Teflubenzuron as a tool for control of trichodinids in freshwater fish: Acute toxicity and in vivo efficacy.

In this study we describe the anti-Trichodina effects of teflubenzuron (TFB) for Oreochromis niloticus and for Piaractus mesopotamicus. We also evaluated the acute toxicity, for both species, by using TFB in the concentrations of 700.0, 800.0, 900.0 and 1000.0 mg L(-1) and a control, without the drug. To assess the efficacy of TFB against Trichodina spp., we used the concentrations of 30.0 or 50.0 mg L(-1) for one hour exposure in tilapia, and the concentration of 30.0, 50.0 and 80.0 mg L(-1) for one hour and 50 mg L(-1) for two hours exposures in pacu. Teflubenzuron did not present significant toxicity in either species, with LC50;48h > 1000.0 mg L(-1). The drug effectiveness was observed against four identified Trichodina species: T. magna, T. heterodentata, T. compacta and T. centrostrigeata, with 87.9% parasite reduction with one hour exposure to 50.0 mg L(-1) TFB on O. niloticus and 96.1% with two hours exposure to 50.0 mg L(-1) TFB on P. mesopotamicus. Teflubenzuron is a drug with potential to be used in Brazilian aquaculture; it attends to important requirements, such as low toxicity and high efficacy in controlling Trichodina spp. infection in O. niloticus and P. mesopotamicus.

Hematological changes and cytogenotoxicity in the tilapia Oreochromis niloticus caused by sub-chronic exposures to mercury and selenium.

Fish bioassays are valuable tools that can be used to elucidate the toxicological potential of numerous substances that are present in the aquatic environment. In this study, we assessed the antagonistic action of selenium (Se) against the toxicity of mercury (Hg) in fish (Oreochromis niloticus). Six experimental groups with six fish each were defined as follows: (1) control, (2) mercury (HgCl(2)), (3) sodium selenite (Na(2)Se(4)O(3)), (4) sodium selenate (Na(2)Se(6)O(4)), (5) mercury + sodium selenite (HgCl(2) + Na(2)Se(4)O(3)), and (6) mercury + sodium selenate (HgCl(2) + Na(2)Se(6)O(4)). Hematological parameters [red blood cells (RBC), white blood cells (WBC), and erythroblasts (ERB)] in combination with cytogenotoxicity biomarkers [nuclear abnormalities (NAs) and micronuclei (MN)] were examined after three, seven, ten, and fourteen days. After 7 days of exposure, cytogenotoxic effects and increased erythroblasts caused by mercury, leukocytosis triggered by mercury + sodium selenite, leukopenia associated with sodium selenate, and anemia triggered by mercury + sodium selenate were observed. Positive correlations that were independent of time were observed between WBC and RBC, ERB and MN, and NA and MN. The results suggest that short-term exposure to chemical contaminants elicited changes in blood parameters and produced cytogenotoxic effects. Moreover, NAs are the primary manifestations of MN formation and should be included in a class characterized as NA only. Lastly, the staining techniques used can be applied to both hematological characterization and the measurement of cytogenotoxicity biomarkers.

Dietary administration of Bacillus subtilis on hematology and non-specific immunity of Nile tilapia Oreochromis niloticus raised at different stocking densities.

