Efeitos do D-limoneno no metabolismo energético de camundongos C57/Bl6 com obesidade induzida pela dieta / Effects of D-limonene on the energy metabolism of C57/Bl6 mice with diet-induced obesity

A obesidade está associada ao desenvolvimento de doenças crônicas não transmissíveis como hipertensão, resistência insulínica, dislipidemia e esteatose hepática. O consumo de compostos bioativos impacta na manutenção da saúde e na prevenção de risco de desenvolvimento dessas doenças. Entre os compostos bioativos, os monoterpenos são pouco investigados, apesar da literatura demonstrar efeitos promissores desses compostos sobre o metabolismo. O D-limoneno, o principal monoterpeno encontrado na laranja, é caracterizado por possuir efeitos hipolipemiantes, anti-inflamatórios e anti-obesogênicos. Estudos in vitro e in vivo descrevem sua capacidade de promover a ß-oxidação de ácidos graxos em adipócitos e redução da inflamação. Este estudo teve como objetivo investigar o efeito do D-limoneno no metabolismo e inflamação em um modelo de obesidade induzida por dieta. Para isso, quarenta camundongos machos (C57/Bl6) de 11 semanas de idade, foram distribuídos em 4 grupos, sendo que um dos grupos recebeu ração normolipídica e os demais, ração hiperlipídica. O D-limoneno foi suplementado na ração de dois grupos que receberam dieta hiperlipídica nas concentrações de 0,1%, e 0,8%. Considerando-se a ingestão alimentar dos animais, a ração suplementada com 0,1% D-limoneno correspondeu à ingestão de 0,15 g/kg/dia e ração com 0,8% de D-limoneno correspondeu a 1,3 g/kg/dia. Os animais tiveram o peso e a ingestão alimentar monitorados ao longo da intervenção com duração de 7 semanas. Os camundongos que receberam D-limoneno a 0,1% apresentaram menor ganho de peso e de acúmulo de tecido adiposo, comparado com os animais sem suplementação alimentados com a dieta hiperlipídica. Além disso, o D-limoneno promoveu a diminuição da concentração plasmática de marcadores inflamatórios incluindo TNF-α, INF-γ e IL-6 nos animais dos grupos que foram suplementados com D-limoneno. Entretanto, não houve diferença nos marcadores bioquímicos e metabólicos. Uma limitação do estudo foi o fato das complicações metabólicas associadas ao modelo de obesidade não terem sido plenamente estabelecidas, dados o alojamento individual, à curta duração da exposição à ração hiperlipídica e idade dos animais no início da suplementação. Esse fato pode ter dificultado a observação dos efeitos do D-limoneno na reversão dos parâmetros que seriam normalmente deteriorados pelo desenvolvimento da obesidade. Concluímos que o D-limoneno pode interferir no metabolismo energético, com possível efeito anti-obesogênico e anti-inflamatório. Devido às limitações do modelo, são necessários mais estudos para confirmar esses resultados

Obesity is associated with the development of chronic non-communicable diseases such as hypertension, insulin resistance, dyslipidemia, and hepatic steatosis. The intake of dietary bioactive compounds is associated with the maintenance of health and the prevention of chronic diseases. Among the group of bioactive compounds, monoterpenes are poorly investigated, in spite of several reports of their promising effects on metabolism. D-limonene is the main monoterpene found in oranges, known for its hypolipemic, anti-inflammatory, and anti-obesogenic effects. in vitro and in vivo studies associate D-limonene to increased ß-oxidation of fatty acids in adipocytes and reduced inflammation. This study aimed at investigating the effects of D-limonene on metabolism and inflammation in a diet-induced obesity model. For this purpose, forty male mice (C57/Bl6) were distributed in 4 groups, with one group receiving a normolipidic diet and the others, a high-fat diet. D-limonene was supplemented in the diets of two groups that received high-fat diet at the concentrations of 0.1% and 0.8%. Considering the feed intake, mice receiving D-limonene supplementation at 0.1% ingested in average 0.15 g/kg/day, while the mice receiving the supplemmentation at 0.8%, ingested approximately 1.3 g of D-limonene /kg/day. The animals had their weight and food intake monitored throughout the intervention. Mice that received Dlimonene supplementation at 0.1% showed reduced weight gain and accumulation of adipose tissue compared to the non-supplemented mice fed the high-fat diet. In addition, D-limonene promoted a decrease in hepatic inflammatory markers including TNF-α, INF-γ, and IL-6. However, there was no difference in biochemical and metabolic markers. A limitation of the study was that the metabolic complications associated with the obesity model were not fully established, probably due to the age at the start of the protocol (11 weeks), individual housing and short duration of the exposure to the high-fat feed. This fact may have prevented the observation of the positive effects of D-limonene in reversing parameters that would normally be impaired by the development of obesity. We conclude that D-limonene may interfere in energy metabolism, with a possible anti-obesogenic and anti-inflammatory effect. Due to the limitations of the model, further studies are needed to confirm these findings

Cápsulas de polvo de arándano como propuesta nutracéutica para mejorar la bioaccesibilidad de compuestos fenólicos / Blueberry Powder capsules as a nutraceutical proposal to improve bioaccessibility of phenolic compounds. Introduction

El arándano (Vaccinium corymbosum L.) posee un alto contenido de compuestos fenólicos los cuales han sido estudiados principalmente por su actividad antioxidante, antiobesogénica, antiinflamatoria, entre otras. Objetivo. Evaluar el efecto de la digestión gastrointestinal in vitro sobre la bioaccesibilidad de compuestos fenólicos y actividad antioxidante de una formulación nutracéutica de arándano (cápsula), comparado con arándano fresco y polvo. Materiales y métodos. Se obtuvieron extractos metanólicos de muestras de arándano fresco y liofilizado y se determinó su contenido de fenoles, flavonoides y antocianinas totales, así como también actividad antioxidante. Se llevó a cabo un ensayo de simulación de digestión gastrointestinal para evaluar la bioaccesibilidad de los compuestos fenólicos presentes en las muestras. Resultados. Los resultados mostraron que la digestión gástrica de arándano en polvo y en cápsula promovió una mayor bioaccesibilidad de fenoles (42% y 40%), flavonoides (52% y 33%) y antocianinas (45% y 40%) comparado con digestos de arándano fresco. Posterior a la digestión intestinal, la bioaccesibilidad de fenoles (63%) y flavonoides (67%) fue mayor en la cápsula de arándano comparada con su contraparte arándano en polvo. Las condiciones de digestión intestinal afectaron negativamente la bioaccesibilidad de las antocianinas independientemente del tipo de muestra evaluada. Conclusión. Las condiciones de digestión gástrica promueven una mayor estabilidad de los compuestos fenólicos en arándano en polvo y en cápsula lo que pudiera ser relevante para el mantenimiento de un ambiente antioxidante a este nivel. Las condiciones de digestión intestinal afectaron de manera particular a los compuestos fenólicos de arándano fresco y polvo, pero no a la cápsula, lo que puede sugerir que el encapsulamiento protegió de las condiciones alcalinas a los fenoles presentes. Se sugieren estudios posteriores sobre absorción in vitro de los componentes remanentes en intestino y sus posibles efectos sobre biomarcadores de estrés oxidativo en modelos in vivo(AU)

