An assessment of whole blood and fractions by nested PCR as a DNA source for diagnosing canine ehrlichiosis and anaplasmosis.

Ehrlichiosis and anaplasmosis are tick-borne diseases. Ehrlichia canis and Anaplasma platys infect mainly white cells and platelets, respectively. The main DNA source for PCR is peripheral blood, but the potential of blood cell fractions has not been extensively investigated. This study aims at assessment of whole blood (WB) and blood fractions potential in nested PCR (nPCR) to diagnose canine ehrlichiosis and anaplasmosis. The 16S rRNA gene was amplified in 71.4, 17.8, 31.57, and 30% of the WB, granulocyte (G), mononuclear cells (M), and buffy coat (BC) samples. Compared to the WB, the sensitivity of the PCR was 42.86% for the M, and BC fractions, 21.43% for the G, and 33.33% for the blood clot (C). There was fair agreement between the WB and M, BC and C, and slight with the G. Fair agreement occurred between the nPCR and morulae in the blood smear. One animal was coinfected with A. platys and E. canis. This study provided the first evidence of A. platys infection in dogs in Paraíba, Brazil, and demonstrated that WB is a better DNA source than blood fractions to detect Ehrlichia and Anaplasma by nPCR, probably because of the plasma bacterial concentration following host cell lysis.

Perfil hematológico de cabras clinicamente sadias criadas no Cariri paraibano / Profile hematological of goat clinical healthy servants in Cariri paraibano

Objetivou-se com este trabalho estudar o perfil hematológico de cabras sem raça definida, criadas na região do Cariri paraibano em regime semi-intensivo e mantidas sob as mesmas condições ambientais e de manejo, como também a busca de valores de referência que se adeqüem à nossa região. Foram coletadas amostras sanguíneas de 143 animais clinicamente sadios, com idades entre 1 e 12 anos. A partir de uma única amostra de sangue de cada animal foram realizados o eritrograma (contagem de hemácias, volume globular, hemoglobina, volume corpuscular médio, hemoglobina corpuscular média e concentração de hemoglobina corpuscular média) e o leucograma (contagem total e diferencial de leucócitos). Os dados obtidos foram avaliados estatisticamente por meio do Teste de Tukey em nível de significância de 5 por cento, comparando os resultados com valores encontrados por outros autores. Os resultados demonstraram que não foram evidenciadas diferenças significativas de resultados encontrados por outros autores para as variáveis avaliadas, porém houve diferenças para alguns parâmetros descritos na literatura para animais de mesma raça e faixas etárias, refletindo a influência de fatores como altitude,clima, nutrição e manejo entre outros. Desta forma, evidencia-se a necessidade de pesquisas para o estabelecimento de valores regionais.

On aimed to study the profile hematological of female goats of the sem race defined, raised in the area of Cariri Paraibano at a semi-intensive regime and under the same environmental and management conditions and handling as well as the search for reference values that adequate to our region. Sanguine samples of 143 clinically healthy animals were collected with ages between 1 and 12 years. Starting from just a single sample of blood of each animal the eritrograma was accomplished (Red blood cell count, packed cell volume, hemoglobin, mean corpuscular values, mean corpuscular hemoglobin and mean corpuscular hemoglobin concentration) and the leucograma (, white blood cell count and differential white blood cell count). The obtained data were appraised statistically by means of the Tukey of Test at the level of significance of 5 percent, comparing the results with found to other authors. The results demonstrated that significant differences of results were not evidenced found by other authors, however there were differences for some parameters described in the literature for animals of the same race and age groups, reflecting the influence of factors as altitude, climate, nutrition and handling among others. So, the need of researches is evidenced for the establishment of regional values.

Bactérias que degradam monofluoroacetato de sódio

O objetivo deste trabalho foi descrever o isolamento de bactérias que degradam monofluoroacetato de sódio (MFA) em amostras de solo, plantas e de rúmen caprino, bem como, realizar uma análise comparativa de sequências enzimáticas, utilizando como critério de seleção a conservação da tríade catalítica, sítio ativo e motivos estruturais da fluoroacetato dehalogenase. As amostras de solo e plantas foram coletadas em áreas de ocorrência de Mascagnia rigida e Palicourea aenofusca, que contêm MFA e as de animais foi coletado líquido ruminal via fístula de caprinos adultos, machos, mestiços, com fistula ruminal, alimentados com feno e pastagem nativa. As amostras foram cultivadas em aerobiose no meio mineral acrescido de 20 mmol L?1 de monofluoroacetato de sódio. Através do sequenciamento do gene 16S rRNA foram isolados sete bactérias de amostras de solo e plantas, identificados como Paenibacillus sp. (ECPB01), Burkholderia sp. (ECPB02), Cupriavidus sp. (ECPB03), Staphylococcus sp. (ECPB04), Ancylobacter sp. (ECPB05), Ralstonia sp. (ECPB06), e Stenotrophomonas sp. (ECPB07). Das amostras de rúmen caprino foram identificados Pigmentiphaga kullae (ECPB08) e Ancylobacter dichloromethanicus (ECPB09). Todos os isolados degradaram o MFA contido no meio, alcançando uma taxa de degradação de 20 mmol L?1 de íon flúor, após 32 horas de incubação em meio Mineral. Na análise comparativa das sequências enzimáticas, de um total de 549 sequências proteicas obtidas do NCBI, 128 continham a tríade catalítica, o sítio ativo e motivo estrutural encontrados na fluoroacetato dehalogenase de Burkholderia sp. (gi|95102016), Micromonospora lupini str. lupac 08 (gi|386690726), Rhodopseudomonas palustris (gi|81829712) e Moraxella sp. (gi|216773), sugerindo que todas são fluoroacetato dehalogenase, pela presença do mecanismo catalítico e estrutural único para defluoração do monofluoroacetato de sódio. No futuro, alguns destes microorganismos podem ser utilizados para estabelecer no rúmen uma população bacteriana capaz de degradar o MFA e proteger ruminantes de intoxicações por este composto