Caracterização e avaliação da capacidade protetora dos peptí­deos imunogênicos de Sporothrix brasiliensis / Characterization and evaluation of the protective capacity of the immunogenic peptides of Sporothrix brasiliensis

A esporotricose é uma doença crônica que envolve o tecido subcutâneo afetando seres humanos e animais, causada pelo fungo termodimórfico Sporothrix spp.. A esporotricose é endêmica na América latina, principalmente no Brasil que teve o maior surto zoonótico já registrado, ocorrendo na cidade do Rio de Janeiro. A espécie Sporothrix brasiliensis é a mais diagnosticada no surto e a mais virulenta entre as especies de Sporothrix spp., causando formas mais graves da doença. A esporotricose em gatos é endêmica, fatal e um dos principais fatores pelo alto número de casos no Rio de Janeiro. O tratamento é longo e não vem sendo o suficiente para conter o número de casos da doença. Uma vacina contra a esporotricose poderia mudar esse paradigma no Brasil. O presente trabalho obteve o proteoma da cepa S. brasiliensis 5110 por meio de uma eletroforese 2D, e caracterizou e identificou as possíveis proteínas imunogênicas do fungo por espectrometria de massa. Por meio de programas de predição, foi avaliado e sintetizado 7 sequências de aminoácidos,das proteínas identificadas com maiores chances de se acoplar a molécula MHC de classe II. Apenas 3 foram capazes de induzir proliferação in vitro, os peptídeos ZR3, ZR4 e ZR8, que foram utilizados como vacina na esporotricose subcutânea e avaliados sua eficácia por meio da carga fúngica, diâmetro das lesões, perfil celular e níveis de citocinas. Neste trabalho concluímos que o peptídeo ZR8 foi o melhor candidato à vacina na esporotricose, pois foi capaz de diminuir o diâmetro das lesões, aumentar os níveis de citocinas protetoras (IFN-γ, IL-17A e IL-1ß) e aumentar o número de células TCD4+ e CD3-/CD19+, sendo assim induzindo uma resposta imunológica protetora na esporotricose subcutânea

Sporotrichosis is a chronic disease, which involves the subcutaneous tissue affecting humans and animals caused by the thermodymorphic fungus Sporothrix spp. Sporotrichosis is endemic in Latin America, mainly in Brazil that had the largest zoonotic outbreak ever recorded, occurring in the city of Rio de Janeiro. The Sporothrix brasiliensis is the species more diagnosed in the outbreak and most virulent, causing severe forms of the disease. Sporotrichosis in cats is endemic, fatal and the main factors due to the high number of cases of the disease in Rio de Janeiro. The treatment is long, and has not been enough to contain the number of cases of sporotrichosis. A vaccine against sporotrichosis could change this paradigm in Brazil. The present work obtained the proteome of S. brasiliensis 5110 strain by 2D electrophoresis, and characterized and identified possible immunogenic proteins by mass spectrometry. By prediction programs were evaluated and synthesized 7 peptide sequence from antigenic proteins that have the highest chances of coupling to the MHC class II molecule. From these 7 peptides only 3 were able to induce proliferation in vitro, called ZR3, ZR4 and ZR8 peptides, that were used as a vaccine in subcutaneous sporotrichosis and evaluated their efficacy through fungal load, lesion diameter, cell profile and cytokine levels. We conclude that ZR8 peptide was the best candidate for sporotrichosis vaccine, since it was able to decrease the lesion diameter, increase the levels of protective cytokines (IFN-γ, IL-17A and IL-1ß) and increase the number of CD4+ T cells and CD3-/CD19+ inducing a protective immune response in subcutaneous sporotrichosis

Estudos de aterosclerose experimental utilizando tomografia por emissão de pósitrons ( PET-Scan ) / Studies of experimental atherosclerosis using pósitron emission tomography ( PET-Scan )