Blueberry (Vaccinium corymbosum L.) has a high content of phenolic compounds which have been studied mainly for their antioxidant, antiobesogenic, anti-inflammatory activity, among others. Objetive. The objective of the present study was to evaluate the effect of in vitro gastrointestinal digestion on the bioaccessibility of phenolic compounds and antioxidant activity of a nutraceutical formulation of blueberry (capsule), compared to fresh and powder blueberry. Materials and methods. Methanolic extracts of fresh and lyophilized blueberry were obtained and determined its total phenols, flavonoids, anthocyanins content, as well as antioxidant activity. A gastrointestinal digestion simulation test also was carried out to assess the bioaccessibility of the phenolic compounds found in samples. Results. The results showed that gastric digestion of powder and capsule blueberry promoted greater bioaccessibility of phenols (42% and 40%), flavonoids (52% and 33%) and anthocyanins (45% and 40%), compared to fresh blueberry digests. After intestinal digestion, the bioaccessibility of phenols (63%) and flavonoids (67%) was higher in the blueberry capsule compared to its powdered blueberry counterpart. The intestinal digestion conditions negatively affected the bioaccessibility of anthocyanins regardless of the type of sample evaluated. Conclusion. Gastric digestion conditions promote greater stability of phenolic compounds in powdered and capsule blueberries, which could be relevant for the maintenance of an antioxidant environment at this level. The intestinal digestion conditions particularly affected the phenolic compounds of fresh and lyophilized blueberry, but not the capsule, which may suggest that encapsulation protected the phenols present from alkaline conditions. Further studies on in vitro absorption of the remaining components in the intestine and their possible effects on oxidative stress biomarkers in in vivo models are suggested(AU)

Evaluación in vitro de las superficies radiculares tratadas mediante terapia periodontal no quirúrgica y biomodificadores radiculares / In vitro evaluation of root surface treated with non-surgical periodontal therapy and root biomodification

Introducción: El uso de agentes químicos en la superficie radicular durante la fase higiénica periodontal tiene como ventajas eliminar factores irritantes, prevenir la acumulación bacteriana y fomentar la cicatrización de la herida. El objetivo del presente estudio fue evaluar la superficie radicular de órganos dentales con periodontitis crónica avanzada, tratados mediante terapia periodontal no quirúrgica con EDTA y láser CO2. Material y métodos: Se evaluaron 40 órganos dentarios de pacientes con periodontitis crónica avanzada indicados para extracción, a los cuales se les realizó raspado y alisado radicular, con el uso de EDTA al 24%, láser CO2 a energía de 1, 1.5 y 2 Watt, para posteriormente evaluar la superficie radicular mediante un microscopio electrónico de barrido. Resultados: El tratamiento de raspado y alisado radicular mostró una superficie regular, pero con marcas de estrías con una cubierta de escombro dentinario, las muestras tratadas con EDTA al 24% muestran apertura de los túbulos dentinarios, con bordes definidos y un diámetro aparentemente amplio y los órganos dentarios tratados con láser CO2 con diferentes poderes de energía mostraron múltiples cambios en su superficie, con una apertura de túbulos dentinarios en su mayoría. Conclusión: La apertura de los túbulos dentinarios se presentó en los grupos experimentales tratados con biomodificador radicular (AU)

Introduction: The use of chemical agents in the root surface during the periodontal hygienic phase has the advantages of eliminating irritating factors, preventing bacterial accumulation and promoting wound healing. The objective of the present study was to evaluate the radicular surface of dental organs with advanced chronic periodontitis treated by non-surgical periodontal therapy with EDTA and CO2 laser. Material and methods: Forty dental organs of patients with advanced chronic periodontitis indicated for extraction were evaluated, which were performed scraping and root planing, with the use of 24% EDTA, CO2 laser with energy of 1, 1.5 and 2 Watt, to later evaluate the radicular surface by means of a scanning electron microscope. Results: The treatment of scaling and root planing showed a regular surface, but with marks of striae with a covering of dentine rubble, the samples treated with 24% EDTA show opening of the dentinal tubules, with defined edges and a seemingly wide diameter and, the dental organs treated with CO2 laser with different power powers showed multiple changes in their surface, with an opening of dentinal tubules in their majority. Conclusion: The opening of the dentinal tubules was presented in the experimental groups treated with a root biomodifier (AU)

Profile of malignant hyperthermia susceptibility reports confirmed with muscular contracture test in Brazil / Perfil dos relatos de suscetibilidade à hipertermia maligna confirmados com teste de contratura muscular no Brasil

Abstract Background and objectives: Malignant hyperthermia is an autosomal dominant hypermetabolic pharmacogenetic syndrome, with a mortality rate of 10%-20%, which is triggered by the use of halogenated inhaled anesthetics or muscle relaxant succinylcholine. The gold standard for suspected susceptibility to malignant hyperthermia is the in vitro muscle contracture test in response to halothane and caffeine. The determination of susceptibility in suspected families allows the planning of safe anesthesia without triggering agents for patients with known susceptibility to malignant hyperthermia by positive in vitro muscle contracture test. Moreover, the patient whose suspicion of malignant hyperthermia was excluded by the in vitro negative muscle contracture test may undergo standard anesthesia. Susceptibility to malignant hyperthermia has a variable manifestation ranging from an asymptomatic subject presenting a crisis of malignant hyperthermia during anesthesia with triggering agents to a patient with atrophy and muscle weakness due to central core myopathy. The aim of this study is to analyze the profile of reports of susceptibility to malignant hyperthermia confirmed with in vitro muscle contracture test. Method: Analysis of the medical records of patients with personal/family suspicion of malignant hyperthermia investigated with in vitro muscle contracture test, after given written informed consent, between 1997 and 2010. Results: Of the 50 events that motivated the suspicion of malignant hyperthermia and family investigation (sample aged 27 ± 18 years, 52% men, 76% white), 64% were investigated for an anesthetic malignant hyperthermia crisis, with mortality rate of 25%. The most common signs of a malignant hyperthermia crisis were hyperthermia, tachycardia, and muscle stiffness. Susceptibility to malignant hyperthermia was confirmed in 79.4% of the 92 relatives investigated with the in vitro muscle contracture test. Conclusion: The crises of malignant hyperthermia resembled those described in other countries, but with frequency lower than that estimated in the country.

