Avaliação de danos genotóxicos e citotóxicos em células da mucosa bucal de soldadores nas cidades de Cubatão e Santos, São Paulo / Evaluation of genotoxic and cytotoxic effects in buccal mucosa cells of welders in the cities of Cubatão and Santos, state of São Paulo, Brazil

Contexto: Estima-se que no mundo existam, aproximadamente, 5 milhões de trabalhadores expostos ocupacionalmente à fumaça de soldagem. Níquel e Cromo são metais que podem ocasionar danos ao material genético, e soldadores, por força do ofício, são rotineiramente expostos a eles. Objetivo: O objetivo do presente estudo foi investigar a frequência de danos citotóxicos e genotóxicos em células da mucosa bucal de um grupo de soldadores. Métodos: Um total de 44 indivíduos, distribuídos em 2 grupos ­ soldadores e não soldadores ­, foi comparado utilizando a técnica do ensaio do micronúcleo e morte celular (picnose, cariorrexe e cariólise) em células da mucosa oral de trabalhadores de soldagem. As células examinadas foram coradas com Feulgen/Fast-green. Resultado: Os soldadores apresentaram maior frequência (p<0,05) de alterações indicativas de citotoxicidade quando comparados ao grupo de indivíduos não expostos a fumos metálicos. Conclusão: Os resultados deste estudo preliminar sugerem que soldadores apresentam maior frequência de danos citotóxicos e morte celular em células da mucosa bucal que trabalhadores não expostos.

Context: It is estimated that approximately 5 million workers are occupationally exposed to welding fumes worldwide. Nickel and Chromium are genotoxic metals found in welding fumes and thus welders are exposed to these metals at the working place. Objective: The objective of this study was to investigate the frequency of cytotoxic and genetic damage in cells harvested from the oral mucosa of welders and also from a group of workers not exposed to metallic fumes. Methods: A total of 44 individuals, divided into 2 groups ­ welders and not-welders ­ were compared using the micronucleus assay technique and cell death (pycnosis, karyorrexis and karyolysis) in buccal mucosa cells of welding workers. The cells examined were staining with Feulgen/Fast-green. Results: Welders presented higher frequency (p<0.05) of cytotoxicity than the group of volunteers who were not exposed to metallic fumes. Conclusion: The results from this preliminary study suggest that welders may have a higher frequency of cytotoxic damage in buccal mucosa cells than non-welding workers.

DNA damage and postural balance in multiple sclerosis patients / Dano ao DNA e equilíbrio postural de portadores de Esclerose Múltipla

Abstract Introduction: Multiple Sclerosis (MS) is a chronic inflammatory disease characterized by infiltration of inflammatory cells on the Central Nervous System (CNS). There is evidence that cumulative DNA damage can contribute to various mechanisms underlying MS lesions. Changes in postural balance are frequent observations in subjects with MS. Objective: Evaluated the DNA damage index (DDI)) and postural balance in patients with MS. Methods: A case-control study was conducted with 28 subjects matched for sex, age, and body mass index, divided into MS group and control. The DDI was assessed by comet assay and postural balance through recording the body oscillations of the center of pressure (COP), in the anterior-posterior and lateral middle directions. Results: Showed higher DDI in MS patients (21.3 ± 4.8) than controls (7.9 ± 6.1). Significant differences between groups were also noted in postural control parameters. The wider ranges of postural sway were observed in the MS group. The associations between DDI and postural control parameters showed weak, but significant correlations. No associations were found between DDI and time of diagnosis of MS. Conclusion: People with MS had higher DDI and larger body oscillations than healthy individuals.

Resumo Introdução: A Esclerose Múltipla (EM) é uma doença inflamatório crônica caracterizada pela infiltração de células inflamatórias no Sistema Nervoso Central (SNC). Há evidencias de que danos cumulativos ao DNA possam contribuir para vários mecanismos subjacentes às lesões da EM. As alterações no equilíbrio postural são observações frequentes nos sujeitos com EM. Objetivo: Este estudo avaliou os índices de dano ao DNA (ID) e equilíbrio postural em portadores de Esclerose Múltipla (EM). Métodos: Um estudo de caso-controle foi conduzido com 28 sujeitos pareados por sexo, idade e índice de massa corporal, divididos em grupo EM e controle. O ID foi avaliado pelo ensaio cometa e o equilibro postural através do registro das oscilações corporais relativas ao deslocamento centro de pressão (COP) nas direções antero posterior e médio lateral. Resultados: Maiores ID em portadores de EM (21,3 ± 4,8) do que controles (7,9 ± 6,1). Diferenças significativas entre os grupos também foram percebidas nos parâmetros do controle postural. As maiores amplitudes de oscilação foram observadas no grupo EM para ambas as direções. As associações entre o ID e parâmetros do controle postural apresentaram correlações fracas e significativas. Não foram encontradas associações entre ID e tempo de diagnóstico de EM. Conclusão: Portadores de EM apresentaram maior ID e maiores oscilações corporais do que controles saudáveis.