A aterosclerose é caracterizada como uma doença imune-inflamatória crônica das artérias devido ao grande acúmulo de lipídios na íntima. Um dos fatores envolvidos na progressão da aterosclerose é a presença de uma subfração de partículas de lipoproteína de baixa densidade (LDL) com um grau mínimo de modificação, denominada LDL eletronegativa [LDL(-)], que possui propriedades pró-inflamatórias, apresenta maior retenção na íntima das artérias e maior tempo de permanência na circulação sanguínea, gerando respostas imuno-inflamatórias. Epítopos de anticorpos monoclonais importantes no reconhecimento das partículas de LDL(-) foram mapeados por phage display, gerando peptídeos mimotopos (P1A3 e P2C7) com potencial para acompanhamento da progressão da aterosclerose, sendo excelentes candidatos como radiotraçadores marcados com emissores de pósitrons para obtenção de imagens moleculares por tomografia por emissão de pósitrons (PET) associada à tomografia computadorizada (PET/CT). O peptídeo P1A3 foi radiomarcado com 64Cu através da complexação com o quelante DOTA, obtendo-se imagens por PET/CT da captação do peptídeo na região do arco aórtico de camundongos knockout para a apolipoproteína E (Apoe-/-) comparados com animais controle sem lesões ateroscleróticas. Antes da obtenção das imagens PET/CT, os peptídeos radiomarcados foram validados através de estudos de estabilidade e biodistribuição, acumulando-se rapidamente nos rins. Também foi sintetizado um nanocluster de ouro, marcado com 64Cu e funcionalizado com P1A3 em sua superfície, observando-se o maior direcionamento dos nanoclusters de ouro ligados ao P1A3 para a região das lesões ateroscleróticas do arco aórtico de camundongos Apoe-/-, comparado ao nanocluster controle. Os peptídeos P1A3 e P2C7 radiomarcados com 68Ga, foram também avaliados por imagens PET/CT em camundongos knockout para o gene do receptor da LDL (LDLr-/-) tratados ou não com dieta hipercolesterolêmica. As imagens PET/CT mostraram que os peptídeos marcados com 68Ga tiveram um aumento de captação na região do arco aórtico de camundongos LDLr-/- hipercolesterolêmicos em relação ao controle. Além disso, P2C7 foi radiomarcado com 99mTc e sua biodistribuição demonstrou uma relação maior de % atividade injetada (AI)/órgão da aorta/coração nos camundongos hipercolesterolêmicos, em concordância com a imagem obtida por SPECT (tomografia computadorizada por emissão de fóton único) que revelou maior captação no arco aórtico

Atherosclerosis is characterized as a chronic immune-inflammatory disease of the large arteries due to the accumulation of lipids in the intima. One of the factors involved in the progression of atherosclerosis is the presence of a subfraction of low-density lipoprotein (LDL) particles with a minimum degree of modification, called electronegative LDL [LDL (-)], which has proinflammatory properties, retention in the intima of the arteries and longer residence time in the blood circulation, generating immune-inflammatory responses. Epitopes of monoclonal antibodies important for the recognition of LDL(-) particles were mapped by phage display, generating mimotope peptides (P1A3 and P2C7) with potential to monitor the progression of atherosclerosis. These peptides are excellent candidates as radiotracers labeled with positron emitters to obtain molecular images by positron emission tomography (PET) associated with computed tomography (PET/CT). The P1A3 peptide was radiolabeled with 64Cu by complexation with the DOTA chelator to obtain PET/CT images of the peptide uptake in the aortic arch of apoliprotein E knockout mice (Apoe-/-) compared to control animals without atherosclerotic lesions. Prior to PET/CT imaging, radiolabeled peptides were validated by stability and biodistribution studies that indicated rapid accumulation in the kidneys. It was also synthesized a gold nanocluster, labeled with 64Cu and functionalized with P1A3 on its surface, observing the greater targeting of gold nanoclusters bound to P1A3 in the region of the atherosclerotic lesions of the aortic arch of Apoe-/- mice, compared to control nanocluster. The P1A3 and P2C7 peptides radiolabeled with 68Ga were also evaluated by PET imaging in LDL receptor gene knockout mice (LDLr-/-) treated or not with a hypercholesterolemic diet. PET/CT images showed that the 68Ga-labeled peptides had increased uptake in aortic arch of LDLr-/- hypercholesterolemic mice in relation to the control. Furthermore, the biodistribution of 99mTc-radiolabeled P2C7 showed a higher %ID (injected dose)/organ ratio of aorta/heart in hypercholesterolemic mice that was in accordance to SPECT (single photon emission computed tomography) imaging showing its higher uptake in the aortic arch

