Hiperplasia pseudoepiteliomatosa: carcinoma escamocelular versus paracoccidioidomicosis oral, un caso con mirada dermatológica / Pseudoepitheliomatous hyperplasia: Squamous cell carcinoma versus oral paracoccidioidomycosis, a case from a dermatological perspective

La paracoccidioidomicosis es una micosis sistémica endémica en Latinoamérica. La presentación más frecuente compromete crónicamente los pulmones, la piel y las mucosas. Al inicio, este paciente presentó, por varios años, una lesión única en la mucosa oral que, en ausencia de otros síntomas, se relacionó con una neoplasia maligna, específicamente con un carcinoma escamocelular. La diferenciación entre los dos diagnósticos se hace mediante un examen directo, un estudio histopatológico y cultivos iniciales y subsecuentes. Sin embargo, tales estudios no fueron concluyentes. Después de varias consultas y pruebas, con los resultados del examen directo, la inmunodifusión y la PCR en tiempo real se confirmó el diagnóstico de paracoccidioidomicosis crónica multifocal. Este caso alerta sobre la ausencia de sospecha clínica de micosis endémicas, dada la presencia de lesiones mucocutaneas que pueden ser producidas por hongos como Paracoccidioides spp, y la importancia de considerarlas entre los diagnósticos diferenciales.

Paracoccidioidomycosis is a systemic mycosis endemic in Latin America. The most frequent form involves a chronic compromise of the lungs, skin, and mucosa. The patient started with a single oral lesion that lasted for several years. The absence of other symptoms pointed out a possible malignant neoplasm, specifically a squamous cell carcinoma. Differentiation between both diagnoses-fungal infection and carcinoma-depends on the results of the direct examination, the histopathological study, and the initial and subsequent cultures. However, in this case, those findings were not conclusive. The coexistence of both diagnoses is frequent and increases the diagnostic challenge. After several consultations and tests, direct examination, immunodiffusion and real-time PCR findings the multifocal chronic paracoccidioidomycosis diagnosis was confirmed. This case warns about a systematical absence of clinical suspicion of endemic mycoses before the appereance of mucocutaneous lesions, which can be produced by fungi like Paracoccidioides spp, and the importance of considering those mycoses among the differential diagnoses.

Paracoccidioidomicosis: crónica de una enfermedad olvidada / Paracoccidioidomycosis: chronicle of a neglected disease

La paracoccidioidomicosis (PCM) es una de las micosis sistémicas que son endémicas exclusivamente en América Latina. Está causada por hongos termodimorfos del género Paracoccidoides: P. brasiliensis (S1), P. americana (PS2), P. restrepiensis (PS3), P. venezuelensis (PS4) y P. lutzii. Paracoccidioides habita y produce conidios infecciosos en suelos de zonas subtropicales húmedas. En Argentina está presente al norte del paralelo 34.5° S. Poco se sabe sobre su nicho ecológico específico, lo que dificulta el diseño de medidas de control de la PCM. La infección ocurre en hospederos susceptibles cuando inhalan conidios aerosolizados. Los trabajadores rurales varones son el grupo más expuesto a contraer PCM. La primoinfección puede ser asintomática o causar un cuadro respiratorio leve; este, a su vez, puede autolimitarse o progresar a enfermedad, ya sea pulmonar o diseminada. Existen dos formas de presentación: (i) aguda/subaguda, en niños, adolescentes y personas con sistemas inmunes comprometidos; y (ii) crónica progresiva, en adultos. La cicatrización de las lesiones resulta en secuelas fibróticas que pueden causar disfagia, disfonía, insuficiencia suprarrenal y obstrucción intestinal. Aunque existen herramientas para su diagnóstico, la PCM es rara vez sospechada precozmente porque sus manifestaciones clínicas iniciales son inespecíficas. Sumados, el diagnóstico tardío y la baja adherencia a los efectivos pero largos tratamientos antimicóticos permiten el avance de la enfermedad y el desarrollo de fibrosis tisular extensa, lo que compromete gravemente la función respiratoria y suprarrenal, altera permanentemente la calidad de vida del paciente y puede causar su muerte.

Paracoccidioidomycosis (PCM) is among the systemic mycoses which are endemic only in Latin America. In Argentina, the vast majority of the cases are reported at north of latitude 34.5° S. The disease is produced by thermodimorphic fungi of the genus Paracoccidoides: P. brasiliensis (S1), P. americana (PS2), P. restrepiensis (PS3), P. venezuelensis (PS4) y P. lutzii. The natural habitat of members of this genus is the soil, where they produce infectious conidia. Little is known, however, about their specific ecologic niche(s), and this knowledge gap hampers the design of measures to control the infection. Rural male workers are the group most at risk of developing PCM. Infection occurs by inhalation of aerosolized conidia and may either be asymptomatic or cause mild respiratory symptoms. In turn, this primary infection may be self-limited or progress to severe pulmonary or disseminated disease. The disease has two clinical presentations: (i) acute or subacute (juvenile), frequent in children, adolescents and people with immunodeficiencies; and (ii) chronic progressive, in adults. Active lesions often resolve into fibrotic scars which can cause dysphagia, dysphonia, adrenal insufficiency, and intestinal obstruction. Although efficient tools are available for diagnosis and treatment, the nonspecific nature of PCM clinical manifestations frequently delay the diagnosis. In addition, the poor adherence to long antifungal treatments allows the advance of the disease and the development of extensive fibrosis compromising severely and permanently respiratory and adrenal functions, thus altering the patient´s quality of life and even causing his/her death.