Avaliação do risco de mutagenicidade e anormalidades nucleares decorrente da exposição ao benzeno e a seus derivados em trabalhadores de oficinas automotivas em Teresina-PI, Brasil / Risk assessment of mutagenicity and nuclear abnormalities resulting from exposure to benzene and its derivatives in workers of automotive workshops in Teresina-PI, Brazil

O monitoramento biológico da exposição a substâncias químicas no local de trabalho tem adquirido crescente importância na avaliação dos riscos para a saúde. Oficinas de reparação de veículos automotores constituem um ramo de atividade pouco estudado.Os trabalhadores nessas oficinas são expostos às tintas e solventes, que sãoconstituídos quimicamente por benzeno e seus derivados. O presente estudo avaliou o risco de mutagenicidade e anormalidades nucleares (cariorexe, cariólise e células binucleadas) em células de mucosa oral desses trabalhadores, com a aplicação do testede micronúcleos. Foram analisados 42 trabalhadores, da cidade de Teresina, PI. Os resultados obtidos foram correlacionados com o estilo de vida desses profissionais. A frequência de micronucleos no grupo exposto foi estatisticamente significante (* P < 0,05 – Teste T- Student) assim como a frequência de anormalidades nucleares (***P < 0,0001– Teste T- Student). Houve correlação positiva entre a frequência de micronucleos e o nãouso de equipamentos de proteção individual (EPIs) e a frequência das anormalidades nucleares (carriorrexe e cariólise) com o não consumo de vegetais e o hábito de fumar. É possível concluir a partir deste estudo que a exposição crônica ocupacional a tintaspode conduzir a um aumento no risco de dano genético em trabalhadores de oficinas automotivas...

Polimorfismo do gene tp53 no códon 72 em pacientes com suspeita de LMC / Codon 72 polymorphism of the TP53 gene in patients suspected to have CML

A leucemia mielóide crônica (LMC) é uma doença proliferativa do sistema hematopoiético, caracterizada pela expansão clonal de uma célula-tronco primitiva e pluripotente denominada stem cell. Este tipo de leucemia está associado, em 90 por cento dos casos, à translocação t(9;22)(q34;q11). Essa alteração cromossômica estrutural codifica para uma proteína quimérica BCR-ABL, que confere às células leucêmicas uma alta resistência à morte, independente do agente indutor desse processo. A proteína p53 é uma reguladora transcricional induzida por danos no DNA, fato que resulta na parada do ciclo celular com conseqüente ativação de mecanismos de reparo ou mesmo na indução à apoptose. As mutações no gene TP53 são as alterações genéticas mais comuns em tumores malignos humanos. O presente estudo teve como objetivo genotipar e determinar a freqüência alélica do polimorfismo do TP53 no códon 72 (arginina - Arg e prolina - Pro), em pacientes com suspeita de LMC, pela Reação em Cadeia da Polimerase. Desta forma, os resultados indicaram que 73,4 por cento (23/30) dos pacientes apresentaram homozigose para arginina (Arg/Arg) e 26,6 por cento (7/30) heterozigose (Arg/Pro). Não foi encontrado nenhum paciente homozigoto para prolina (Pro/Pro). Os resultados obtidos sugerem que o polimorfismo do gene TP53 no códon 72 não é um fator de risco importante para a iniciação, promoção e progressão da LMC.

Chronic myeloid leukemia (CML) is a proliferative disorder of the hematopoietic system characterized by clonal expansion of a primitive and pluripotent stem cell. In this type of leukemia, up to 90 percent of all cases is associated to a specific chromosomal translocation, t(9;22)(q34;q11). The genomic alteration results in a chimeric protein, BCR-ABL, that confers a high resistance leukemia cells to death, independent of the induction mechanism of this process. Protein p53 is a transcriptional factor expressed after DNA damage which ceases cell cycle progression and consequently activates repair mechanisms or even induces apoptosis. Mutations of TP53 are the most common genetic alterations in malignant tumors in humans. The main objective of the current study was to genotype and determine the allelic frequency of the TP53 polymorphism at codon 72 in patients suspected of having CML using a PCR-based assay. The frequencies of the genotypes among the cases were: 73.4 percent (23/30) and 26 percent (7/30) for homozygous arginine (Arg-72) and heterozygous proline/arginine (Pro/Arg-72), respectively. Homozygous proline (Pro-72) was not observed in the current study. The results obtained suggest that the TP53 polymorphism at codon 72 is not an important risk factor for the initiation, promotion, nor progression of CML.