Actualizaciones sobre "Irisina": la nueva mioquina / Irisin updates: the new myokine

In the continuous search of researchers to find an effective method to control obesity, a myokine called Irisin was found. Irisin is secreted mainly by skeletal muscle in response to exercise, either resistance, strength or high intensity, where High Intensity Interval Training (HIIT) is included. This polypeptide hormone acts mainly on subcutaneous adipose cells, turning white fat into brown fat. Brown fat is highly thermogenic, which enhance raising of total energy expenditure and helps maintaining or loosing corporal weight. Plasmatic Irisin levels are related positively with insulin sensitivity and weight loss. It has been also discovered that a greater plasmatic level of Irisin is related to the lengthening of telomeres, to a greater concentration of free tyrosine (T4) and it has been recently found that is related to an antitumoral effect on some types of cancer. All of the functions mediated by Irisin, have given it a protective action against different diseases, especially metabolic ones. The aim of this review was to update the knowledge about Irisin, and to show the effects that exercise has on its plasmatic levels, as well as comprehend how does the release of irisin influences different body systems. Counting with more information will allow the arising of new lines of investigation that will bring up non pharmacological therapeutic strategies for the treatment of non-communicable diseases.

En la búsqueda continua de los investigadores por combatir de manera más efectiva la obesidad, se descubre una mioquina llamada Irisina. La Irisina es secretada principalmente por el músculo esquelético en respuesta al ejercicio, ya sea aeróbico, de fuerza o de alta intensidad, donde se incluyen, ejercicios de intervalo de alta intensidad (HIIT). Esta hormona polipeptídica actúa principalmente sobre células adiposas subcutáneas, transformando grasa blanca en grasa parda. La grasa parda es altamente termogénica, lo que favorece el aumento del gasto energético total y ayuda a mantener o incluso a perder peso corporal. La concentración de Irisina plasmática se relaciona positivamente con la sensibilidad a la insulina y la pérdida de peso. Además, se ha descubierto que una mayor concentración de Irisina plasmática se relaciona con el alargamiento de los telómeros, y también, con una mayor concentración de T4 libre y con un recién descubierto efecto antitumoral en algunos tipos de cáncer. Todas las funciones mediadas por la Irisina, le atribuyen una acción protectora contra distintas enfermedades, especialmente metabólicas. El objetivo de esta revisión fue actualizar el conocimiento sobre la Irisina, evidenciando los efectos que tiene la realización de ejercicio sobre los niveles plasmáticos de ésta, así como también comprender como su liberación influye en distintos sistemas corporales. El contar con mayor información dará paso a nuevas líneas de investigación y permitirá contar con estrategias terapéuticas no farmacológicas que contribuyan en el tratamiento de enfermedades crónicas no transmisibles.

