Infecção natural de Triatoma brasiliensis brasiliensis, Caicó, Rio Grande do Norte, pelo Trypanosoma cruzi e o estudo de peptídeos antimicrobianos em diferentes espécies de triatomíneos (Hemiptera, Heteroptera, Reduviidae) / Natural infection of Triatoma brasiliensis brasiliensis, Caicó, Rio Grande do Norte by trrypanosoma cruzi and the study of antimicrobial peptides in different triatomine species (hemiptera, heteroptera, reduviidae)

RESUMO

Triatoma brasiliensis é um dos vetores da doença de Chagas no Nordeste do Brasil, apresentando altos índices de infecção natural pelo Trypanosoma cruzi. No presente estudo, dois aspectos foram abordados primeiro a coleta de exemplares de T. b. brasiliensis oriundos de Caicó, RN, para análise de infecção natural por T. cruzi, em períodos diferentes (abril e novembro de 2011). O segundo aspecto abordado está relacionado ao estudo do gene que codifica defensinas como marcador molecular filogenético para a análise de diferentes espécies de triatomíneos, incluindo o complexo T. brasiliensis, além de exemplares de T. b. brasiliensis coletados em Caicó. Em relação à infecção natural de T. b. brasiliensis por T. cruzi observamos um alto índice (86 porcento), mais especificamente na localidade de Penedo. Também foi observado que não houve diferenças significativas entre as expedições realizadas nos períodos de chuva (abril de 2011) e seca (novembro de 2011)Além disso, cinco isolados de T. cruzi foram caracterizados molecularmente por duas metodologias mini-exon, 24Salpha rDNA e 18S rDNA. Como resultados observamos os dois genótipos (TcI e TcII) circulando em Caicó. Foram obtidas sequências do gene que codifica defensina, onde diferentes isoformas deste gene puderam ser identificadas e caracterizadas nas diferentes espécies de triatomíneos estudadas. A espécie Panstrongylus megistus ficou nos mesmos clados que representantes do gênero Rhodnius. Houve uma clara separação dos clados em relação aos gêneros Triatoma e Rhodnius. Com relação aos membros do complexo T. brasiliensis, não foi possível uma clara distinção entre as espécies pelo fato da molécula de defensina apresentar menos que 500 bp em seu tamanho, além de ser bastante conservada, não sendo portanto um bom marcador para separar grupos muito proximamente relacionados...

ABSTRACT

Triatoma brasiliensis is one of the main Chagas disease vectors in NortheasternBrazil, presenting a high natural Trypanosoma cruzi infection rate. In the present work, two different aspects were investigated First, triatomines of the subspecies T. b. brasiliensis were collected in Caicó, RN for analysis of natural infection by T. cruzi in two dissimilar periods (April and November 2011). The second aspect is related touse of defensin encoding genes as a phylogenetic marker for the study of different triatomine species, mainly the T. brasiliensis species complex, including T. b. brasiliensis specimens from Caicó. The results showed a high infection rate (86 percent) of T. b. brasiliensis from Caicó by T. cruzi, especially in insects from Penedo. Nosignificant differences between the rainy period (April 2011) and dried season (November 2011) could be observed. In addition, five T. cruzi isolates were cultivated and characterized by three different molecular methods (mini-exon, 24Salpha rDNA and 18S rDNA). The results showed the presence of TcI and TcII genotypes circulating in Caicó. Defensin encoding genes were amplified and sequenced for different triatomine species, showing three differing forms. Panstrongylus megistus clusteredtogether with representatives of the genus Rhodnius. A separation between the genus Triatoma and Rhodnius could also be detected. However, inside of the T. brasiliensis species complex the taxa could not be well separated. Since thismolecular marker has a size of less than 500 bp and is highly conserved defensinencoding sequences might not be a good marker to separate closely related species and subspecies...