Phenotypic, molecular and genomic characterization of Actinobaculum suis isolated from swine in Brazil.

Urinary tract infections (UTI) are considered one of the most important diseases of sows due to its close relationship with reproductive problems such as reduced litter size, increase in the rate of return to estrous, vulvar discharge, abortion, mastitis and anestrus. Actinobaculum suis is one of the main agents involved in porcine urinary tract infection and is responsible for the most severe and fatal cases in sows. In the present report, 23 A. suis strains isolated from a sow and boars in Brazil were identified by PCR and further characterized by broth microdilution, molecular typing by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE), single-enzyme amplified fragment length polymorphism (SE-AFLP), and whole-genome sequencing. All strains were sensitive to ceftiofur, linezolid, nitrofurantoin, quinupristin-dalfopristin and vancomycin. Ciprofloxacin, daptomycin, lincomycin, erythromycin and tylosin resistance was observed in 100% of tested strains. Tetracycline and tigecycline also presented high resistance rates (87% and 30.4%, respectively). PFGE with eight different restriction enzymes and three programs did not enable strain characterization; however, all strains were typed by SE-AFLP that clustered strains according to their origin, thus proving an effective tool for A. suis genotyping. Whole-genome sequencing and comparative analysis enabled species differentiation from closely related genus. This is the first report of genomic characterization of A. suis.

Genotypic Characterization of Arcobacter spp. Isolated from Chicken Meat in Brazil.

Arcobacter butzleri, Arcobacter cryaerophilus, and Arcobacter skirrowii are Gram-negative pathogenic microorganisms that cause watery diarrhea and septicemia in humans. The aims of this study were to detect the presence of Arcobacter spp. in chicken meat from butcher shops in São Paulo (Brazil) and to verify their virulence genes and genotypic profiles. A total of 300 chicken cuts were analyzed. The results show the presence of Arcobacter spp. in 18.3% of samples, which were identified as A. butzleri (63.6%) and A. cryaerophilus (36.3%). All strains were positive for the virulence genes ciaB and mviN, followed by cj1349 (98%), pldA (94.4%), cadF (72.7%), tlyA (92.7%), hecA (49%), irgA (47.2%), and hecB (34.5%). These strains were subjected to single-enzyme amplified fragment length polymorphism. Nineteen genotypic profiles were obtained for A. butzleri, and 17 for A. cryaerophilus. These results confirm the presence of virulent strains of A. butzleri and A. cryaerophilus in the chicken meat in Brazil. The presence of potentially virulent strains of Arcobacter highlights a possible public health risk, particularly with respect to ingestion of undercooked foods and cross-contamination from uncooked foods during food preparation and contaminated utensils.

Actinobaculum suis detection using polymerase chain reaction.

Actinobaculum suis is an important agent related to urinary infection in swine females. Due to its fastidious growth characteristics, the isolation of this anaerobic bacterium is difficult, thus impairing the estimation of its prevalence. The purpose of this study was to develop and test a polymerase chain reaction (PCR) for the detection and identification of A. suis and then compare these results with traditional isolation methods. Bacterial isolation and PCR were performed on one hundred and ninety-two urine samples from sows and forty-five preputial swabs from boars. The results indicate that this PCR was specific for A. suis, presenting a detection limit between 1.0 × 10(1) CFU/mL and 1.0 × 10(2) CFU/mL. A. suis frequencies, as measured by PCR, were 8.9% (17/192) in sow urine samples and 82.2% (37/45) in preputial swabs. Assessed using conventional culturing techniques, none of the urine samples were positive for A. suis; however, A. suis was detected in 31.1% (14/45) of the swabs. This PCR technique was shown to be an efficient method for the detection of A. suis in urine and preputial swabs.

Antimicrobial Resistance Profile of Staphylococcus hyicus Strains Isolated from Brazilian Swine Herds.