Prevalência de diagnóstico médico de asma em adultos brasileiros: Pesquisa Nacional de Saúde, 2013 / Prevalence of asthma medical diagnosis among Brazilian adults: National Health Survey, 2013

RESUMO: Objetivo: Estimar a prevalência de diagnóstico médico de asma na população adulta brasileira (≥ 18 anos). Métodos: Estudo transversal de base populacional com dados da Pesquisa Nacional de Saúde (PNS), de 2013; processo amostral por conglomerado com três estágios de seleção: setor censitário, domicílio e indivíduo. Calculou-se a prevalência e intervalo de confiança de 95% (IC95%) do desfecho "diagnóstico médico de asma" relatado pelo entrevistado e sua distribuição conforme variáveis demográficas, socioeconômicas, macrorregiões e zona urbana ou rural do país. Ainda foi investigado o manejo da asma naqueles que responderam afirmativamente sobre o diagnóstico médico; as análises foram ponderadas. Resultados: Foram entrevistados 60.202 adultos. A prevalência do diagnóstico médico de asma foi de 4,4% (IC95% 4,1 - 4,7), maior no sexo feminino, nos de cor branca, com maior escolaridade e moradores na região Sul; entre aqueles com diagnóstico médico, observou-se percentual elevado (38,2%) de crises de asma nos últimos 12 meses, com cerca de 80% usando medicação e 15% com limitação severa às atividades diárias. Conclusões: Apesar da estabilidade da prevalência da asma comparada a estudos anteriores no país, ainda são necessárias políticas para melhor manejo da doença.

ABSTRACT: Objective: To estimate the prevalence of asthma medical diagnosis among the adult Brazilian population (aged ≥ 18 years). Methods: This is a cross-sectional, population-based study from the 2013 National Health Survey (NHS); it is a sampling cluster process with three stages of selection: census tracts, households, and individuals. The prevalence and 95% confidence interval for the outcome "asthma medical diagnosis" reported by the interviewed subjects were calculated, besides its distribution according to demographic and socioeconomic variables, macroregions, and urban or rural area of the country. Management of the disease was also evaluated among those who reported asthma medical diagnosis and the analyses were weighted. Results: A total of 60,202 adults were interviewed. The prevalence of asthma medical diagnosis was 4.4% (95%CI 4.1 - 4.7), and it was higher among the female subjects, the white skin-colored subjects, those with higher educational level, and those who lived in the south of Brazil. Among those who reported asthma medical diagnosis, a high percentage of asthma attacks were seen in the last 12 months, with around 80% using medication and about 15% referring severe limitation to their daily activities. Conclusions: Although it seems there is asthma diagnosis stability in the country when compared with other researches, we still need public policies for improving the disease management.

Consumo de bebidas alcoólicas e direção de veículos nas capitais brasileiras e no Distrito Federal, segundo dois inquéritos nacionais de saúde / Alcohol consumption and driving in Brazilian capitals and Federal District according to two national health surveys

RESUMO: Objetivo Apresentar os resultados dos indicadores sobre consumo de álcool e direção para as capitais brasileiras obtidos em dois inquéritos populacionais realizados em 2013 no Brasil. Métodos: Estudo transversal realizado com dados da população adulta (≥ 18 anos) participante da Vigilância de Doenças Crônicas por Inquérito Telefônico (Vigitel) e da Pesquisa Nacional de Saúde (PNS). Foram calculadas as prevalências para os indicadores de consumo de bebida alcoólica e direção veicular. Resultados: A proporção de motoristas adultos de carro ou moto que dirigiram logo depois de beber foi significativamente maior no sexo masculino (29,3% - Vigitel; 24,4% - PNS), entre jovens de 18 a 29 anos (31,6% - Vigitel; 24,1% - PNS) e entre os residentes das capitais da Região Centro-Oeste (33,7% - Vigitel; 28,3% - PNS). A proporção de adultos que referiram beber e dirigir foi maior no sexo masculino (9,4% - Vigitel; 7,4% - PNS), no grupo de 18 a 29 anos (7,1% - Vigitel; 4,5% - PNS) e entre os residentes das capitais da Região Centro-Oeste (7,9% - Vigitel; 6,1% - PNS). Conclusão: O estudo permitiu estimar a prevalência do hábito de dirigir após ingestão de bebida alcoólica entre motoristas e na população em geral e mostrou coerência entre os resultados dos dois inquéritos epidemiológicos de abrangência nacional.

