A proteoliposome based formulation administered by the nasal route produces vibriocidal antibodies against El Tor Ogawa Vibrio cholerae O1 in BALB/c mice.

A vaccine candidate against the enteric pathogen Vibrio cholerae was developed based on a proteoliposome (PL) formulation using a wild type strain C7258, V. cholerae O1, El Tor Ogawa as part of strategy to develop a combined formulation against enteric diseases preventable by the stimulation of the mucosal immune system. A detergent extraction method was applied to obtain the PL. Scanning electron microscopy and molecular exclusion chromatography showed the presence of two PL populations. Photon correlation spectroscopy studies were then carried out to evaluate the size (169.27+/-3.85nm), polydispersity (0.410) and zeta potential (-23.28+/-1.21mV) of the PL. SDS-PAGE and Western blot analysis revealed the presence of lipopolysaccharide (LPS), mannose-sensitive haemagglutinin (MSHA) and a range of outer membrane proteins, including OmpU. BALB/c mice were immunized intranasally with two doses of PL containing 25mug of LPS each 28 days apart. The mice showed high anti-LPS IgG titres (3.36+/-0.235) and vibriocidal antibodies (3.70+/-0.23) after two weeks from last dose. These results show for the first time that PL can be obtained from V. cholerae O1 and when administer by intranasal route has the potential to protect against this pathogen.

Cuantificación de lipopolisacárido en un proteoliposoma obtenido a partir de la superficie externa de Vibrio cholerae O1 / Lipopolysaccharide quantification in a proteoliposome obtained from external surface of Vibrio

El lipopolisacárido (LPS) de Vibrio cholerae O1, a diferencia de la mayoría de las bacterias gramnegativas, no es reactivo en el ensayo del KDO, un método ampliamente utilizado para la cuantificación de LPS. Este LPS puede ser cuantificado por peso seco cuando se trata del antígeno en estado puro, pero cuando se necesita cuantificarlo, por ejemplo en un proteoliposoma, se requieren métodos de hidrólisis fuerte para que la molécula de KDO se exponga y sea reactiva en el ensayo antes mencionado. En este trabajo describimos un método rápido, sencillo y reproducible que nos permite cuantificar el LPS en un proteoliposoma obtenido a partir de la superficie externa de V. cholerae O1, El Tor Ogawa, mediante el uso de un anticuerpo monoclonal anti-LPS Ogawa en Western blot y la posterior evaluación del perfil reactivo en un densitómetro, utilizando LPS Ogawa purificado y cuantificado por peso seco como patrón de referencia. Este método puede ser aplicado a cualquier otra preparación que contenga LPS y que no pueda ser evaluada por KDO(AU)

Reactogenicidad e inmunogenicidad de una nueva vacuna de toxoide tetánico y diftérico con concentración reducida en adolescentes cubanos / Reactogenicity and immunogenicity of a new tetanus toxoid and reduced diphtheria toxoid vaccine in

Se realizó un estudio aleatorizado, controlado y a doble ciegas en 225 adolescentes cubanos entre 13 y 16 años de edad, con el objetivo de evaluar la reactogenicidad y la inmunogenicidad de una nueva vacuna de toxoide tetánico y toxoide diftérico con concentración reducida, producida en el Instituto Finlay, con respecto a su similar comercial IMOVAX dT adult de Aventis Pasteur. Se tomaron muestras de suero antes y 21 días después de la vacunación. La reactogenicidad de ambas vacunas fue similar. Los síntomas y signos, tanto locales como generales fueron moderados y aparecieron principalmente durante las primeras 72 h después de la vacunación. Todos los voluntarios vacunados alcanzaron niveles protectores (³0,1 UI/mL) de antitoxina contra el tétanos y la difteria. El 99,25por ciento de los inmunizados con la vacuna experimental y el 98,36por ciento de los voluntarios del grupo control presentaron niveles de antitoxina tetánica correspondientes a una protección de larga duración (³1,0 UI/mL); para la antitoxina diftérica se alcanzaron estos niveles en el 81,20por ciento y 80,33por ciento de los voluntarios en cada grupo. Los títulos medios geométricos de antitoxina tetánica (21,73 UI/mL) y antitoxina diftérica (2,55 UI/mL) inducidos por la nueva vacuna fueron superiores (p<0,05) a los del grupo control: 15,55 UI/mL y 1,84 UI/Ml, respectivamente(AU)