Lesões orais e correlação com aspectos clínicos, epidemiológicos e laboratoriais da paracoccidioidomicose / Oral lesions and correlation with clinical, epidemiological and laboratory aspects of paracoccidioidomycosis

Introdução: a paracoccidioidomicose (PCM) é uma micose sistêmica endêmica cuja incidência vem aumentando de forma significativa na região norte do Brasil. Duas espécies, Paracoccidioides brasiliensis e Paracoccidioides lutzii podem causar a doença. A última aparenta ter maior importância em Rondônia, estado com as maiores taxas de incidência e mortalidade por PCM do Brasil. Objetivo: descrever as características clínicas, epidemiológicas e laboratoriais de pacientes portadores de PCM e estabelecer correlação com lesões orais. Material e Métodos: estudo retrospectivo de pacientes atendidos no Centro de Referência em Medicina Tropical de Rondônia durante o período de janeiro de 2013 a dezembro de 2016. Resultados: foram diagnosticados 107 pacientes com média de idade de 53,8 anos, sendo 100 homens e 07 mulheres. Observou-se que 77% mantinham contato ou relataram experiência anterior com lavoura. A maioria (98,1%) apresentou a forma crônica da doença. O diagnóstico foi confirmado em 74,7%, e baseado em achados clínicos e/ou epidemiológicos no restante. O diagnóstico sorológico não esteve disponível no período. O tempo médio entre o início dos sintomas e a realização do diagnóstico foi de 7,3 meses. Os principais locais acometidos foram os pulmões (95,3%), seguidos da cavidade oral (55,1%) e dos gânglios (28%). Na cavidade oral, a faringe/laringe predominou (33%), seguida da mucosa jugal (17,8%) e palato mole (13,1%). Houve 58,3% de associação com tabagismo. O medicamento mais utilizado para o tratamento foi o Itraconazol, fornecido pelo governo. Conclusão: não houve diferença entre os grupos com ou sem comprometimento da cavidade oral. A presença de lesões orais em mais da metade dos casos, com diagnóstico mais acessível, sugere que se pode diminuir o tempo entre o início dos sintomas e o início do tratamento, e contribuir para uma menor proporção de sequelas. Sugere-se ainda que o P. lutzii pode manifestar doença com características clínicas, epidemiológicas e laboratoriais semelhantes ao P. brasiliensis, exceto pela menor proporção de formas agudas de PCM. Mas novos estudos são necessários(AU)

Background: Paracoccidioidomycosis (PCM) is an endemic systemic mycosis whose incidence has been increasing significantly in the northern region of Brazil. Two species, Paracoccidioides brasiliensis and Paracoccidioides lutzii can cause the disease. The latter appears to be more important in Rondônia, the state with the highest incidence and mortality rates by PCM in Brazil. Objective: To describe the clinical, epidemiological and laboratory characteristics of PCM patients and to establish correlation with oral lesions. Material and Methods: a retrospective study of patients attended at the Reference Center in Tropical Medicine of Rondônia during the period from January 2013 to December 2016. Results: A total of 107 patients were diagnosed, with mean age of 53.8 years, 100 men and 7 women. It was observed that 77% maintained contact or reported previous experience with rural areas. The majority (98.1%) presented the chronic form of the disease. The diagnosis was confirmed by the finding of the fungus in clinical specimens in 74.7%, and based on clinical and/or epidemiological findings in the rest. The serological diagnosis was not available in the period. The mean time between onset of symptoms and the diagnosis was 7.3 months. The main sites were the lungs (95.3%), followed by the oral cavity (55.1%) and the ganglia (28%). In the oral cavity, the pharynx/larynx predominated (33%), followed by jugal mucosa (17.8%) and soft palate (13.1%). There was an 58,3% association with smoking. The most commonly used drug was Itraconazole in 93.5% of patients. Conclusion: There was no difference between groups with or without oral cavity involvement. The presence of oral lesions in more than half of the cases, with a more accessible diagnosis, suggests that the time between onset of symptoms and the beginning of treatment can be shortened and contribute to a lower proportion of sequelae. It is also suggested that P. lutzii can manifest disease with clinical, epidemiological and laboratory characteristics similar to P. brasiliensis, except for the smaller proportion of acute forms of PCM. But new studies are needed(AU)

Paracoccidioidomycosis in the spine: case report and review of the literature / Paracoccidioidomicose na coluna vertebral: relato de caso e revisão da literatura

ABSTRACT: CONTEXT: Paracoccidioidomycosis is a systemic form of mycosis that spreads hematogenously, secondarily to reactivation of lung infection or infection at another site or to new exposure to the causative agent. Few cases of bone involvement have been reported in the literature and involvement of the spine is extremely rare. CASE REPORT: We describe a case of a 68-year-old male patient with spondylodiscitis at the levels L4-L5 caused by presence of the fungus Paracoccidioides brasiliensis, which was diagnosed through percutaneous biopsy. The patient was treated with sulfamethoxazole and trimethoprim for 36 months, with complete resolution of the symptoms. CONCLUSION: Spondylodiscitis caused by the fungus Paracoccidioides brasiliensis is uncommon. However, in patients with chronic low-back pain who live or used to live in endemic regions, this infection should be considered as a possible differential diagnosis.

RESUMO: CONTEXTO: Paracoccidioidomicose é uma micose sistêmica de disseminação hematogênica, secundária a reativação de uma infecção pulmonar ou de outro sítio, ou a uma nova exposição ao agente causador. Poucos casos de envolvimento ósseo são relatados na literatura, e o acometimento da coluna vertebral é extremamente raro. RELATO DE CASO: Descrevemos o caso de um paciente masculino de 68 anos, apresentando espondilodiscite no nível L4-L5, causada pela presença do fungo Paracoccidioides brasiliensis, diagnosticada após biópsia percutânea. O paciente foi tratado com sulfametoxazol e trimetoprim por 36 semanas, com resolução completa dos sintomas. CONCLUSÃO: A espondilodiscite causada pelo fungo Paracoccidioides brasiliensis é incomum, mas, em pacientes portadores de lombalgia crônica que viveram ou vivem em regiões endêmicas, deve ser considerada como um possível diagnóstico diferencial.