ABSTRACT: Objective: To present the results of indicators of alcohol consumption and driving for Brazilian capitals based on two population surveys performed in Brazil in 2013. Methods: Cross sectional study with data from adults (≥ 18 years) participants of the Telephone Survey on Risk and Protective Factors for Chronic Diseases (Vigitel) and the National Health Survey (NHS). Prevalence for indicators of alcohol consumption and driving was then calculated. Results: The proportion of adult drivers who drove soon after drinking was significantly higher among males (29.3% - Vigitel and 24.4% - NHS), the young aging 18 to 29 years (31.6% - Vigitel and 24.1% - NHS) and among residents of the capitals of the Midwest (33.7% - Vigitel and 28.3% - NHS). The proportion of adults who reported drinking and driving was higher among males (9.4% - Vigitel and 7.4% - NHS) in the 18 to 29 age group (7.1% - Vigitel; 4.5% - NHS), and among residents of the capitals of the Midwest (7.9% - Vigitel and 6.1% - NHS). Conclusion: The study estimated the prevalence of the habit of driving after alcohol consumption among drivers and in the general population. There was consistency between the results from two nationwide surveys.

Prevalência de doenças crônicas não transmissíveis e associação com autoavaliação de saúde: Pesquisa Nacional de Saúde, 2013 / Prevalence of chronic non-communicable diseases and association with self-rated health: National Health Survey, 2013

Resumo: Objetivo: Analisar o perfil de dez doenças crônicas não transmissíveis investigadas na Pesquisa Nacional de Saúde realizada no Brasil em 2013 e sua associação com a autoavaliação da saúde. Métodos: Estudo transversal de base populacional e abrangência nacional com 60.202 indivíduos com 18 anos ou mais. Foi utilizado processo amostral por conglomerado com três estágios de seleção: setor censitário, domicílio e indivíduo. Calculou-se a prevalência das doenças crônicas e os intervalos de confiança de 95% por idade, sexo e escolaridade, a idade média do primeiro diagnóstico e a proporção de limitação das atividades habituais. Para testar a associação com a autoavaliação de saúde, utilizou-se o procedimento de regressão logística ajustada por sexo e idade. Resultados: As doenças mais prevalentes foram hipertensão arterial (21,4%), depressão (7,6%), artrite (6,4%) e diabetes mellitus (6,2%). Indivíduos com diagnóstico de acidente vascular cerebral (AVC) referiram maior limitação das atividades habituais (38,6%). Observou-se um gradiente na prevalência segundo idade e escolaridade, e todas as doenças foram mais frequentes entre as mulheres. Pior autoavaliação de saúde foi encontrada entre aqueles com diagnóstico de AVC (OR = 3,60; valor de p < 0,001) e nos que referiram duas doenças (OR = 5,53; valor de p < 0,001) ou três ou mais doenças (OR = 10,86; valor de p < 0,001). Conclusões: Por se tratar de doenças associadas a fatores de risco modificáveis, a prevenção com foco populacional é a melhor estratégia para redução da carga dessas doenças.

ABSTRACT: Objective: To analyze the profile of 10 chronic noncommunicable diseases investigated in the National Health Survey carried out in Brazil in 2013 and their association with the self-rated health. Methods: A cross-sectional, population-based nationwide study with 60,202 individuals aged 18 years old or more. Sampling process by conglomerate was carried out in three stages of selection: census tract, household, and individual. The prevalence of chronic diseases by age, gender and educational status and the confidence intervals of 95% , the mean age at the first diagnosis and the proportion of limitation of the usual activities were calculated. To test the association with self-rated health, the logistic regression procedure adjusted for gender and age was used. Results: The more prevalent diseases were hypertension (21.4%), depression (7.6%), arthritis (6.4%), and diabetes mellitus (6.2%). Individuals diagnosed with stroke reported greater limitations in the daily activities (38.6%). There was a gradient in the prevalence by age and educational level, and all the diseases were more frequent among women. A worse self-rated health was observed among those with a diagnosis of stroke (OR = 3.60; p < 0.001) and those who referred two diseases (OR = 5.53; p < 0.001) or three or more diseases (OR = 10.86; p < 0.001). Conclusions: Because these diseases are associated with modifiable risk factors, the prevention with population focus is the best strategy to reduce the burden of these diseases.