Resumo Justificativa e objetivo: Hipertermia maligna é uma síndrome farmacogenética hipermetabólica, autossômica dominante, com mortalidade entre 10%-20%, desencadeada por uso de anestésico inalatório halogenado ou relaxante muscular succinilcolina. O padrão-ouro para pesquisa de suscetibilidade à hipertermia maligna é o teste de contratura muscular in vitro em resposta ao halotano e à cafeína. A determinação da suscetibilidade nas famílias suspeitas permite planejar anestesias seguras sem agentes desencadeantes para os pacientes confirmados como suscetíveis à hipertermia maligna pelo teste de contratura muscular in vitro positivo. Além disso, o paciente no qual a suspeita de hipertermia maligna foi excluída pelo teste de contratura muscular in vitro negativo pode ser anestesiado de forma convencional. Suscetibilidade à hipertermia maligna tem manifestação variável, desde indivíduo assintomático que apresenta crise de hipertermia maligna durante anestesia com agentes desencadeantes, até paciente com atrofia e fraqueza muscular por miopatia central core disease. O objetivo deste trabalho é analisar o perfil dos relatos de suscetibilidade à hipertermia maligna confirmados com teste de contratura muscular in vitro. Método: Análise das fichas de notificação dos pacientes com suspeita pessoal/familiar de hipertermia maligna investigados com teste de contratura muscular in vitro, após assinatura do termo de consentimento, entre 1997-2010. Resultados: Dos 50 eventos que motivaram a suspeita de hipertermia maligna e a investigação familiar (amostra com 27 ± 18 anos, 52% homens, 76% brancos), 64% foram investigados por crise de hipertermia maligna anestésica, com mortalidade de 25%. Sinais mais comuns da crise de hipertermia maligna foram hipertermia, taquicardia e rigidez muscular. Suscetibilidade à hipertermia maligna foi confirmada em 79,4% dos 92 parentes investigados com teste de contratura muscular in vitro. Conclusão: Crises de hipertermia maligna assemelharam-se às descritas em outros países, porém com frequência inferior à estimada no país.

Cuidado em saúde em adultos com hipertensão arterial autorreferida no Brasil segundo dados da Pesquisa Nacional de Saúde, 2013 / Health care in adults with self-reported hypertension in Brazil according to the National Health Survey, 2013

RESUMO: Objetivo: Descrever indicadores de cuidado em saúde em adultos com hipertensão arterial autorreferida no Brasil, segundo características sociodemográficas. Métodos: Foram utilizados dados da Pesquisa Nacional de Saúde 2013, estudo transversal de base populacional, referentes ao cuidado em saúde com a hipertensão arterial autorreferida quanto ao uso de serviços de saúde. As prevalências e seus intervalos de confiança de 95% (IC95%) foram calculados segundo sexo, idade, raça/cor e escolaridade, representativos para Brasil e grandes regiões. Resultados: A hipertensão arterial foi referida por 21,4% (IC95% 20,8 - 22,0) dos entrevistados, sendo maior em mulheres e em pessoas sem instrução e com ensino fundamental incompleto. Dentre estes, 45,9% (IC95% 44,0 - 47,7) referiram ter recebido assistência médica pela última vez em uma Unidade Básica de Saúde; 81,4% (IC95% 80,1 - 82,7) referiram tomar medicamentos para a hipertensão; e 92,0% (IC95% 91,2 - 92,8) referiram ter realizado todos os exames complementares que foram solicitados. Conclusão: É importante conhecer a cobertura e o acesso aos serviços de saúde para o cuidado aos indivíduos com hipertensão arterial, de modo a avançar na qualidade da assistência prestada e reduzir as desigualdades identificadas.

ABSTRACT: Objective: To describe health care indicators in adults with self-reported hypertension in Brazil, according to socio-demographic characteristics. Methods: Data from the National Health Survey 2013, a cross-sectional population-based study, about health care of self-reported hypertension and health services were used. Prevalence and 95% confidence intervals (95%CI) were calculated for sex, age, race/color skin and schooling levels, representing Brazil and major regions. Results: Hypertension was reported by 21.4% (95%CI 20.8 - 22.0) of respondents, being higher in women and in people without instruction and incomplete middle school. Among these, 45.9% (95%CI 44.0 - 47.7) reported having received medical care for the last time in a basic health unit; 81.4% (95%CI 80.1 - 82.7) reported taking medication for high blood pressure; and 92.0% (95%CI 91.2 - 92.8) reported having taken all requested complementary examinations. Conclusion: It is important to know the coverage and access to health services for the care of patients with hypertension, in order to improve care quality and reduce identified inequalities.

Instituição de longa permanência para idosos: um lugar de cuidado para quem não tem opção? / Long-stay institutions for the elderly: a place of care for those who have no choice? / Institución de larga estadía para las personas mayores: ¿un lugar de atención para aquellos que no tienen otra opción?

Pesquisa descritiva, qualitativa, com abordagem compreensiva, que teve por objetivo compreender o significado da instituição de longa permanência para idosos institucionalizados. Os dados foram coletados com 13 idosos institucionalizados, no período de 5 de abril a 25 de maio de 2013 por meio da entrevista narrativa, e submetidos a análise de conteúdo, na modalidade de análise temática. Os resultados indicam que ser idoso institucionalizado significa ter suas necessidades de cuidado atendidas, no que concerne a suas necessidades básicas; ao acesso a serviços e recursos de saúde, e a ter um lugar onde possam envelhecer e morrer. O estudo permitiu concluir que a instituição aparece como um lugar ambíguo para os idosos, pois ao mesmo tempo em que os acolhe, abriga e atende suas necessidades, é um ambiente que inviabiliza a vida independente e autônoma.

This is a descriptive, qualitative research, with comprehensive approach, which aimed to understand the meaning that the longterm institution has to institutionalized elderly. Data were collected with 13 institutionalized elderly in the period from April 5 to May 25, 2013, through narrative interview, and subjected to content analysis, in the form of thematic analysis. The results indicated that being elderly institutionalized means having their care needs met, with respect to their basic needs; access to health services and resources, and to have a place where they can grow old and die. The study concluded that the institution appears as an ambiguous place for the elderly because, even embracing and housing them and meeting their needs, is an environment that prevents the independent and autonomous life.

Investigación descriptiva, cualitativa con enfoque comprehensivo, que tuve como objetivo comprender el significado de la institución a largo plazo tiene para ancianos institucionalizados. Los datos fueron recolectados con 13 ancianos institucionalizados en el periodo comprendido entre el 5 abril-25 mayo de 2013, a través de entrevista narrativa, y tratados mediante análisis de contenido, en la modalidad de análisis temático. Los resultados indican que estar en edad avanzada y estar institucionalizado significa tener sus atendidas sus necesidades básicas; el acceso a los servicios de salud y los recursos, y tener un lugar donde pueden envejecer y morir. El estudio llegó a la conclusión de que la institución se presenta como un lugar ambiguo para las personas mayores, ya que si bien les acoja, albergue y atiendan sus necesidades, es un ambiente que impide la vida independiente y autónoma.