Paracoccidioidomicose subaguda abdominal em paciente adulto imunocompetente: relato de caso / Abdominal subacute paracoccidioidomycosis in an immunocompetent adult patient: case report

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: A paracoccidioidomicose é uma doença fúngica, granulomatosa crônica, que acomete principalmente os pulmões, o sistema linfático e a pele. Pode ser dividida nas formas aguda e subaguda, que ocorre principalmente em crianças e acomete preferencialmente pele e sistema linfático e, crônica que ocorre principalmente em adultos, particularmente no pulmão. O objetivo deste estudo foi apresentar a manifestação da paracoccidioidomicose subaguda em adulto jovem imunocompetente.RELATO DO CASO: Paciente do sexo feminino, 29 anos, internada para investigação de dor abdominal, sendo diagnosticada paracoccidioidomicose subaguda. Apresentou colestase intra-hepática, devido à linfoadenomegalia intra-abdominal. Evoluiu sem complicações após tratamento instituído.CONCLUSÃO: O caso relatado reflete uma manifestação incomum,em adulto jovem, residente em zona urbana, das formas aguda e subaguda de paracoccidioidomicose, com acometimento linfonodal profundo intra-abdominal causando colestase intra-hepática, icterícia e anemia.

BACKGROUND AND OBJECTIVES: Paracoccidioidomycosis is a chronic, fungal, granulomatous disease, which mainly affects the lungs, lymphatic system and skin. It can be divided into acute and subacute, occurring primarily in children and affecting mainly the skin and lymphatic system, and chronic, occurring primarily in adults and affecting mainly the lungs. This report describes the manifestation of subacute paracoccidioidomycosis in an immunocompetent young adult.CASE REPORT: Female patient, 29 year-old, imunocompetent, hospitalized with abdominal pain, was diagnosed with subacute paracoccidioidomycosis. She showed intrahepatic cholestasis due to intra-abdominal lymphadenopathy. She presented uneventful recovery after treatment.CONCLUSION: This case reflects an unusual manifestation in young adults living in urban areas of the subacute/acute paracoccidioidomycosis, with deep intra-abdominal lymphadenopathy causing intrahepatic cholestasis, jaundice and anemia. There was improvement after treatment

Paracocidioidomicosis diseminada cronica como primera manifestacion de SIDA / Chronic disseminated paracoccidioidomycosis as a first manifestation of HIV infection

La paracoccidioidomicosis (PCM) es una micosis sistémica, endémica de áreas tropicales y subtropicales de América Central y América del Sur causada por un hongo dimorfo denominadoParacoccidioides brasiliensis. Es una enfermedad prevalente en América Latina, desde México (20 grausde latitud norte) hasta la Argentina (35 graus de latitud sur). Su distribución incluye regiones de clima tropical y subtropical, con temperaturas medias elevadas y alta humedad constantes durante el ano. Existen alrededor de 10 millones de personas infectadas por este hongo pero solo un 2 por ciento desarrollarán las formas diseminadas de la enfermedad. La migración constante de personas desde áreas rurales a urbanas, incrementa el riesgo de reactivación de la PCM en personas, tanto inmucompetentes comoinmunosuprimidos, fuera de las áreas endémicas. La enfermedad diseminada crónica es la forma clínica más frecuente y se caracteriza por el compromiso pulmonar y mucocutáneo. Se presenta un paciente con una PCM diseminada crónica como primera manifestación de la infección por el virusde la inmunodeficiencia humana. El diagnóstico se basó en los hallazgos epidemiológicos, clínicos,microbiológicos e histopatológicos.

Morfologia, virulência e perfil genético de Paracoccidioides brasiliensis: avaliação pré e pós-passagem em modelo murino de isolados provenientes de forma clínica crônica humana da paracoccidioidomico / Morphology, virulence and genetic profile of P. brasiliensis pre evaluation and post-passage in a murine model of chronic isolates from human clinical form of paracoccidioidomico

Estudos sobre os aspectos morfológicos, genéticos e de virulência, inerentes ao Paracoccidioides brasiliensis antes e depois da interação com hospedeiro experimental são de grande importância para. Oito isolados avaliados não apresentaram diferenças macro e micromorfológicas póspassagem em animal quando comparadas a morfologia pré-passagem. Entretanto eles diferiram entre si em relação à micromorfologia, in vitro, com diferenças na gemulação e presença de filamentos à temperatura de 36oC. Em relação à virulência, segundo os critérios adotados, índice esplênico, reisolamento de células fúngicas, lesões em diferentes órgãos e taxa de sobrevivência, o isolado Pb235CRS foi considerado o mais virulento; os isolados Pb261, Pb31MAS, Pb285, Pb246, Pb281 apresentaram virulência intermediária e os isolados Pb29EE e Pb639 foram os menos virulentos. A genotipagem por RAPD dos isolados demonstrou modificações no perfil de bandas do DNA após interação com o hospedeiro animal, aos 100 dias da inoculação, porém não foi possível correlacionar esses dados com os demais obtidos. Os resultados obtidos em nosso estudo apontam que diferenças entre isolados existem e podem interferir na evolução da doença...