Exenatide improves type 2 diabetes concomitant with non-alcoholic fatty liver disease / Exenatide melhora o diabetes tipo 2 de ocorrência concomitante com doença hepática gordurosa não alcoólica

OBJECTIVE: To investigate the effects of exenatide on blood glucose, body weight and hepatic enzymes in patients with type 2 diabetes mellitus (T2DM) and concomitant non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD). SUBJECTS AND METHODS: One hundred and seventeen patients with T2DM and NAFLD were randomly divided into exenatide group and metformin group. Patients were treated with exenatide and metformin, respectively, for 12 weeks. RESULTS: After 12 weeks of treatment, body weight, body mass index (BMI), waist-to-hip ratio, HbA1c, FPG, 2-h PPG, ALT, AST, γ-GT, and hs-CRP were significantly reduced, and the AST/ALT ratio and adiponectin were markedly increased in both groups. BMI, waist-to-hip ratio, 2-h PPG, ALT, AST, γ-GT, and hs-CRP were markedly lower, and AST/ALT ratio and adiponectin in the exenatide group were dramatically higher than in the metformin group. CONCLUSION: Compared with metformin, exenatide is better to control blood glucose, reduces body weight and improves hepatic enzymes, attenuating NAFLD in patients with T2DM concomitant with NAFLD.

OBJETIVO: Investigar os efeitos do exenatide sobre a glicose sérica, peso corporal e enzimas hepáticas em pacientes com diabetes melito tipo 2 (T2DM) e doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA). SUJEITOS E MÉTODOS: Um total de 117 pacientes com T2DM e DHGNA foi aleatoriamente separado em dois grupos, um tratado com exenatide e um tratado com metformina. Os pacientes foram tratados por 12 semanas. RESULTADOS: Após 12 semanas de tratamento, o peso corporal, índice de massa corporal (IMC), relação cintura-quadril, HbA1c, FPG, glicose pós-prandial, ALT, AST, γ-GT e proteína C-reativa foram significativamente reduzidos, e a relação AST/ALT e a adiponectina aumentaram marcadamente nos dois grupos. O IMC, relação cintura-quadril, glicose pós-prandial, ALT, AST, γ-GT e proteína C-reativa foram marcadamente menores, e a relação AST/ALT e a adiponectina foram dramaticamente mais altas no grupo tratado com exenatide do que no grupo tratado com metformina. CONCLUSÃO: Comparado com a metformina, o exenatide controla melhor a glicose sérica, reduz o peso corporal e melhora as enzimas hepáticas, atenuando a DHGNA em pacientes com T2DM de ocorrência concomitante com a DHGNA.

Clinical response to interferon beta and glatiramer acetate in multiple sclerosis patients: a Brazilian cohort / Resposta terapêutica ao interferon beta e ao acetato de glatiramer em pacientes com esclerose múltipla: estudo de uma coorte brasileira

INTRODUCTION: Many patients with multiple sclerosis (MS) are currently receiving treatment with interferon beta (IFNb) and glatiramer acetate (GA). Identifying nonresponders patients is important to define therapy strategies. Several criteria for treatment response to IFNb and GA have been proposed. OBJECTIVE: It was to investigate the response to treatment with IFNb-1a, IFNb-1b and GA among relapsing-remitting multiple sclerosis (RRMS) patients. METHODS: We analyzed treatment response to IFNb and GA in ninety-one RRMS patients followed for at least one year. Clinical response was established by clinical criteria based on relapses, disability progression or both. RESULTS: We observed a proportion of nonresponders, ranging from 3.3 to 42.9%, depending on the stringency of the criteria used. CONCLUSIONS: Our sample of Brazilian patients with MS has similarities when compared to other studies and there was no statistically significant difference regarding age, gender, ethnicity or disease duration between responders and nonresponders.

