High Genomic Variability in Equine Infectious Anemia Virus Obtained from Naturally Infected Horses in Pantanal, Brazil: An Endemic Region Case.

Equine infectious anemia virus (EIAV) is a persistent lentivirus that causes equine infectious anemia (EIA). In Brazil, EIAV is endemic in the Pantanal region, and euthanasia is not mandatory in this area. All of the complete genomic sequences from field viruses are from North America, Asia, and Europe, and only proviral genomic sequences are available. Sequences from Brazilian EIAV are currently available only for gag and LTR regions. Thus, the present study aimed for the first time to sequence the entire EIAV genomic RNA in naturally infected horses from an endemic area in Brazil. RNA in plasma from naturally infected horses was used for next-generation sequencing (NGS), and gaps were filled using Sanger sequencing methodology. Complete viral genomes of EIAV from two horses were obtained and annotated (Access Number: MN560970 and MN560971). Putative genes were analyzed and compared with previously described genes, showing conservation in gag and pol genes and high variations in LTR and env sequences. Amino acid changes were identified in the p26 protein, one of the most common targets used for diagnosis, and p26 molecular modelling showed surface amino acid alterations in some epitopes. Brazilian genome sequences presented 88.6% nucleotide identity with one another and 75.8 to 77.3% with main field strains, such as EIAV Liaoning, Wyoming, Ireland, and Italy isolates. Furthermore, phylogenetic analysis suggested that this Brazilian strain comprises a separate monophyletic group. These results may help to better characterize EIAV and to overcome the challenges of diagnosing and controlling EIA in endemic regions.

Renal profile and urinary fractional excretion of calcium, phosphorus, and magnesium of lambs fed with different contents of phosphorus / Perfil renal e excreção fracionada urinária de cálcio, fósforo e magnésio de cordeiros alimentados com teores diferentes de fósforo

Obstructive urolithiasis is common in confined sheep, and a predominant factor predisposing animals to this condition is nutritional management. The objective of this study was to evaluate the effect of different concentrations of phosphorus (P) on urinalysis, serum urea and creatinine, and serum and urine concentrations of calcium (Ca), P, and magnesium (Mg), as well as to establish the fractional excretion (FE) of these elements in confined lambs. Thirty male Santa Inês x Ile de France sheep at four months of age were divided into two groups according to the diet: Group 1 (G1, n = 15), with 0.43% P in their feed; and Group 2 (G2, n = 15) with 0.65% P. The diets consisting of 10% Coast-cross hay and 90% of a concentrate of soybean meal, wheat, and crushed corn were provided for 90 consecutive days, with water ad libitum. The time points (M) of blood and urine collection were determined as M0, immediately before the beginning of the diet, and at 15-day intervals: M1, M2, M3, M4, M5, and M6. Phosphorous-rich diets favored the appearance of triple phosphate crystals in both groups, causing calculogenesis in more than one third of the animals (11/30), emphasizing the relevance of conducting laboratory tests to aid in urolithiasis diagnosis. In addition, FE revealed an increased renal excretion of excess minerals in the diet, and therefore a greater predisposition for stone formation in relation to nutritional management.

A urolitíase obstrutiva é frequente em ovinos confinados, sendo o manejo nutricional um dos fatores predispo-nentes mais importantes à formação dos cálculos. O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito da alimentação, com diferentes concentrações de fósforo (P), sobre a urinálise, ureia e creatinina séricas, concentração de cálcio (Ca), P e magnésio (Mg) séri-cos e urinários, bem como estabelecer a excreção fracionada (EF) desses elementos em cordeiros confinados. Utilizaram-se 30 ovinos machos, não castrados, Santa Inês x Ile de France, com quatro meses de idade, que foram divididos em dois grupos de acordo com a dieta: Grupo 1 (G1, n = 15), com 0,43% de P; e Grupo 2 (G2, n = 15) com 0,65% de P. As dietas foram for-necidas por 90 dias consecutivos, com 10% de feno de Coast-cross; 90% de concentrado composto por farelo de soja, trigo e milho triturado; água ad libitum. Os momentos (M) de colheita de sangue e urina foram determinados como M0, imediata-mente antes do início da dieta, e em intervalos de 15 dias nos momentos M1, M2, M3, M4, M5, M6. As dietas ricas em fós-foro favoreceram o aparecimento de cristal fosfato triplo em ambos os grupos, o que provocou a calculogênese em um terço dos animais (11/30). Ressaltou-se a relevância da execução de exames laboratoriais para auxílio diagnóstico de urolitíase. Além disso, a EF comprovou a maior excreção renal dos minerais em excesso na dieta, que mostrou a maior predisposição para for-mação dos cálculos conforme o manejo nutricional.