Staphylococcus hyicus is the causative agent of porcine exudative epidermitis. This disorder affects animals in all producing countries and presents a widespread occurrence in Brazil. This study evaluated strains from a historical collection in order to detect the presence of exfoliative-toxin-encoding genes (SHETB, ExhA, ExhB, ExhC, ExhD), characterize the strains using PFGE, and determine their respective antimicrobial resistance profiles. The results obtained from the evaluation of 77 strains from 1982 to 1987 and 103 strains from 2012 reveal a significant change in resistance profiles between the two periods, especially regarding the antimicrobial classes of fluoroquinolones, amphenicols, lincosamides, and pleuromutilins. The levels of multidrug resistance observed in 2012 were significantly higher than those detected in the 1980s. It was not possible to correlate the resistance profiles and presence of genes encoding toxins with the groups obtained via PFGE. Only 10.5% of the strains were negative for exfoliative toxins, and different combinations of toxins genes were identified. The changes observed in the resistance pattern of this bacterial species over the 30-year period analyzed indicate that S. hyicus could be a useful indicator in resistance monitoring programs in swine production. In a country with animal protein production such as Brazil, the results of this study reinforce the need to establish consistent monitoring programs of antimicrobial resistance in animals, as already implemented in various countries of the world.

Identificação de Klebsiella spp. em fezes de psitacídeos cativos

No Brasil são encontradas mais de 80 espécies de aves da família Psittacidae, incluindo papagaios, araras e periquitos. A manutenção destas aves em zoológicos contribui para a conservação das espécies, mas o ambiente de cativeiro pode favorecer a colonização intestinal por enterobactérias. O objetivo deste trabalho foi identificar a presença de Klebsiella spp. nas fezes de psitacídeos cativos. Foram analisadas 34 amostras de fezes de aves alojadas em um zoológico do estado de São Paulo em maio de 2017. As amostras foram coletadas com auxílio de suabe estéril, no mês de maio de 2017 e submetidas ao cultivo bacteriológico, utilizando-se ágar MacConkey com incubação a 37oC por 24 horas. Foram identificadas 11 (32,35%) amostras positivas para Klebsiella spp., incluindo as espécies: K. pneumoniae e K. oxytoca. Os resultados demonstraram a presença de aves colonizadas por Klebsiella spp. Novos estudos são necessários para determinação da patogenicidade destas estirpes, perfil de resistência antimicrobiana e riscos de saúde animal, uma vez que as enterobactérias não são componentes da microbiota de psitacídeos saudáveis.(AU)

More than 80 species of birds belonged to the family Psittacidae in Brazil, including parrots, macaws and parakeets. The maintenance of these birds in Zoos may help the conservation of the species, but the captivity can favor intestinal colonization by enterobacteria. The aim of this study was to identify the presence of Klebsiella spp. in the fecal samples of captive parrots. Thirty -four fecal samples of psittacine birds from a Zoo of São Paulo state were analyzed. The samples were collected with a sterile swab during May 2017, and subjected to bacteriological culture on MacConkey agar, with incubation at 37oC for 24 hours. The results showed that 11 (32.35%) were positive for Klebsiella spp., with identification of the species: K. pneumoniae and K. oxytoca. This study showed the presence of birds colonized by Klebsiella spp. Further studies are required to determine the pathogenicity, the antimicrobial resistance profile and animal health risks, since enterobacteria do not belong to microbiota of psittacine birds.(AU)