Imunologia da paracoccidioidomicose / Immunology of paracoccidioidomycosis

Paracoccidioidomicose é a mais prevalente micose sistêmica na América Latina, em pacientes imunocompetentes, sendo causada pelo fungo dimórfico Paracoccidioiddes brasiliensis. O estudo da sua imunopatogênese é importante na compreensão de aspectos relacionados à história natural, como a imunidade protetora, e à relação entre hospedeiro e parasita, favorecendo o entendimento clínico e a elaboração de estratégias terapêuticas. O polimorfismo clínico da doença depende, em última análise, do perfil de resposta imune que prevalece expresso pelo padrão de citocinas teciduais e circulantes, além da qualidade da resposta imune desencadeada, que levam ao dano tecidual.

Paracoccidioidomycosis is the most prevalent systemic mycosis in Latin America, among immunecompetent patients. It's caused by the dimorphic fungus Paracoccidioiddes brasiliensis. Investigations regarding its immunopathogenesis are very important in the understanding of aspects related to natural history, as the protective immunity, and the relationship between host and parasite; also favoring the knowledge about clinical patterns and the elaboration of therapeutic strategies. The disease clinical polymorphism depends, at least, of the immune response profile according to the tissue and blood released citokynes, resulting in tissue damage.

High molecular mass fraction in clinical isolates of Paracoccidioides brasiliensis / Fração de alta massa molecular em isolados clínicos de Paracoccidioides brasiliensis

INTRODUCTION: Different serum levels of the IgG/IgE for Paracoccidioides brasiliensis high mass molecular (hMM) fraction (~366kDa) in the acute and chronic forms of the disease have been reported. Considering the nonexistence of hMM fraction investigation involving clinical isolates of P. brasiliensis, the present study aimed to investigate the presence of the hMM fraction (~366kDa) in cell free antigens (CFA) from P. brasiliensis clinical isolates. METHODS: CFA from 10 clinical isolates and a reference strain (Pb18) were submitted to SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) followed by gel image capturing and densitometer analysis. Additionally, CFA from 20 isolates and Pb18 were analyzed by capture ELISA (cELISA) using polyclonal (polAb) or monoclonal (mAb) antibodies to the hMM fraction. RESULTS: The presence of the hMM component was observed in CFA of all samples analyzed by SDS-PAGE/densitometry and by cELISA. In addition, Pearson's correlation test demonstrated stronger coefficients between hMM fraction levels using pAb and mAb (R = 0.853) in cELISA. CONCLUSIONS: The soluble hMM fraction was present in all the P. brasiliensis clinical isolates analyzed and the reference strain Pb18, which could be used as a source of this antigen. The work also introduces for first time, the cELISA method for P. brasiliensis hMM fraction detection. Analysis also suggests that detection is viable using polAb or mAb and this methodology may be useful for future investigation of the soluble hMM fraction (~366kDa) in sera from PCM patients.

INTRODUÇÃO: Diferentes níveis sorológicos de IgG/IgE contra a fração de alta massa molecular (hMM) (~366kDa) de Paracoccidioides brasiliensis têm sido encontrados na PCM aguda e crônica. Considerando a inexistência de investigação sobre esta fração em isolados clínicos de P. brasiliensis, o objetivo deste estudo foi investigar a presença da fração hMM (~366kDa) no preparado livre de células (CFA) de P. brasiliensis obtidos de isolados clínicos. MÉTODOS: CFA de 10 isolados e de cepa de referência (Pb18) foram submetidas à eletroforese em gel de SDS-poliacrilamida (SDS-PAGE) seguida de captura de imagem e análise por densitometria. Adicionalmente, CFA de 20 isolados e de Pb18 foram analisados por ELISA captura (cELISA) utilizando anticorpos policlonal (polAb) ou monoclonal (mAb) para fração hMM. RESULTADOS: A presença do componente de hMM foi observada em todas as amostras analisadas por SDS-PAGE/densitometria e por cELISA. Adicionalmente, o teste de correlação de Pearson demonstrou forte relação entre os níveis de fração hMM usando pAb e mAb (R = 0.853) no cELISA. CONCLUSÕES: Conclui-se que a fração hMM está presente em todos os isolados clínicos de P. brasiliensis analisados e no isolado referencial, sugerindo a possibilidade dos mesmos serem utilizados como fonte desta fração antigênica. Este trabalho também introduz pela primeira vez o método de cELISA para detecção da fração hMM de P. brasiliensis, sugerindo que detecção utilizando anticorpos polAb ou mAb é viável e essa metodologia poderá ser útil para investigação futura desta fração solúvel (~366kDa) em soros de pacientes com PCM.

Simultaneous infection of human host with genetically distinct isolates of Paracoccidioides brasiliensis

This study is the first report on genetic differences between isolates of Paracoccidioides brasiliensis from a single patient. We describe a simultaneous infection with genetically distinct isolates of P. brasiliensis in a patient with chronic paracoccidioidomycosis. The clinical isolates were obtained from lesions in different anatomical sites and were characterised by random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis. The RAPD technique can be helpful for distinguishing between clinical isolates. Different random primers were used to characterise these clinical isolates. The RAPD patterns allowed for differentiation between isolates and the construction of a phenetic tree, which showed more than 28 percent genetic variability in this fungal species, opening new possibilities for clinical studies of P. brasiliensis. Based on these results and preliminary clinical findings, we suggest that different genotypes of P. brasiliensis might infect the same patient, inducing the active form of the disease.