Renal profile and urinary fractional excretion of calcium, phosphorus, and magnesium of lambs fed with different contents of phosphorus / Perfil renal e excreção fracionada urinária de cálcio, fósforo e magnésio de cordeiros alimentados com teores diferentes de fósforo

Obstructive urolithiasis is common in confined sheep, and a predominant factor predisposing animals to this condition is nutritional management. The objective of this study was to evaluate the effect of different concentrations of phosphorus (P) on urinalysis, serum urea and creatinine, and serum and urine concentrations of calcium (Ca), P, and magnesium (Mg), as well as to establish the fractional excretion (FE) of these elements in confined lambs. Thirty male Santa Inês x Ile de France sheep at four months of age were divided into two groups according to the diet: Group 1 (G1, n = 15), with 0.43% P in their feed; and Group 2 (G2, n = 15) with 0.65% P. The diets consisting of 10% Coast-cross hay and 90% of a concentrate of soybean meal, wheat, and crushed corn were provided for 90 consecutive days, with water ad libitum. The time points (M) of blood and urine collection were determined as M0, immediately before the beginning of the diet, and at 15-day intervals: M1, M2, M3, M4, M5, and M6. Phosphorous-rich diets favored the appearance of triple phosphate crystals in both groups, causing calculogenesis in more than one third of the animals (11/30), emphasizing the relevance of conducting laboratory tests to aid in urolithiasis diagnosis. In addition, FE revealed an increased renal excretion of excess minerals in the diet, and therefore a greater predisposition for stone formation in relation to nutritional management.(AU)

A urolitíase obstrutiva é frequente em ovinos confinados, sendo o manejo nutricional um dos fatores predispo-nentes mais importantes à formação dos cálculos. O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito da alimentação, com diferentes concentrações de fósforo (P), sobre a urinálise, ureia e creatinina séricas, concentração de cálcio (Ca), P e magnésio (Mg) séri-cos e urinários, bem como estabelecer a excreção fracionada (EF) desses elementos em cordeiros confinados. Utilizaram-se 30 ovinos machos, não castrados, Santa Inês x Ile de France, com quatro meses de idade, que foram divididos em dois grupos de acordo com a dieta: Grupo 1 (G1, n = 15), com 0,43% de P; e Grupo 2 (G2, n = 15) com 0,65% de P. As dietas foram for-necidas por 90 dias consecutivos, com 10% de feno de Coast-cross; 90% de concentrado composto por farelo de soja, trigo e milho triturado; água ad libitum. Os momentos (M) de colheita de sangue e urina foram determinados como M0, imediata-mente antes do início da dieta, e em intervalos de 15 dias nos momentos M1, M2, M3, M4, M5, M6. As dietas ricas em fós-foro favoreceram o aparecimento de cristal fosfato triplo em ambos os grupos, o que provocou a calculogênese em um terço dos animais (11/30). Ressaltou-se a relevância da execução de exames laboratoriais para auxílio diagnóstico de urolitíase. Além disso, a EF comprovou a maior excreção renal dos minerais em excesso na dieta, que mostrou a maior predisposição para for-mação dos cálculos conforme o manejo nutricional.(AU)

Fixed-time insemination with frozen semen in mares: is it suitable for poorly fertile stallions?