Identificação de Klebsiella spp. em fezes de psitacídeos cativos

No Brasil são encontradas mais de 80 espécies de aves da família Psittacidae, incluindo papagaios, araras e periquitos. A manutenção destas aves em zoológicos contribui para a conservação das espécies, mas o ambiente de cativeiro pode favorecer a colonização intestinal por enterobactérias. O objetivo deste trabalho foi identificar a presença de Klebsiella spp. nas fezes de psitacídeos cativos. Foram analisadas 34 amostras de fezes de aves alojadas em um zoológico do estado de São Paulo em maio de 2017. As amostras foram coletadas com auxílio de suabe estéril, no mês de maio de 2017 e submetidas ao cultivo bacteriológico, utilizando-se ágar MacConkey com incubação a 37oC por 24 horas. Foram identificadas 11 (32,35%) amostras positivas para Klebsiella spp., incluindo as espécies: K. pneumoniae e K. oxytoca. Os resultados demonstraram a presença de aves colonizadas por Klebsiella spp. Novos estudos são necessários para determinação da patogenicidade destas estirpes, perfil de resistência antimicrobiana e riscos de saúde animal, uma vez que as enterobactérias não são componentes da microbiota de psitacídeos saudáveis.

More than 80 species of birds belonged to the family Psittacidae in Brazil, including parrots, macaws and parakeets. The maintenance of these birds in Zoos may help the conservation of the species, but the captivity can favor intestinal colonization by enterobacteria. The aim of this study was to identify the presence of Klebsiella spp. in the fecal samples of captive parrots. Thirty -four fecal samples of psittacine birds from a Zoo of São Paulo state were analyzed. The samples were collected with a sterile swab during May 2017, and subjected to bacteriological culture on MacConkey agar, with incubation at 37oC for 24 hours. The results showed that 11 (32.35%) were positive for Klebsiella spp., with identification of the species: K. pneumoniae and K. oxytoca. This study showed the presence of birds colonized by Klebsiella spp. Further studies are required to determine the pathogenicity, the antimicrobial resistance profile and animal health risks, since enterobacteria do not belong to microbiota of psittacine birds.

Pesquisa de bactérias gram negativas em papagaio do congo (Psittacus erithacus) mantidos em criatório comercial / Research for gram-negative bacteria in congo's parrot (Psittacus erithacus) held in commercial breeding

A microbiota intestinal de psitacídeos é constituida principalmente por bactérias Gram positivas e tem menor prevalência de Gram negativas. Embora existam poucos estudos descrevendo a microbiota destas aves, uma série de agentes bacterianos com potencial zoonótico pode ser transmitida das aves para os humanos. O objetivo deste trabalho foi pesquisar a presença de bactérias Gram negativas em um criadouro de papagaios do congo (Psittacus erithacus). Foram coletadas e analisadas amostras de fezes e de coana de 24 animais. Os resultados obtidos demonstraram a presença de bactérias Gram negativas nas fezes (45,8%) e na coana (62,5%). Foi isolado um total de 26 colônias bacterianas, com predomínio de agentes da família Enterobacteriaceae (21/26). As espécies encontradas foram Escherichia coli, Enterobacter asburiae, Klebsiella oxytoca, Citrobacter freundii, Citrobacter amolonaticus, Enterobacter cloacae, Providencia alcalifaciens, Providencia rettgeri, Citobacter koseri, Citrobacter braakii, Pseudomonas mendocina, Alcaligenes faecalis e Aeromonas caviae. Os dados deste trabalho revelaram uma elevada frequência de bactérias Gram negativas na microbiota destas aves. Estudos futuros serão realizados para avaliar a virulência e a resistência antimicrobiana, determinando o impacto potencial da presença destes agentes para a saúde dos animais e os riscos zoonóticos.(AU)

The intestinal microbiota of parrots consists mainly by Gram positive bacteria and has a lower prevalence of Gram negative. Although there are few studies describing the microbiota of these birds, many of these bacteria have a zoonotic potential and can be transmitted from birds to humans. The aim of this study was to investigate the presence of Gram negative in congo parrots (Psittacus erithacus). Fecal and coana samples collected from 24 birds were analyzed. The results showed the presence of Gram negative bacteria in feces (45.8%) and coana (62.5%). A total of 26 strains were isolated, with predominance of members of the Enterobacteriaceae family (21/26). The species identified were Escherichia coli, Enterobacter asburiae, Klebsiella oxytoca, Citrobacter freundii, Citrobacter amolonaticus, Enterobacter cloacae, Providencia alcalifaciens, Providencia rettgeri, Citobacter koseri, Citrobacter braakii, Pseudomonas mendocina, Alcaligenes faecalis and Aeromonas caviae. The data of this study revealed a high frequency of Gram negative bacteria in the microbiota of these birds. Future studies will be conducted to assess virulence and antimicrobial resistance profile, looking for the potential impact of these agents over animal health and zoonotic risks.(AU)