Identification of Paracoccidioides brasiliensis in adrenal glands biopsies of two patients with paracoccidioidomycosis and adrenal insufficiency / Identificação do Paracoccidioides brasiliensis nas amostras de glândulas adrenais de dois doentes com paracoccidioidomicose e insuficiência adrenal

The authors report two cases of adrenal insufficiency secondary to infiltration of the adrenal glands by Paracoccidioides brasiliensis. The first patient had been treated for a chronic multifocal form of paracoccidiodomycosis 11 years ago. The diagnosis of the mycosis was done simultaneous with that of the adrenal insufficiency in the second patient. In both patients the diagnosis was done by direct visualization of fungus in adrenal biopsies. They were treated with hormonal supplements and itraconazol by 12 and six months, without relapses during the follow-up period.

Os autores apresentam dois casos de insuficiência supra-renal secundária à infiltração das adrenais pelo Paracoccidioides brasiliensis. O primeiro paciente tinha sido tratado de paracoccidioidomicose crônica multifocal 11 anos atrás. No segundo paciente, o diagnóstico da micose foi feito de forma simultânea com o da insuficiência adrenal. Em ambos os pacientes, o diagnóstico foi feito pela visualização direta do fungo nas biopsias adrenais. Eles foram tratados com suplementos hormonais com itraconazol por seis a 12 meses, sem recaídas durante o período de acompanhamento.

Estudo do papel de células T reguladoras e moléculas co-estimulatórias ma regulação da resposta imune em doenças infecciosas e tumor de cabeça e pescoço / The role of the regulatory T cells and PD-1 molecules in the modulation of the immune response in chronic infections and head and neck tumors

O sistema imune serve como uma barreira contra os patógenos e ao crescimento anormal de células. Para impedir as respostas imunes excessivas ou indiscriminadas que podem comprometer a sobrevivência do organismo, diversos mecanismos regulatórios são ativados visando manter o delicado balanço entre início e término de uma resposta imune. As celular T reguladoras (Treg) parecem desempenhar papel central na regulação da resposta imune em infecções crônicas e durante o desenvolvimento de tumores. Outro mecanismo importante no controle da resposta imune é desempenhado por moléculas co-estimulatórias, dentre as quais estão CTLA-4 e PD-1, todas associadas à função das células T reguladoras. Um aspecto importante é q a sobrevida de tecido tumoral e de transplantes tem sido associada à função das células T reguladoras. Assim, buscamos definir o envolvimento de células T reguladoras e PD-1 na modulação da resposta imune L. braziliensis, ao fungo P. brasiliensis, à doença periodontal e ao tumor de cabeça e pescoço. Baseado nos resultados já publicados e em dados preliminares, as hipóteses são que: (a) a interação do parasita (ou célula tumoral) com o hospedeiro leva à migração de linfócitos T e efetores e células T reguladoras para o local da lesão; (b) a dinâmica do acúmulo dessas células em tais sítios determina a eficiência da eliminação do patógeno ou tumor. No caso das parasitoses, há o desenvolvimento de imunidade concomitante; (c) as células T regulam a resposta imune local de forma contato dependente e modulando a função de APC através da liberação de IL-10 e/ou TGF-β; (d) infecção e progressão tumoral levam à modulação da expressão de PD-1 nos leucócitos e seus ligantes nos órgãos; (e) a interação PD-PDL-1 regula a resposta imune local de forma a favorecer a persistência do patógeno e os mecanismos de escape tumoral.

The immune system serves as a barrier against pathogens and abnormal cellular growth. To avoid tissue and organ damage during immune response several regulatory mechanisms are activated to limit, terminate and attenuate T-cells response. Regulatory T cells (Treg) play a central role in the regulation of the immune response in chronic infections and tumor-specific immunity. Programmed death-1 (PD-1) is a transmembrane protein that acts as a negative regulator in effector T cells, modulating the delicate balance between effective antimicrobial immune defenses and immune-mediated tissue damage. However, recent data suggest that the PD-1:PD-L1 pathway can also block antitumor immune responses even when tumor antigens can be recognized. An important aspect it that the survival of tumor and transplant tissues has been associated with the function or regulatory T cells. Thus, we discuss the role of Treg cells and PD-1 molecules in the modulation of the immune response to L. braziliensis, P. brasiliensis, periodontal disease and head and neck tumors. Based on published results and preliminary data, the hypotheses are that: (a) the interaction of the parasite (or tumoral cells) with the host leads to the migration of effector T lymphocytes and Treg cells to the local; (b) the dynamics of cells accumulation in such sites determinate the elimination efficiency of tumors. In infectious disease, there is the development of concomitant immunity; (c) Treg cells regulate the local immune response, modulating the APC function through the release of IL-10 and/or TGF-β; (d) infection and tumor progression leads to the modulation of PD-1 expression in the leukocytes and their ligands in the tissue; (e) PD-PDL-1 interactions regulate the immune response and may mediate the persistence of pathogen and contribute to immune evasion by cancers.T.

Human serum antibody reactivity towards Paracoccidioides brasiliensis antigens treated with sodium metaperiodate / Reatividade de anticorpos de soros humanos a antígenos de Paracoccidioides brasiliensis tratados com metaperiodato sódico

In this study, we evaluated the profile of anti-Paracoccidioides brasiliensis immunoglobulin isotypes in serum from patients with the acute and chronic forms of paracoccidioidomycosis, using the whole Paracoccidioides brasiliensis antigen and the antigen treated with sodium metaperiodate. All the immunoglobulin isotypes present in the serum from patients with the acute and chronic forms of paracoccidioidomycosis presented higher reactivity towards the whole antigen than to the antigen treated with metaperiodate (P < 0.05). The reactivity of IgG and IgM to the antigen treated with metaperiodate was greater in serum from patients with the acute form of the disease (P < 0.05), while IgA was more reactive in serum from patients with the chronic form (P < 0.05). There was greater reactivity of IgG1 and IgG2 to the whole antigen and the antigen treated with metaperiodate in the serum from patients with paracoccidioidomycosis than there was in serum from patients with other parasitic infections (P < 0.05). Furthermore, IgG1 from patients with the acute form recognized the 19kDa, 27kDa and 31kDa antigens in the western blot test. Thus, the results suggest that modifications to the epitopes of Paracoccidioides brasiliensis antigens may help to improve the immunodiagnosis of paracoccidioidomycosis.