The purpose of the present study was to compare two protocols for equine frozen semen programs using either postovulation insemination or fixed-time insemination (FT), evaluating both pregnancy rates and intrauterine fluid (IUF) accumulation after artificial insemination with semen obtained from either highly or poorly fertile stallions. Six ejaculates from two stallions (n = 12) were processed. After thawing, semen samples were evaluated by computerized semen analysis. Fifteen mares (30 cycles) were inseminated with frozen semen from highly fertile stallion A, and 14 mares (28 cycles) were inseminated with frozen semen from poorly fertile stallion B. Ovulations were induced with 1 mg (intramuscular) of deslorelin acetate after the observation of a greater than 35 mm follicle and uterine edema. In postovulation insemination group, mares were inseminated once with 800 × 10(6) total sperm in a maximum 6-hour interval after ovulation. In FT group, mares were inseminated twice with 400 × 10(6) total sperm, 24 and 40 hours after induction. Mares were ultrasonographically examined for IUF accumulation 24 hours and for pregnancy diagnosis 14 days after the last insemination. Although IUF accumulation was more evident in mares inseminated once postovulation, pregnancy rates were similar for both protocols, regardless of the stallion, although a significant effect of the stallion was observed. These results indicated that FTs may be used for both highly and poorly fertile stallions as a practical tool to help spreading the use of frozen semen in equine reproduction programs.

Resposta inflamatória uterina após inseminação artificial em éguas resistentes e susceptíveis à endometrite / Uterine inflammatory response after artificial insemination in mares resistant and susceptible to endometritis / Respuesta inflamatoria del útero después de la inseminación artificial en yeguas resistentes y susceptibles a endometritis

A endometrite persistente pós-cobertura (EPPC) é a principal causa da redução de fertilidade em éguas. Tal desordem pode acarretar grande prejuízo econômico para os produtores, devido à possível queda na taxa de concepção dos animais, aumento do número de serviço por concepção e sobrevivência embrionária prejudicada. O objetivo deste trabalho foi verificar o estímulo do sêmen na resposta inflamatória uterina de éguas resistentes e susceptíveis à endometrite após inseminação artificial (IA). 8 éguas resistentes e 15 susceptíveis à EPPC foram selecionadas com base nos seus índices reprodutivos e exames ultrassonográficos e citológicos. A concentração de células polimorfonucleares (PMNs) na secreção uterina, citologia exfoliativa uterina e acúmulo de fluido uterino verificado no exame ultrassonográfico foram analisados nos dois grupos de animais (1) 24 horas antes da IA e (2) 24 horas após a IA com sêmen fresco. As células polimorfonucleares na secreção uterina foram quantificadas com o uso da câmara de Neubauer e a leitura das amostras de citologia foi realizada por microscopia óptica utilizando imersão, considerando a porcentagem de neutrófilos/100 células de forma aleatória. Os resultados demonstraram que houve uma resposta inflamatória mais intensa nas éguas susceptíveis quando comparadas às resistentes, pelo aumento do acúmulo de fluido uterino verificado no exame ultrassonográfico, aumento do número de células polimorfonucleares observadas na citologia exfoliativa endometrial e pelo aumento da concentração destas células no fluido uterino. Portanto, foi constatado que o sêmen estimula uma resposta inflamatória mais severa no ambiente uterino das éguas susceptíveis.

Post breeding endometritis (PBE) is the major cause of fertility reduction in mares. Such disorder can result in a great economic injury to producers due to the possible fall in the rate of conception, increase in the number of service per conception and impaired embryonic survival. The aim of this study was to verify semen's stimulus on inflammatory response in mares resistant and susceptible to PBE after artificial insemination (AI). 15 mares susceptible to PBE and 8 mares resistant to PBE were selected based on their reproductive index, ultrasonographic and cytological examination. The concentration of polymorphonuclear (PMNs) cells in the uterine secretion, exfoliative cytology of the uterus and uterine fluid accumulation observed by ultrasonography were analyzed in both group of animals (1) 24 hours before AI and (2) 24 hours after AI with fresh semen. PMNs in uterine secretion were quantified by the use of Neubauer chamber and the lecture of endometrial cytology samples were analyzed by optical microscopy using immersion, considering the percentage of neutrophils/100 cells in an alleatory form. The results showed that semen can stimulate a major inflammatory response inside the uterine environment in susceptible mares when compared to resistant mares, by increasing the amount of fluid inside the uterus verified by ultrasonographic exam, increase in PMN number observed in uterine cytology, and increase in concentration of PMN in uterine fluid. Therefore, it was found that semen stimulate a more severe inflammatory response inside the uterine environment of susceptible mares.