An 84-day feeding trial was conducted to evaluate the effect of the dietary administration of Bacillus subtilis on the growth performance, body composition, intestinal probiotic recovery, hematology, and non-specific immunity of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) raised at two stocking densities. Five hundred twenty male Nile tilapias (32.63 ± 1.25 g) were distributed in 16,800-L tanks. The experimental design was completely randomized using four replications and a 2 × 2 factorial scheme with two stocking densities (18.75 fish m(-3) 62.50 fish m(-3)) and two diets (control and with probiotic). The probiotic-supplemented diet included 5 × 10(6) CFU g feed(-1). There were no significant differences (P > 0.05) in the growth performance, body composition, and levels of cortisol and glucose between the animals fed with the control diet and the animals fed with the probiotic-supplemented diet. Differences in the growth performance were observed between the fish reared at different stocking densities; in particular, the fish raised at the high stocking density exhibited reduced weight gain, feed intake, and specific growth rate compared with those raised at the low stocking density. The B. subtilis remained viable after its inclusion in the feed, storage, and passage through the stomach, which demonstrations the feasibility of using this bacteria as a probiotic. Higher values (P < 0.05) in the plasma lysozyme levels and phagocytic activity were observed in the fish that received the probiotic-supplemented diet and reared at the high stocking density, but this difference was not observed in the fish raised at the low stocking density and fed the different diets. The administration of the probiotic caused decreases in the number of erythrocytes and the hematocrit level in the fish reared at the high stocking density, but these erythrocytes showed higher values of mean corpuscular hemoglobin. The stocking density was shown to be a stressor agent that causes a lower fish growth rate. The fish fed the control diet and raised at the high stocking density had lower lysozyme levels than the fish subjected to the other treatments. The inclusion of the probiotic bacteria B. subtilis at a concentration of 5 × 10(6) CFU g feed(-1) benefited the innate immune system of Nile tilapia by decreasing the stress associated with exposure to a high stocking density, increasing the mean corpuscular hemoglobin, and improving the innate immune system (lysozyme and phagocytic activities of macrophages).

Probiotic supplementation causes hematological changes and improves non-specific immunity in Brycon amazonicus

A commercialprobioticcontaining Bacillussubtilis(109 CFU g-1) was evaluated incaged matrinxã,Bryconamazonicus,by measuring hematological parametersand macrophage activity after 42 and 84 days after feeding. The product wasadded tocommercial feed using 2%soybean oil as a protectant. A randomized three-treatmentexperiment was performed using fourreplicates per treatment. The groups included: (a) control without probiotic, (b) 5 g kg-1probiotic, and (c) 10 g kg-1probiotic. Forhematological analysis,eightfishper treatmentwere used to determinetotal cell count (RBC); thrombocytes, differential, and total leukocyte count (TLC); hematocrit (Htc); hemoglobin tax; mean corpuscular volume (MCV); and mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC). Furthermore, plasma cortisol and glucose levels were measured in blood samples. Macrophage phagocytic activity was evaluated by injecting Saccharomyces cerevisiae(11,000 cells in a 3 mLvolume) into the coelomic cavity incubating for 8hours.Addition of probiotics to the diet of caged matrinxã altered the Htc, RBC, MCV, MCHC, TLC, lymphocyte, and eosinophil values. We observed increased cortisol and glucose levels and phagocytic activity, but no increase in the phagocytic index. We thus conclude that supplementing caged Brycon amazonicuswith probiotics improves their non-specific immunity and alters blood profiles.

Adhesion of pathogenic bacteria to polystyrene, skin and gut mucus of gilthead seabream, infectious capacity and antibiotics susceptibility / Adesão de bactérias patogênicas a poliestireno, pele e muco intestinal de gilthead seabream, capacidade infecciosa e susceptibilidade a antibióticos

Linking proprieties of adhesion, infectious capacities and antibiotic resistance of pathogen bacteria could help to treat fish diseases. Adhesions of ten fish pathogenic bacteria were tested in microtiter plates vacant, coated with skin or gut mucus, fixed with methanol, stained with 2% crystal-violet and revealed by colorimetric method. Infectious capacity was performed by exposing gilthead seabream fibroblast cell line (SAF-1) to 107 -108 CFUmL-1 of pathogen bacteria. Cell viability was measured 3h, 9h and 20 hours post-infection. The sensitivity to antibiotics was executed by disk diffusion. Data showed that all the bacteria tested adhere to polystyrene. For skin mucus, Vibrio harveyi, Vibrio alginolyticus, Halomonas venusta, and Aeromonas bivalvium were moderately adherent. Dietzia maris was strongly adherent. For gut mucus, 60% of tested bacteria were weakly adherent and 40% were non adherent. For infection, D. maris, V. harveyi and A. bivalvium decreased the cells viability to 89% after only 3h. After 20h, the viability percentage ranged between 1% and 32%. All isolates presented resistance to 1000 mg ml-1 of sulphonamide, 60% were resistant to sulfonamide and penicillin G. Present findings could be relevant in fish aquaculture and underscore the importance of the linkage between adhesion, infectious capacity, and antibiotic susceptibility of pathogen bacteria to avoid fish diseases.

