Imunização de camundongos LDLr-/- com peptídeo mimético da LDL eletronegativa: uma potencial estratégia terapêutica para a aterosclerose / Immunization of LDLr - / - mice with electronegative LDL mimetic peptides: a potential therapeutic strategy for atherosclerosis

Introdução: A aterosclerose é uma doença inflamatória crônica decorrente de alterações na parede das artérias de médio e grande calibre e associadas a diversos fatores de risco, dentre os quais destaca-se as hiperlipidemias, ou seja, o aumento plasmático das lipoproteínas, mas também outras comorbidades, como a Síndrome Metabólica. Entre as lipoproteínas, a lipoproteína de baixa densidade (LDL) é de grande relevância na aterosclerose. Diferentes espécies de LDL modificada (LDLm) são originadas através de lipólise, glicação e proteólise, além da oxidação, variando em densidade e eletronegatividade, sendo melhor denominada LDL eletronegativa [LDL (-)]. Considerando as diferenças conformacionais entre a estrutura da ApoB-100 da LDL nativa e da LDL (-), em um estudo inicial, nosso grupo desenvolveu um anticorpo monoclonal (2C7) a partir da imunização de camundongos Balb/c com a LDL (-) humana. Em uma etapa seguinte foi mapeado o epítopo reconhecido pelo anticorpo monoclonal anti-LDL (-) através de phage display. O peptídeo ligante do anticorpo monoclonal anti-LDL (-) foi nomeado p2C7. Esse peptídeo não representa regiões da sequência linear da ApoB-100 humana, mas microdomínios conformacionais de epítopos da ApoB-100 da LDL (-), tornando-os candidatos para a imunomodulação da aterogênese. Portanto, investigar a imunomodulação induzida pelos peptídeo p2C7 miméticos da LDL (-), por representar um epítopo imunodominante da LDL (-), poderá abrir novas perspectivas terapêuticas futuras para a imunomodulação da aterosclerose. Objetivo: Avaliar a imunomodulação promovida pelo p2C7 in vivo, utilizando camundongos C57BL/6 LDLr -/- e amostras de plasma humano. Adicionalmente, no estágio (BEPE) realizado no Instituto Karolinska (dezembro de 2019 a março de 2021), investigou-se o imunometabolismo como mediador nas doenças cardiovasculares. Na parte II-A, estão descritos os resultados do estudo inicialmente proposto. Na parte II-B, apresenta-se os resultados que foram desenvolvidos posteriormente, com ampliação do escopo do projeto, abordando-se a inflamação vascular envolvida no aneurisma de aorta abdominal através de ferramentas de bioinformática. Na parte II-C, são apresentados os resultados do estudo do envolvimento da enzima indolamina 2,3 dioxigenase (IDO) na esteatohepatite não-alcoólica (NASH) e aterosclerose em camundongos ApoE-/- and ApoE/IDO/double-knockout. Metodologia: Foi avaliada a presença de anticorpos anti-p2C7 em amostras de plasma humano de indivíduos com ou sem síndrome metabólica. Realizamos a determinação de TNF circulante nas mesmas amostras e prosseguimos com regressões lineares associando os parâmetros inflamatórios com os níveis de anticorpos anti-p2C7. Camundongos C57BL/6 LDLr -/- foram imunizados com p2C7 e os adjuvantes Alum ou Montanide ISA 720, analisando-se os títulos de anticorpos contra p2C7 e LDL (-), a produção de citocinas (IL-10, IL-4, IL-2, IL-6, IFNγ, IL-17, TNFα) e células secretoras de anticorpos. Camundongos C57BL/6 LDLr -/- foram tolerizados contra os peptídeos mimotopos, com injeções intravenosas (veia caudal) e desafiados com a imunização contendo LDL (-) + Alum. Avaliou-se os títulos de anticorpos contra p2C7 e LDL (-) e a produção de citocinas (TNF-α, IFNγ, IL-12, IL-6, IL-10 e MCP-1). Os camundongos foram mantidos em dieta hipercolesterolêmica por 3 meses para formação da placa aterosclerótica. Após este período, os camundongos foram eutanasiados, avaliando-se a formação de placa aterosclerótica na artéria abdominal e arco aórtico, assim como a produção de citocinas (TNF-α, IFNγ, IL-12, IL-6, IL-10 e MCP-1). Camundongos C57BL/6 LDLr -/- foram imunizados com OVA-p2C7 e, após dieta hipercolesterolêmica de 3 meses para formação de placa aterosclerótica, foram avaliados os parâmetros inflamatórios e avaliada a captação de 18F-FDG no arco aórtico através de PET/CT. Resultados: A imunização com o p2C7 (livre) não foi capaz de induzir resposta humoral, não se observando títulos detectáveis de anticorpos reativos à p2C7 ou LDL (-) em nenhum camundongo imunizado, assim como não foram detectadas células secretoras de anticorpos específicos para a LDL (-). O grupo imunizado com Alum ou Montanide + p2C7 teve aumento significativo na produção de TNF- quando comparado com os demais grupos. O protocolo de tolerização foi realizado com sucesso, visto que os camundongos tolerizados apresentaram títulos de anticorpos inferiores aos controles para o epítopo utilizado. Apenas os camundongos tolerizados com o p2C7 apresentaram aumento significativo na produção de IL-6, IL-12, IL-10, TNF-α, IFNγ e MCP 1 após dieta hipercolesterolêmica. A imunização ativa com OVA-p2C7 foi capaz de reduzir a produção de TNF induzida pela dieta hipercolesterolêmica, assim como reduzir a captação de 18F-FDG. Conclusão: o epítopo p2C7 é altamente expresso na LDL (-) de pacientes com maior risco cardiovascular. Além disso, a imunização ativa com p2C7 também se mostra uma ferramenta promissora para prevenir e regular a inflamação causada pela LDL (-) no curso da aterosclerose