Isolamento e identificação de Pasteurella multocida e Bordetella spp. em coelhos (Oryctolagus cuniculus) / Isolation and identification of Pasteurella multocida and Bordetella spp. in rabbits (Oryctolagus cuniculus)

As doenças respiratórias representam uma das principais causas de morbidade e mortalidade em coelhos. A pasteurelose é a doença bacteriana de maior impacto na cunicultura brasileira. Infecções mistas por Pasteurella multocida e Bordetella spp. resultam em um quadro clínico grave, com descarte de matrizes e elevado prejuízo econômico. O objetivo desse trabalho foi pesquisar a presença de Pasteurella multocida e Bordetella spp. em uma granja de coelhos comerciais com histórico de doença respiratória crônica. Foram avaliados 34 animais doentes. Na cultura bacteriológica foram identificados 6 animais positivos para Pasteurella multocida. e 3 positivos para Bordetella spp. Estes achados confirmam a presença destes agentes na granja e apontam a necessidade de adoção de medidas sanitárias para controle da infecção.(AU)

Respiratory diseases represent a major cause of morbidity and mortality in rabbits. Pasteurellosis is the most important bacterial disease on Brazilian cuniculture flocks. The infection associated by P. multocida and Bordetella spp. results in a severe clinical picture, and becomes responsible for waste matrices and high economic damage. The aim of this study was to search the presence of Pasteurella multocida and Bordetella spp in a commercial farm of rabbits, with a history of chronic respiratory disease. Thirty-four sick animals were investigated. The results of bacteriological tests showed six animals positive for Pasteurella multocida and 3 positive for Bordetella spp. These results confirm the presence of both pathogens and highlight the need of sanitary management for infection control.(AU)

Isolamento e identificação de Pasteurella multocida e Bordetella spp. em coelhos (Oryctolagus cuniculus) / Isolation and identification of Pasteurella multocida and Bordetella spp. in rabbits (Oryctolagus cuniculus)

As doenças respiratórias representam uma das principais causas de morbidade e mortalidade em coelhos. A pasteurelose é a doença bacteriana de maior impacto na cunicultura brasileira. Infecções mistas por Pasteurella multocida e Bordetella spp. resultam em um quadro clínico grave, com descarte de matrizes e elevado prejuízo econômico. O objetivo desse trabalho foi pesquisar a presença de Pasteurella multocida e Bordetella spp. em uma granja de coelhos comerciais com histórico de doença respiratória crônica. Foram avaliados 34 animais doentes. Na cultura bacteriológica foram identificados 6 animais positivos para Pasteurella multocida. e 3 positivos para Bordetella spp. Estes achados confirmam a presença destes agentes na granja e apontam a necessidade de adoção de medidas sanitárias para controle da infecção.

Respiratory diseases represent a major cause of morbidity and mortality in rabbits. Pasteurellosis is the most important bacterial disease on Brazilian cuniculture flocks. The infection associated by P. multocida and Bordetella spp. results in a severe clinical picture, and becomes responsible for waste matrices and high economic damage. The aim of this study was to search the presence of Pasteurella multocida and Bordetella spp in a commercial farm of rabbits, with a history of chronic respiratory disease. Thirty-four sick animals were investigated. The results of bacteriological tests showed six animals positive for Pasteurella multocida and 3 positive for Bordetella spp. These results confirm the presence of both pathogens and highlight the need of sanitary management for infection control.