Estudar o link entre propriedades de adesão, capacidades infecciosas e resistência a antibióticos de bactérias patogênicas pode ajudar a tratar doenças de peixes. A adesão de dez bactérias patogênicas foi testada em placas de microtitulação vazias, revestidas com muco da pele ou do intestino, fixadas com metanol, coradas com 2% de violeta cristal e reveladas pelo modo colorimétrico. A capacidade infecciosa foi realizada expondo a linha celular de fibroblasto de dourada (SAF-1) a 107-108 CFUmL-1 de bactérias patogénicas. A viabilidade celular foi medida 3h, 9h e 20 horas após a infecção. A sensibilidade aos antibióticos foi executada por difusão em disco. Os dados mostram que todas as bactérias testadas aderem ao poliestireno. Para o muco cutâneo, Vibrio harveyi, Vibrio alginolyticus, Halomonas venusta e Aeromonas bivalvium foram moderadamente aderentes. Dietzia maris foi fortemente aderente. Para o muco intestinal, 60% das bactérias testadas eram fracamente aderentes e 40% não aderentes. Para infecção, D. maris, V. harveyi e A. bivalvium diminuíram a viabilidade celular para 89% após apenas 3h. Após 20h, o percentual de viabilidade variou entre 1% e 32%. Todos os isolados apresentaram resistência a 1000 mg mL-1 de sulfonamida, 60% foram resistentes à sulfonamida e à penicilina G. Os achados atuais podem ser relevantes na aqüicultura e ressaltam a importância da ligação entre adesão, capacidade infecciosa e suscetibilidade a antibióticos de bactérias patogênicas para evitar doenças em peixes.

Adhesion of pathogenic bacteria to polystyrene, skin and gut mucus of gilthead seabream, infectious capacity and antibiotics susceptibility / Adesão de bactérias patogênicas a poliestireno, pele e muco intestinal de gilthead seabream, capacidade infecciosa e susceptibilidade a antibióticos

Linking proprieties of adhesion, infectious capacities and antibiotic resistance of pathogen bacteria could help to treat fish diseases. Adhesions of ten fish pathogenic bacteria were tested in microtiter plates vacant, coated with skin or gut mucus, fixed with methanol, stained with 2% crystal-violet and revealed by colorimetric method. Infectious capacity was performed by exposing gilthead seabream fibroblast cell line (SAF-1) to 107 -108 CFUmL-1 of pathogen bacteria. Cell viability was measured 3h, 9h and 20 hours post-infection. The sensitivity to antibiotics was executed by disk diffusion. Data showed that all the bacteria tested adhere to polystyrene. For skin mucus, Vibrio harveyi, Vibrio alginolyticus, Halomonas venusta, and Aeromonas bivalvium were moderately adherent. Dietzia maris was strongly adherent. For gut mucus, 60% of tested bacteria were weakly adherent and 40% were non adherent. For infection, D. maris, V. harveyi and A. bivalvium decreased the cells viability to 89% after only 3h. After 20h, the viability percentage ranged between 1% and 32%. All isolates presented resistance to 1000 mg ml-1 of sulphonamide, 60% were resistant to sulfonamide and penicillin G. Present findings could be relevant in fish aquaculture and underscore the importance of the linkage between adhesion, infectious capacity, and antibiotic susceptibility of pathogen bacteria to avoid fish diseases.(AU)