Introduction: Atherosclerosis is a chronic inflammatory disease resulting from changes in the wall of medium and large-caliber arteries and associated with several risk factors, among which hyperlipidemias stand out, ie, the increase in plasma lipoproteins, but also other comorbidities, such as Metabolic Syndrome. Among the lipoproteins, low-density lipoprotein (LDL) is of great relevance in atherosclerosis. Different isoforms of modified LDL (LDLm) are originated through lipolysis, glycation and proteolysis, in addition to oxidation, varying in density and electronegativity, being better called electronegative LDL [LDL (-)]. Considering the conformational differences between the ApoB-100 structure of native LDL and LDL (-), in an initial study, our group developed a monoclonal antibody (2C7) from the immunization of Balb/c mice with human LDL (-). In a next step, the epitope recognized by the anti-LDL monoclonal antibody (-) was mapped using phage display. The binding peptide of anti-LDL monoclonal antibodies (-) was named p2C7. This peptide does not represent linear sequence regions of human ApoB-100, but conformational microdomains of LDL (-) ApoB-100 epitopes, making them candidates for the immunomodulation of atherogenesis. Therefore, investigating the immunomodulation induced by p2C7 peptide mimetics of LDL (-) as it represents an immunodominant epitope of LDL (-) could open new future therapeutic perspectives for the immunomodulation of atherosclerosis. Objective: To evaluate the immunomodulation promoted by p2C7 in vivo, using C57BL/6 LDLr -/- mice, and human plasma samples. In addition, in the internship (BEPE), held at the Karolinska Institute (December 2019 to March 2021), immunometabolism as a mediator of Cardiovascular Diseases was studied. In part II-A, the results of the initially proposed study are described. In part II-B, the results that were developed later are presented, expanding the scope of the project, approaching the vascular inflammation involved in the abdominal aortic aneurysm through bioinformatics tools. In part II-C, the results of the study of the involvement of the enzyme indoleamine 2,3 dioxygenase (IDO) in non-alcoholic steatohepatitis (NASH) and atherosclerosis in ApoE-/- and ApoE/IDO/double mice are presented -knockout. Methodology: The presence of anti-p2C7 antibodies in human plasma samples with or without Metabolic Syndrome was evaluated. We measured circulating TNF in the same samples and proceeded with linear regressions associating inflammatory parameters with levels of anti-p2C7 antibodies. C57BL/6 LDLr -/- mice were immunized with p2C7 and the adjuvants Alum or Montanide ISA 720, analyzing the antibody titers against p2C7 and LDL (-), the production of cytokines (IL-10, IL-4, IL -2, IL-6, IFNγ, IL-17, TNFα) and antibody-secreting cells. C57BL/6 LDLr -/- mice were tolerized against mimotope peptides with intravenous injections (caudal vein) and challenged with immunization containing LDL (-) + Alum. Antibody titers against p2C7 and LDL (-) and cytokine production (TNF-α, IFNγ, IL-12, IL-6, IL-10 and MCP-1) were evaluated. The mice were kept on a hypercholesterolemic diet for 3 months for atherosclerotic plaque formation. After this period, the mice were euthanized, evaluating the formation of atherosclerotic plaque in the abdominal artery and aortic arch, as well as the production of cytokines (TNF-α, IFNγ, IL-12, IL-6, IL-10 and MCP -1). C57BL/6 LDLr -/- mice were immunized with OVA-p2C7 and, after a 3-month hypercholesterolemic diet for atherosclerotic plaque formation, inflammatory parameters were evaluated and 18F-FDG uptake was evaluated by PET/CT. Results: Immunization with p2C7 (free) was not able to induce a humoral response, with no detectable titers of antibodies reactive to p2C7 or LDL (-) being observed in any immunized mouse, as well as no detectable antibody-secreting cells for the LDL (-). The group immunized with Alum or Montanide + p2C7 had a significant increase in TNF-α production when compared to the other groups. The tolerance protocol was successfully performed, as the tolerized mice had lower antibody titers than controls for the epitope used. Only mice tolerated with p2C7 showed a significant increase in the production of IL-6, IL-12, IL-10, TNF-α, IFNγ and MCP 1 after a hypercholesterolemic diet. Active immunization with OVA-p2C7 was able to reduce TNF production induced by the hypercholesterolemic diet, as well as to reduce 18F-FDG uptake. Conclusion: the p2C7 epitope is highly expressed in LDL (-) of patients with higher cardiovascular risk. Furthermore, active immunization with p2C7 is also a promising tool to prevent and regulate inflammation caused by LDL (-) in the course of atherosclerosis

Docosahexaenoic fatty acid nanoencapsulated with Anti-PECAM-1 as strategy to increase atherosclerotic plaque stability / Ácido graxo docosahexaenoico nanoencapsulado com anti-PECAM-1 como uma estratégia para aumentar a estabilidade de placas ateroscleróticas

Cardiovascular diseases (CVDs) are the main cause of mortality worldwide, being the ischemic heart disease responsible for 85% of deaths. Atherosclerosis is a chronic inflammation of the arteries that underlies ischemic forms of CVD and involves the innate and adaptive immune systems, from initial fatty streak formation to atherosclerotic plaque ruptures, which defines the beginning and end stages of disease, respectively. Recent research on the reduction of systemic inflammation in order to treat CVD is controversial, since results show that this reduced inflammation can also increase patient susceptibility to general infection. Therefore, new tissue-targeting strategies are necessary. Docosahexaenoic fatty acid (DHA) is a natural bioactive precursor of pro-resolving oxylipins that can reduce inflammation. Based on these factors, the objective of this study was to develop a nanocapsule containing algae oil as a DHA source and apply anti-PECAM-1 on its surface to drive it to the inflamed endothelium. Initially, a surface-functionalized metal-complex multi-wall nanocapsule containing algae oil in its nucleus (MLNC-DHA-a1) was developed. This nanocapsules presented a mean diameter of 163 ± 5 nm, was spherical in shape, showed 94.80% conjugation efficiency using 200 µg/mL of anti-PECAM-1 on the surface, and did not show significant toxicity toward HUVECs at concentrations from 0.14 to 2.90x1011 nanocapsules/mL. The nanocapsules were also stable for 2 h, sufficient time to allow for clinical applications. In cell viability assays, concentrations of 0.14 to 1.40x1011 nanocapsules/mL did not significantly affect the viability of immortalized murine macrophages (RAW 264.7) and U-937 cells after 24, 48, and 72 h of treatment. Finally, macrophages were incubated with 0.75x1011 MLNC-DHA-a1 nanocapsules/mL for 4 h and showed a significant uptake, observed using dark-field hyperspectral microscopy (CytoViva®). Once inside murine macrophages (RAW 264.7), MLNC-DHA-a1 nanocapsules promoted a strong increase in M2 phenotype polarization compared to non-treated control cells. Our results suggest that DHA-enriched algae oil, as part of a lipid core nanocapsules, does not reduce cell viability and improves macrophage phenotype, making it a promising potential therapy for controlling chronic inflammation and healing or stabilizing atherosclerotic plaques

As doenças cardiovasculares (DCVs) são a principal causa de mortalidade no mundo, sendo os eventos isquêmicos responsáveis por 85% das mortes. A aterosclerose é uma inflamação crônica das artérias associada aos eventos isquêmicos das DCVs, na qual o sistema imunológico inato e adaptativo estão envolvidos desde a formação inicial das estrias gordurosas até a ruptura das placas ateroscleróticas. Pesquisas recentes direcionadas à redução da inflamação sistêmica têm mostrado resultados controversos, pois essa abordagem pode aumentar a susceptibilidade do paciente a infecções. Nesse sentido, novas estratégias direcionadas ao tecido lesionado são necessárias. No que se refere a medicamentos anti-inflamatórios ou suplementos alimentares, o ácido docosaexaenóico (DHA) tem sido relatado como um precursor natural de oxilipinas pró- resolutivas. Baseado nesse contexto, o objetivo deste estudo foi desenvolver nanocápsulas contendo óleo de alga como fonte de DHA e vetorizar essas nanopartículas com o anticorpo antiPECAM-1 em sua superfície, visando direcioná-las ao endotélio inflamado. Inicialmente, a nanocápsula multiparede metal-complexa funcionalizada contendo óleo de alga em seu núcleo (MLNC-DHA-a1) foi desenvolvida, apresentando um diâmetro médio de 163 ± 5 nm, formato esférico, onde a eficiência de conjugação do anti-PECAM-1 (200 µg/mL) foi de 94,80% sem toxicidade significativa em HUVECs nas concentrações de 1.14 a 2.9 x 1011 nanocápsulas/mL. As nanocápsulas apresentaram uma estabilidade de 2h, o que representa tempo suficiente para a sua aplicação clínica. A seguir, ensaios de viabilidade celular foram realizados em outras linhagens de células para avaliar a toxicidade das nanocápsulas. As concentrações de 0.14 a 1.40 x 1011 de nanocápsulas/mL não afetaram significativamente a viabilidade celular de macrófagos murinos imortalizados (RAW 264.7) e U-937 após 24, 48 e 72 h de tratamento. Por fim, os macrófagos (RAW 264.7) foram incubados com 0.75 x 1011 MLNC-DHA-a1/mL durante 4 h e apresentam uma captação significativa das nanocápsulas, observada por microscopia hiperespectral de campo escuro (CytoViva®). Uma vez captadas pelos macrófagos murinos imortalizados (RAW 264.7), as nanoformulações MLNC-DHA-a1 promoveram um forte aumento da polarização do fenótipo M2 em comparação com as células controle não tratadas. Nossos resultados sugerem que o óleo de alga rico em DHA presente no núcleo lipídico das nanocápsulas, não reduziu a viabilidade celular e estimulou uma maior polarização de macrófagos para o tipo M2, sendo assim uma terapia potencial para controlar a inflamação crônica e cicatrizar ou estabilizar placas ateroscleróticas

