Vimentin and Anti Vimentin Antibodies in Chagas' Disease / Vimentina e Anticorpos Anti-Vimentina na Doença de Chagas

Abstract Background: Vimentin is a main structural protein of the cell, a component of intermediate cell filaments and immersed in cytoplasm. Vimentin is mimicked by some bacterial proteins and anti-vimentin antibodies occur in autoimmune cardiac disease, as rheumatic fever. In this work we studied vimentin distribution on LLC-MK2 cells infected with T. cruzi and anti-vimentin antibodies in sera from several clinical pictures of Chagas' disease or American Trypanosomiasis, in order to elucidate any vimentin involvement in the humoral response of this pathology. Objective: We standardized an indirect immunofluorescence assay (IFI) to determine sub cellular expression in either parasites and host cells, and ELISA to evaluate anti-vimentin antibodies in sera fron chagasic patients. Methods: We analyzed the distribution of vimentin in culture cells using indirect fluorescent assays, using as external controls anti-T. cruzi sera, derived from chronic infected patients for identification of the parasites in the same model. After infection and growth of T.cruzi amastigotes, those cells express larger amounts of vimentin, with heavy staining of cytoplasm outside the parasitophorous vacuole and some particle shadowing patterns, suggesting that vimentin are associated with cell cytoplasm. Anti-vimentin antibodies were present in most American trypanosomiasis samples, but notably, they are much more present in acute (76, 9%) or clinical defined syndromes, especially cardiac disease (87, 9%). Paradoxically, they were relatively infrequent in asymptomatic (25%) infected patients, which had a clearly positive serological reaction to parasite antigens, but had low frequency of anti-vimentin antibodies, similar to controls (2,5%). Conclusion: Our current data revealed that anti-vimentin antibodies induced during T. cruzi infection could be a marker of active disease in the host and its levels could also justify drug therapy in American Trypanosomiasis chronic infection, as a large group of asymptomatic patients would be submitted to treatment with frequent adverse reactions of the available drugs. Anti-vimentin antibodies could be a marker of cardiac muscle cell damage, appearing in American Trypanosomiasis patients during active muscle cell damage.

Resumo Fundamento: A Vimentina é uma proteína estrutural importante da célula, um componente dos filamentos celulares intermediários e imersa no citoplasma. Algumas proteínas bacterianas imitam a Vimentina e anticorpos anti-vimentina ocorrem em doenças cardíacas auto-imunes, como a febre reumática. Neste trabalho, estudamos a distribuição de vimentina em células LLC-MK2 infectadas com T. Cruzi e anticorpos anti-vimentina em soros de várias imagens clínicas da doença de Chagas ou tripanossomíases americanas, a fim de elucidar qualquer implicação da vimentina na resposta humoral desta patologia. Objetivo: padronizamos um teste de imunofluorescência indireta (IFI) para determinar a expressão subcelular em parasitas e células hospedeiras, e ELISA para testar anticorpos anti-vimentina em soros de pacientes chagásicos. Métodos: analisamos a distribuição de vimentina em células de cultura usando ensaios fluorescentes indiretos, utilizando como controles externos soros anti-T. Cruzi, derivados de pacientes com infecção crônica para a identificação de parasitas no mesmo modelo. Após a infecção e o crescimento de amastigotas de T. Cruzi, essas células expressam grandes quantidades de vimentina, com forte coloração do citoplasma fora da vacuola parasitófora e alguns padrões de sombreamento das partículas, sugerindo que a vimentina está associada ao citoplasma da célula. Os anticorpos anti-vimentina estavam presentes na maioria das amostras americanas de tripanossomíases, mas estão notavelmente mais presentes em síndromes agudas ou clinicamente definidas (76,9%), especialmente em doenças cardíacas (87,9%). Paradoxalmente, eram relativamente infrequentes em pacientes infectados assintomáticos (25%), que apresentavam uma reação sorológica claramente positiva aos antígenos parasitas, mas apresentavam baixa frequência de anticorpos anti-vimentina, semelhante aos controles (2,5%). Conclusão: Nossos dados atuais revelaram que os anticorpos anti-vimentina induzidos durante a infecção por T. Cruzi poderiam ser um marcador de doença ativa no hospedeiro e seus níveis também poderiam justificar o tratamento farmacológico em infecção crônica com tripanossomíase americana, uma vez que um grande grupo de pacientes assintomáticos seria submetido a tratamento com reações adversas frequentes aos medicamentos disponíveis. Os anticorpos anti-vimentina poderiam ser um marcador de danos nas células do músculo cardíaco, que aparece em pacientes com tripanossomíase americana durante o dano das células musculares ativas.

Prevalence and associated risk factors for Giardia lamblia infection among children hospitalized for diarrhea in Goiânia, Goiás State, Brazil

The objective of this study was to determine the prevalence and to identify risk factors associated with Giardia lamblia infection in diarrheic children hospitalized for diarrhea in Goiânia, State of Goiás, Brazil. A cross-sectional study was conducted and a comprehensive questionnaire was administered to the child's primary custodian. Fixed effects logistic regression was used to determine the association between infection status for G. lamblia and host, sociodemographic, environmental and zoonotic risk factors. A total of 445 fecal samples were collected and processed by the DFA methodology, and G. lamblia cysts were present in the feces of 44 diarrheic children (9.9 percent). A variety of factors were found to be associated with giardiasis in these population: age of children (OR, 1.18; 90 percent CI, 1.0 - 1.36; p = 0.052), number of children in the household (OR 1.45; 90 percent CI, 1.13 - 1.86; p = 0.015), number of cats in the household (OR, 1.26; 90 percent CI, 1.03 -1.53; p = 0.059), food hygiene (OR, 2.9; 90 percent CI, 1.34 - 6.43; p = 0.024), day-care centers attendance (OR, 2.3; 90 percent CI, 1.20 - 4.36; p = 0.034), living on a rural farm within the past six months prior hospitalization (OR, 5.4; CI 90 percent, 1.5 - 20.1; p = 0.03) and the number of household adults (OR, 0.59; 90 percent CI, 0.42 - 0.83; p = 0.012). Such factors appropriately managed may help to reduce the annual incidence of this protozoal infection in the studied population.