Reflexões sobre a ceratite fúngica por meio dos achados de exames histopatológicos / Reflections on mycotic keratitis based on findings from histopathologically examined specimens

OBJETIVO: Estudo de botões corneanos por meio do exame histopatológico para verificar as alterações ocorridas nos tecidos corneanos numa infecção fúngica e tirar desses achados orientações para o diagnóstico e o tratamento. MÉTODOS: Trabalho retrospectivo, realizado num Banco de Olhos (BOO) entre janeiro de 2006 e junho de 2011, usando dados de prontuários a partir das informações enviadas pelos cirurgiões e sendo examinado material recebido de ceratoplastia penetrante com o exame de 38 peças de 35 pacientes, sendo processadas e feitas de uma a três colorações de acordo com as dificuldades diagnósticas. RESULTADOS: Os pacientes eram na maioria homens, 57% (n=35), a faixa etária acima de 60 anos a mais numerosa com 1/3 dos pacientes. Os casos de ceratite fúngica correspondiam à média de 6,4% (n=597) do material recebido no BOO e 1,65% (n=2310) dos transplantes ocorrido com o material fornecido nos últimos 5 anos. Pelas informações dos cirurgiões 39,5% (n=38) dos casos deviam-se a perfuração corneana. Usando as datas dos transplantes foi feita uma Tábua de Observação. Em 11 (n=38) casos, a córnea procedia de transplante anterior. As formas leveduriformes nos tecidos corneanos eram de 63% (n=38). Em 50% (n=38) dos casos o infiltrado inflamatório era pequeno ou inexistente. A camada de Descemet estava íntegra em 13% (n=38), enquanto eram encontrados fungos na superfície corneana de 45% (n=38) dos casos. CONCLUSÃO: A coleta do material poderá ser feita com sucesso mesmo depois de instalado o tratamento, entretanto, nas úlceras de córnea deve ser feito preferentemente a coleta de material com espátula para exame laboratorial e a microscopia confocal in vivo. A predominância das leveduras poderá ser devido a alterações morfológicas do fungo sofridas no tecido corneano. A penetração intraocular é facilitada por alterações da Camada de Descemet e pela própria capacidade do fungo de penetrar nos tecidos justificando o tratamento sistêmico desde o início.

PURPOSE: The study of fungal invasion and pathogenicity in corneal tissue observed through the histopathological examination of specimens obtained through penetrating keratoplasty ('PKP') of samples obtained from an Eye Bank ('EB'), with the aim of applying findings in diagnosis and treatment of the condition METHODS: Retrospective non-comparative case studies on samples collected between January 2006 and June 2011 based on identification data comprised of scant historical information sent by surgeons and material obtained through PKP, consisting of 38 samples from 35 patients. Processing involved special stains for fungi in order to detect the presence thereof, with one to three colourations being performed in accordance with diagnostic difficulty in relation to each sample. RESULTS: Patients were predominantly male (20 compared to 15 females), and the most represented age group was 60+ years of age (1/3 of the patients). Mycotic keratitis was detected in 6.4% (n= 597) of cases referred to the EB and in 1.65% (n= 2310) of transplants using corneal material provided by the EB over the last five years. According to historical information provided by surgeons, 39.5% (n= 38) of cases were due to perforation of the cornea. A statistical table was prepared using transplant data. 11 specimens (n= 38) were due to an anterior corneal graft. Yeasts were present in 63% (n= 38), and 50% (n= 38) of corneal tissue had mild or non-existing inflammation. 13% (n= 38) had whole Descemet layers, while 45% (n= 38) presented fungi on the corneal surface. CONCLUSION: Corneal grasping and confocal microscopy may be performed successfully after treatment has been initiated, although in corneal ulcers samples should ideally be collected with a spatula for laboratory testing in vivo. The high prevalence of yeasts in the samples we looked at may be due to morphologic changes in corneal tissue of fungal origin. Intraocular penetration of the fungi is facilitated by changes to the Descemet layer, and assisted by the fungi's own properties. Therefore systemic treatment is justified from the outset.

Transmission of Campylobacter coli in chicken embryos

Campylobacter coli is an important species involved in human cases of enteritis, and chickens are carriers of the pathogen mainly in developing country. The current study aimed to evaluate the transmission of C. coli and its pathogenic effects in chicken embryos. Breeder hens were inoculated intra-esophageally with C. coli isolated from chickens, and their eggs and embryos were analyzed for the presence of bacteria using real-time PCR and plate culture. The viability of embryos was verified. In parallel, SPF eggs were inoculated with C. coli in the air sac; after incubation, the embryos were submitted to the same analysis as the embryos from breeder hens. In embryos and fertile eggs from breeder hens, the bacterium was only identified by molecular methods; in the SPF eggs, however, the bacterium was detected by both techniques. The results showed no relationship between embryo mortality and positivity for C. coli in the embryos from breeder hens. However, the presence of bacteria is a cause of precocious mortality for SPF embryos. This study revealed that although the vertical transmission is a possible event, the bacteria can not grow in embryonic field samples.

Análise da expressão e atividade das moléculas de influxo e de efluxo de drogas em células da leucemia mielóide crônica / Analysis of the expression and activity of drug influx and efflux molecules in chronic myeloid leukemia cells

"A leucemia mielóide crônica (LMC) é caracterizada pela presença da translocação t(9:22) que codifica a proteína quimérica oncogênica BCR-ABL. Imatinibe é uma droga alvo-específica que inibe a atividade tirosina quinase (TK) da proteína BCR-ABL. Entretanto, os níveis intracelulares do imatinibe podem ser alterados pelas proteínas transportadoras de efluxo de drogas: glicoproteína P (Pgp), proteína da resistência em câncer de mama (BCRP) e proteína relacionada à resistência à múltiplas drogas (MRP1), assim como a proteína transportadora de influxo de drogas (OCT1). O objetivo do presente estudo foi analisar a participação dessas proteínas, isoladamente ou em associação, na resistência ao imatinibe em linhagens celulares e células de pacientes com LMC. Para análise da atividade das proteínas transportadoras de efluxo, foi utilizado o fluorocromo rodamina-123 associado ao modulador ciclosporina-A (Rho+CSA) e o pheophorbide A associado ao fumitremorgin C (PhA+FTC), ambos através de citometria de fluxo. A análise dos RNAm dos genes ABCB1, ABCG2 e SLC22A1 que codificam as proteínas Pgp, BCRP e OCT1, respectivamente, foi realizada por PCR em tempo real. A inibição da TK BCR-ABL foi mensurada através dos níveis de fosforilação de CrkL (pCrkL), seu principal alvo de ativação. Observamos uma maior positividade para o ensaio Rho+CSA nas amostras que expressavam Pgp comparada com as que expressavam MRP1, sugerindo menor atividade dessa proteína em pacientes com LMC, ou ainda que tal ensaio possa ser menos específico para a atividade da MRP1. O ensaio PhA+FTC foi capaz de identificar a atividade da proteína BCRP em linhagens celulares e células de pacientes. Níveis reduzidos dos RNAm ABCB1 e SLC22A1, mas não do RNAm ABCG2, foram observados quando comparados com as amostras de indivíduos saudáveis. Não houve correlação entre os níveis da proteína Pgp e do RNAm ABCB1. A expressão de Pgp foi detectada na maioria das amostras de LMC, independente da fase da doença, e não foi associada com o prognóstico desfavorável. Variações nos níveis de expressão da Pgp foram observadas durante a evolução da LMC e relacionadas com o tratamento prévio. O imatinibe foi capaz de aumentar a expressão da Pgp, assim como os níveis do RNAm ABCB1 na linhagem K562-Lucena 1, Pgp+. Além disso, observamos uma maior redução de pCrkL e um maior percentual de morte celular nas células K562, Pgp-, quando comparadas à K562-Lucena 1, evidenciando um possível papel do imatinibe como substrato para a Pgp. Este fármaco também demonstrou ter potencial para funcionar como agente modulador da bomba de efluxo, uma vez que impediu o exporte de Rho das células K562-Lucena 1. Amostras de pacientes resistentes ao imatinibe exibiram altos níveis de atividade das proteínas transportadoras de efluxo de drogas (ensaio Rho+CSA). Nossos dados mostram que a atividade e/ou expressão dos transportadores de efluxo e influxo de drogas encontram-se alterados na maioria dos pacientes com LMC, porém não há correlação com a resposta ao imatinibe e o prognóstico na LMC. Entretanto, o conjunto dos resultados sugere um papel para a Pgp na resistência in vitro ao imatinibe"(AU)

