Potencial osteoindutor de blocos de osso alógeno humano in vitro / Osteoinductive potential ot allogeneic human bone blacks in vitro

RESUMO

O enxerto alógeno apresenta diversas vantagens em relação ao enxerto autógeno, porém sua utilização é relativamente recente e cercada de incertezas em relação ao seu comportamento biológico/imunológico e eficácia como biomaterial. Alguns autores consideram-no estritamente osteocondutor, enquanto outros acreditam que ele pode ser osteoindutor. O objetivo deste trabalho foi estudar o potencial osteoindutor do osso alógeno analisando os efeitos dos extratos proteicos provenientes de blocos de aloenxerto sobre células pré-osteoblásticas humanas. As proteínas extraídas dos blocos ósseos foram incubadas em culturas de células pré-osteoblásticas, a fim de verificar o potencial de indução de proliferação celular. Foram utilizados os métodos do RT-qPCR, Vermelho de Alizarina e Von Kossa para avaliar o metabolismo das células ósseas e a formação de nódulos minerais contendo cálcio e fosfato, respectivamente. Também foi pesquisado se havia nos blocos ósseos a proteína morfogenética BMP-2. Foi possível observar, nos grupos experimentais, aumento na proliferação celular, do metabolismo das células ósseas e da produção de nódulos de cálcio e fosfato, em relação ao grupo controle. Foi possível detectar a presença de BMP-2 em seis dos nove blocos ósseos. Conclui-se que os blocos de aloenxerto mineralizado possuem proteínas com potencial osteoindutor quando testado seu comportamento in vitro em células osteoblásticas

ABSTRACT

The allogenic bone has several comparative advantages in relation to autograft bone, but its use is relatively recent and surrounded by uncertainties regarding the bioloqical/immunological behavior and effectiveness as a biomaterial. Some authors consider the material strictly osteoconductive, while others bel ieve that the materia I ca n a Iso possess osteoi nd uctive activitv Thus, we evaluated the osteoinductive potential of allograft bone by analyzing the effects of protein extracts from allograft blocks using human pre-osteoblastic cells. The protein extract from allograft block was incubated in cultures of pre-osteoblast cells in order to verify the cell proliferation potential. Moreover, it was employed the RT-qPCR, Alizarin and Von Kossa staining to evaluate the bone metabolism, as well as, the potential induction of calcium and phosphate nodule formation. Finally, it was quantified the morphogenetic protein BMP-2. It was possible to observe in the experimental group, an increase in the cell proliferation and cellular metabolism, as well as, a significant increase in the formation of nodules of calcium and phosphate in comparison to control group. It was possible to detect amounts of BMP-2 in six of nine total samples tested. It was possible to conclude that the mineralized allografts blocks have in vitro osteoinductive activity on osteoblastic cells