Diferenciación de cepas de Mycoplasma gallisepticum a partir de RFLP / Differentiation of Mycoplasma gallisepticum Strains through RFLP

RESUMEN

La micoplasmosis aviar es una enfermedad que afecta considerablemente al sector avícola, lo que se ve reflejado en la disminución de parámetros productivos en aves de engorde ponedoras de huevo fértil y ponedoras de huevo comercial. Los costos de su presentación son tan altos que es imposible la supervivencia de la avicultura industrial sin pensar en el control efectivo o en su erradicación. Existe un gran interés en la tipificación de cepas de M. gallisepticum(Mg) tanto vacunales como de campo, aspecto clave para el manejo de la enfermedad, pero aún no existe un método definitivo de caracterización de cepas de Mg. En la actualidad se están estudiando genes relacionados con proteínas de superficie —gapA y mgc2, lipoproteína (lp)— que permitan identificar y caracterizar genómicamente al Mg. En el presente estudio se amplificaron regiones del gen lp a partir de las cepas F y Ts-11 del Mg por la técnica de reacción en cadena de la polimeras a (PCR) que dio un amplicón de 455 pb para cada una de las cepas; a cada uno de las aplicaciones se les hizo la prueba de polimorfismo de longitud de los fragmentos de restricción (RFLP) con la enzima Taq I, lo que permitió diferenciar cepas vacunales de cepas de campo obtenidas a partir de muestras de hisopos traqueales tomados en granjas de explotación comercial. Se demostró que el PCR-RFLP es un método adecuado de diagnóstico de la micoplasmosis en nuestro medio...

ABSTRACT

Avian mycoplasmosis is a disease that considerably affects the poultry sector, which is reflectedin the decrease of the production parameters in fertile and commercial egg layingbroilers. Presentation costs are so high that it is impossible for the poultry industry to survivewithout thinking of its effective control or eradication. There is great interest in the type ofM. gallisepticum (Mg) strains, both vaccine and field, which are key aspects to handle thedisease, but there is still no definitive method for Mg strain characterization. Genes relatedto surface proteins —gapA and mgc2,lipoprotein (lp)— that make it possible to identify andcharacterize the Mg genomically are currently being studied. In this study, regions of the lpgene were amplified from strains F and Ts-11 of Mg through the polymerase chain reaction(PCR) technique, which gave an amplicon of 455 bp for each of the strains; each of amplicons was applied the restriction fragment length polymorphism (RFLP) test with theTaq I enzyme, which made it possible to differentiate vaccine strains from field strains obtainedfrom tracheal swab samples taken at commercial farms. It was demonstrated that PCRRFLPis an appropriate method of diagnosis of mycoplasmosis in our environment...

RESUMO

A micoplasmose aviar é uma doença que afeta consideravelmente o setor avícola, isso se refletena diminuição de parâmetros produtivos em aves de engorde poedeiras de ovo fértil epoedeiras de ovo comercial. Os custos de sua apresentação são tão altos que é impossível asobrevivência da avicultura industrial sem pensar no controle efetivo ou em sua erradicação.Existe um grande interesse na tipificação de cepas de M. gallisepticum (Mg) tanto vacinaiscomo de campo, aspecto chave para o manejo da doença, mas ainda não existe um métododefinitivo de caracterização de cepas de Mg. Na atualidade estão sendo estudados genes relacionadoscom proteínas de superfície —gapA e mgc2, lipoproteína (lp)— que permitamidentificar e caracterizar genômicamente ao Mg. No presente estudo se amplificaram regiõesdo gen lp a partir das cepas F e Ts-11 do Mg pela técnica de reação em cadeia da polimerase(PCR) que deu um amplicon de 455 pb para cada uma das cepas; a cada um dos ampliconsfoi feito o teste de polimorfismo de longitude dos fragmentos de restrição (RFLP) com aenzima Taq I, o que permitiu diferenciar cepas vacunais de cepas de campo obtidas a partirde mostras de mostras traqueais tomadas em granjas de exploração comercial. Demonstrou-seque o PCR-RFLP é um método adequado de diagnóstico da micoplasmose em nosso meio...