Estudar o link entre propriedades de adesão, capacidades infecciosas e resistência a antibióticos de bactérias patogênicas pode ajudar a tratar doenças de peixes. A adesão de dez bactérias patogênicas foi testada em placas de microtitulação vazias, revestidas com muco da pele ou do intestino, fixadas com metanol, coradas com 2% de violeta cristal e reveladas pelo modo colorimétrico. A capacidade infecciosa foi realizada expondo a linha celular de fibroblasto de dourada (SAF-1) a 107-108 CFUmL-1 de bactérias patogénicas. A viabilidade celular foi medida 3h, 9h e 20 horas após a infecção. A sensibilidade aos antibióticos foi executada por difusão em disco. Os dados mostram que todas as bactérias testadas aderem ao poliestireno. Para o muco cutâneo, Vibrio harveyi, Vibrio alginolyticus, Halomonas venusta e Aeromonas bivalvium foram moderadamente aderentes. Dietzia maris foi fortemente aderente. Para o muco intestinal, 60% das bactérias testadas eram fracamente aderentes e 40% não aderentes. Para infecção, D. maris, V. harveyi e A. bivalvium diminuíram a viabilidade celular para 89% após apenas 3h. Após 20h, o percentual de viabilidade variou entre 1% e 32%. Todos os isolados apresentaram resistência a 1000 mg mL-1 de sulfonamida, 60% foram resistentes à sulfonamida e à penicilina G. Os achados atuais podem ser relevantes na aqüicultura e ressaltam a importância da ligação entre adesão, capacidade infecciosa e suscetibilidade a antibióticos de bactérias patogênicas para evitar doenças em peixes.(AU)

Monitoring whole blood, plasma and serum variables of Nile tilapia during 24 hours, after capture stress / Monitoramento das variáveis do sangue total, plasma e soro de Tilápia-do-Nilo, durante 24 horas, após estresse de captura

Stress is know as responsible for the decrease in immunity and reduced survival, growth, and reproductive capacity of animals. Besides, organisms respond to certain biological rhythms, such as circadian, to which animals naturally adjust. This study aimed to monitor the plasma (lactate and total protein), serum (cortisol and cholesterol) and whole blood (glucose) variables in tilapia in a 24 h cycle. A set of 49 aquariums with 5 individuals each were used. All of them, at the beginning of the experiment, were subjected to the same stress of capture and handling. The animals from the first aquaria were sampled after 15 min of stress. Blood samples from animals of the remaining aquarium were sequentially drawn at 30-min intervals. Radar charts were used to visualize the hourly change in the measured variables. Significant differences of each analysis between the measured variables by aquarium and the phases of the circadian cycle (light-dark) and morning-afternoon-night-dawn intervals, were evaluated using the Mann-Whitney and Kruskal-Wallis tests, respectively. A positive relationship between cortisol and glucose levels was found. Most analysis, except cholesterol and lactate did not show any significant difference between light and dark periods, and the intensity and frequency of peaks observed were not deleterious to individuals.

O estresse é conhecidamente responsável pela diminuição da imunidade e redução da sobrevivência, crescimento e capacidade reprodutiva dos animais. Além disso, os organismos respondem a certos ritmos biológicos, como o circadiano, aos quais se ajustam naturalmente. Este estudo teve como objetivo monitorar as variáveis plasmática (lactato e proteína total), soro (cortisol e colesterol) e sangue total (glicose) na tilápia em um período de 24 h. Quarenta e nove aquários com 5 indivíduos cada foram utilizados. Todos eles, no início do experimento, foram submetidos ao mesmo estresse de captura e manuseio. Os animais do primeiro aquários foram amostrados após 15 min do estresse. Os demais As amostras de sangue de indivíduos de cada aquário foram sequencialmente em intervalos de 30 min. Somente os indivíduos do primeiro aquário foram analisados após 15 minutos de estresse. Os gráficos de radar foram usadas para visualizar a variação horária nas variáveis medidas. Diferenças estatisticamente significativas entre a média dos indivíduos de cada aquário, para as fases do ciclo circadiano (luz-escuro) e os intervalos manhã-tarde-noite-madrugada foram respectivamente avaliadas utilizando os testes Mann-Whitney e Kruskal-Wallis. Observou-se relação positiva entre os níveis de cortisol e glicose. As análises, com exceção de colesterol e lactato, não mostraram diferença significativa entre períodos de luz e sombras, e a intensidade e a freqüência dos picos observados não foram prejudiciais aos indivíduos.