Imunização de camundongos LDLr-/- com peptídeo mimético da LDL eletronegativa: uma potencial estratégia terapêutica para a ateroscleros / Immunization of LDLr - / - mice with electronegative LDL mimetic peptides: a potential therapeutic strategy for atherosclerosis

Introdução: A aterosclerose é uma doença inflamatória crônica decorrente de alterações na parede das artérias de médio e grande calibre e associadas a diversos fatores de risco, dentre os quais destaca-se as hiperlipidemias, ou seja, o aumento plasmático das lipoproteínas, mas também outras comorbidades, como a Síndrome Metabólica. Entre as lipoproteínas, a lipoproteína de baixa densidade (LDL) é de grande relevância na aterosclerose. Diferentes espécies de LDL modificada (LDLm) são originadas através de lipólise, glicação e proteólise, além da oxidação, variando em densidade e eletronegatividade, sendo melhor denominada LDL eletronegativa [LDL (-)]. Considerando as diferenças conformacionais entre a estrutura da ApoB-100 da LDL nativa e da LDL (-), em um estudo inicial, nosso grupo desenvolveu um anticorpo monoclonal (2C7) a partir da imunização de camundongos Balb/c com a LDL (-) humana. Em uma etapa seguinte foi mapeado o epítopo reconhecido pelo anticorpo monoclonal anti-LDL (-) através de phage display. O peptídeo ligante do anticorpo monoclonal anti-LDL (-) foi nomeado p2C7. Esse peptídeo não representa regiões da sequência linear da ApoB-100 humana, mas microdomínios conformacionais de epítopos da ApoB-100 da LDL (-), tornando-os candidatos para a imunomodulação da aterogênese. Portanto, investigar a imunomodulação induzida pelos peptídeo p2C7 miméticos da LDL (-), por representar um epítopo imunodominante da LDL (-), poderá abrir novas perspectivas terapêuticas futuras para a imunomodulação da aterosclerose. Objetivo: Avaliar a imunomodulação promovida pelo p2C7 in vivo, utilizando camundongos C57BL/6 LDLr -/- e amostras de plasma humano. Adicionalmente, no estágio (BEPE) realizado no Instituto Karolinska (dezembro de 2019 a março de 2021), investigou-se o imunometabolismo como mediador nas doenças cardiovasculares. Na parte II-A, estão descritos os resultados do estudo inicialmente proposto. Na parte II-B, apresenta-se os resultados que foram desenvolvidos posteriormente, com ampliação do escopo do projeto, abordando-se a inflamação vascular envolvida no aneurisma de aorta abdominal através de ferramentas de bioinformática. Na parte II-C, são apresentados os resultados do estudo do envolvimento da enzima indolamina 2,3 dioxigenase (IDO) na esteatohepatite não-alcoólica (NASH) e aterosclerose em camundongos ApoE-/- and ApoE/IDO/double-knockout. Metodologia: Foi avaliada a presença de anticorpos anti-p2C7 em amostras de plasma humano de indivíduos com ou sem síndrome metabólica. Realizamos a determinação de TNF circulante nas mesmas amostras e prosseguimos com regressões lineares associando os parâmetros inflamatórios com os níveis de anticorpos anti-p2C7. Camundongos C57BL/6 LDLr -/- foram imunizados com p2C7 e os adjuvantes Alum ou Montanide ISA 720, analisando-se os títulos de anticorpos contra p2C7 e LDL (-), a produção de citocinas (IL-10, IL-4, IL-2, IL-6, IFNγ, IL-17, TNFα) e células secretoras de anticorpos. Camundongos C57BL/6 LDLr -/- foram tolerizados contra os peptídeos mimotopos, com injeções intravenosas (veia caudal) e desafiados com a imunização contendo LDL (-) + Alum. Avaliou-se os títulos de anticorpos contra p2C7 e LDL (-) e a produção de citocinas (TNF-α, IFNγ, IL-12, IL-6, IL-10 e MCP-1). Os camundongos foram mantidos em dieta hipercolesterolêmica por 3 meses para formação da placa aterosclerótica. Após este período, os camundongos foram eutanasiados, avaliando-se a formação de placa aterosclerótica na artéria abdominal e arco aórtico, assim como a produção de citocinas (TNF-α, IFNγ, IL-12, IL-6, IL-10 e MCP-1). Camundongos C57BL/6 LDLr -/- foram imunizados com OVA-p2C7 e, após dieta hipercolesterolêmica de 3 meses para formação de placa aterosclerótica, foram avaliados os parâmetros inflamatórios e avaliada a captação de 18F-FDG no arco aórtico através de PET/CT. Resultados: A imunização com o p2C7 (livre) não foi capaz de induzir resposta humoral, não se observando títulos detectáveis de anticorpos reativos à p2C7 ou LDL (-) em nenhum camundongo imunizado, assim como não foram detectadas células secretoras de anticorpos específicos para a LDL (-). O grupo imunizado com Alum ou Montanide + p2C7 teve aumento significativo na produção de TNF- quando comparado com os demais grupos. O protocolo de tolerização foi realizado com sucesso, visto que os camundongos tolerizados apresentaram títulos de anticorpos inferiores aos controles para o epítopo utilizado. Apenas os camundongos tolerizados com o p2C7 apresentaram aumento significativo na produção de IL-6, IL-12, IL-10, TNF-α, IFNγ e MCP 1 após dieta hipercolesterolêmica. A imunização ativa com OVA-p2C7 foi capaz de reduzir a produção de TNF induzida pela dieta hipercolesterolêmica, assim como reduzir a captação de 18F-FDG. Conclusão: o epítopo p2C7 é altamente expresso na LDL (-) de pacientes com maior risco cardiovascular. Além disso, a imunização ativa com p2C7 também se mostra uma ferramenta promissora para prevenir e regular a inflamação causada pela LDL (-) no curso da aterosclerose

