Seroprevalencia y detección molecular de Toxoplasma gondii en donantes de un banco de sangre de Cúcuta, Colombia / Seroprevalence and molecular detection of Toxoplasma gondii among donors in a blood bank in Cúcuta, Colombia

Resumen Introducción. La infección por Toxoplasma gondii puede presentarse en los humanos con un amplio rango de manifestaciones que van desde el estado asintomático hasta la enfermedad grave, según el estado inmunológico del individuo. Los mecanismos de transmisión incluyen la transfusión sanguínea, pero poco se sabe sobre la frecuencia del parásito en los bancos de sangre de Colombia. Objetivo. Determinar la prevalencia de la infección con T. gondii en donantes de un banco de sangre de Cúcuta mediante técnicas de diagnóstico serológico y molecular. Materiales y métodos. Se determinaron los anticuerpos IgG e IgM contra T. gondii mediante un inmunoensayo en suero en 348 donantes. Se determinó la frecuencia de ADN de T. gondii utilizando la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en sangre total de donantes seropositivos y se analizaron las variables de interés con base en la información obtenida durante la selección de donantes. Resultados. De los 348 donantes participantes, 134 (38,5 %) presentaron anticuerpos IgG contra T. gondii; dos (0,6 %) de ellos presentaron tanto IgG como IgM y, en dos (1,5 %), se detectó ADN del parásito en la sangre. Un análisis bivariado evidenció una asociación entre la seropositividad para T. gondii y tener más de 26 años de edad (p=0,020). Conclusiones. La prevalencia de la infección con T. gondii encontrada en los donantes de sangre sugiere una exposición significativa al agente, la cual adquiere relevancia al detectarse la parasitemia.

Abstract Introduction: Toxoplasma gondii infection manifests differently in humans according to their immunity ranging from asymptomatic profiles to severe disease. There are multiple transmission mechanisms including blood transfusions, but little is known about the frequency of T. gondii infection in Colombia's blood banks. Objective: To determine the prevalence of T. gondii infection in blood donors of a blood bank in the city of Cúcuta by serological and molecular diagnostic techniques. Materials and methods: We identified IgG and IgM antibodies against T. gondii by immunoassay in serum from 348 donors. The frequency of T. gondii DNA was determined by polymerase chain reaction (PCR) in whole blood from seropositive donors and relevant variables were analyzed based on the information obtained from surveys during blood donor selection. Results: Out of the 348 enrolled donors, 134 (38.5%) showed IgG antibodies against T. gondii; two of them (0.6%) had both IgG and IgM, and in two of them (1.5%), parasite DNA was detected in blood samples. A bivariate analysis indicated an association between seropositivity to T. gondii and being over 26 years of age (p=0.020). Conclusions: The prevalence of T. gondii infection found in the blood donors of this study suggests a significant exposure to the infectious agent that becomes relevant when parasitemia is detected.

Serologic and molecular diagnostic and bioassay in mice for detection of Toxoplasma gondii in free ranges chickens from Pantanal of Mato Grosso do Sul / Diagnóstico sorológico e molecular e bioensaio em camundongo para detecção de Toxoplasma gondii em galinhas de criação livre do Pantanal do Mato Grosso do Sul

The aim of this study was to investigate the occurrence of Toxoplasma gondii and compare the results obtained in the Modified Agglutination Test (MAT), Polimerase Chain Reaction (PCR) and bioassay in mice. In order to accomplish this, 40 free-range chickens from eight farms in neighboring areas to the Pantanal in Nhecolândia, Mato Grosso do Sul, were euthanized and blood samples, brain and heart were collected. The occurrence of anti-T. gondii antibodies found in chickens was 67.5% (27 samples), considering as a cutoff point the dilution 1:5. Among the samples analyzed, 7 (25.9%) were positive in the dilution 1:5, 3 (11.1%) in 1:10, 2 (7.4%) in 1:20, 3 (11.1%) in 1:320, 1 ( 3.7%) in 1:640, 3 (11.1%) in 1:1280, 2 (7.4%) in 1:2560, 4 (14.8%) in 1:5120 and 2 (7.4%) in 1:10.240. From the mixture of tissue samples (brain and heart) from the chickens analyzed, 16 (40%) presented electrophoretic bands compatible with T. gondii by PCR (gene B1). In the comparison of techniques, 59.26% positivity in PCR was revealed among animals that were seropositive in MAT (cutoff 1:5). From 141 inoculated mice, six (4.44%) died of acute toxoplasmosis between 15 and 23 days after inoculation. Surviving mice were sacrificed at 74 days after inoculation, and a total of 28 cysts were found in the brains of 10 distinct groups. From the seropositive hens, 27 bioassays were performed and 11 (40.7%) isolates were obtained. A greater number of isolations happened in mice that were inoculated with tissues from chickens that had high titers for anti-T. gondii antibodies. Chronic infection in mice was observed in nine groups (33.3%) from five different properties. Among the surviving mice, 25.6% were positive for T. gondii in MAT (1:25). From mice positive in PCR, 87.5% were also positive in MAT. Among the PCR-negative mice, 5.2% were positive for T. gondii in MAT. It can be concluded through this study that the occurrence of infecton by T. gondii in the rural properties studied was high, that PCR directed to gene B1 does not confirm the viability of the parasite, but it can be used as a screening method for the selection of chickens infected by T. gondii, that the animals with titer greater than 10 must be prioritized for the selection of animals for bioassay, since for them, the chances of isolating the parasite are greater and that seroconversion in experimentally infected mice is not a good indicator for isolating the agent.