Endometritis después de la cobertura es la principal causa de disminución de la fertilidad en yeguas. Este trastorno puede causar una gran pérdida económica para los creadores debido a la posible disminución de la tasa de concepción de los animales, el aumento del número de servicios por concepción y supervivencia de los embriones afectada. El objetivo de este estudio fue evaluar el estímulo del semen en la respuesta inflamatoria uterina de yeguas resistentes y susceptibles a la endometritis depués de la inseminación artificial (IA). 8 yeguas resistentes y 15 susceptibles a endometritis fueron seleccionadas en base a sus índices reproductivos, exámenes de ultrasonido y citologicos. La concentración de las células polimorfonucleares (PMN) en la secreción uterina, citología exfoliativa y la acumulación de fluido uterino observado en el examen de ultrasonido uterino se analizaron en ambos grupos de animales (1) 24 horas antes de la IA, y (2) 24 horas después de la inseminación artificial (IA) con semen fresco. Las células polimorfonucleares en las secreciones uterinas se cuantificaron utilizando una cámara de Neubauer y la lectura de las muestras para citología se realizó por inmersión usando microscopía óptica, mientras que el porcentaje de células neutrófilos/100 al azar. Los resultados mostraron que había una respuesta inflamatoria más intensa en las yeguas susceptibles en comparación con las resistentes al aumentar la cantidad de fluido observado en ultrasonido uterino, incremento en el número de células polimorfonucleares observados en citología exfoliativa endometrial y aumento de la concentración de estas células en el fluido uterino. Por lo tanto, se encontró que el semen estimula una respuesta inflamatoria en el entorno uterino más grave en yeguas susceptibles.

Comparação de diferentes temperaturas de armazenamento de sêmen refrigerado de garanhões da raça Mangalarga Marchador e Quarto de Milha / Comparison of differences storage temperatures in cooling semen of Mangalarga Marchador and Quarter Horses stallions / Comparación de diferentes temperaturas de almacenamiento de semen refrigerado de caballos Mangalarga Marchador y Cuarto de Milla

Pesquisas têm sido realizadas com o objetivo de prolongar a longevidade espermática por meio da refrigeração ou criopreservação do sêmen equino e com isso melhorar as taxas de fertilidade. Muitas dessas pesquisas têm como objetivo desenvolver diluidores, aditivos, curvas e protocolos de refrigeração, assim como tempos e temperaturas de estocagem que garantam a motilidade e integridade do sêmen equino submetido à refrigeração e com isso índices de fertilidade melhores e menos variáveis. Nos últimos anos, houve um aumento considerável na utilização de sêmen equino refrigerado, principalmente devido à aceitação de grande parte das associações de criadores de cavalos. A raça Mangalarga Marchador, de origem nacional, tem se mostrado extremamente sensível ao processo de manipulação, refrigeração e transporte de sêmen. Como em outras espécies de produção, o sucesso da inseminação artificial nos equinos depende da manutenção da viabilidade e fertilidade do sêmen durante o armazenamento. Além disso, quanto maior o tempo ao qual se mantem o potencial fertilizante do sêmen refrigerado, maior flexibilidade terá o médico veterinário para coletar e enviar o sêmen aos haras em que as éguas se encontram, resultando num maior êxito da técnica. O presente experimento teve por objetivo comparar as raças Mangalarga Marchador (MM) e Quarto de Milha (QM) quanto à resistência à refrigeração em duas temperaturas de armazenamento de sêmen refrigerado (5°C e 15°C). Os resultados deste trabalho demonstraram que não houve diferença entre as temperaturas de armazenamento (5ºC e 15°C), mostrando que ambas são eficientes na manutenção da viabilidade espermática pelo período de 24 horas para ambas as raças estudadas. Além disso, foi observada uma característica espermática superior dos garanhões da raça Quarto de Milha quando comparada aos da raça Mangalarga Marchador, tanto nos parâmetros de velocidade espermática, avaliado pelo CASA, revelando uma maior sensibilidade dos animais da raça Mangalarga ao processo de refrigeração do sêmen.