Isolation of Saprolegnia aenigmatica oomycetes and protocol for experimental infection of pacu (Piaractus mesopotamicus) / Isolamento do oomiceto Saprolegnia aenigmatica e protocolo de infecção experimental em pacu (Piaractus mesopotamicus)

Successful disease treatment depends on molecular studies under indoor conditions with experimental infection protocols that facilitate understanding the disease and the drug`s efficacy. The internal transcribed spacer (ITS) region was sequenced from three isolates, which were identified as Saprolegnia aenigmatica. Subsequently, healthy fish were immunosuppressed with dexamethasone (1.2 mg kg-1) and descaled to the skin using a sharp scalpel. These individuals were isolated in individual aquariums maintained at 22°C. Individuals in one group were subcutaneously inoculated with 9,000 zoospores (DDZ treatment), a second group was exposed to oomycetes in water with three colonized baits (DDB), a third group was maintained in water without zoospores (DD), and a control group (C) consisted of healthy animals. After 48 and 96 hours, two animals from each group were euthanized for fungal reisolation. The fish from groups DD and C did not show clinical signs, and no oomycetes were isolated. The animals from the DDZ and DDB groups showed cotton-wool-like masses on the skin, and S. aenigmatica was re-isolated. Thus, for infection using zoospores or baits parasitized by S. aenigmatica, an immunosuppressor (dexamethasone) and a sharp scalpel can be used effectively to establish an experimental infection in P. mesopotamicus.(AU)

O sucesso do tratamento de uma enfermidade depende do estudo de moléculas em condições de laboratório por meio de protocolos de infecção experimental que viabilizam a compreensão da doença e da eficácia dos fármacos. Pela sequência ITS foram identificadas três cepas de Saprolegnia aenigmatica. Dessa forma, pacus sadios foram submetidos à imunossupressão com dexametasona (1,2 mg kg-1), esfoliados com auxílio de bisturi e distribuídos em aquários a 22ºC. Após este procedimento, um grupo de animais foi inoculado com 9.000 zoósporos/peixe subcutâneo (DEZ), a outro foram adicionadas três iscas colonizadas com o oomiceto na água (DEI), um terceiro grupo foi mantido sem contato com o oomiceto (DE) e um quarto grupo, de animais sadios, representaram o controle (C). Após 48 e 96h deste procedimento, foram eutanaziados animais de cada grupo para reisolamento. Os animais do grupo DE e C não apresentaram sinais clínicos e não foi reisolado o oomiceto. Porém, tanto os animais do grupo DEZ quanto como os animais do grupo DEI apresentaram micélio branco na pele e foi reisolado Saprolegnia aenigmatica. Assim, a infecção com zoósporos ou com iscas colonizadas por S. aenigmatica, com o uso de dexametasona e abrasivo epitelial são formas eficazes de infecção experimental em P. mesopotamicus.(AU)

Monitoring whole blood, plasma and serum variables of Nile tilapia during 24 hours, after capture stress / Monitoramento das variáveis do sangue total, plasma e soro de Tilápia-do-Nilo, durante 24 horas, após estresse de captura

Stress is know as responsible for the decrease in immunity and reduced survival, growth, and reproductive capacity of animals. Besides, organisms respond to certain biological rhythms, such as circadian, to which animals naturally adjust. This study aimed to monitor the plasma (lactate and total protein), serum (cortisol and cholesterol) and whole blood (glucose) variables in tilapia in a 24 h cycle. A set of 49 aquariums with 5 individuals each were used. All of them, at the beginning of the experiment, were subjected to the same stress of capture and handling. The animals from the first aquaria were sampled after 15 min of stress. Blood samples from animals of the remaining aquarium were sequentially drawn at 30-min intervals. Radar charts were used to visualize the hourly change in the measured variables. Significant differences of each analysis between the measured variables by aquarium and the phases of the circadian cycle (light-dark) and morning-afternoon-night-dawn intervals, were evaluated using the Mann-Whitney and Kruskal-Wallis tests, respectively. A positive relationship between cortisol and glucose levels was found. Most analysis, except cholesterol and lactate did not show any significant difference between light and dark periods, and the intensity and frequency of peaks observed were not deleterious to individuals.(AU)