Os objetivos deste estudo foram investigar a ocorrência de Toxoplasma gondii e comparar os resultados obtidos no Teste de Aglutinação Modificada (MAT), Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) e o bioensaio em camundongos. Para tanto, 40 galinhas de criação livre de oito fazendas em áreas limítrofes ao Pantanal da Nhecolândia, Mato Grosso do Sul, foram eutanasiadas e amostras de sangue, o cérebro e o coração foram coletados. A frequência de anticorpos anti-T. gondii encontrada nas galinhas foi de 67,5% (27 amostras), considerando como ponto de corte a diluição 1:5. Entre as amostras analisadas, 7 (25,9%) foram positivas na diluição 1:5, 3 (11,1%) em 1:10, 2 (7,4%) em 1:20, 3 (11,1%) em 1:320, 1 ( 3,7%) em 1:640, 3 (11,1%) em 1:1.280, 2 (7,4%) em 1:2.560, 4 (14,8%) em 1:5.120 e 2 (7,4%) em 1:10.240. A partir da mistura de amostras de tecidos (cérebro e coração) das galinhas analisadas, 16 (40%) apresentaram bandas eletroforéticas compatíveis com T. gondii por PCR (gene B1). Na comparação das técnicas, revelou-se 59,26% de positividade na PCR entre os animais soropositivos no MAT (ponto de corte 1:5). Dos 141 camundongos inoculados, seis (4,44%) morreram de toxoplasmose aguda entre 15 e 23 dias após a inoculação. Os camundongos que sobreviveram foram sacrificados 74 dias após a inoculação, sendo encontrados 28 cistos nos cérebros de 10 grupos distintos. Das galinhas soropositivas, foram realizados 27 bioensaios e obtidos 11 (40,7%) isolados. Um maior número de isolamentos ocorreu em camundongos que foram inoculados com tecidos de galinhas que tinham altos títulos de anticorpos anti-T. gondii. Infecção crônica em camundongos foi observada em nove grupos (33,3%) de cinco propriedades diferentes. Entre os camundongos que sobreviveram, 25,6% foram positivos para T. gondii no MAT (1:25). Dos camundongos positivos na PCR, 87,5% também foram positivos no MAT. Já entre os camundongos PCR negativos 5,2% foram positivos para T. gondii no MAT. Concluiu-se através deste estudo que a ocorrência de infecção pelo T. gondii nas propriedades rurais estudadas foi alta, que a PCR direcionada ao gene B1, não confirma a viabilidade do parasita, porém pode ser utilizada como método de triagem para a seleção de galinhas infectadas por T. gondii, que os animais com título maior que 10 devem ser priorizados para a seleção de animais para bioensaio, pois para eles, as chances de isolamento do parasita são maiores e que a soroconversão em camundongos infectados experimentalmente não é um bom indicador de isolamento do agente.