O objetivo desse estudo foi estimar a prevalência e identificar fatores de risco associados à infecção por Giardia lamblia em crianças hospitalizadas com diarréia no município de Goiânia, Estado de Goiás, Brasil. Foi realizado um estudo transversal e um questionário estruturado foi administrado ao responsável pela criança. Análise multivariada foi realizada por meio de regressão logística para se determinar a associação entre infecção por G. lamblia e as variáveis sociodemográficas, ambientais e zoonóticas relacionadas ao hospedeiro. Das 445 amostras de fezes coletadas e processadas pelo método de imunofluorescência direta (DFA), 44 (9,9 por cento) apresentaram cisto de G. lamblia. Uma variedade de fatores de risco foi encontrada associada à giardíase: idade da criança (OR, 1,18; 90 por cento CI, 1,0 - 1,36; p = 0,052), número de crianças na família (OR, 1,45; 90 por cento CI, 1,13 - 1,86; p = 0,015), número de gatos pertecentes à família (OR, 1,26; 90 por cento CI, 1,03 - 1,53; p = 0,059), higiene alimentar (OR, 2,9; 90 por cento CI, 1,34 - 6,43; p = 0,024), usuários de creches (OR, 2,3; 90 por cento CI, 1,20 - 4,36; p = 0,034), ter residido em área rural seis meses precedendo à hospitalização (OR, 5,4; 90 por cento CI, 1,5 - 20,1; p = 0,03) e número de adultos na família (OR, 0,59; 90 por cento CI, 0,42 - 0,83; p = 0,012). Tais fatores, devidamente controlados podem contribuir para redução anual da incidência desta parasitose na população estudada.

Frequency of specific anti-Toxoplasma gondii IgM, IgA and IgE in Colombian patients with acute and chronic ocular toxoplasmosis

We studied the frequency of specific anti-Toxoplasma IgM, IgA and IgE antibodies in serum of 28 immunocompetent Colombian patients, selected by ophthalmologists and with lesions that were compatible with ocular toxoplasmosis. Patients were classified in three groups: (i) group 1 consisted of ten patients with a first episode; (ii) group 2, with seven patients with a recurrence and (iii) group 3, consisted of eleven patients with chronic chorioretinal lesion without uveitis. We found that 10/28 (35 per cent) of Colombian patients with ocular toxoplasmosis possessed at least one serological marker for Toxoplasma infection different from IgG. In group 1 (first episode), we found simultaneous presence of specific IgM plus IgA plus IgE in 1/10 (10 per cent). In group 2 (recurrences) in 1/7 (14 per cent) we found IgM and IgA test positives and in 1/7 (14 per cent) we found IgM and IgE tests positives. In group 3 (toxoplasmic chorioretinal scar) the IgA serological test was positive in 2/11 (18 per cent). These results show that serum IgM or IgA or IgE can be present during recurrences.

Schistosoma mansoni: protective immunity in mice cured by chemotherapy at the chronic phase of the disease

Aiming at demonstrating a decrease of acquired immunity after chemotherapeutic cure, a group of mice was infected with 25 Schistosoma mansoni cercariae (LE strain). A part of these animals was treated with 400 mg/kg oxamniquine, at 120 days after infection. Challenge infections were carried out at 45, 90 and 170-day-intervals after treatment (185, 210 and 290 days after primo-infection, respectively). Recovery of worms at 20 days after reinfections showed that a residual immunity remains up to 90 days after treatment, and disappears at 170 days after cure. Using the ELISA method, it was possible to detect a decrease of antibody levels (total IgG) in the treated group, when antigens from different evolutive stages of S. mansoni were used. The epidemiological implications of the present results, and the possible mechanisms involved in the decrease of acquired immunity after treatment are discussed.

Variaçäo temporal dos títulos das reaçöes sorológicas na fase crônica da doença de chagas e sua possível correlaçäo clínica / Phase variations of sorologic titers in chronic chagas' disease and possible clinical correlations

Estudou-se a variaçäo dos títulos sorológicos das reaçöes de fixaçäo do complemento, hemaglutinaçäo passiva, imunofluorescência e ELISA, num período de quatro semanas consecutivas, em 13 pacientes portadores da moléstia de Chagas na sua fase crônica, com idade média de 32,5 anos, dos quais seis se encontravam na forma indeterminada e sete na cardíaca. Nenhuma deles tinha sido submetido a tratamento específico. Em todas as 208 amostras os quatro testes foram reagentes. A análise estatísticamente näo mostrou diferenças significativas ao nível de p<5% entre os grupos na forma indeterminada e cardíaca, nem entre os títulos obtidos para cada semana nos quatro testes realizados. Concluiu-se, assim, que as variaçöes temporais que existem nessas reaçöes sorológicas näo säo estatisticamente significantivas, e poderiam ser decorrentes de variaçäo do nível de anticorpos relacionados a surtos de parasitemia. Além disso, os níveis dos títulos sorológicos näo têm relaçäo com a forma clínica em que o pacientes se encontra