"Chronic myeloid leukemia (CML) is characterized by the presence of the t(9:22) encoding the BCR-ABL chimeric oncogenic protein. Imatinib is a target specific drug that inhibits the activity of the tyrosine kinase (TK) protein BCR-ABL. However, imatinib intracellular concentration may be altered by transporter proteins. It was described that efflux proteins, P-glycoprotein (Pgp), breast cancer resistance protein (BCRP) and multidrug resistance related protein (MRP1), and the influx protein, the organic cation transporter protein (OCT1) may contribute for imatinib clinical resistance. The aim of this study was to evaluate the role of these proteins in imatinib resistance in cell lines and leukemic cells from CML patients. To analyze the activity of the efflux transporter proteins, fluorochrome rhodamine-123 associated with the modulator cyclosporin A (Rho+CSA) and pheophorbide A associated with fumitremorgin C (PhA+FTC) were used by flow cytometry. Analysis of ABCG1, ABCG2 and SLC22A1 genes, that encode the Pgp, BCRP and OCT1 proteins, respectively, was performed by real time PCR. The inhibition of BCR-ABL TK was measured by the levels of CrkL phosphorylation (pCrkL), its main target of activation. We observed a higher positivity for Rho+CSA assay in samples expressing Pgp, when compared with the ones expressing MRP1. These results suggest that patients with CML have lower activity of this protein, or this assay might be less specific to indicate the activity of MRP1. The PhA+FTC assay was able to identify BCRP activity in cell lines and cells from patients. Reduced levels of ABCB1 and SLC22A1, but not ABCG2 mRNA were observed when compared with samples from healthy individuals. There was no correlation between the levels of Pgp protein and ABCB1 mRNA. Pgp expression was detected in most samples of CML, regardless of disease stage and was not associated with poor prognosis. Changes in Pgp expression levels have been observed during the development of CML and were related to pretreatment. Imatinib was able to increase Pgp expression as well as ABCB1 mRNA levels in Pgp+ K562Lucena 1 cells. Moreover, we observed a greater pCrkL reduction and a higher percentage of cell death in Pgp- K562 cells compared to K562-Lucena 1, indicating a possible role of imatinib as a Pgp substrate. This drug has also been shown to have potential as an efflux pump modulating agent, once efflux of Rho was prevented in K562-Lucena 1. Imatinib resistant patient samples exhibited high levels of efflux transporter proteins activity (Rho+CSA assay). Our data show that the activity and / or expression of influx and efflux transporters of drugs are altered in most patients with CML, but no correlation with prognosis and response to imatinib in CML was observed. However, our results suggest a role for Pgp in imatinib resistance"(AU)

Balking blood pressure "control" by older persons of Bambuí, Minas Gerais State, Brazil: an ethno-epidemiological inquiry / A resistência contra o "controle" da pressão arterial na população idosa de Bambuí, Minas Gerais, Brasil: um inquérito etno-epidemiológico

This ethno-epidemiological inquiry aims to comprehend hypertension-related experiences in the elderly population of Bambuí, in the State of Minas Gerais, Brazil. It combines ethnographic descriptions with statistical data. The subjective significance of factors associated with adequate arterial pressure control is explored. A baseline cohort of 26 people with hypertension, randomly selected from a total number of 1,494 residents over the age of 60, was interviewed utilizing signs, meanings and actions methodology. Multivariate analysis shows an association (p < 0.001) between female gender and monthly household income and treatment of hypertension and adequate blood pressure control. The number of doctor visits is associated with treatment but not with adequate blood pressure control. Conflicting cultural construction of "blood pressure problems" contributes to "non-adherence" to treatment. There is a fine line between blood pressure "control" and what is perceived as health professionals "controlling" patients' lives. Doctor-prescribed regimes are perceived as "prohibiting life's pleasures" and "controlling" personal liberty and free choice. Giving elderly people a voice regarding their social context can promote autonomy, well-being and happiness in later life.

Esta pesquisa etno-epidemiológica objetiva compreender a experiência humana da hipertensão enquanto percebida por pessoas idosas em Bambuí, Minas Gerais, Brasil. Mescla descrições etnográficas com dados numéricos. Significados acerca dos fatores correlacionados ao controle da pressão arterial são aprofundados. De 1,494 residentes > 60 anos em uma base de coorte, 26 hipertensos idosos foram aleatoriamente selecionados e entrevistados utilizando signos, significados e ações. A análise multivariada associou (p < 0,001) o sexo feminino e renda mensal domiciliar ao tratamento da hipertensão mas não com controle da pressão adequado. Construções culturais conflitantes de "problema de pressão" contribuem para a "não-adesão" ao tratamento. Há uma tensão entre o "controle" da pressão arterial e os profissionais de saúde "controlando" a vida. "Regimes" prescritos pelos médicos proíbem os prazeres da vida, "controlando" a liberdade pessoal e o livre arbítrio. Dar voz aos idosos sobre suas condições sociais pode promover autonomia, bem estar e felicidade na últimas etapas da vida.

Distribution of biotypes and leukotoxic activity of Aggregatibacter actinomycetemcomitans isolated from Brazilian patients with chronic periodontitis / Distribuição de biótipos e atividade leucotóxica de Aggregatibacter actinomycetemcomitans isolados de pacientes brasileiros com periodontite crônica

Aggregatibacter actinomycetemcomitans is an important etiologic agent of the periodontitis and is associated with extra-oral infections. In this study, the detection of the ltxA gene as well as the ltx promoter region from leukotoxic A. actinomycetemcomitans isolated from 50 Brazilian patients with periodontitis and 50 healthy subjects was performed. The leukotoxic activity on HL-60 cells was also evaluated. Leukotoxic activity was determined using a trypan blue exclusion method. The 530 bp deletion in the promoter region was evaluated by PCR using a PRO primer pair. A. actinomycetemcomitans was detected by culture and directly from crude subgingival biofilm by PCR using specific primers. By culture, A. actinomycetemcomitans was detected in nine (18 percent) of the periodontal patients and one (2 percent) healthy subject. However, by PCR, this organism was detected in 44 percent of the periodontal patients and in 16 percent of the healthy subjects. It was verified a great discrepancy between PCR detection of the ltx operon promoter directly from crude subgingival biofilm and from bacterial DNA. Only one periodontal sample harbored highly leukotoxic A. actinomycetemcomitans. Moreover, biotype II was the most prevalent and no correlation between biotypes and leukotoxic activity was observed. The diversity of leukotoxin expression by A. actinomycetemcomitans suggests a role of this toxin in the pathogenesis of periodontal disease and other infectious diseases

Aggregatibacter actinomycetemcomitans é um importante agente etiológico da periodontite e produz infecções extra-bucais. Neste estudo, foram detectados os biótipos, o gene ltxA associado à produção de leucotoxina e o promotor ltx em A. actinomycetemcomitans de pacientes com e sem periodontite. A atividade leucotóxica sobre células HL-60 também foi avaliada. A atividade leucotóxica foi determinada através do método de exclusão do azul de tripam. A deleção de 530 bp no promotor ltx foi avaliada usando-se o par de iniciadores PRO. A. actinomycetemcomitans foi detectado por cultura e por PCR. Por cultura, A. actinomycetemcomitans foi detectado em nove pacientes com periodontite (18 por cento) e em um indivíduo sadio (2 por cento). Por PCR esse microrganismo foi detectado em 44 por cento dos pacientes com periodontite e em 16 por cento dos saudáveis. Verificou-se diferença estatística entre a detecção do promotor do operon ltx, por PCR, diretamente do biofilme subgengival e do DNA bacteriano. Somente uma amostra clínica apresentou A. actinomycetemcomitans altamente leukotóxico. O biótipo II foi o mais prevalente e não foi observada correlação biótipo-atividade leucotóxica. A expressão da leucotoxina por A. actinomycetemcomitans na doença periodontal e outras doenças infecciosas necessita ser avaliado.