Studies have been conducted in order to prolong sperm longevity using cooling or frozen-thawed equine semen and in that way improve fertility rates. Many of these studies have focused on developing extenders, additives, cooling curves and protocols, as well as storage times and temperatures to ensure the integrity and motility of equine semen exposed to cooling. Recent years have increased the use of cooled equine semen, mainly due to the acceptance of the horse breeders associations. The Brazilian breed called "Mangalarga Marchador" has proven to be extremely sensitive to the cooling semen. As in other species, the success of artificial insemination in horses depends on maintaining the viability and fertility of semen during storage. Moreover, the longer you keep the cooling semen fertilizing potential, more flexibility will have the veterinarian to collect and send the semen samples, resulting in higher technique success. The aim of this study was to compare breeds Mangalarga Marchador (MM) and Quarter Horses (QM) for resistance to cooling in two semen storage systems (5°C and 15°C). The results showed no difference between the storage temperatures (5°C and 15°C), showing that both are effective in maintaining sperm viability for a period of 24 hours for both breeds studied. In addition, we observed superior sperm characteristics for Quarter Horse stallions when compared to the Mangalarga Marchador, evaluated by CASA, revealing a higher sensitivity for the cooling process by Mangalarga Marchador stallions.

Últimamente, varios estudios se han realizado con el fin de prolongar la longevidad de los espermatozoides mediante refrigeración o criopreservación del semen equino y de esa manera mejorar las tasas de fecundidad. Muchos de estos estudios se han centrado en los diluyentes, aditivos, curvas de enfriamiento y protocolos, así como los tiempos y temperaturas de almacenamiento para garantizar la integridad y la motilidad del semen equino expuestos al enfriamiento. En los últimos años han aumentado el uso de semen refrigerado equino, principalmente debido a la aceptación de las asociaciones de criadores de caballos. La raza brasileña "Mangalarga Marchador" ha demostrado ser extremadamente sensible a la refrigeración del semen. Como en otras especies, el éxito de la inseminación artificial en los caballos depende del mantenimiento de la viabilidad y fertilidad del semen durante el almacenamiento. Por otra parte, cuanto más tiempo se mantenga el potencial fertilizante, más flexibilidad tendrá el veterinario para colectar y enviar las muestras de semen, lo que resulta en mejores resultados de la técnica. El objetivo de este estudio fue comparar las razas Mangalarga Marchador (MM) y Caballos Cuarto de Milla (CM) para la resistencia a la refrigeración en dos temperaturas de almacenamiento de semen (5°C y 15°C). Los resultados no mostraron diferencia entre las temperaturas de almacenamiento (5°C y 15°C), mostrando que ambos son efectivos en el mantenimiento de la viabilidad espermática por un período de 24 horas para ambas las razas estudiadas. Además, se observó características espermáticas superiores de los sementales Cuarto de Milla en comparación con los Mangalargas Marchadores, evaluada por CASA, indicando una mayor sensibilidad para el proceso de refrigeración para la raza Mangalarga Marchador.

A administração de hCG incrementa a incidência de ovulações duplas e múltiplas em éguas da raça Campolina apresentando folículos codominantes? / Does hCG administration increase the incidence of double and multiple ovulations in Campolina mares with co-dominant follicles?

A gonadotrofina coriônica humana (hCG) é rotineiramente empregada na indução de ovulação em éguas. A incidência de duplas ovulações é variável, sendo comum em determinadas raças brasileiras, como Brasileiro de Hipismo e Campolina. O objetivo deste trabalho foi avaliar se a administração de hCG em éguas da raça Campolina incrementa a incidência de ovulações duplas e múltiplas. Através de palpação retal e ultrassonografia, foram avaliados dois ciclos estrais de 104 éguas, divididas em dois grupos. À detecção de um ou mais folículos ³35 mm e edema endometrial grau 2, 2.500 IU de hCG (IV) eram administrados às éguas do grupo I. O grupo II serviu como controle. Os resultados obtidos foram analisados pelo Qui-quadrado. A incidência de ovulações duplas nos grupos I e II foi de, respectivamente, 32,7% (34/104) versus 30,8% (32/ 104). Ambos os grupos obtiveram incidência semelhante de ovulações triplas (1,9% - 2/104). Apenas uma ovulação quádrupla (1,0% - 1/104) foi detectada, no grupo controle. A incidência de duplas e múltiplas ovulações foi similar entre os grupos (p > 0,05). Pelo fato das éguas da raça Campolina apresentarem, fisiologicamente, considerável incidência de ovulações duplas e múltiplas, é possível que a administração de hCG não tenha influenciado estes padrões ovulatórios.(AU)