Neste trabalho, foi avaliado o perfil de isotipos de imunoglobulinas anti-Paracoccidioides brasiliensis em soros de pacientes com formas crônica e aguda de paracoccidiodomicoses usando antígeno total e tratado com meta-periodato. Todos os tipos de imunoglobulinas presentes nos soros de pacientes com formas aguda e crônica apresentaram alta reatividade ao antígeno total quando comparado ao tratado com meta-periodato (P < 0,05). Houve maior reatividade de IgG e IgM anti-antígeno tratado com meta-periodato em soros de pacientes com forma aguda da doença (P < 0,05), enquanto IgA foi mais reativa em soros da forma crônica (P < 0,05). Houve maior reatividade de IgG1 e IgG2 com antígeno total e tratado com meta-periodato em soros de pacientes comparados aos com outras parasitoses (P < 0,05). Além disso, IgG1 de pacientes com a forma aguda reconhecem antígenos de 19kDa, 27kDa e 31kDa por western blot. Assim, os resultados sugerem que alterações nos epitopos de antígenos de Paracoccidioides brasiliensis podem auxiliar no aprimoramento do imunodiagnóstico da paracoccidioidomicose.

Perfil clínico, laboratorial e epidemiológico de pacientes com paracoccidioidomicose em um serviço de referência no noroeste do Estado do Paraná / Clinical-laboratorial and epidemiologic profile of patients with paracoccidioidomycosis in a reference service of Northwesthern Paraná

Há indicativos de que a paracoccidioidomicose (PCM) seja endêmica no Noroeste do Paraná, porém pouco ainda é documentado sobre essa doença na região. No presente estudo, são descritas as características clínico-laboratoriais e epidemiológicas de 45 indivíduos com PCM, atendidos em um serviço de referência, no Noroeste do Estado do Paraná, no período de março de 1996 a novembro de 2006. Observou-se que a manifestação clínica que motivou a procura por assistência foi lesões na orofaringe em 28 (62,2%) casos, seguida do comprometimento pulmonar em 9 (20,0%), sendo que 10 dos 45 pacientes (22,2%) foram encaminhados ao serviço por cirurgiões-dentistas. A proporção homem/mulher foi de 14:1, houve predomínio de maiores de 41 anos de idade; da forma crônica da doença e profissão vinculada à agricultura. Os hábitos de tabagismo e consumo de bebida alcoólica foram freqüentes. Como método de diagnóstico, o mais realizado foi o histopatológico, e a associação sulfametoxazol-trimetropim foi o tratamento farmacológico mais prescrito.

There are indications that paracoccidioidomycosis (PCM) is endemic in northwestern Paraná, but little is documented about this disease in the region. This study outlines the clinical-laboratory and epidemiologic features of 45 individuals with PCM, attended at a referral service in northwestern Paraná from March 1996 to November 2006. It was observed that the clinical manifestation that motivated the search for assistance were lesions of the oropharynx in 28 (62.2%) instances, followed by lung damage in nine (20.0%). Ten of the 45 patients (22.2%) were sent to the service by dental surgeons. The male/female ratio was 14:1. There was a predominance of patients older than 41, bearing the chronic form of the disease, and from a profession linked to agriculture. Smoking and alcohol drinking habits were frequent. The most employed diagnostic method was histopathological, and the most prescribed pharmacological treatment was the sulphametoxazole-trimethoprimassociation.

Hay indicativos de que la paracoccidioidomicosis (PCM) sea endémica en el Noroeste del Paraná, pero pocoaún se documenta sobre esa enfermedad en la región. En el presente estudio, son descritas las características clínico-laboratoriales y epidemiológicas de 45 pacientes con PCM, atendidos en un servicio de referencia, en el Noroeste del Estado del Paraná, en el período de marzo de 1996 a noviembre de 2006. Se observó que la manifestación clínica que motivó la búsqueda por la asistencia fue lesiones en la orofaringe en 28 (62,2%) delos casos, seguida del comprometimiento pulmonar en 9 (20,0%), siendo que 10 de los 45 pacientes (22,2%)fueron encaminados al servicio por cirujanos-dentistas. La proporción hombre / mujer fue de 14:1; hubo predominio de mayores de 41 años de edad, de la forma crónica de la enfermedad y de profesión vinculada a laagricultura. Los hábitos de tabaquismo y de consumo de alcohol fueron frecuentes. Como método de diagnóstico, lo más realizado fue el histopatológico, y la asociación sulfametoxazol-trimetropim fue el tratamiento farmacológico más prescrito.