Case report: disseminated dermatophytosis by microsporum gypseum in a systemic lupus erythematosus patient

Mycosis is a major contributor to morbidity and mortality in patients with systemic lupus erythematosus and frequent exposition to an infectious source could enhance the development of dermatophytic infections. A case of disseminated dermatophytosis by Microsporum gypseum is reported in a systemic lupus erythematosus (SLE) patient.

Micoses contribuem para a morbidade e mortalidade em pacientes com lúpus eritematoso sistêmico e exposição freqüente a fontes infecciosas pode aumentar o desenvolvimento de infecções dermatofíticas. Um caso de dermatofitose disseminada por Microsporum gypseum é reportado em paciente com lúpus eritematoso sistêmico (LES).

Microcolony detection in thin layer culture as an alternative method for rapid detection of Mycobacterium tuberculosis in clinical samples

Tuberculosis remains one of the major causes of mortality worldwide. The early detection of new cases is an important goal in the program of tuberculosis control. Several methodologies for rapid and accurate laboratorial diagnosis have been developed, however, some of these techniques are expensive or cumbersome, making their implementation in low-income regions unfeasible. In this study, the thin layer culture method was compared with conventional culture method and it was observed that it provides earlier results and a presumptive species identification, being adequate alternative method for rapid laboratory diagnosis.

A tuberculose permanece como uma das principais causas de mortalidade em todo o mundo. A detecção precoce dos casos novos é um importante ponto nos programas de controle da tuberculose. Diversas metodologias para um rápido e acurado diagnóstico laboratorial tem sido desenvolvidas, entretanto, algumas destas técnicas são de alto custo ou de difícil execução, tornando inexeqüível sua implementação em locais com poucos recursos. Neste trabalho o método de cultivo em camada delgada foi comparado ao método de cultivo convencional verificando-se apresenta resultados positivos em menor tempo com uma identificação presuntiva da espécie de micobactéria, sendo assim um método alternativo adequado para o diagnóstico laboratorial rápido.

O efeito do laser de baixa energia no crescimento bacteriano "in vitro" / Low level laser effect in \"in vitro\" bacterial growth

OBJETIVO: Avaliar, por meio de estudo bacteriológico in vitro, o efeito de dois tipos de laser de baixa energia (LBE) sobre diferentes populações bacterianas habitualmente presentes em feridas pós-traumáticas. MÉTODOS: Foram colhidos swabs diretamente do sítio de infecção de pacientes internados com osteomielite pós-traumática crônica. As bactérias isoladas foram Acinetobacter baumanii complex, Escherichia coli, Haemophilus influenzae, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Salmonela sp, Serratia sp e Staphylococcus aureus. O material coletado foi semeado em meio ágar-sangue, através de alça estéril, utilizando-se 30 placas de Petri para cada germe. Foram utilizados dois aparelhos de LBE: Ibramed Laser Pulse #01189, com 15W/904nm por 200 segundos, e Phisiolux dual Bioset #9909001, com 20W/904nm por 230 segundos. Nos grupos I (n = 10) e II (n = 10), as bactérias sofreram irradiação pelo laser. O grupo III (n = 10) serviu de controle, não sendo irradiado. As bactérias dos grupos I e II foram irradiadas em câmara de fluxo laminar, previamente esterilizada por raio ultravioleta. O laser foi administrado de forma direta, central e perpendicularmente à superfície de cultivo das bactérias, com distância-padrão de 1cm, através de orifício confeccionado na tampa das placas. O crescimento bacteriano foi analisado após 12 e 24 horas da irradiação. Os resultados foram processados estatisticamente, utilizando-se o teste não-paramétrico de Kruskall-Wallis, com nível de significância p < 5 por cento. RESULTADOS: Observou-se comportamento similar entre as populações bacterianas nos três grupos experimentais após 12 e 24 horas da irradiação com os dois tipos de LBE, não havendo diferença estatisticamente significante no crescimento bacteriano entre os grupos I e II e entre estes e o grupo III (controle). CONCLUSÃO: O efeito do LBE, nas condições estudadas, mostrou-se inócuo quanto ao aumento do número de unidades formadoras de colônias bacterianas,...

OBJECTIVE: To perform an in vitro bacteriologic study to evaluate the effect of two types of low level laser (LLL) on different bacterial populations usually present in post-traumatic wounds. METHODS: Swabs were prepared directly at the infection site of patients hospitalized with chronic post-traumatic osteomyelitis. Isolated bacteria were Acinetobacter baumanii complex, Escherichia coli, Haemophilus influenzae, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Salmonela sp, Serratia sp, and Staphylococcus aureus. The material collected was seeded in agar-blood medium with a sterile loop, using 30 Petri dishes for each germ. Two LLL devices were used: Ibramed Laser Pulse #01189, with 15W/904nm for 200 seconds, and Phisiolux dual Bioset #9909001, with 20W/904nm for 230 seconds. In groups I (n = 10) and II (n = 10), bacteria were irradiated with laser. Group III (n = 10) was the control group and was not irradiated. Bacteria in groups I and II were submitted to radiation in a laminar flow chamber that was previously sterilized with UV rays, and the laser was directly, centrally, and perpendicularly applied to the bacteria cultivation surface, from a standard distance of one centimeter, through an orifice made in the lid of the dishes. Bacterial growth was analyzed 12 and 24 hours after the irradiation. Results were statistically processed using the non-parametric test of Kruskall-Wallis, with a significance level p < 5 percent. RESULTS: A similar behavior was seen in the bacterial population of the three groups studied after 12 and 24 hours of irradiation with the two types of LLL, and there was no statistically significant difference in the bacterial growth between groups I and II and between these two groups and group III (control). CONCLUSION: In the conditions of this study, the effect of LLL showed to be innocuous for the increase in the number of units forming bacterial colonies, in the doses used in this study, as an adjuvant for...