Pesquisa de bactérias gram negativas em papagaio do congo (Psittacus erithacus) mantidos em criatório comercial / Research for gram-negative bacteria in congo's parrot (Psittacus erithacus) held in commercial breeding

A microbiota intestinal de psitacídeos é constituida principalmente por bactérias Gram positivas e tem menor prevalência de Gram negativas. Embora existam poucos estudos descrevendo a microbiota destas aves, uma série de agentes bacterianos com potencial zoonótico pode ser transmitida das aves para os humanos. O objetivo deste trabalho foi pesquisar a presença de bactérias Gram negativas em um criadouro de papagaios do congo (Psittacus erithacus). Foram coletadas e analisadas amostras de fezes e de coana de 24 animais. Os resultados obtidos demonstraram a presença de bactérias Gram negativas nas fezes (45,8%) e na coana (62,5%). Foi isolado um total de 26 colônias bacterianas, com predomínio de agentes da família Enterobacteriaceae (21/26). As espécies encontradas foram Escherichia coli, Enterobacter asburiae, Klebsiella oxytoca, Citrobacter freundii, Citrobacter amolonaticus, Enterobacter cloacae, Providencia alcalifaciens, Providencia rettgeri, Citobacter koseri, Citrobacter braakii, Pseudomonas mendocina, Alcaligenes faecalis e Aeromonas caviae. Os dados deste trabalho revelaram uma elevada frequência de bactérias Gram negativas na microbiota destas aves. Estudos futuros serão realizados para avaliar a virulência e a resistência antimicrobiana, determinando o impacto potencial da presença destes agentes para a saúde dos animais e os riscos zoonóticos.

The intestinal microbiota of parrots consists mainly by Gram positive bacteria and has a lower prevalence of Gram negative. Although there are few studies describing the microbiota of these birds, many of these bacteria have a zoonotic potential and can be transmitted from birds to humans. The aim of this study was to investigate the presence of Gram negative in congo parrots (Psittacus erithacus). Fecal and coana samples collected from 24 birds were analyzed. The results showed the presence of Gram negative bacteria in feces (45.8%) and coana (62.5%). A total of 26 strains were isolated, with predominance of members of the Enterobacteriaceae family (21/26). The species identified were Escherichia coli, Enterobacter asburiae, Klebsiella oxytoca, Citrobacter freundii, Citrobacter amolonaticus, Enterobacter cloacae, Providencia alcalifaciens, Providencia rettgeri, Citobacter koseri, Citrobacter braakii, Pseudomonas mendocina, Alcaligenes faecalis and Aeromonas caviae. The data of this study revealed a high frequency of Gram negative bacteria in the microbiota of these birds. Future studies will be conducted to assess virulence and antimicrobial resistance profile, looking for the potential impact of these agents over animal health and zoonotic risks.

A survey on gram-negative bacteria in saffron finches (Sicalis flaveola) from illegal wildlife tradein Brazil / Pesquisa de bactérias gram-negativas em canários-da-terra (Sicalis flaveola) resgatados do tráfico ilegal de aves no Brasil

Passerines such as canaries or finches are the most unlawfully captured species that are sent to wildlife centers in São Paulo, Brazil. Captured birds may have infection by opportunistic bacteria in stressful situations. This fact becomes relevant when seized passerine are reintroduced. The aim of this study was to evaluate the health state of finches from illegal wildlife trade using microbiological approaches. Microbiological samples were collected by cloacal and tracheal swabs of 100 birds, captured during 2012 and 2013. The results indicate high frequency of gram-negative bacteria in feces and oropharynx, especially from the Enterobacteriaceae family (97.5%). The most frequent genera were Escherichia coli (46.5%) and Klebsiella pneumoniae (10.4%). Enterobacter cloacae, Serratia liquefaciens, Serratia spp. Klebsiella oxytoca and Citrobacter freundii were isolated with lower frequency from asymptomatic birds. The presence of enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) and Shiga toxinproducing strain (STEC) confirm the zoonotic risks and public health concern.(AU)