INTRODUÇÃO: Muitos pacientes com esclerose múltipla (EM) estão atualmente recebendo tratamento com interferon beta (IFNb) e acetato de glatiramer (AG). Identificar pacientes não respondedores é importante para definir estratégias terapêuticas. Foram propostos vários critérios para definir a resposta ao tratamento com IFNb e AG. OBJETIVO: Foi investigar a resposta ao tratamento com IFNb-1a, IFNb-1b e AG entre pacientes com esclerose múltipla remitente-recorrente (EMRR). MÉTODOS: Analisamos a resposta ao tratamento com IFNb e AG em 91 pacientes com EMRR acompanhados por um período de pelo menos um ano. A resposta clínica foi estabelecida por critérios baseados em surtos, progressão da incapacidade ou ambos. RESULTADOS: Observamos uma proporção de não respondedores que variou de 3,3 a 42,9%, dependendo do rigor do critério utilizado. CONCLUSÕES: Nossa amostra de pacientes brasileiros com EM tem semelhanças quando comparada a outros estudos e não apresentou diferença estatisticamente significativa entre respondedores e não respondedores com relação à idade, sexo, etnia ou duração da doença.

Telopeptido carboxilo terminal del colageno tipo i ( beta-ctx ) serico y / compromiso oseo en la insuficiencia renal cronica / Serum beta-type I collagen carboxyterminal telopeptide ( beta-CTXs ) and bone involvement in chronic renal failure

La osteodistrofia renal (ODR) se caracteriza por alteraciones óseas. Se evaluaron métodos bioquímicosalternativos a la biopsia ósea en pacientes renales para determinar cambios rápidos delremodelamiento óseo en 43 pacientes predialíticos (PD) y 49 hemodializados (HD). Los PD presentaronfosfatemia, fosfatasa alcalina ósea (FAO), hormona paratiroidea intacta (PTHi) y beta-telopéptido carboxilo terminaldel colágeno tipo I (betaCTXs) mayores y clearence de creatinina (Ccr) menores (p<0.001) que los controles.La fosfatemia de HD fue más elevada, significativamente respecto de controles (p<0.0001); FAO, PTHi y betaCTXsfueron mayores a los otros dos grupos (p<0.0001). En ambos grupos renales betaCTXs y FAO correlacionaroncon PTHi (p<0.002 y p<0.0001, respectivamente) y entre sí (p<0.0001). Los PD con Ccr <40 ml/min presentaronPTHi, FAO y bCTXs (p<0.004, p<0.05 y p<0.001, respectivamente) más elevados que aquellos con Ccr>40ml/min. En PD, betaCTXs (p<0.05) y en HD tanto betaCTXs como FAO (p<0.0001) estaban aumentados respecto decontroles, aun con PTHi normal. Los incrementos mayores en los marcadores óseos se observaron en los pacientescon mayores niveles de PTHi (p<0.001). En conclusión; aun sin PTHi elevada existe un aumento deresorción ósea (posiblemente por otros factores) y la medición de betaCTXs sería una herramienta apropiada notraumática para detectar tempranamente alteraciones óseas por IR que permitiría tomar medidas preventivaspara evitar dicha pérdida. Asimismo, instalada la ODR determinar el aumento del remodelamiento sería sumamenteútil para identificar pacientes que requieran biopsia ósea. El reemplazo de la misma por beta-CTX séricodeberá esperar estudios que demuestren la correlación existente entre ambas metodologías.