El síndrome Torch

El síndrome de TORCH (Toxoplasmosis, otros como Sífilis, Rubéola, Citomegalovirus y Herpesvirus) reune el grupo de agentes más comunes en infección intrauterina crónica, causante de las más serias lesiones embrionarias. La infección por el virus de inclusión citomegálica es la más común, afecta del 0.5 al 2 por ciento de los nacidos vivos, la toxoplasmosis afecta cerca de uno a cuatro por mil nacidos vivos, la rubéola a uno por mil en épocas no epidémicas y la sífilis presenta una incidencia variable. Las manifestaciones clínicas y serológicas varian con cada entidad pero es importante conocer que en nuestro medio existe un grupo considerable de gestantes en los grupos de riesgo ante el síndrome TORCH; se debe considerar estos agentes en el control periódico de toda gestante, incluyendo necesariamente, estudios serológicos para buscar anticuerpos específicos y análisis de la inmunidad contra los mismos. Es importante detectar los recién nacidos asitimáticos ya que pueden beneficiarse del tratamiento temprano; dichos casos deben continuar en control al menos durante el primer año. El conocimiento adecuado de la epidemiología de una comunidad determinada permitirá ampliar de una forma adecuada el tamizaje a otros agentes.

Evolution of IgG antibody response against Toxoplasma gondii tissue cyst in acute and chronic human infections

O reconhecimento do perfil dos antigenos de cistos tissulares pelos anticorpos IgG foi estudado durante a infecçäo toxoplasmotica aguda e crônica. Assim a resposta de IgG contra Toxoplasma gondii foi investida pelo immunoblotting em dois pacientes acidentalmente infectados com a variedade RH bem como em grupos de pacientes naturalmente infectados nas fases aguda e crônica. Houve uma coincidencia global da massa molecular entre antigenos de taquizoitas e cistos tissulares reconhecidos por estes soros, todavia, eles parecem näo ser as mesmas moleculas. A resposta contra cistos tissulares começa precocemente durante a infecçäo aguda e a reatividade de anticorpos e forte contra ampla variedade de antigenos. Seis faixas (entre 82 e 151 kDA) foram reconhecidas exclusivamente pelos soros das fases agudas e crônicas foram 4 grupos com intervalos de 20-24 kDa, 34-39 kDa, 58-80 kDa e 105-130 kDa. Ambos pacientes infectados acidentalmente e alguns dos pacientes naturalmente infectados mostraram fraca resposta especifica contra os antigenos de cistos tissulares

Seroprevalencia de citomegalovirus y toxoplasma gondii en población sana menor de 30 años, en Santiago de Chile / Seroprevalence of cytomegalovirus y toxoplasma gondii in health population under 30 years old at Santiago, Chile

Subjects and methods: The prevalence of IgG antibodies against Cytomegalovirus and Toxoplasma gondii were studied in 560 subjetcs under 30 years old, using and ELISA technique. Age, socioeconomic level, breast feeding, assistance to nurseries and number of family members were considered as risk factors for these infections. Results: Infection by Cytomegalovirus and Toxoplasma gondii were studied in 560 subjetcs under 30 years old, using an ELISA technique. Age, socioeconomic level, breast feeding, assistance to nurseries and number of family members were considered as risk factors for these infections. Results: Infection by Cytomegalovirus had a global prevalence of 60 percent. It showed an epidemiological pattern of late adquisition in high socioeconomic levels and a pattern of early infection in medium and low socioeconomic levels. Eighty to 90 percent of sera were positive for the infection in adult subjetcs of the three socioeconomic levels. There was a positive correlation between the duration of breast feeding and the frequency of Cytomegalovirus infection. Infection by Toxoplasma gondii had a global prevalence of 24.6 percent. The rates of susceptible individuals were 80 and 50 percent in high and medium-low socioeconomic levels respectively. Conclusions: The knowledge about the frequency of these infections in high risk populations such as women during their reproductive years and immunodepressed individuals, will allow the implementation of preventive measures

Toxoplasmosis crónica intrauterina / Chronic intrauterine toxoplasmosis

Se estudian 100 muestras de placentas (de embarazos a término), y membranas y restos ovulares de mujeres con el fin de reconocer formas evolutivas de Toxoplasma gondii. Todas las muestras procedieron de madres con presunción clínica de ser pasibles de una toxoplasmosis intrauterina. Los materiales fueron estudiados en la siguiente forma: extendidos coloreados con Wright y Giemsa; e inoculación intraperitoneal en lauchas. La recuperación del parásito fue en un 92% de los casos. No se cotejaron estos datos con los hallazgos serológicos obtenidos en las pacientes durante el embarazo. Los autores resaltam la importância de la toxoplasmosis crónica intrauterina como factor etiológico de complicaciones del embarazo en relación con la infección aguda adquirida durante la gestación, y destacan además la existencia de una forma esquizogónica de reproducción del parásito a nivel de las vellosidades coriales