Exposición a Solventes Orgánicos y Efectos Genotóxicos en Trabajadores de Fábricas de Pinturas en Bogotá / Bogotá paint-industry workers´ exposure to organic solvents and genotoxic effects

Objetivo: Investigar la exposición a solventes orgánicos y los efectos genotóxicos mediante monitoreo citogenético determinando la frecuencia de micronúcleos en linfocitos y el daño del ADN por el ensayo del cometa, en trabajadores de fábricas de pinturas en Bogotá. Metodología: Como biomarcadores de exposición a benceno, tolueno y xileno, la excreción de fenol, ácido hipúrico y ácido metilhipúrico fue investigada en muestras de orina provenientes de trabajadores en dos fábricas de pinturas en Bogotá y de un grupo control. También se realizó monitoreo de la concentración de benceno, tolueno y xileno en el ambiente de trabajo. Como biomarcadores de efectos genéticos tempranos, la frecuencia de micronúcleos y rompimiento de cadenas simples de ADN fueron evaluadas en células mononucleares a partir de muestras de sangre periférica. Resultados: Las concentraciones de ácido hipúrico en orina post-exposición se encontraron dentro de los rangos normales, mientras que para fenol el 3,3 por ciento y para ácido metilhipúrico el 50,8 por ciento de las muestras presentaron niveles por encima de los valores de referencia. En una de las fábricas la concentración de benceno en aire estaba por encima de los valores límites permisibles. No hubo diferencias estadísticas entre los trabajadores expuestos y los no expuestos con relación a los biomarcadores genéticos examinados. Conclusiones: En este estudio los niveles de solventes orgánicos internamente efectivos parecen ser bajos lo cual se explica con la ausencia de efectos genotóxicos en las células examinadas. Este trabajo constituye un aporte para continuar investigando sobre el tema y a la vez hacer seguimiento por medio del programa de vigilancia epidemiológica.

Objective: Investigating the degree of exposure to organic solvents and related genotoxic consequences in paint-factory workers by using cytogenetic monitoring and determining micronuclei frequency in lymphocytes and DNA damage as assessed by comet assays. Methodology: Excretion of phenol and hippuric and methylhippuric acids in urine was investigated as biomarkers for benzene, toluene and xylene exposure. Urine samples were taken in two paint-factories in Bogotá and in a non-exposed control group. Benzene, toluene and xylene concentrations in air were measured in the work setting. Micronuclei and simple DNA chain breakage frequency were evaluated in peripheral blood sample mononuclear cells to assess early genetic effects. Results: Hippuric acid concentration was found to be within normal values; by contrast, phenol and methylhippuric acid sample concentrations were above normal values by 3,3 percent and 50,8 percent, respectively. Benzene concentration in air was above permissible limits in one of the factories. There were no statistical differences regarding genetic biomarkers between exposed and non-exposed workers. Conclusions: Organic solvent levels in the samples were apparently low, which is consistent with the absence of genotoxicity in cells. This study represents a step forward in research in occupational health surveillance.

Estresse oxidativo e danos de DNA na diabete / Oxidative stress and DNA damage in diabetes

Diabetes mellitus é doença crônica caracterizada por alterações no metabolismo de lipoproteínas, glicose e produção aumentada de espécies reativas do metabolismo do oxigênio (ERMO). Os radicais livres produzidos no organismo como ERMO podem danificar componentes celulares e estão implicados numa variedade de doenças.Podem atacar todos os tipos de macromoléculas, inclusive o DNA. Os efeitos de antioxidantes e de outros agentes que modifiquem os danos de DNA gerados por ERMO têm sido avaliados pelo teste do cometa também conhecido por Single Cell Gel Eletrophoresis assay (SCGE). O ensaio do cometa também é marcador adequado para verificar danos no DNA em pacientes portadores de diabete com estresse oxidativo sistêmico

Monitoring of molecular ans cytogenetic damage in lymphocytes from three persons with polycystic kidney disease

Background. Much interest has been generated in the studies that would help to under stand whether is a causal association between disease and various types of molecular or cytogenetic damage detected in human cells. Materials and Methods. The aims of this study were to elicit the possible association between DNA and cytogenetic damage induced in lymphocytes of three members of a family with autosomal dominant polycystic kidney disease (ADPKD). Ther predictability to develop cancer or to sensitive response to enviromental exposure of the young girl at the age of 19, her brother (9 years old) and a maternal aunt at the age of 41 were sought. Cytogenetic studies, analysis of DNA damage by single cell gel electrophoresis assay (SCGE known as a Comet assay), and analysis of p21ras protein level in blood plasma were carried out on their lymphocytes. Results. The analysis for presence of chromosome aberrations in the first mitosis and sister chromatid exchanges in the second mitosis revealed elevated levels of cytogenetic biomarkers when compared to the mean values observed in the reference group in environmental biological monitoring studies. Results of sister chromatid exchanges (SCE) and percent of cells with elevated number of exchanges (high frequency cells) that were significantly higher in two probands had demonstrated susceptibility to or possibility of enviromental exposure (pesticides, smoking). The results of this study show that the lymphocytes of two persons revealed increased sensitivity to 0.5 Gy dose of gamma radiation expressed in the increased, atthough statistically insignificant, damage detected on the molecular level after cell irradiation. Conclusions. The latter might be associated with a specific aberration present in the cells of these persons. But final conclusions can be arrived at when an application of FISH technique is completed