The human chorionic gonadotrophin (hCG) has been routinely used in the equine species to induce ovulations for more than four decades. The incidence of multiple ovulations in horses is variable, being double ovulations a common occurrence in some Brazilian breeds, such as Brasileiro de Hipismo and Campolina. The aim of this work was to evaluate the role of hCG administration to increase, in Campolina mares, the incidence of double and multiple ovulations, which are desirable in embryo transfer programs. One hundred and four (104) mares had their estrous cycles recorded through rectal palpation and ultrasonographic evaluation during the breeding season of 2003 - 2004, in a total of two hundred and eight (208) cycles (two cycles per mare). Animals were allocated in two groups, with fifty two (52) horses each. In Group I mares, once one or more = 35 mm follicles and grade 2 uterine edema were present, 2.500 IU of hCG were intravenously administered. The untreated mares in Group II served as control. The Chi-Square test was used to analyze obtained results. The incidence of double ovulations in groups I and II was, respectively, of 32.7% (34/104) versus 30.8% (32/104). The incidence of triple ovulations was low in both groups, of 1.9% (2/104). Only once in the control group (1.0% - 1/104) was a quadruple ovulation detected. There was no difference in the incidence of double and multiple ovulations between both groups (p > 0.05). Possibly, hCG administration did not influence ovulation patterns in this work due to the fact that Campolina breed mares physiologically show a considerable incidence of double and multiple ovulations.(AU)

A administração de hCG incrementa a incidência de ovulações duplas e múltiplas em éguas da raça Campolina apresentando folículos codominantes? / Does hCG administration increase the incidence of double and multiple ovulations in Campolina mares with co-dominant follicles?

A gonadotrofina coriônica humana (hCG) é rotineiramente empregada na indução de ovulação em éguas. A incidência de duplas ovulações é variável, sendo comum em determinadas raças brasileiras, como Brasileiro de Hipismo e Campolina. O objetivo deste trabalho foi avaliar se a administração de hCG em éguas da raça Campolina incrementa a incidência de ovulações duplas e múltiplas. Através de palpação retal e ultrassonografia, foram avaliados dois ciclos estrais de 104 éguas, divididas em dois grupos. À detecção de um ou mais folículos ³35 mm e edema endometrial grau 2, 2.500 IU de hCG (IV) eram administrados às éguas do grupo I. O grupo II serviu como controle. Os resultados obtidos foram analisados pelo Qui-quadrado. A incidência de ovulações duplas nos grupos I e II foi de, respectivamente, 32,7% (34/104) versus 30,8% (32/ 104). Ambos os grupos obtiveram incidência semelhante de ovulações triplas (1,9% - 2/104). Apenas uma ovulação quádrupla (1,0% - 1/104) foi detectada, no grupo controle. A incidência de duplas e múltiplas ovulações foi similar entre os grupos (p > 0,05). Pelo fato das éguas da raça Campolina apresentarem, fisiologicamente, considerável incidência de ovulações duplas e múltiplas, é possível que a administração de hCG não tenha influenciado estes padrões ovulatórios.