Associação entre paracoccidioidomicose e tuberculose: realidade e erro diagnóstico / Association between paracoccidioidomycosis and tuberculosis: reality and misdiagnosis

OBJETIVO: Avaliar a freqüência da real associação entre paracoccidioidomicose (PCM) e tuberculose (TB) e a freqüência do diagnóstico errôneo prévio de TB em doentes com PCM entre os pacientes atendidos na Disciplina de Pneumologia do Hospital das Clínicas da Universidade Estadual de Campinas, Campinas (SP). MÉTODOS: Estudo retrospectivo de 227 pacientes adultos com diagnóstico confirmado de PCM (forma crônica) entre 1980 e 2005. RESULTADOS: Dos 227 casos, 36 (15,8 por cento) haviam sido tratados anteriormente para TB. Porém, apenas 18 (7,9 por cento) apresentaram baciloscopia positiva. Os outros 18 (7,9 por cento) nunca tiveram o diagnóstico confirmado pela baciloscopia nem responderam ao tratamento específico para TB. CONCLUSÃO: Apesar de a associação entre PCM e TB existir e estar documentada na literatura, o erro diagnóstico é bastante comum, haja vista a sobreposição e similaridade das apresentações clínicas e radiológicas dessas duas doenças, havendo, portanto, a necessidade do diagnóstico bacteriológico antes de se iniciar o tratamento específico.

OBJECTIVE: To evaluate the frequency of the real association between paracoccidioidomycosis (PCM) and tuberculosis (TB) as well as the rate of previous TB misdiagnosis in individuals with PCM among the patients treated in the Pulmonology Division of the State University of Campinas Hospital das Clínicas, Campinas, Brazil. METHODS: A retrospective study of 227 adult patients with PCM (chronic form) treated between 1980 and 2005. RESULTS: Of the 227 patients studied, 36 (15.8 percent) had been previously treated for TB. However, only 18 (7.9 percent) presented positive sputum smear microscopy results. The remaining 18 (7.9 percent) neither presented positive sputum smear microscopy nor showed improvement after receiving specific anti-TB treatment. CONCLUSION: Although the existence of an association between PCM and TB has been documented in the literature, misdiagnosis is common due to the superimposition of and the similarity between their clinical and radiographic presentations, thereby warranting the need for bacteriological diagnosis before initiating specific treatment.

Distribuição fenotípica e a freqüência genotípica do sistema sangüíneo Duffy em pacientes com a doença de Jorge Lobo / Phenotypic distribution and genotypic frequency of the Duffy blood group system in Jorge Lobo's disease patients

A doença de Jorge Lobo é uma micose cutânea e subcutânea de evolução crônica, causada pelo Lacazia loboi. Os mecanismos envolvidos na suscetibilidade/resistência do hospedeiro frente ao agente não estão ainda elucidados, dentre eles encontra-se a constituição genética. Portanto, o objetivo deste trabalho é avaliar a distribuição fenotípica do grupo sangüíneo Duffy em pacientes com doença de Jorge Lobo e calcular suas freqüências gênicas. Foram analisados 21 pacientes, 13 caucasóides e oito mestiços (tipo moreno claro), provenientes do estado do Acre, e 44 indivíduos, não acometidos por esta doença, habitantes da cidade de Rio Branco (AC), como grupo controle. O fenótipo Duffy foi definido pela presença dos antígenos nas hemácias pela reação de aglutinação dos eritrócitos com anti-soros anti-Fya e anti-Fyb incubando-se a 37ºC e aplicando-se o teste da antiglobulina humana. Os resultados mostram que a distribuição fenotípica do sistema Duffy nos pacientes difere significativamente daquela observada nos controles, pela alta freqüência de indivíduos com fenótipo Fy(a-b-). Observa-se claramente que os pacientes apresentam maior freqüência do alelo FY e menor do alelo FYA do que os controles. O alelo FYB (não inclui os alelos que não são expressos) tem praticamente a mesma freqüência nos dois grupos. Com relação à comparação entre distribuição do grupo sangüíneo Duffy com as formas clínicas, sugere maior número de pacientes com forma localizada da doença de Jorge Lobo apresentando um predomínio do fenótipo Fy(a-b+) seguido do fenótipo Fy(a-b-) e inexistência do fenótipo Fy(a+b-). Por outro lado, temos a forma disseminada com maior incidência de fenótipo Fy(a+b-). A forma multifocal foi menos expressiva. Desse modo, podemos inferir uma provável prevalência de fenótipo Duffy negativo na região por nós estudada e os poucos dados disponíveis até o momento tornam clara a necessidade de elaborar tabelas de freqüências fenotípicas para a população...

Jorge Lobo's disease is a chronic cutaneous-subcutaneous mycosis caused by the fungus Lacazia loboi. The mechanisms involved in susceptibility and resistance to infection by this pathogen, especially genetic background, are yet to be understood. The objective of the present study was to evaluate the phenotypic distribution of the Duffy blood group in Jorge Lobo's disease patients and calculate its gene frequencies. Twenty one patients were analyzed, among them 13 Caucasoid and 8 from mixed ethnical backgrounds (Afro-Brazilians) originating from the State of Acre. The control group consisted of 44 healthy individuals from the city of Rio Branco (AC). The Duffy phenotype was defined by the presence of antigens in erythrocytes as visualized by the agglutination reaction of erythrocytes in the presence of anti-Fya and anti-Fyb antisera incubated at 37ºC by the human antiglobulin test. Results showed that the phenotypic distribution of the Duffy blood group system in patients was significantly different from controls, with the frequency of individuals with phenotype Fy(a-b-) being very high. Patients presented remarkably higher frequencies of the allele FY and ower frequencies of the allele FYA compared to controls. Frequencies of the allele FYB (not including non-expressed alleles) were similar in both groups. The comparison between Duffy blood group distribution with clinical forms of the disease suggests predominance of the phenotype Fy(a-b+) in patients with the localized form of Jorge Lobo's disease, followed by phenotype Fy(a-b-) and absence of phenotype (a+b-). On the other hand, we observed a higher incidence of phenotype Fy(a+b-) in patients with the disseminated form of the disease. The multifocal forms were less expressive. Therefore, we may infer that the negative Duffy phenotype is probably more prevalent in the region studied. There is scarce data available on phenotype distributions, it is necessary to develop similar studies...