Atividade de amidinas reversas contra Trypanosoma cruzi in vitro / Activity of reversed amidines against Trypanosoma cruzi in vitro

A doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, é uma parasitose relevante e negligenciada afetando 16-18 milhões de indivíduos em áreas endêmicas da América Latina. A quimioterapia corrente, baseada em 2 nitroderivados (nifurtimox e benznidazol), é insatisfatória principalmente pela baixa atividade na fase crônica, alta toxicidade e devido ao aumento de isolados resistentes. Diamidinas aromáticas apresentam importante atividade anti-tumoral e antiparasitária, e vêem sendo utilizadas no tratamento de doenças parasitárias humanas e animais. Porém, devido à baixa biodisponibilidade oral e alta toxicidade, estudos têm sido desenvolvidos de modo a sintetizar e avaliar a ação de novos análogos dicatiônicos. Assim, a presente dissertação teve por objetivo caracterizar a atividade de amidinas reversas (ARs) contra Trypanosoma cruzi in vitro, comparando-a com a ação da diguanidina DB711. Nossos dados revelaram que ARs exibem importante efeito antiparasitário sobre amastigotas e tripomastigotas de T. cruzi em doses micro e nanomolares que não afetam a viabilidade de células de mamíferos. As amidinas DB889 e DB702 apresentaram superior atividade na maioria dos sistemas avaliados (diferentes formas evolutivas, diferentes condições de temperatura, e adição de sangue) em relação às duas outras ARs testadas, DB786 e DB811, sugerindo que pequenas varuações na estrutura química resultam em diferenças na potência antiparasitária. A análise das ARs sobre amastigotas não revelou diferenças no perfil de susceptibilidade entre os 2 estoques de T. cruzi testados, cepa Y e clone DM28c. Observamos superior atividade das ARs sobre tripomastigotas durante incubação a 37grausC, e que a adição de sangue reduziu a atividade tripanocida da maioria dos compostos testados à 4grausC, possivelmente devido à sua associação a componentes plasmáticos, como já relatado em outros estudos. Ensaios...A análise por microscopia eletrônica de transmissão (MET) revelou importantes altera...

Clinical and biochemical manifestation produced by scorpion (Hemiscorpius lepturus) venom in experimental animals

Several studies have been published about the clinical and biochemical manifestations produced by the venom of scorpions of the Buthidae family, but very few reports have indicated the manifestations induced by the venom of the Scorpionidae family. Hemiscorpius lepturus is an important scorpion species present in the south and southwestern part of Iran, causing morbidity and mortality in children and adults. For the present study, H. lepturus venom was extracted by electric shock and subcutaneously injected (6.3mg/kg) into a group of six rabbits. Blood collection was carried out before and three hours after venom injection for determination of osmotic fragility and levels of blood sugar, alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), lactate dehydrogenase (LDH), creatine phosphokinase (CPK) and alkaline phosphatase (ALP). In vitro studies were also carried out to verify the osmotic fragility of red blood cells (RBCs) exposed to venom concentrations ranging from 0-90µg/2ml blood. Results showed the extreme effect of this venom on the lysis of RBCs both in vitro and in vivo. Venom injection caused significant (p>0.001) increase in ALT, AST, LDH and blood sugar levels. There was also an increase in CPK, and ALP levels after venom injection; however, it was not statistically significant. All animals died four hours after having received the venom. The current study revealed that the neurological effect of H. lepturus venom is similar to that of scorpions of the Buthidae family. However, they differ in RBCs lysis, which was highly significant when induced by H. lepturus venom, probably due to the presence of a type of phospholipase in this venom. Further studies are needed to provide a clearer view of the mechanism of action of H. lepturus venom.(AU)

Toxoplasma gondii: aspectos estruturais e funcionais da parede de cistos teciduais e cistogênese em células musculares esqueléticas, in vitro / Toxoplasma gondii: structural and functional aspects of the wall of tissue cysts and cystogenesis in skeletal muscle cells, in vitro

Toxoplasmose é uma importante doença parasitária de distribuição mundial, causada pelo Toxoplasma gondii. A necessidade de novos agentes terapêuticos contra a toxoplasmose tem despertado o interesse: (i) pela melhor caracterização da superfície celular das diferentes formas evolutivas do parasito, e (ii) por um melhor entendimento sobre os mecanismos de aquisição de nutrientes por esse patógeno assim como (iii) dos eventos relacionados à sua conversão para bradizoítos e formação do cisto tecidual. Assim, nosso primeiro objetivo foi investigar a carga elétrica de superfície dos cistos de T. gondii, através de marcadores policatiônicos, tais como o vermelho de rutênio (VR) e a ferritina cationizada (FC). Através do uso do VR foi possível identificar a localização de glicosaminoglicanos por toda a superfície da parede cística, como uma camada homogênea granular eletrondensa. A incubação de cistos vivos por 20 min a 4°C com FC confirmou que a sua superfície é carregada negativamente, havendo a subseqüente incorporação destes sítios aniônicos após a elevação da temperatura para 37°C. Nestes ensaios, inicialmente, os sítios aniônicos estavam presentes em vesículas e túbulos, e posteriormente localizados na matriz cística, próximos elou em contato direto com a membrana de bradizoítos presentes no interior dos cistos. A seguir, como o intercâmbio molecular entre os parasitos encistados e o citoplasma da célula hospedeira infectada é ainda pouco conhecido, nosso segundo objetivo foi avaliar a incorporação de traçadores endocíticos de fase fluída pelos cistos de T. gondii.

A microscopia de varredura confocal a laser (MVCL) utilizando reconstrução 3D de cistos isolados e incubados com albumina bovina (BSA) conjugada a FITC mostrou a associação do ligante à parede cística, assim como sua localização na matriz dos cistos. A atividade endocítica foi adicionalmente avaliada por estudos ultraestruturais utilizando-se diferentes traçadores (ferritina nativa, peroxidase e BSA) conjugados a partículas de ouro coloidal. A análise por microscopia eletrônica de transmissão (MET) confirmou a presença dos ligantes na superfície do cisto tecidual, dentro de vesículas e em túbulos dispersos na sua matriz, bem como associados à membrana dos bradizoítos intracísticos. Esses resultados sugerem que, pelo menos uma das vias relacionadas à aquisição de nutrientes pelos parasitos intracísticos , envolva a incorporação de moléculas disponíveis no citoplasma da célula hospedeira. Na última etapa da presente tese nosso objetivo foi acompanhar a cistogênese do T. gondii in vitro, durante a interação de bradizoítos com culturas primárias de células musculares esqueléticas (CME). A conversão de bradizoíto para taquizoíto foi monitorada entre 12-168 h de interação através de ensaios de imunofluorescência, utilizando-se anticorpos monoclonais estágio-específicos, anti-BAG1 e anti-SAG1, respectivamente.

Nossos resultados revelaram que até 24 h de interação, não houve conversão bradizoíto-taquizoíto, e que somente a partir de 48 h, vacúolos parasitóforos (VPs) positivos para SAG1 ou BAG1 puderam ser identificados numa mesma célula, sendo que os primeiros sempre continham um maior número de parasitas. Adicionalmente, a análise da interação bradizoítos-CME por microscopia eletrônica de varredura revelou a associação do parasito à célula hospedeira pela região anterior do parasito assim como, pela sua porção posterior e lateral havendo inclusive, expansão da membrana das CME. Estes dados sugerem que a invasão deste tipo celular por bradizoítos ocorra tanto por penetração ativa como por endocitose. Por fim, a análise por MET mostrou a participação de elementos do retículo endoplasmático rugoso das CME na formação do VP e permitiu evidenciar a completa cistogênese do T. gondii a partir de 96 h de infecção. Os presentes resultados fornecem importantes informações relacionadas à natureza da parede cística e sua capacidade endocítica, além de apresentar dados inéditos sobre o processo de cistogênese do T. gondii em CME. Este conjunto de informações pode efetivamente contribuir para a formulação de novas abordagens terapêuticas para toxoplasmose crônica além de revelar que o cultivo primário de CME representa uma excelente ferramenta para o estudo dos fatores envolvidos na interconversão do T. gondii.