The human chorionic gonadotrophin (hCG) has been routinely used in the equine species to induce ovulations for more than four decades. The incidence of multiple ovulations in horses is variable, being double ovulations a common occurrence in some Brazilian breeds, such as Brasileiro de Hipismo and Campolina. The aim of this work was to evaluate the role of hCG administration to increase, in Campolina mares, the incidence of double and multiple ovulations, which are desirable in embryo transfer programs. One hundred and four (104) mares had their estrous cycles recorded through rectal palpation and ultrasonographic evaluation during the breeding season of 2003 - 2004, in a total of two hundred and eight (208) cycles (two cycles per mare). Animals were allocated in two groups, with fifty two (52) horses each. In Group I mares, once one or more = 35 mm follicles and grade 2 uterine edema were present, 2.500 IU of hCG were intravenously administered. The untreated mares in Group II served as control. The Chi-Square test was used to analyze obtained results. The incidence of double ovulations in groups I and II was, respectively, of 32.7% (34/104) versus 30.8% (32/104). The incidence of triple ovulations was low in both groups, of 1.9% (2/104). Only once in the control group (1.0% - 1/104) was a quadruple ovulation detected. There was no difference in the incidence of double and multiple ovulations between both groups (p > 0.05). Possibly, hCG administration did not influence ovulation patterns in this work due to the fact that Campolina breed mares physiologically show a considerable incidence of double and multiple ovulations.

Efeito dos anti-inflamatórios esteróides na reação inflamatória e na fertilidade de éguas normais e susceptíveis à endometrite persistente após inseminação artificial

O objetivo deste estudo foi verificar a influência da adição de antiinflamatórios esteróides (AIES) ao diluidor seminal na motilidade e funcionalidade espermática e a eficiência da dexametasona na imunomodulação da resposta inflamatória após a cobertura. A dexametasona foi selecionada entre quinze diferentes AIES. Foram analisadas a motilidade (CASA), a integridade da membrana plasmática e acrossomal e o potencial da membrana mitocondrial dos espermatozóides nos momentos zero, 30, 60 e 120 minutos após a diluição. A intensidade da reação inflamatória provocada pelo sêmen foi mensurada em éguas resistentes e susceptíveis à endometrite persistente pós cobertura utilizando exame ultrassonográfico e citologia exfoliativa do útero, concentração de neutrófilos e de óxido nítrico do fluído uterino e taxa de recuperação embrionária. Dentre os AIES testados a dexametasona foi a que apresentou menor efeito deletério sobre as caracteísticas de motilidade e na morfofuncionalidade espermática. Quinze éguas resistentes e 15 susceptíveis à endometrite persistente após cobertura foram submetidas ao tratamento com dexametasona sistêmica e intra uterina adicionada ao diluidor de sêmen. As éguas susceptíveis apresentaram resposta inflamatória mais intensa durante as primeiras 8 horas após a inseminação artificial (p<0,05), porém, após 24 horas as concentrações de óxido nítrico foram semelhantes entre as éguas resistentes e susceptíveis, apesar das éguas susceptíveis manterem a reação inflamatória mais intensa até esse momento (p<0,05). As taxas de recuperação embrionária foram maiores para as éguas resistentes do que para as susceptíveis (p<0,05). Os tratamentos com dexametasona não se mostraram eficazes na imunomodulação da resposta inflamatória induzida pela cobertura

The objective of this study was to assess the influence of the addition of anti-inflammatory steroids (AIS) in the seminal extender in sperm viability and functionality, and efficiency of dexamethasone on immune modulation of inflammatory response after mating. Dexamethasone was selected from fifteen different AIS. Motility, membrane and acrosomal integrity and mitochondrial membrane potential of spermatozoa in moments 0, 30, 60 e 120 minutes after dilution were analyzed. The intensity of the inflammatory reaction caused by sperm was measured in resistant and susceptible mares using ultrasound examination and exfoliative cytology of the uterus, concentration of neutrophils and nitric oxide in uterine fluid and rate of embryo recovery. Among the AIS tested dexamethasone maintained the sperm motility parameters and did not show any deleterious effects on sperm structure and function (p>0.05). Fifteen mares resistant and 15 susceptible to post-breeding endometritis were subjected to treatment with dexamethasone systemic and intra uterine added to the semen extender. Susceptible mares showed more severe inflammatory response during the first 8 hours after artificial insemination (p<0.05), while 24 hours after mating the concentrations of nitric oxide were similar between resistant and susceptible mares, despite the fact that susceptible mares presented inflammatory reaction more intensive in this moment (p<0.05). The embryo recovery rates were higher for mares resistant compared to susceptible (p<0.05). Treatments with dexamethasone were not effective in the immunomodulation of the inflammatory response induced by mating