Introduction: Atherosclerosis is a chronic inflammatory disease resulting from changes in the wall of medium and large-caliber arteries and associated with several risk factors, among which hyperlipidemias stand out, ie, the increase in plasma lipoproteins, but also other comorbidities, such as Metabolic Syndrome. Among the lipoproteins, low-density lipoprotein (LDL) is of great relevance in atherosclerosis. Different isoforms of modified LDL (LDLm) are originated through lipolysis, glycation and proteolysis, in addition to oxidation, varying in density and electronegativity, being better called electronegative LDL [LDL (-)]. Considering the conformational differences between the ApoB-100 structure of native LDL and LDL (-), in an initial study, our group developed a monoclonal antibody (2C7) from the immunization of Balb/c mice with human LDL (-). In a next step, the epitope recognized by the anti-LDL monoclonal antibody (-) was mapped using phage display. The binding peptide of anti-LDL monoclonal antibodies (-) was named p2C7. This peptide does not represent linear sequence regions of human ApoB-100, but conformational microdomains of LDL (-) ApoB-100 epitopes, making them candidates for the immunomodulation of atherogenesis. Therefore, investigating the immunomodulation induced by p2C7 peptide mimetics of LDL (-) as it represents an immunodominant epitope of LDL (-) could open new future therapeutic perspectives for the immunomodulation of atherosclerosis. Objective: To evaluate the immunomodulation promoted by p2C7 in vivo, using C57BL/6 LDLr -/- mice, and human plasma samples. In addition, in the internship (BEPE), held at the Karolinska Institute (December 2019 to March 2021), immunometabolism as a mediator of Cardiovascular Diseases was studied. In part II-A, the results of the initially proposed study are described. In part II-B, the results that were developed later are presented, expanding the scope of the project, approaching the vascular inflammation involved in the abdominal aortic aneurysm through bioinformatics tools. In part II-C, the results of the study of the involvement of the enzyme indoleamine 2,3 dioxygenase (IDO) in non-alcoholic steatohepatitis (NASH) and atherosclerosis in ApoE-/- and ApoE/IDO/double mice are presented -knockout. Methodology: The presence of anti-p2C7 antibodies in human plasma samples with or without Metabolic Syndrome was evaluated. We measured circulating TNF in the same samples and proceeded with linear regressions associating inflammatory parameters with levels of anti-p2C7 antibodies. C57BL/6 LDLr -/- mice were immunized with p2C7 and the adjuvants Alum or Montanide ISA 720, analyzing the antibody titers against p2C7 and LDL (-), the production of cytokines (IL-10, IL-4, IL -2, IL-6, IFNγ, IL-17, TNFα) and antibody-secreting cells. C57BL/6 LDLr -/- mice were tolerized against mimotope peptides with intravenous injections (caudal vein) and challenged with immunization containing LDL (-) + Alum. Antibody titers against p2C7 and LDL (-) and cytokine production (TNF-α, IFNγ, IL-12, IL-6, IL-10 and MCP-1) were evaluated. The mice were kept on a hypercholesterolemic diet for 3 months for atherosclerotic plaque formation. After this period, the mice were euthanized, evaluating the formation of atherosclerotic plaque in the abdominal artery and aortic arch, as well as the production of cytokines (TNF-α, IFNγ, IL-12, IL-6, IL-10 and MCP -1). C57BL/6 LDLr -/- mice were immunized with OVA-p2C7 and, after a 3-month hypercholesterolemic diet for atherosclerotic plaque formation, inflammatory parameters were evaluated and 18F-FDG uptake was evaluated by PET/CT. Results: Immunization with p2C7 (free) was not able to induce a humoral response, with no detectable titers of antibodies reactive to p2C7 or LDL (-) being observed in any immunized mouse, as well as no detectable antibody-secreting cells for the LDL (-). The group immunized with Alum or Montanide + p2C7 had a significant increase in TNF-α production when compared to the other groups. The tolerance protocol was successfully performed, as the tolerized mice had lower antibody titers than controls for the epitope used. Only mice tolerated with p2C7 showed a significant increase in the production of IL-6, IL-12, IL-10, TNF-α, IFNγ and MCP 1 after a hypercholesterolemic diet. Active immunization with OVA-p2C7 was able to reduce TNF production induced by the hypercholesterolemic diet, as well as to reduce 18F-FDG uptake. Conclusion: the p2C7 epitope is highly expressed in LDL (-) of patients with higher cardiovascular risk. Furthermore, active immunization with p2C7 is also a promising tool to prevent and regulate inflammation caused by LDL (-) in the course of atherosclerosis

Estado periodontal de pacientes con factores de riesgo aterotrombóticos y algunas enfermedades consecuentes / Periodontal status of patients with atherothrombotic risk factors and some subsequent diseases

Introducción: la periodontitis y la infección subgingival anaerobia asociada representan injuria metastásica que disemina mediadores inflamatorios favorecedores de la ateroesclerosis. La alta tasa de mortalidad por enfermedades cardíacas y cerebrovasculares en Cuba demanda estudios sobre factores de riesgo emergentes, para dirigir esfuerzos a su prevención y control. Objetivo: caracterizar la asociación entre enfermedad periodontal inmunoinflamatoria crónica (EPIC) y un grupo de enfermedades derivadas de la aterosclerosis. Materiales y Métodos: entre enero y marzo del 2017 se realizó un estudio transversal descriptivo, de casos y controles, en el consultorio No 13 del Policlínico "19 de Abril", municipio Plaza de la Revolución. Se conformó el grupo de casos con pacientes que padecieron enfermedades seleccionadas derivadas de la ateroesclerosis; el grupo de controles con sujetos que no las habían presentado. Se homologaron según edad, sexo y color de la piel. Se exploraron factores de riesgo ateroescleróticos y prevalencia y severidad de la EPIC según el Índice Periodontal Revisado. Se respetaron normativas bioéticas para investigaciones biomédicas. Se emplearon medidas de resumen para datos cualitativos y la prueba de independencia de chi-cuadrado (x2) para variables cualitativas. Resultados: existió igual cantidad de hombres que de mujeres, mayoritariamente blancos, entre 61 y 70 años. Las complicaciones ateroescleróticas más frecuentes fueron la angina de pecho y el infarto del miocardio. El factor de riesgo más común fue la hipertensión arterial. Solo hubo 3 pacientes sanos según la Periodoncia. Conclusiones: la asociación entre la EPIC y el grupo de enfermedades estudiadas derivadas de la aterosclerosis no fue estadísticamente significativa (AU).

Introduction: Periodontitis and its associated anaerobic subgingival infection represent metastatic injury that disseminates inflammatory mediators, which favor atherosclerosis. The high mortality rate for heart and cerebrovascular diseases in Cuba requires studies on emerging risk factors to direct efforts to their control and prevention. Objective: To characterize the association between chronic immune inflammatory periodontal disease (CIIPD) and some entities derived from atherothrombotic disease. Materials and Methods: Between January and March 2017, a cross - sectional descriptive study of cases and controls was carried out in the Medical Office # 13 of the Policlinic "19 de Abril", municipality of Plaza de la Revolución. The cases group was formed with patients who have suffered the chosen diseases derived from arteriosclerosis. The control group was formed by 1 X 1 mating, with subjects who had not presented diseases derived from atherosclerosis. They were validated according to age, sex and skin color. Atherosclerotic risk factors were explored, and also the prevalence and severity of CIIPD according to the Revised Periodontal Index. Bioethical principles and regulations for biomedical research were fulfilled. Summary measures were used for qualitative data and independent chi square test (X2) for qualitative variables. Results: The amount of men and women was the same, mostly white persons, aged 61-70 years. The most frequent atherosclerotic complications were angina pectoris and myocardial infarction. The most common risk factor was hypertension. From the point of view of Periodontics, there were only 3 healthy patients. Conclusions: The association among CIIPD and the chosen diseases derived from arteriosclerosis was not statiscally significant (AU).