Prevalence of leukotoxic genotypes of Actinobacillus actinomycetemcomitans in Brazilians with chronic periodontitis

Actinobacillus actinomycetemcomitans is considered a major etiologic agent of aggressive periodontitis but this species has also been associated with other forms of periodontal disease. Further, highly leukotoxic strains are related to severity of disease. This investigation determined the prevalence of A. actinomycetemcomitans and the occurrence of the leukotoxin gene 530-bp deletion in Brazilian subjects with chronic periodontitis. Twenty periodontally healthy and 20 chronic periodontitis subjects were selected. Full-mouth clinical examination was carried out at 6 sites/tooth. Subgingival biofilm samples were collected from the 3 deepest sites and 3 healthy sites from periodontitis subjects, as well as from 3 sites of individuals with periodontal health. A. actinomycetemcomitans and the genetic deletion were determined by the polymerase chain reaction. Significant differences were sought by Mann-Whitney, Chi-square, and Wilcoxon sign tests. Periodontitis subjects presented a higher prevalence (75 percent) of A. actinomycetemcomitans than individuals with health (45 percent) (p = 0.053). A mean frequency of 57.5 percent of A. actinomycetemcomitans - positive sites was observed in the periodontitis group. Of those, 75 percent were diseased, whereas 40 percent were healthy sites (p = 0.0001). Healthy subjects showed a mean frequency of 35 percent of positive sites. In contrast, the genetic deletion was detected only in 4 diseased sites from 2 chronic periodontitis patients. A high prevalence of A. actinomycetemcomitans was observed in Brazilians with chronic periodontitis. However, the leukotoxin gene 530-bp deletion was rarely detected in the subgingival biofilm of these subjects.

Actinobacillus actinomycetemcomitans tem sido associado com diferentes formas de doenças periodontais, mas tal espécie é considerada o principal agente etiológico da doença periodontal agressiva. Algumas cepas de A. actinomycetemcomitans apresentam uma deleção de 530 pb na região promotora do operon do gene da leucotoxina, produzindo assim maiores quantidades desta toxina. Tal fato pode ter um importante papel na patogênese das doenças periodontais. A proposta do presente estudo foi determinar a prevalência do A. actinomycetemcomitans em amostras de biofilme subgengival de indivíduos brasileiros com periodontite crônica e saúde periodontal; bem como avaliar a distribuição do tipo genético leucotóxico desta espécie nestes indivíduos. Vinte pacientes com periodontite crônica e 20 controles com saúde periodontal foram selecionados. O exame clínico periodontal foi realizado em 6 sítios/dente em todos os dentes. Amostras de biofilme subgengival foram coletadas de 3 sítios com a maior profundidade de bolsa e 3 sítios sem doença dos pacientes com periodontite, assim como de 3 sítios aleatórios dos controles. A detecção do A. actinomycetemcomitans e a ocorrência da deleção genética foram realizadas utilizando a técnica de PCR diretamente nas amostras de biofilme. Pacientes com periodontite crônica apresentaram uma alta prevalência de A. actinomycetemcomitans (75 por cento) quando comparados aos indivíduos sem doença periodontal (45 por cento), porém essa diferença não foi significativa (p = 0.053). Foi observada uma freqüência média de 57.5 por cento de sítios com A. actinomycetemcomitans no grupo com periodontite. Destes sítios, 75 por cento eram sítios com doença, enquanto 40 por cento eram sítios saudáveis (p = 0.0001). Indivíduos sem doença periodontal apresentaram uma freqüência média de 35 por cento de sítios com A. actinomycetemcomitans. A deleção de 530-pb foi encontrada somente em 4 sítios doentes de 2 pacientes com periodontite crônica. Entretanto...

Talidomida no tratamento de pacientes com Dermatite Atópica Grave: Estudo retrospectivo de 14 casos / Thalidomide in the treatment of patients with severe atopic dermatitis: retrospective study of 14 patients

Introdução: A dermatite atópica (DA) é uma doença inflamatória cutânea crônica recidivante, caracterizada clinicamente por lesões de distribuição e morfologias típicas, prurido (sintoma principal e primário) e antecedente pessoal e/ou familiar de atopia, entre outras. Além do tratamento convencional que inclui afastamento dos fatores desencadeantes; hidratação da pele; antihistamínicos orais; corticosteróides tópicos; outras terapias têm sido propostas e entre elas: a talidomida. Objetivo: avaliar a ação da talidomida como tratamento opcional para o controle do prurido de pacientes com DA grave. Pacientes e Métodos: por análise de prontuários médicos, foram avaliados 14 pacientes (3 a 30 anos de vida) acompanhados na Disciplina de Alergia, Imunologia Clínica e Reumatotogia por diagnóstico de DA grave, (critérios de Hanifin e Rajka).Resultados: observou-se melhora do prurido em 10/14 pacientes com a talidomida. Todos toleraram bem o medicamento e nenhum apresentou efeito adverso. Discussão: a talidomida foi efetiva no controle do prurido de pacientes com DA grave de difícil tratamento.

Aspectos clínicos de pacientes sob suspeita de defeito fagocitário / Clinical profile of pacients suspected of having phagocyte defects

Objetivo: Analisar aspectos clínicos de pacientes com infecções graves e/ u de repetição sugestivas de distúrbio fagocitário encaminhado s a um laboratório especializado para avaliação do sistema APDH oxidase. Métodos: Foram estudados 53 pacientes com suspeita de defeito no sistema ADPH oxidase. Avaliação laboratorial constou de teste do NBT e dosagem de ânion superóxido liberado por neutrófilos e células mononucleares. Os pacientes foram classificados em grupo I com Doença Granulomatosa. Crônica (DGC) e grupo II sem doença determinada. Resulta os: O grupo I foi composto por 20 pacientes e grupo II por 33 pacientes. As infecções pulmonares foram as mais freqüentes nos dois grupos, seguidas de adenites, infecções cutâneas e abscessos profundos no grupo I e otite média, infecção de pele e amigdalite no grupo II. Observou-se diferença estatisticamente significativa para infecção urinária (p=0,0097), abscessos profundos (p=0,0012) e linfadenopatias (p=0,0003). Reação adversas à vacina BCG foi observada em cinco pacientes do grupo I e apenas um paciente do grupo II (p=0,0240). A história familiar de infecção de repetição foi referida por doze pacientes do grupo I e por 8 pacientes do grupo II (p=0,0181). Conclusão: A presença de história familiar de infecção de repetição, reação à vacina BCG, linfadenites e abscessos profundos apresentaram associação a grupo com diagnóstico bioquímico de DGC. Infecção urinária teve associada ao grupo sem diagnóstico definido, mas com suspeita clínica de defeito de fagócito.