Isolamento de genes que codificam proteínas excretadas-secretadas pelo Trypanosoma cruzi (TESA) com potencial para imunodiagnóstico / isolation of genes that codify excreted-secreted antigens for the Trypanosoma cruzi (TESA) with potential for imunodiagnosis

O perfil de antigenicidade das proteínas excretadas-secretadas pelas formas tripomastigotas (TESA) do T. cruzi apresenta, por immunoblotting (TESA-blot), duas moléculas imunodominantes que permitem o diagnóstico diferencial da doença de Chagas. TESA-blot mostra uma banda de 150-160 kDa amplamente reconhecida por soros de pacientes de fase crônica e uma outra, denominada SAPA (shed acute phase antigen), preferencialmente reativa com soros da fase aguda da doença de Chagas (Umezawa et al., 1996b). Além disso, moléculas de 160 kDa presentes somente na infecçäo ativa, consideradas potentes candidatas como marcadores de cura da doença de Chagas, foram descritas como alvo de anticorpos líticos (Krautz et al., 2000)...

Autoimmunity in Chagas' heart disease

The time scale dissociation between high parasitemia and tissue pathology allied to the absence of parasites in the heart lesions of chronic Chagas' disease cardiopathy, casted doubt on the direct participation of Trypanosoma cruzi in tissue lesions. Moreover, the heart tissue lesions in chronic Chagas' disease cardiopathy are associated to an inflammatory mononuclear cell infiltrate, presumably the ultimate effectors of tissue damage. It has been hypothesized that the inflammatory cell infiltrate could mediate a delayed hypersensitivity process directed to the heart tissue components, an autoimmune response triggered by immunological cross-reactivity in the course of a protective immune response against some T. cruzi antigen homologous to heart proteins. However, little is known about the efector role of the T cells in the infiltrate, or about the nature of the antigen that lead to their accumulation in tissue. In this paper, we will review the published evidence on autoimmunity and immunological cross-reactivity between T cruzi and the mammalian host, along with data generated in our laboratory. The definition of the precise role played by autoimmunity in the pathogenesis of Chagas' disease cardiopathy may have important consequences both for immunoprophylaxis and for the therapeutic approach of chronic Chagas' disease.

Investigación de péptidos plasmáticos en la insuficiencia renal crónica / Investigation of plasma peptides in chronic renal failure

Se describe una metodología para el fraccionamiento de péptidos y se aplica, en el presente trabajo, al análisis de compuestos péptidos presentes en el plasma de pacientes con insuficiencia renal crónica (IRC). Las muestras de plasma de sujetos controles (C;n=5) y de pacientes con IRC (n-10) fueron ultrafiltradas a través de membranas Diaflo PM 30 e YM 02, obteniéndose 2 fracciones, fracción A con sustancias de masa molecular relativa (M) menor de 1.000 y fracción B con M, aproximada entre 1.000 y 30.000, aunque los ensayos de estandarización mostraron que esta última fracción incluía proteínas de M, semejante a la albúmina. Las fracciones A, estudiadas mediante cromatografía en capa fina, mostraron la presencia de una banda fluorescamina positiva en las muestras de IRC, ausente en las C. Las fracciones B fueron analizadas por electroforesis en gel de poliacrilamida con SDS (SDS-PAGE) y tranferencia con detección inmunológica. Para desarrollar esta última técnica, se obtuvo un antisuero en conejo contra la fracción plasmática B, obtenida a partir de un pool de plasmas de pacientes con IRC. Después de la separación en SDS-PAGE, los compuestos fueron transferidos a papel de nitrocelulosa y detectados mediante una técnica de doble antisuero, empleando como primer antisuero, el anti-fracción IRC obtenido en conejo y luego, un antisuero inti-IgG de conejo, marcado con peroxidasa. Para el revelado final se utilizó una reacción colorimétrica, mediada por peroxidasa. El análisis de SDS-PAGE mostró que las fracciones plasmáticas B de pacientes con IRC contenían mayor número de bandas en el rango de M, 15.000-70.000 que las C, aumentando las diferencias cuali y/o cuantitativas entre los dos grupos, al emplear la técnica de separación electroforética, tranferencia de detección inmunológica. El procedimiento descrito constituye una metodología apropiada para el estudio de péptidos en líquidos biológicos