Relación entre gravedad de arteriosclerosis y progresión de enfermedad renal en pacientes nefrectomizados / Relation between severity of atherosclerosis and progression of renal disease in nephrectomized patients

Nefrectomía radical se asocia a disminución progresiva de función renal. Los parámetros en insuficiencia renal post-nefrectomía están identificados, no así la importancia de la histopatología vascular en la pieza de nefrectomía. Nuestro objetivo fue evaluar si la gravedad de la aterosclerosis en tejido renal no neoplásico puede predecir la evolución del filtrado glomerular en pacientes con nefrectomía total. Se incluyeron 31 pacientes con nefrectomía radical unilateral, no donantes. Edad promedio 68.5 ± 11.8 años, 80% tenían antecedentes de hipertensión, 64% sobrepeso, 51% fumadores. Se estimó tasa de filtración glomerular preoperatoria, postoperatoria y a 6, 12 y 24 meses de cirugía. Se determinó grado de arteriolosclerosis según porcentaje de estrechamiento de luz vascular (grado 0: sin estrechamiento vascular; grado 1: menos del 25%; grado 2: 25-50%; grado 3: más del 50%). Los 10 pacientes con arteriolosclerosis grado 0 tuvieron mayor tasa de filtración glomerular basal (75 ± 13 ml/min/1.73 m²) que los 8 con grado 2 y 3 (55 ± 22 ml/min/1.73 m2) (p 0.0886). En la última evaluación, la tasa de filtrado glomerular fue 60 ± 13 ml/min/1.73 m² (grado 0) y 39 ± 11 ml/min/1.73 m² (grados 2 y 3) (p = 0.05). La disminución del filtrado glomerular fue mayor en grados más graves de ateroesclerosis (sin significación estadística). El análisis histológico de piezas quirúrgicas de nefrectomía permitiría identificar aquellos con mayor riesgo de progresión de enfermedad renal según gravedad de las lesiones vasculares ateroscleróticas.

Radical nephrectomy is associated with a progressive decline in renal function. Clinical parameters in post-nephrectomy insufficiency were described but the impact of histopathologic vascular findings in the non-neoplastic kidney of nephrectomy specimen, has been poorly studied. Our aim was to evaluate whether the severity of atherosclerosis in non-neoplastic renal tissue predicts the evolution of glomerular filtration rate in patients undergoing total nephrectomy. Thirty-one non-donor patients with unilateral radical nephrectomy were included. Average age was 68.5 ± 11.8 years, 80% had a history of hypertension, 64% overweight and 51% were smokers. The glomerular filtration rate was estimated preoperatively, postoperatively and at 6, 12 and 24 months after surgery. Arteriolosclerosis was scored based on degree of narrowing of the vascular lumen (stage 0: no vascular narrowing; stage 1: less than 25%; stage 2: 25-50%; stage 3: more than 50%). Ten patients in stage 0 had higher basal glomerular filtration rate (75 ± 13 ml/min/1.73 m²) than eight patients in stage 2 or 3 (55 ± 22 ml/min/1.73 m²) (p 0.0886). At the last postoperative evaluation, the glomerular filtration rate was 60 ± 13 ml/min/1.73 m² (stage 0) and 39 ± 11 ml/min/1.73 m² (stage 2 or 3) (p = 0.05). The decrease in glomerular filtration rate was higher in patients with more severe degrees of atherosclerosis but the difference was not statistically significant. The histological evaluation of the severity of arteriosclerosis in the whole kidney allows the identification of patients with a greater risk of decreased glomerular filtration rate after a post radical nephrectomy.

Implications of alcoholic cirrhosis in atherosclerosis of autopsied patients / Implicações da doença hepática alcoólica na aterosclerose de pacientes autopsiados

Summary Introduction: Alcoholism is a major public health problem, which has a high social cost and affects many aspects of human activity. Liver disease is one of the first consequences of alcohol abuse, and steatosis, liver cirrhosis and hepatitis may occur. Other organs are also affected with pathological changes, such as pancreatitis, cardiomyopathies, dyslipidemias and atherosclerosis. Objective: To identify the occurrence and degree of atherosclerosis in alcohol-dependent individuals with liver cirrhosis, observing macroscopic and microscopic changes in lipid and collagen deposits and in the liver. We also aimed to verify the association of lipid and collagen fiber deposits with gender, age and body mass index, and to relate alcoholism, liver cirrhosis and atherosclerosis. Method: We performed a study based on autopsy reports of patients with alcoholic liver cirrhosis, with analysis of aorta and liver fragments to verify the occurrence and degree of atherosclerosis, as well as collagen contents. Results: Microscopic atherosclerosis was higher in young subjects (early injury) and in patients with alcoholic liver cirrhosis. The macroscopic analysis of atherosclerosis in aortas showed that patients in more advanced age groups presented more severe classifications. Atherosclerosis, both micro and macroscopically, and the percentage of fibrosis in the liver and aorta were more expressive in females. Conclusion: Cirrhotic patients presented a higher percentage of fibrosis and lipidosis, and may represent a group susceptible to the accelerated progression of cardiovascular diseases. Investigative studies contribute to targeting health-promoting interventions, reducing the mortality and costs of treating cardiovascular disease.

Resumo Introdução: O alcoolismo é um grande problema de saúde pública, de elevado custo social e que afeta vários aspectos da atividade humana. Hepatopatia é uma das primeiras consequências do abuso de álcool, podendo ocorrer esteatose, cirrose hepática e hepatite. Outros órgãos, porém, também são afetados, ocorrendo alterações patológicas, como pancreatite, cardiomiopatias, dislipidemias e aterosclerose. Objetivo: Identificar a ocorrência e a intensidade de aterosclerose em alcoolistas com cirrose hepática, observando alterações macro e microscópicas do depósito lipídico e de fibras colágenas e fígado. Verificar a associação de depósito lipídico e de fibras colágenas com gênero, idade e índice de massa corporal (IMC). Relacionar alcoolismo, cirrose hepática e aterosclerose. Método: Foi realizado estudo com base em laudos de autópsias de pacientes com cirrose hepática alcoólica, sendo estudados aortas e fígados para verificar a ocorrência e a intensidade de aterosclerose, bem como a quantidade de colágeno encontrada. Resultados: A aterosclerose microscópica foi maior em jovens (lesão inicial) e em pacientes com cirrose hepática alcoólica. A análise macroscópica da aterosclerose nas aortas mostrou que pacientes com faixas etárias mais avançadas apresentaram classificações mais intensas. A aterosclerose, tanto micro quanto macroscopicamente, e a porcentagem de fibrose no fígado e na aorta foram mais expressivas no gênero feminino. Conclusão: Os pacientes cirróticos apresentaram maior porcentagem de fibrose e lipidose, e podem representar um grupo susceptível à acelerada progressão de doenças cardiovasculares. Estudos investigativos contribuem para o direcionamento das intervenções promotoras da saúde, reduzindo a mortalidade e os custos no tratamento das doenças cardiovasculares.