No Estado de São Paulo, Brasil, os pássaros como os canários-da-terra têm sido uma das espécies mais frequentemente resgatadas do tráfico ilegal e enviadas aos centros de vida selvagem. Em situações de estresse estas aves podem ser acometidas por infecções causadas por bactérias oportunistas. Este fato é de grande importância quando é planejada da reintrodução das aves na natureza. O presente trabalho foi delineado para avaliar o estado de saúde de canários-da-terra resgatados do tráfico ilegal. Foram colhidas soabes da traqueia e da cloaca de 100 aves resgatadas durante os anos de 2012 e 2013. Os resultados obtidos revelaram alta frequência de bactérias gram-negativas nas fezes e no orofaringe dos animais, com maior frequência para os membros da família Enterobacteriaceae (97,5%). Os gêneros mais frequentes foram Escherichia coli (46,55) e Klebsiella pneumoniae (10,4%). Outros microorganismos incluindo Enterobacter cloacae, Serratia liquefaciens, Serratia spp, Klebsiella oxytoca e Citrobacter freundii também foram isolados em menor frequencia de aves assintomáticas. A presença de estirpes de Escherichia coli enteropagênicas (EPEC) e as produtoras da toxina de Shiga confirmam o risco de zoonose e a importância para saúde pública deste tipo de ave.(AU)

A survey on gram-negative bacteria in saffron finches (Sicalis flaveola) from illegal wildlife trade in Brazil / Pesquisa de bactérias gram-negativas em canários-da-terra (Sicalis flaveola) resgatados do tráfico ilegal de aves no Brasil

Passerines such as canaries or finches are the most unlawfully captured species that are sent to wildlife centers in São Paulo, Brazil. Captured birds may have infection by opportunistic bacteria in stressful situations. This fact becomes relevant when seized passerine are reintroduced. The aim of this study was to evaluate the health state of finches from illegal wildlife trade using microbiological approaches. Microbiological samples were collected by cloacal and tracheal swabs of 100 birds, captured during 2012 and 2013. The results indicate high frequency of gram-negative bacteria in feces and oropharynx, especially from the Enterobacteriaceae family (97.5%). The most frequent genera were Escherichia coli (46.5%) and Klebsiella pneumoniae(10.4%). Enterobacter cloacae, Serratia liquefaciens, Serratia spp. Klebsiella oxytoca and Citrobacter freundii were isolated with lower frequency from asymptomatic birds. The presence of enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) and Shiga toxin-producing strain (STEC) confirm the zoonotic risks and public health concern.(AU)

No Estado de São Paulo, Brasil, os pássaros como os canários-da-terra têm sido uma das espécies mais frequentemente resgatadas do tráfico ilegal e enviadas aos centros de vida selvagem. Em situações de estresse estas aves podem ser acometidas por infecções causadas por bactérias oportunistas. Este fato é de grande importância quando é planejada da reintrodução das aves na natureza. O presente trabalho foi delineado para avaliar o estado de saúde de canários-da-terra resgatados do tráfico ilegal. Foram colhidas soabes da traqueia e da cloaca de 100 aves resgatadas durante os anos de 2012 e 2013. Os resultados obtidos revelaram alta frequência de bactérias gram-negativas nas fezes e no orofaringe dos animais, com maior frequência para os membros da família Enterobacteriaceae (97,5%). O s gêneros mais frequentes foram Escherichia coli (46,55) e Klebsiella pneumoniae (10,4%). Outros microorganismos incluindo Enterobacter cloacae, Serratia liquefaciens, Serratia spp, Klebsiella oxytoca e Citrobacter freundii também foram isolados em menor frequencia de aves assintomáticas. A presença de estirpes de Escherichia coli enteropagênicas (EPEC) e as produtoras da toxina de Shiga confirmam o risco de zoonose e a importância para saúde pública deste tipo de ave. (AU)

Caracterização genotípica e fenotípica de cepas de Escherichia coli associadas à doença do edema em suínos / Genotypic and phenotypic characterization of E. coli associated to edema disease in swine