Avaliacao das subpopulacoes de timocitos em camundongos BALB/c infectados com Paracoccidioides brasiliensis por via intratraqueal / Evaluation of thymocyte subpopulations in BALB / c mice infected with Paracoccidioides brasiliensis intratracheally

O P. brasiliensis e o agente etiologico da paracoccidioidomicose, uma doenca granulomatosa cronica que afeta primariamente os pulmoes e esta frequentemente relacionada com a diminuicao da resposta imune celular especifica. A inoculacao intraperitonial deste fungo em camundongos causa a trofia do timo, orgao respónsavel pela geracao de linfocitos T que dirigem a reposta imune especifica. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar a ocorrencia de atrofia timica em camundongos infectados com P. brasiliensis pela via intratraqueal, que constituium modelo mais fiel da doenca. A infeccao por esta via, resultou claramente em atrofia timica, que foi caracterizada por uma diminuicao do peso, celularidade e viabilidade celular, alem de alteracoes nas subpopulacoes dos timocitos, como diminuicao dos duplos dispositivos (CD4+CD8+) e consequente aumento dos duplos negativos (CD4-CD8-) e timocitos CD4+CD8- e CD4-CD8+.

Análise da estabilidade de exoantígenos de Paracoccidioides brasiliensis

O diagnóstico da Paracoccidioidomicose (PCM), baseia-se na demonstração do P. brasiliensis (Pb) em amostras biológicas e, indiretamente, por meio de provas sorológicas, sendo a especificidade e sensibilidade diretamente relacionadas à preparação antigênica empregada. A estabilidade de exoantígenos de Pb, produzidos há 15 anos, foi avaliada comparando o perfil de reatividade, por ID, de 75 soros de pacientes com PCM frente a nove diferentes preparações antigênicas: antígeno somático (AgSo) e antígeno metabólico (AgM) obtidos das amostras 113 e B-339, antígeno “cell free antigen” (AgCFA) obtido da amostra 113; componente solúvel da superfície externa da parede celular de Pb (CSSEPC de Pb) obtido da amostra 113 e cultivado em ágar Fava Neto, a 36° C durante 5, 10, 15 e 20 dias, antígeno 113 Negroni e antígeno 113 NGTA cultivados por 20dias a 36o C. Por ID verificou-se que a reatividade dos soros de pacientes com PCM foi de 90% para AgSo e CSSEPC de 5, 10, 15 e 20 dias; 86,6% para AgS; 83,3% para AgM; 80% Ag 113 NGTA e 76,6% para Ag113 Negroni. A análise do perfil eletroforético revelou grande complexidade das frações protéicas dos CSSEPCs e exoantígeno 113 Negroni e NGTA, apresentando proteínas com massa molecular entre 25 a 170 kDa. Por “immunoblotting”, confirmou-se a especificidade dos CSSEPC frente a pool de soros da forma crônica bem como da aguda, observando-se que CSSEPC obtidos no 50 e 100 dia, apresentaram intensa reatividade das frações antigênicas de 25, 43, 60, 70, 85 e 160 kDa. Concluímos que os CSSEPC além de estáveis, apresentam determinantes antigênicos altamente conservados, fato comprovado, pelo alto padrão de reatividade observado frente a soros das diferentes formas clínicas de PCM, anti-soros anti-exoantígeno de Pb e anti-gp43

Análise da estabilidade de exoantígenos de Paracoccidioides brasiliensis / Study of stability of Paracoecidioides brasiliensis exoantigens

O diagnóstico da Paracoccidioidomicose (PCM), baseia-se na demonstração do P. brasiliensis (Pb) em amostras biológicas e, indiretamente, por meio de provas sorológicas, sendo a especificidade e sensibilidade diretamente relacionadas à preparação antigênica empregada. A estabilidade de exoantígenos de Pb, produzidos há 15 anos, foi avaliada comparando o perfil de reatividade, por ID, de 75 soros de pacientes com PCM frente a nove diferentes preparações antigênicas: antígeno somático (AgSo) e antígeno metabólico (AgM) obtidos das amostras 113 e B-339, antígeno “cell free antigen” (AgCFA) obtido da amostra 113; componente solúvel da superfície externa da parede celular de Pb (CSSEPC de Pb) obtido da amostra 113 e cultivado em ágar Fava Neto, a 36° C durante 5, 10, 15 e 20 dias, antígeno 113 Negroni e antígeno 113 NGTA cultivados por 20dias a 36o C. Por ID verificou-se que a reatividade dos soros de pacientes com PCM foi de 90% para AgSo e CSSEPC de 5, 10, 15 e 20 dias; 86,6% para AgS; 83,3% para AgM; 80% Ag 113 NGTA e 76,6% para Ag113 Negroni. A análise do perfil eletroforético revelou grande complexidade das frações protéicas dos CSSEPCs e exoantígeno 113 Negroni e NGTA, apresentando proteínas com massa molecular entre 25 a 170 kDa. Por “immunoblotting”, confirmou-se a especificidade dos CSSEPC frente a pool de soros da forma crônica bem como da aguda, observando-se que CSSEPC obtidos no 50 e 100 dia, apresentaram intensa reatividade das frações antigênicas de 25, 43, 60, 70, 85 e 160 kDa. Concluímos que os CSSEPC além de estáveis, apresentam determinantes antigênicos altamente conservados, fato comprovado, pelo alto padrão de reatividade observado frente a soros das diferentes formas clínicas de PCM, anti-soros anti-exoantígeno de Pb e anti-gp43