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Biomarkers to evaluate the effects of temperature and methanol on recombinant Pichia pastoris
Zepeda, Andrea B.; Figueroa, Carolina A.; Abdalla, Dulcineia S.P.; Maranhão, Andrea Q.; Ulloa, Patricio H.; Pessoa Jr, Adalberto; Farías, Jorge G..
Afiliação
  • Zepeda, Andrea B.; Universidad de La Frontera. Facultad de Ingeniería, Ciencias y Administración. Departamento de Ingeniería Química. Temuco. CL
  • Figueroa, Carolina A.; Universidad de La Frontera. Facultad de Ingeniería, Ciencias y Administración. Departamento de Ingeniería Química. Temuco. CL
  • Abdalla, Dulcineia S.P.; Universidad de La Frontera. Facultad de Ingeniería, Ciencias y Administración. Departamento de Ingeniería Química. Temuco. CL
  • Maranhão, Andrea Q.; Universidad de La Frontera. Facultad de Ingeniería, Ciencias y Administración. Departamento de Ingeniería Química. Temuco. CL
  • Ulloa, Patricio H.; Universidad de La Frontera. Facultad de Ingeniería, Ciencias y Administración. Departamento de Ingeniería Química. Temuco. CL
  • Pessoa Jr, Adalberto; Universidad de La Frontera. Facultad de Ingeniería, Ciencias y Administración. Departamento de Ingeniería Química. Temuco. CL
  • Farías, Jorge G.; Universidad de La Frontera. Facultad de Ingeniería, Ciencias y Administración. Departamento de Ingeniería Química. Temuco. CL
Braz. j. microbiol ; 45(2): 475-483, Apr.-June 2014. ilus, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-723102
Biblioteca responsável: BR1.1
ABSTRACT
Pichia pastoris is methylotrophic yeast used as an efficient expression system for heterologous protein production. In order to evaluate the effects of temperature (10 and 30 °C) and methanol (1 and 3% (v/v)) on genetically-modified Pichia pastoris, different biomarkers were evaluated Heat stress (HSF-1 and Hsp70), oxidative stress (OGG1 and TBARS) and antioxidant (GLR). Three yeast cultures were performed 3X = 3% methanol-10 °C, 4X = 3% methanol-30 °C, and 5X = 1% methanol-10°C. The expression level of HIF-1α, HSF-1, HSP-70 and HSP-90 biomarkers were measured by Western blot and in situ detection was performed by immunocytochemistry. Ours results show that at 3% methanol -30 °C there is an increase of mitochondrial OGG1 (mtOGG1), Glutathione Reductase (GLR) and TBARS. In addition, there was a cytosolic expression of HSF-1 and HSP-70, which indicates a deprotection against nucleolar fragmentation (apoptosis). On the other hand, at 3% methanol -10 °C and 1% and at methanol -10 °C conditions there was nuclear expression of OGG1, lower levels of TBARS and lower expression of GLR, cytosolic expression of HSF-1 and nuclear expression HSP-70. In conclusion, our results suggest that 3% methanol-30 °C is a condition that induces a strong oxidative stress and risk factors of apoptosis in modified-genetically P. pastoris.
Assuntos


Texto completo: Disponível Coleções: Bases de dados internacionais Base de dados: LILACS Assunto principal: Pichia / Biomarcadores / Metanol Tipo de estudo: Fatores de risco Idioma: Inglês Revista: Braz. j. microbiol Assunto da revista: Microbiologia Ano de publicação: 2014 Tipo de documento: Artigo / Documento de projeto País de afiliação: Chile Instituição/País de afiliação: Universidad de La Frontera/CL

Texto completo: Disponível Coleções: Bases de dados internacionais Base de dados: LILACS Assunto principal: Pichia / Biomarcadores / Metanol Tipo de estudo: Fatores de risco Idioma: Inglês Revista: Braz. j. microbiol Assunto da revista: Microbiologia Ano de publicação: 2014 Tipo de documento: Artigo / Documento de projeto País de afiliação: Chile Instituição/País de afiliação: Universidad de La Frontera/CL
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