A doença do edema afeta os leitões desmamados e é causada por cepas de Escherichia coli adaptadas ao hospedeiro e produtoras da toxina Stx2e. A doença do edema é caracterizada por edema de pálpebras, ataxia, pedalagem, dificuldade locomotora, e morte súbita. No presente estudo foram avaliadas 158 cepas de E. coli positivas para presença do gene codificador da toxina Stx2e isoladas de 62 animais provenientes de 13 granjas localizadas nos Estados do Rio Grande do Sul, Santa Catarina, Mato Grosso, Paraná, São Paulo, Goiás e Minas Gerais. As cepas foram submetidas a determinação do perfil de resistência, caracterização dos genes de virulência, determinação do grupo filogenético, expressão da toxina em cultivos de célula Vero, caracterização genotípica através da eletroforese em campo pulsado (PFGE) e polimorfismo do comprimento de fragmentos amplificados com uma única enzima (SE-AFLP). Dentre as 158 cepas stx2e+ foram identificadas 83,5% (132/158) apresentando resistência a três classes de antimicrobianos ou mais. Altos níveis de resistência forma identificados contra tetraciclina, sulfonamidas e florfenicol. A frequência dos genes de virulência associados a doença do edema como a fímbria F18, por exemplo, foi baixa em relação a outros estudos. Todas as 158 cepas testadas apresentaram a expressão da toxina e efeito citotóxico em células Vero. A caracterização dos grupos filogenéticos permitiu a distribuição das cepas nos quatro grupos descritos a seguir: grupo A 27,2% (43/158), grupo B1 3,8% (6/158), grupo B2 39,2% (62/158) e grupo D 29,8% (47/158). As cepas foram caracterizadas através da PFGE e do SE-AFLP e ambas as técnicas apresentaram altos índices discriminatórios (0,98 e 0,99 respectivamente). A associação mais frequente nas duas técnicas genotípicas foi observada em relação ao animal e a granja de origem. Apesar de pertencerem a um patotipo definido (STEC) e de serem altamente especializadas em relação ao hospedeiro, o suíno, foi observada uma grande variabilidade genética e de perfis de resistência entre as cepas de E. coli estudadas. (AU)

Edema disease affects weaning piglets and is caused by a host adapted Escherichia coli and producer of Stx2e toxin. The edema disease is characterized by swollen eyelids, ataxia, recumbence, convulsions, paralysis, or sudden death. In the present study were evaluated 158 E. coli strains Stx2e toxin gene positive isolated from 62 animals, from 13 swine herds located at Rio Grande do Sul, Santa Catarina, Mato Grosso, Paraná, São Paulo, Goiás and Minas Gerais States. Strains were submitted to resistance profile determination, virulence genes detection, phylogenetic group characterization, toxin expression in Vero cell culture, genotypic characterization through pulsed field gel electrophoresis (PFGE) and single enzyme amplified fragments length polymorphism (SEAFLP). Among the 158 strains stx2e+ were identified 83.5% (132/158) resistant to more than three or more classes of antimicrobials, High levels of resistance were found against tetracycline, sulfonamide and florfenicol. The frequency of virulence genes associated to edema disease as F18 fimbriae, for example, was low in relation to other studies. All 158 tested strains presented Stx2e toxin expression and cytotoxic effect in Vero cell culture. The characterization of phylogenetic groups permitted the distribution of strains in four groups described as follow: group A 27.2% (43/158), group B1 3.8% (6/158), group B2 39.2% (62/158) and group D 29.8% (47/158). The strains were characterized through PFGE and the SE-AFLP, and both techniques presented high discriminatory index (0.98 and 0.99 respectively). The association more frequently in both techniques was observed in relation to animal and herd origin. Despite to belong to one defined pathotype (STEC) and to be highly specialized in relation to host, the swine, it was observed a high variability of genetic and resistance profile among tested E. coli. (AU)