Estudos de aterosclerose experimental utilizando tomografia por emissão de pósitrons ( PET-Scan ) / Studies of experimental atherosclerosis using pósitron emission tomography ( PET-Scan )

A aterosclerose é caracterizada como uma doença imune-inflamatória crônica das artérias devido ao grande acúmulo de lipídios na íntima. Um dos fatores envolvidos na progressão da aterosclerose é a presença de uma subfração de partículas de lipoproteína de baixa densidade (LDL) com um grau mínimo de modificação, denominada LDL eletronegativa [LDL(-)], que possui propriedades pró-inflamatórias, apresenta maior retenção na íntima das artérias e maior tempo de permanência na circulação sanguínea, gerando respostas imuno-inflamatórias. Epítopos de anticorpos monoclonais importantes no reconhecimento das partículas de LDL(-) foram mapeados por phage display, gerando peptídeos mimotopos (P1A3 e P2C7) com potencial para acompanhamento da progressão da aterosclerose, sendo excelentes candidatos como radiotraçadores marcados com emissores de pósitrons para obtenção de imagens moleculares por tomografia por emissão de pósitrons (PET) associada à tomografia computadorizada (PET/CT). O peptídeo P1A3 foi radiomarcado com 64Cu através da complexação com o quelante DOTA, obtendo-se imagens por PET/CT da captação do peptídeo na região do arco aórtico de camundongos knockout para a apolipoproteína E (Apoe-/-) comparados com animais controle sem lesões ateroscleróticas. Antes da obtenção das imagens PET/CT, os peptídeos radiomarcados foram validados através de estudos de estabilidade e biodistribuição, acumulando-se rapidamente nos rins. Também foi sintetizado um nanocluster de ouro, marcado com 64Cu e funcionalizado com P1A3 em sua superfície, observando-se o maior direcionamento dos nanoclusters de ouro ligados ao P1A3 para a região das lesões ateroscleróticas do arco aórtico de camundongos Apoe-/-, comparado ao nanocluster controle. Os peptídeos P1A3 e P2C7 radiomarcados com 68Ga, foram também avaliados por imagens PET/CT em camundongos knockout para o gene do receptor da LDL (LDLr-/-) tratados ou não com dieta hipercolesterolêmica. As imagens PET/CT mostraram que os peptídeos marcados com 68Ga tiveram um aumento de captação na região do arco aórtico de camundongos LDLr-/- hipercolesterolêmicos em relação ao controle. Além disso, P2C7 foi radiomarcado com 99mTc e sua biodistribuição demonstrou uma relação maior de % atividade injetada (AI)/órgão da aorta/coração nos camundongos hipercolesterolêmicos, em concordância com a imagem obtida por SPECT (tomografia computadorizada por emissão de fóton único) que revelou maior captação no arco aórtico

Atherosclerosis is characterized as a chronic immune-inflammatory disease of the large arteries due to the accumulation of lipids in the intima. One of the factors involved in the progression of atherosclerosis is the presence of a subfraction of low-density lipoprotein (LDL) particles with a minimum degree of modification, called electronegative LDL [LDL (-)], which has proinflammatory properties, retention in the intima of the arteries and longer residence time in the blood circulation, generating immune-inflammatory responses. Epitopes of monoclonal antibodies important for the recognition of LDL(-) particles were mapped by phage display, generating mimotope peptides (P1A3 and P2C7) with potential to monitor the progression of atherosclerosis. These peptides are excellent candidates as radiotracers labeled with positron emitters to obtain molecular images by positron emission tomography (PET) associated with computed tomography (PET/CT). The P1A3 peptide was radiolabeled with 64Cu by complexation with the DOTA chelator to obtain PET/CT images of the peptide uptake in the aortic arch of apoliprotein E knockout mice (Apoe-/-) compared to control animals without atherosclerotic lesions. Prior to PET/CT imaging, radiolabeled peptides were validated by stability and biodistribution studies that indicated rapid accumulation in the kidneys. It was also synthesized a gold nanocluster, labeled with 64Cu and functionalized with P1A3 on its surface, observing the greater targeting of gold nanoclusters bound to P1A3 in the region of the atherosclerotic lesions of the aortic arch of Apoe-/- mice, compared to control nanocluster. The P1A3 and P2C7 peptides radiolabeled with 68Ga were also evaluated by PET imaging in LDL receptor gene knockout mice (LDLr-/-) treated or not with a hypercholesterolemic diet. PET/CT images showed that the 68Ga-labeled peptides had increased uptake in aortic arch of LDLr-/- hypercholesterolemic mice in relation to the control. Furthermore, the biodistribution of 99mTc-radiolabeled P2C7 showed a higher %ID (injected dose)/organ ratio of aorta/heart in hypercholesterolemic mice that was in accordance to SPECT (single photon emission computed tomography) imaging showing its higher uptake in the aortic arch

Combined bioactive approach over atherosclerosis risk biomarkers / Abordagem combinada de compostos bioativos sobre biomarcadores de risco para aterosclerose

Atherosclerosis, one major cause of morbidity and mortality worldwide, is a complex and multifactorial disease that involves three mainly conditions: chronic inflammation, dyslipidemia and oxidative stress. Although statins are the first-line therapy for LDL cholesterol (LDL-C) lowering, the efficacy of cardiovascular events prevention is limited to 30-40%. This residual risk brought attention to the need of new therapies and clinical targets beyond LDL-C, such as inflammation and oxidative stress. Importantly, suboptimal treatment and/or statin discontinuation due to adverse effects have also been a very challenging clinical problem. Complementary diet therapy can be an effective and safe approach to support pharmacological treatment, especially when drugs alone are insufficient to attenuate risk factors and/or the recommended dose is not well tolerated. The aim of this study was to evaluate the effects of three bioactive components, namely omega-3 fatty acids, plant sterols and polyphenols, on markers of dyslipidemia, inflammation and oxidative stress in patients treated with statins. A randomized, crossover clinical study was carried out, with the participation of 53 subjects. At each intervention period, study participants received a packaged for the functional or control treatment. Functional treatment consisted of fish oil (1.7 g of EPA+DHA/day), chocolate containing plant sterols (2.2 g/day) and green tea (two tea sachets/day). Control treatment consisted of soy oil softgels, regular chocolate and anise tea. After 6 weeks of intervention, functional treatment reduced plasma LDL-C (-13.7% ± 3.7, p=0.002) and C-reactive protein (-35.5% ± 5.9, p=0.027). Plasma triacylglycerol (-15.68% ± 5.94, p=0.02) and MDA (-40.98% ± 6.74, p=0.04) were reduced in subgroups of patients (n=23) with baseline values above the median (93 mg/dL and 2.23 umol/L, respectively). Analysis of lathosterol and campesterol in plasma suggested that intensity of LDL-C reduction was influenced by cholesterol absorption rate rather than its endogenous synthesis. After multivariate analysis, patients identified as "good responders" to supplementation (n=10) were recruited for a pilot protocol of statin dose reduction with complementary diet therapy. Responders received the functional treatment for 12 weeks: standard statin therapy was kept during the first 6 weeks and reduced by 50% from weeks 6 to 12. No difference was observed for plasma lipids and inflammation biomarkers, cholesterol efflux capacity or HDL particle number after statin dose reduction when compared to standard therapy. Although limited by the small sample size, our study demonstrates the potential for a new therapeutic approach combining lower statin dose and specific dietary compounds. This may be particularly helpful for the many patients with, and at risk for, CVD who cannot tolerate high-dose statin therapy

