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Variability in the recognition of distinctive immunofluorescence patterns in different brands of HEp-2 cell slides / Variabilidade no reconhecimento de padrões de imunofluorescência indireta em diferentes marcas de lâminas HEp-2
Dellavance, Alessandra; Cruvinel, Wilson de Melo; Francescantonio, Paulo Luiz Carvalho; Mangueira, Cristovão Luis Pitangueira; Drugowick, Inês Cristina; Rodrigues, Silvia Helena; Andrade, Luis Eduardo Coelho.
Afiliação
  • Dellavance, Alessandra; Unifesp. São Paulo. BR
  • Cruvinel, Wilson de Melo; Pontifícia Universidade Católica. Biomedicine and Pharmacy Department. Goiania. BR
  • Francescantonio, Paulo Luiz Carvalho; Pontifícia Universidade Católica. Medicine Department. Goiania. BR
  • Mangueira, Cristovão Luis Pitangueira; Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina. Hospital das Clínicas. São Paulo. BR
  • Drugowick, Inês Cristina; Hospital Israelita Albert Einstein. Clinical Pathology Department. São Paulo. BR
  • Rodrigues, Silvia Helena; Unifesp. Immuno-Rheumatology Laboratory. São Paulo. BR
  • Andrade, Luis Eduardo Coelho; Unifesp. São Paulo. BR
J. bras. patol. med. lab ; 49(3): 182-190, June 2013. ilus, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-684554
Biblioteca responsável: BR14.1
ABSTRACT

INTRODUCTION:

Indirect immunofluorescence on HEp-2 cells is considered the gold standard for the detection of autoantibodies against cellular antigens. However, the culture conditions, cell fixation and permeabilization processes interfere directly in the preservation and spatial distribution of antigens. Therefore, one can assume that certain peculiarities in the processing of cellular substrate may affect the recognition of indirect immunofluorescence patterns associated with several autoantibodies.

OBJECTIVE:

To evaluate a panel of serum samples representing nuclear, nucleolar, cytoplasmic, mitotic apparatus, and chromosome plate patterns on HEp-2 cell substrates from different suppliers. MATERIALS AND

METHODS:

Seven blinded observers, independent from the three selected reference centers, evaluated 17 samples yielding different nuclear, nucleolar, cytoplasmic and mitotic apparatus patterns on HEp-2 cell slides from eight different brands. The slides were coded to maintain confidentiality of both brands and participating centers.

RESULTS:

The 17 HEp-2 cell patterns were identified on most substrates. Nonetheless, some slides showed deficit in the expression of several patterns nuclear coarse speckled/U1-ribonucleoprotein associated with antibodies against RNP (U1RNP), centromeric protein F (CENP-F), proliferating cell nuclear antigen (PCNA), cytoplasmic fine speckled associated with anti-Jo-1 antibodies (histidyl synthetase), nuclear mitotic apparatus protein 1 (NuMA-1) and nuclear mitotic apparatus protein 2 (NuMA-2).

CONCLUSION:

Despite the overall good quality of the assessed HEp-2 substrates, there was considerable inconsistency in results among different commercial substrates. The variations may be due to the evaluated batches, hence generalizations cannot be made as to the respective brands. It is recommended that each new batch or new brand be tested with a panel of reference sera representing the various patterns.
RESUMO

INTRODUÇÃO:

A imunofluorescência indireta (IFI) utilizando células HEp-2 como substrato antigênico é o teste padrão-ouro para a pesquisa de autoanticorpos contra antígenos celulares. Contudo, as condições de cultivo, fixação e permeabilização celular interferem diretamente na preservação e na distribuição espacial dos antígenos. Portanto, pode-se presumir que distintas condições no preparo das células possam interferir no reconhecimento dos padrões de imunofluorescência associados aos diversos autoanticorpos.

OBJETIVO:

Avaliar um painel de amostras de soro representativo de padrões nuclear, nucleolar, citoplasmático, de aparelho mitótico e de placa cromossômica em substratos de células HEp-2 de diferentes fornecedores.

MATERIAIS E MÉTODOS:

Sete observadores blindados e independentes de três centros de referência avaliaram 17 amostras que apresentavam diferentes padrões nucleares, nucleolares, citoplasmáticos e associados ao aparelho mitótico em lâminas com células HEp-2 de oito procedências. As lâminas foram codificadas para manter a confidencialidade das marcas, bem como dos centros participantes.

RESULTADOS:

Os 17 padrões de imunofluorescência em células HEp-2 foram reconhecidos na maioria dos substratos. No entanto, alguns substratos mostraram déficit na apresentação de alguns padrões (nuclear pontilhado grosso/U1-ribonucleoprotein associado a anticorpos contra o RNP (U1 ribonucleoproteína), sugestivo da presença de anticorpos anti-CENP-F (proteína centromérica F), sugestivo de anticorpos contra antígenos de célula em proliferação (proliferating cell nuclear antigen [PCNA]), citoplasmático pontilhado fino associado a anticorpos anti-Jo-1 (histidil sintetase), anti-NuMA-1 (nuclear mitotic apparatus protein 1) e anti-NuMA-2 (nuclear mitotic apparatus protein 2).

CONCLUSÃO:

Em que pese a boa qualidade geral dos substratos avaliados, existe divergência nos resultados obtidos entre os diferentes substratos comerciais. As variações observadas podem ser devidas aos lotes avaliados, portanto não se pode generalizar para as respectivas marcas. Recomenda-se que cada novo lote ou marca de lâmina sejam testados com diferentes soros referência representativos dos diversos padrões.
Assuntos


Texto completo: Disponível Coleções: Bases de dados internacionais Base de dados: LILACS Assunto principal: Autoanticorpos / Anticorpos Antinucleares / Imunofluorescência / Técnica Indireta de Fluorescência para Anticorpo Tipo de estudo: Estudo prognóstico Idioma: Inglês Revista: J. bras. patol. med. lab Assunto da revista: Patologia Ano de publicação: 2013 Tipo de documento: Artigo País de afiliação: Brasil Instituição/País de afiliação: Hospital Israelita Albert Einstein/BR / Pontifícia Universidade Católica/BR / Unifesp/BR / Universidade de São Paulo/BR

Texto completo: Disponível Coleções: Bases de dados internacionais Base de dados: LILACS Assunto principal: Autoanticorpos / Anticorpos Antinucleares / Imunofluorescência / Técnica Indireta de Fluorescência para Anticorpo Tipo de estudo: Estudo prognóstico Idioma: Inglês Revista: J. bras. patol. med. lab Assunto da revista: Patologia Ano de publicação: 2013 Tipo de documento: Artigo País de afiliação: Brasil Instituição/País de afiliação: Hospital Israelita Albert Einstein/BR / Pontifícia Universidade Católica/BR / Unifesp/BR / Universidade de São Paulo/BR
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