Caracterização genotípica e fenotípica de cepas de Escherichia coli associadas à doença do edema em suínos / Genotypic and phenotypic characterization of E. coli associated to edema disease in swine

A doença do edema afeta os leitões desmamados e é causada por cepas de Escherichia coli adaptadas ao hospedeiro e produtoras da toxina Stx2e. A doença do edema é caracterizada por edema de pálpebras, ataxia, pedalagem, dificuldade locomotora, e morte súbita. No presente estudo foram avaliadas 158 cepas de E. coli positivas para presença do gene codificador da toxina Stx2e isoladas de 62 animais provenientes de 13 granjas localizadas nos Estados do Rio Grande do Sul, Santa Catarina, Mato Grosso, Paraná, São Paulo, Goiás e Minas Gerais. As cepas foram submetidas a determinação do perfil de resistência, caracterização dos genes de virulência, determinação do grupo filogenético, expressão da toxina em cultivos de célula Vero, caracterização genotípica através da eletroforese em campo pulsado (PFGE) e polimorfismo do comprimento de fragmentos amplificados com uma única enzima (SE-AFLP). Dentre as 158 cepas stx2e+ foram identificadas 83,5% (132/158) apresentando resistência a três classes de antimicrobianos ou mais. Altos níveis de resistência forma identificados contra tetraciclina, sulfonamidas e florfenicol. A frequência dos genes de virulência associados a doença do edema como a fímbria F18, por exemplo, foi baixa em relação a outros estudos. Todas as 158 cepas testadas apresentaram a expressão da toxina e efeito citotóxico em células Vero. A caracterização dos grupos filogenéticos permitiu a distribuição das cepas nos quatro grupos descritos a seguir: grupo A 27,2% (43/158), grupo B1 3,8% (6/158), grupo B2 39,2% (62/158) e grupo D 29,8% (47/158). As cepas foram caracterizadas através da PFGE e do SE-AFLP e ambas as técnicas apresentaram altos índices discriminatórios (0,98 e 0,99 respectivamente). A associação mais frequente nas duas técnicas genotípicas foi observada em relação ao animal e a granja de origem. Apesar de pertencerem a um patotipo definido (STEC) e de serem altamente especializadas em relação ao hospedeiro, o suíno, foi observada uma grande variabilidade genética e de perfis de resistência entre as cepas de E. coli estudadas.

Edema disease affects weaning piglets and is caused by a host adapted Escherichia coli and producer of Stx2e toxin. The edema disease is characterized by swollen eyelids, ataxia, recumbence, convulsions, paralysis, or sudden death. In the present study were evaluated 158 E. coli strains Stx2e toxin gene positive isolated from 62 animals, from 13 swine herds located at Rio Grande do Sul, Santa Catarina, Mato Grosso, Paraná, São Paulo, Goiás and Minas Gerais States. Strains were submitted to resistance profile determination, virulence genes detection, phylogenetic group characterization, toxin expression in Vero cell culture, genotypic characterization through pulsed field gel electrophoresis (PFGE) and single enzyme amplified fragments length polymorphism (SEAFLP). Among the 158 strains stx2e+ were identified 83.5% (132/158) resistant to more than three or more classes of antimicrobials, High levels of resistance were found against tetracycline, sulfonamide and florfenicol. The frequency of virulence genes associated to edema disease as F18 fimbriae, for example, was low in relation to other studies. All 158 tested strains presented Stx2e toxin expression and cytotoxic effect in Vero cell culture. The characterization of phylogenetic groups permitted the distribution of strains in four groups described as follow: group A 27.2% (43/158), group B1 3.8% (6/158), group B2 39.2% (62/158) and group D 29.8% (47/158). The strains were characterized through PFGE and the SE-AFLP, and both techniques presented high discriminatory index (0.98 and 0.99 respectively). The association more frequently in both techniques was observed in relation to animal and herd origin. Despite to belong to one defined pathotype (STEC) and to be highly specialized in relation to host, the swine, it was observed a high variability of genetic and resistance profile among tested E. coli.