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Ocorrência de resultados falso-negativos na reação de PCR em Tempo Real (PCR-TR) no diagnóstico da doença meningocócica / False-negative results in Real-Time PCR (RT-PCR) formeningococcal disease diagnosis
Fusakasawa, Lucila Okuyama; Gonçalves, Maria Gisele; Higa, Fabio Takenori; Salgado, Maristela Marques; Lemos, Ana Paula Silva de; Sacchi, Claudio Tavares.
Afiliação
  • Fusakasawa, Lucila Okuyama; Instituto Adolfo Lutz. São Paulo. BR
  • Gonçalves, Maria Gisele; Instituto Adolfo Lutz. São Paulo. BR
  • Higa, Fabio Takenori; Instituto Adolfo Lutz. São Paulo. BR
  • Salgado, Maristela Marques; Instituto Adolfo Lutz. São Paulo. BR
  • Lemos, Ana Paula Silva de; Instituto Adolfo Lutz. São Paulo. BR
  • Sacchi, Claudio Tavares; Instituto Adolfo Lutz. São Paulo. BR
Rev. Inst. Adolfo Lutz ; 72(1): 65-71, 2013. tab
Artigo em Inglês | LILACS, Sec. Est. Saúde SP | ID: lil-729390
Biblioteca responsável: BR91.2
ABSTRACT
Factors responsible for false-negative results (F-N) in RT-PCR assay for detecting N. meningitidis in serumand CSF samples were investigated. As the meningococcal disease should be rapidly treated because ofits high mortality and epidemic potential, the F-N in diagnostic testing may cause treatment failuresand/or on disease restraint in community. Thus, it is crucial to learn the factors which cause F-N in RTPCRassays. The F-N were induced by inhibition, low quantity of target DNA in extracted samples, andinadequate temperature employed at PCR annealing procedure. As bacterial DNA concentration in samplesmight be highly variable, the ideal sample volume to be extracted could not be defined. As previouslyrecommended for N. meningitidis gene-grouping by RT-PCR assay, the annealing temperature at 60 °Cwas not suitable for B and W135 genogroups. Altogether, these factors induced F-N in 31 samples; therefore,30 % of N. meningitidis detected by RT-PCR were classified as non-genogrouped. The inhibitors and/orthe low amount of target DNA induced F-N on RT-PCR, independently of the specimen volume used forextracting DNA. However, adjustments on the PCR annealing temperature and amount of extracted DNAadded into the reaction might avoid the occurrence of the majority of F-N.
Assuntos
Texto completo: Disponível Coleções: Bases de dados nacionais / Brasil Contexto em Saúde: Doenças Negligenciadas Problema de saúde: Zoonoses Base de dados: LILACS / Sec. Est. Saúde SP Assunto principal: Líquido Cefalorraquidiano / Técnicas e Procedimentos Diagnósticos / Reações Falso-Negativas / Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real / Neisseria meningitidis Tipo de estudo: Estudo diagnóstico / Estudo de rastreamento Idioma: Inglês Revista: Rev. Inst. Adolfo Lutz Ano de publicação: 2013 Tipo de documento: Artigo Instituição/País de afiliação: Instituto Adolfo Lutz/BR
Texto completo: Disponível Coleções: Bases de dados nacionais / Brasil Contexto em Saúde: Doenças Negligenciadas Problema de saúde: Zoonoses Base de dados: LILACS / Sec. Est. Saúde SP Assunto principal: Líquido Cefalorraquidiano / Técnicas e Procedimentos Diagnósticos / Reações Falso-Negativas / Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real / Neisseria meningitidis Tipo de estudo: Estudo diagnóstico / Estudo de rastreamento Idioma: Inglês Revista: Rev. Inst. Adolfo Lutz Ano de publicação: 2013 Tipo de documento: Artigo Instituição/País de afiliação: Instituto Adolfo Lutz/BR
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