A aterosclerose, uma importante causa mundial de morbidade e mortalidade, é uma doença complexa e multifatorial que envolve três principais condições: inflamação crônica, dislipidemia e estresse oxidativo. Embora as estatinas sejam fármacos de primeira linha para redução de LDL colesterol (LDL-C), sua eficácia na prevenção de eventos cardiovasculares é limitadada a 30-40%. Este risco cardiovascular residual evidencia a necessidade de novas terapias e marcadores clínicos que vão além do LDL-C, como inflamação e estresse oxidativo. Não obstante, tratamento subótimo e/ou interrupção do uso de estatinas devido à ocorrencia de efeitos adversos também é um grave obstáculo na clínica médica. Neste contexto, a terapia dietética complementar representa uma abordagem efetiva e segura para o suporte do tratamento farmacológico, especialmente quando as drogas são insuficientes para atenuar fatores de risco e/ou quando a dose recomendada não é bem tolerada. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito de três compostos bioativos - ácidos graxos ômega 3, fitosteróis e polifenóis - sobre marcadores de inflamação, lipemia e estresse oxidativo em indivíduos tradados com estatinas. Foi realizado um estudo clínico randomizado, de delineamento crossover, com a participação de 53 voluntários. A cada período de intervenção, os participantes receberam um tratamento funcional ou controle. O tratamento funcional foi composto por cápsulas de óleo de peixe (1.7 g/dia de EPA+DHA), chocolate contendo fitosteróis (2.2 g/dia) e chá verde (dois sachês/dia). O tratamento controle foi composto por cápsulas de óleo de soja, chocolate sem adição de fitosteróis e chá de anis. Após 6 semanas de intervenção, o tratamento funcional reduziu a concentração plasmática de LDL-C (-13.7% ± 3.7, p=0.002) e proteína C-reativa (-35.5% ± 5.9, p=0.027). Triglicerídeos (- 15.68% ± 5.94, p=0.02) e malondialdeído (-40.98% ± 6.74, p=0.04) foram reduzidas apenas em subgrupos de indivíduos que apresentavam valores basais acima da mediana (93 mg/dL e 2.23 umol/L, respectivamente). A análise de latosterol e campesterol no plasma sugeriu que a intensidade da redução de LDL-C não foi influenciada pela síntese endógena de colesterol, mas sim pela taxa de absorção. Após análise multivariada dos resultados, pacientes identificados como "good responders" à suplementação (n=10) foram recrutados para um estudo piloto de redução da dosagem da estatina, aliado à terapia dietética complementar. Estes pacientes receberam o tratamento funcional por 12 semanas: durante as 6 primeiras semanas mantevese a dosagem de estatina, que em seguida foi reduzida em 50% das semanas 6 a 12. Não foram observadas diferenças para os marcadores plasmáticos de lipídeos, inflamação, capacidade de efluxo de colesterol ou número de partículas de HDL após a redução da dose de estatina, quando comparada à terapia convencional. Embora limitado pelo reduzido número de pacientes, o estudo demonstra o potencial para uma nova abordagem terapêutica, combinando reduzida dose de estatina com específicos compostos bioativos. Esta pode ser uma importante alternativa para muitos pacientes em risco cardiovascular e que são intolerantes à terapia com altas doses de estatina.

Importancia médica del glucocáliz endotelial: Parte 2: su papel en enfermedades vasculares y complicaciones de la diabetes mellitus / Medical significance of endothelial glycocalyx: Part 2: Its role in vascular diseases and in diabetic complications

El glucocáliz endotelial es una capa constituida por glucosaminoglicanos, proteoglicanos y glucoproteínas que cubre al endotelio en su cara luminal. La participación del deterioro del glucocáliz endotelial parece esencial en los pasos iniciales de la fisiopatología de la aterosclerosis, de las complicaciones microangiopáticas de la diabetes mellitus y de la enfermedad venosa crónica. Los factores de riesgo de la aterosclerosis como la hipercolesterolemia, la hiperglucemia, la inflamación, el exceso de sodio y las fuerzas de tensión alteradas causan deterioro del glucocáliz. Esto provoca disfunción endotelial y permite la filtración de lipoproteínas (LDL) y de leucocitos al espacio subendotelial, iniciando la formación de la placa de ateroma. En la diabetes el glucocáliz adelgazado, principalmente por estrés oxidativo, posibilita la filtración de proteínas (albuminuria) y el trastorno endotelial de la microangiopatía. La hipertensión venosa crónica altera las fuerzas de tensión y daña el glucocáliz, lo que permite la filtración de leucocitos a las partes más profundas de la pared venosa, iniciando la inflamación y el deterioro morfológico y funcional de las venas que lleva a la enfermedad venosa crónica. El tratamiento con glucosaminoglicanos (sulodexida) logra prevenir o revertir el daño al glucocáliz endotelial y algunas de sus consecuencias; es eficaz en la enfermedad venosa crónica, especialmente con úlceras venosas. También ha sido útil en aterosclerosis obliterante de miembros inferiores y en la nefropatía diabética con albuminuria.

Endothelial glycocalyx is a layer composed by glycosaminoglycans, proteoglycans and glycoproteins attached to the vascular endothelial luminal surface. Shredding of glycocalyx appears as an essential initial step in the pathophysiology of atherosclerosis and microangiopathic complications of diabetes mellitus, as well as in chronic venous disease. Atherosclerosis risk factors, as hypercholesterolemia (LDL), hyperglycemia, inflammation, salt excess and altered shear stress can damage glycocalyx. This lead to endothelial dysfunction and allows LDL and leukocytes to filtrate to the subendothelial space initiating atheroma plaque formation. Degradation of glycocalyx in diabetes mellitus is mainly due to oxidative stress and enables protein filtration (albuminuria) and endothelial disorder of microangiopathy. Chronic venous hypertension brings to altered shears stress which results in shredded glycocalyx, this allows leukocytes to migrate into venous wall and initiate inflammation leading to morphologic and functional venous changes of the chronic venous disease. Treatment with glycosaminoglycans (sulodexide) prevents or recovers the damaged glycocalyx and several of its consequences. This drug improves chronic venous disease and promotes healing of chronic venous ulcers. It has also been useful in peripheral arterial obstructive disease and in diabetic nephropathy with albuminuria.

Incorporação de esterificação do colesterol na lipoproteína de alta densidade(HDL): avaliação de biomarcadores plasmaticos e do diadnóstico por imagem (ecografia vascular com doppler) relacionados com a doença aterogênica de carótidas extracranianas e artérias vertebrais / Incorporation of cholesterol esterification in high-density lipoprotein (HDL): evaluation of plasma biomarkers and imaging diadnóstico (vascular ultrasound Doppler) disease-related atherogenic extracranial carotid and vertebral arteries