Estudo das catelicidinas no plasma seminal de garanhões e das interleucinas na resposta inflamatória pós-iseminação artificial em éguas

A expressão das interleucinas no útero e das catelicidinas no plasma seminal podem ser responsáveis pela magnitude e persistência da resposta inflamatória uterina. Os objetivos desse estudo foram verificar a presença das catelicidinas no plasma seminal e caracterizar a resposta imune uterina pela expressão de interleucinas inflamatórias. O plasma seminal foi obtido por coleta de sêmen de 15 garanhões e submetido ao SDSPAGE e DOT-blotting. As éguas foram submetidas a um ciclo estral sem desafio uterino (T1), com infusão de plasma seminal (T2) e inseminação artificial (T3). Exame ultrassonográfico, citologia exfoliativa uterina e colheita de células para a expressão do RNAm das interleucinas por qPCR foram realizados durante 3 ciclos consecutivos aleatoriamente, 24 (M1), 48 (M2) e 72 horas (M3) após a indução da ovulação. A expressão do RNAm no endométrio das éguas resistentes e susceptíveis foi verificada para as interleucinas IL-1?, IL-6, IL-8, IL-10 e TNF-?. A concentração total de proteínas no plasma seminal dos garanhões variou de 6,3 a 25,6 mg/mL. O SDS-PAGE revelou a existência de 3 bandas protéicas dentro do intervalo de peso molecular previamente citado na literatura para as catelicidinas equinas. Os garanhões avaliados mostraram quantidades de eCATH1 < 339,6ng, eCATH2 < 141,3ng e eCATH3 < 283,4ng. No momento M2 não foi possível diferenciar as éguas resistentes das susceptíveis pela citologia ou ultrassonografia independente da infusão com plasma seminal, inseminação artificial ou da ovulação, mas quando há presença de espermatozoides no útero a resposta inflamatória é mais intensa. Durante o momento M3, as éguas susceptíveis apresentaram maior volume de fluido uterino acumulado em todos os tratamentos com menor capacidade de limpeza uterina. Foi verificada maior expressão do RNAm das interleucinas pró-inflamatórias nas éguas susceptíveis e a expressão do RNAm da interleucina-10 é

In the equine species, uterine interleukin expression and seminal plasma cathelicidins can modulate the magnitude and persistence of the post-breeding inflammatory reaction. The objectives were to verify the presence of cathelicidins in the stallion seminal plasma and characterize the uterine immune response by pro and anti-inflammatory interleukins. Seminal plasma was obtained by semen collection of 15 stallions and submitted to SDS-PAGE and DOT-blotting tests. Three experiments were designed to study interleukin expression during baseline (T1), after seminal plasma infusion (T2) and artificial insemination (T3). Endometrial cytology and cell collection as well as ultrassonographic evaluations were performed to access interleukin mRNA through qPCR during three randomly assigned consecutive estrous cycles, 24 (M1), 48 (M2) and 72 hours (M3) after an ovulation was induced. Endometrial mRNA expression in mares resistant and susceptible to persistent post-breeding endometritis was identified for the following pro-inflammatory cytokines: IL-1?, IL-6, IL-8, IL-10 e TNF-?. Total seminal plasma protein concentrations ranged from 6.3 to 25.6 mg/mL. SDS-PAGE analysis identified the existence of three proteic bands with molecular weight similar to what was previously reported for equine cathelicidins. Evaluated stallions showed values < 339.6 ng for eCATH1, < 141.3 ng for eCATH2 and < 283.4 for eCATH3. At M2, resistant and susceptible mares could not be separated through cytology or ultrassonography, even though the presence of sperm strongly stimulates uterine inflammatory reaction. At M3, susceptible mares showed higher uterine fluid accumulation and lower uterine clearance. Pró-inflammatory mRNA expression was higher in susceptible mares and interleukin-10 mRNA expression was similar between resistant and susceptible mares