As complicações da aterosclerose agregam as principais causas de morte no mundo relacionada a problemas cardiovasculares. É caracterizada por distúrbio da condição mecânica e fisiológica, que promove espessamento e endurecimento nas artérias coronárias, cerebrais e periféricos, ocasionando lesão inflamatória crônica, rica em lipídios e células características do processo inflamatório nas paredes vasculares. Objetivos: Avaliar concentrações plasmáticas de biomarcadores do metabolismo lipídico e resultados de doppler de carótidas, relacionando-os com a doença aterogênica de carótidas. Delineamento: Estudo de Corte Transverso. Casuística e Métodos: 66 pacientes com idade 57,5 ± 15,5 anos, (20 a 77), 63% mulheres. Na análise estatística utilizaram-se testes paramétricos e nãoparamétricos, valores de p < 0,05 foram considerados estatisticamente significantes. Resultados: Verificou-se DCA na população masculina a partir da faixa 36-45 anos; nas mulheres, a doença pôde ser detectada a partir de 46-55 anos, elevando-se em ambos gêneros conforme aumento da idade. Tivemos maior prevalência de DCA no gênero feminino (33% contra apenas 15%), na faixa de 56-65 anos, mostrando RR de 1,56 para o gênero feminino (p<0,002; teste de Fisher, com aproximação de Katz). Quanto ao perfil clínico, houve prevalência de 53% pacientes com DCA; 82% pacientes estavam em uso de medicação regular para quaisquer das doenças pregressas; 68% hipertensos; 73% dislipidêmicos; 11% coronariopatas; 4% apresentaram AVE e 64% faziam uso regular de hipolipemiantes. O teste de Fisher evidenciou diferentes RR em função da presença ou não de DCA: Hipotireoidismo (DCA vs NDCA, p< 0,555; RR=1,0); (DCA vs EMI, p < 0,0001; RR=5,2); Dislipidemia (DCA vs NDCA, p< 0,001; RR=1,62); HAS (DCA vs NDCA, p< 0,003; RR=1,76); DM (DCA vs NDCA, p< 0,001; RR=3,6); AVE (DCA vs NDCA, p< 0,0001; RR=2,03); DAC (DCA vs NDCA, p< 0,0001; RR=6,14). Predominaram estenoses leves em 44%, estenoses moderadas em 9%, não foram observados pacientes com estenose severa ou oclusão. A avaliação dos dados de colesterol livre e total de colesterol marcado na fração HDL diferiu entre os grupos estratificados por HDL-C maior e menor do que 40mg/dl e para as condições DCA e sem DCA (p = 0,0409 e, p = 0,0475 teste t), respectivamente. A análise de correlação linear de Pearson entre os dados de atividade de PON1 quando HDL-C < 40mg/dl e incorporação de colesterol livre e, também entre percentual de esterificação CL/CE foi significativa (r = -0,6; p = 0,048; n = 20 e r = -0,7; p = 0,006; n = 12), respectivamente. Conclusões: Evidenciado presença da DCA com aumento da idade conforme literatura; prevaleceu DCA no perfil clínico dos participantes do estudo; as doenças de base identificadas elevam o risco para DCA; o transporte reverso de colesterol é prejudicado na DCA.

Revascularización endovascular de la enfermedad oclusiva ateroesclerótica crónica de la aorta infrarrenal: reporte de tres casos clínicos / Endovascular revascularization of infrarenal aortic chronic atherosclerotic disease: a report of three clinical cases

La revascularización endovascular de la aorta infrarrenal en pacientes sintomáticos con lesiones oclusivas ateroescleróticas crónicas surge como modalidad terapéutica en casos seleccionados, idealmente en lesiones tipo A y B. Comunicar los resultados inmediatos y el seguimiento a largo plazo, de pacientes con clínica de claudicación intermitente de miembros inferiores, diagnosticados con estenosis significativa de la aorta infrarrenal entre junio de 2002 y enero de 2008. Tres pacientes fueron sometidos a angioplastía percutánea de la aorta infrarrenal. con implante de stent o stent-graft, indicándose al egreso aspirina, clopidogrel y cilostazol, así como rehabilitación. Se realizó seguimiento clínico y por angiotomografía al año. El promedio de estenosis fue de 86,3%, 0% posangioplastia. Durante el seguimiento se evidenció mejoría clínica y ausencia de reestenosis. La angioplastia con balón e implantación de stent ha demostrado ser una técnica segura y efectiva como lo describe la literatura actualmente. Siendo una modalidad de menor costo para pacientes con esta entidad clínica.

Endovascular revascularization of chronic atherosclerotic type A and B lesions of the infrarenal aorta is a therapeutic option in selecte symptomatic patients. Communicate immediate and long-term follow-up autcome of patients with lower limb intermittent claudication with significant infrarenal aortic stenosis diagnosis between June 2002 and January 2008. Three patients underwent percutaneous transluminal angioplasty of the infrarenal aorta with either stent or stent-graft deployment, treated ofter discharge with aspirin, clopidogret and rehabilitation. One year clinical and tomographic follow up was made. Stenosis average was 86.3%, 0% after angioplasty. Clinical improvement and no restenosis were evident during follow-up. Percutaneous transluminal angioplasty with stent deployment seems to be a safe an effective approach to treat these lesions as reported in the literature, at a lower cost on an outpatient basis.

Coronary fat content evaluated by morphometry in patients with severe atherosclerosis has no relation with serum lipid levels

The relationship between lipid serum levels and coronary atherosclerotic plaque fat content was studied in 51 necropsy patients. Serum lipids were measured by standard techniques, during life, in the absence of lipid-lowering drugs. Intima, intimal fat and media areas were measured using a computerized system in cryosections of the odd segments of the right, anterior descending and circumflex coronary arteries stained with Sudan-IV. Mean intimal and lipid areas were 5.74 ± 1.98 and 1.22 ± 0.55 mm² (22.12 ± 8.48 percent) in 26 cases with high cholesterol (³200 mg/dL) and 4.98 ± 1.94 and 1.16 ± 0.66 mm² (22.75 ± 9.06 percent) in 25 cases with normal cholesterol (<200 mg/dL; P > 0.05). Patients with high levels of low-density lipoprotein (³130 mg/dL, N = 15) had a higher intima/media area ratio than those with normal levels of low-density lipoprotein (<130 mg/dL, N = 13, P < 0.01). No significant difference in the morphometrical variables was found in groups with high or low serum levels of triglycerides (³200 mg/dL, N = 13 vs <200 mg/dL, N = 36) or high-density lipoprotein (³35 mg/dL, N = 11 vs <35 mg/dL, N = 17). The association between the morphological measurements and serum levels of cholesterol, its fractions, and triglycerides was also tested and the correlation coefficients were low. Although high cholesterol is a risk factor, we show here that in patients with severe atherosclerosis blood cholesterol and triglyceride levels seem to have little influence on coronary lipid content, indicating that other factors may contribute to arterial lipid deposition and plaque formation.

Periodontitis como factor de riesgo en pacientes con enfermedad aterosclerótica aguda y crónica / Periodontitis as a risk factor in patients with chronic and acute arterosclerosis

Diversos estudios han señalado que el desarrollo de la aterosclerosis estaría relacionado con infecciones directas de microorganismos y/o presencia de marcadores inflamatorios, entre los cuales se encuentran los de origen periodontal. El presente estudio tuvo por finalidad identificar si la periodontitis está relacionada con el síndrome coronario agudo o con la cardiopatía coronaria crónica en forma diferente. Para aclarar este tema se seleccionaron a 90 pacientes de ambos sexos, que se encontraban en el servicio de cardiología del Hospital Edgardo Rebagliati Martins, con los diagnósticos de síndrome coronario agudo (30 pacientes), enfermedad coronaria crónica (30 pacientes) y un grupo control (30 pacientes). A todos ellos se les evaluó clínicamente el estado periodontal, utilizando el índice de Ramfjord. Los resultados evidenciaron una tendencia del grupo con enfermedad coronaria crónica a padecer gingivitis, mientras que en el grupo con síndrome coronario agudo esta tendencia se orientó hacia algún tipo de significativa entre estas variables (p menor que 0.05) se relaciona con el síndrome coronario agudo, pero no con la enfermedad coronaria crónica.

The reason of the study was identify if there was a relationship between the periodontitis and the atherosclerosis. For that reason we selected 90 patients, males or females, this patients must have been in the cardiology service of the Edgardo Rebagliati Martins hospital, whit the diagnosis of acute coronary (30 patients) chronic coronary disease (30 patients) and a control group (30 patients). Every patient was evaluated with the Ramfjor index to know how the periodontal state was. The results show that a person with chronic coronary disease presents gingivitis and people with acute coronary syndrome presents periodontitis, finding a sign can't relationship between the second groups. In conclusion the presence of periodontitis is related to acute coronary syndrome, not been the case of chronic coronary disease.