O estresse é conhecidamente responsável pela diminuição da imunidade e redução da sobrevivência, crescimento e capacidade reprodutiva dos animais. Além disso, os organismos respondem a certos ritmos biológicos, como o circadiano, aos quais se ajustam naturalmente. Este estudo teve como objetivo monitorar as variáveis plasmática (lactato e proteína total), soro (cortisol e colesterol) e sangue total (glicose) na tilápia em um período de 24 h. Quarenta e nove aquários com 5 indivíduos cada foram utilizados. Todos eles, no início do experimento, foram submetidos ao mesmo estresse de captura e manuseio. Os animais do primeiro aquários foram amostrados após 15 min do estresse. Os demais As amostras de sangue de indivíduos de cada aquário foram sequencialmente em intervalos de 30 min. Somente os indivíduos do primeiro aquário foram analisados após 15 minutos de estresse. Os gráficos de radar foram usadas para visualizar a variação horária nas variáveis medidas. Diferenças estatisticamente significativas entre a média dos indivíduos de cada aquário, para as fases do ciclo circadiano (luz-escuro) e os intervalos manhã-tarde-noite-madrugada foram respectivamente avaliadas utilizando os testes Mann-Whitney e Kruskal-Wallis. Observou-se relação positiva entre os níveis de cortisol e glicose. As análises, com exceção de colesterol e lactato, não mostraram diferença significativa entre períodos de luz e sombras, e a intensidade e a freqüência dos picos observados não foram prejudiciais aos indivíduos.(AU)

Isolation of Saprolegnia aenigmatica oomycetes and protocol for experimental infection of pacu (Piaractus mesopotamicus) / Isolamento do oomiceto Saprolegnia aenigmatica e protocolo de infecção experimental em pacu (Piaractus mesopotamicus)

Successful disease treatment depends on molecular studies under indoor conditions with experimental infection protocols that facilitate understanding the disease and the drug`s efficacy. The internal transcribed spacer (ITS) region was sequenced from three isolates, which were identified as Saprolegnia aenigmatica. Subsequently, healthy fish were immunosuppressed with dexamethasone (1.2 mg kg-1) and descaled to the skin using a sharp scalpel. These individuals were isolated in individual aquariums maintained at 22°C. Individuals in one group were subcutaneously inoculated with 9,000 zoospores (DDZ treatment), a second group was exposed to oomycetes in water with three colonized baits (DDB), a third group was maintained in water without zoospores (DD), and a control group (C) consisted of healthy animals. After 48 and 96 hours, two animals from each group were euthanized for fungal reisolation. The fish from groups DD and C did not show clinical signs, and no oomycetes were isolated. The animals from the DDZ and DDB groups showed cotton-wool-like masses on the skin, and S. aenigmatica was re-isolated. Thus, for infection using zoospores or baits parasitized by S. aenigmatica, an immunosuppressor (dexamethasone) and a sharp scalpel can be used effectively to establish an experimental infection in P. mesopotamicus.

O sucesso do tratamento de uma enfermidade depende do estudo de moléculas em condições de laboratório por meio de protocolos de infecção experimental que viabilizam a compreensão da doença e da eficácia dos fármacos. Pela sequência ITS foram identificadas três cepas de Saprolegnia aenigmatica. Dessa forma, pacus sadios foram submetidos à imunossupressão com dexametasona (1,2 mg kg-1), esfoliados com auxílio de bisturi e distribuídos em aquários a 22ºC. Após este procedimento, um grupo de animais foi inoculado com 9.000 zoósporos/peixe subcutâneo (DEZ), a outro foram adicionadas três iscas colonizadas com o oomiceto na água (DEI), um terceiro grupo foi mantido sem contato com o oomiceto (DE) e um quarto grupo, de animais sadios, representaram o controle (C). Após 48 e 96h deste procedimento, foram eutanaziados animais de cada grupo para reisolamento. Os animais do grupo DE e C não apresentaram sinais clínicos e não foi reisolado o oomiceto. Porém, tanto os animais do grupo DEZ quanto como os animais do grupo DEI apresentaram micélio branco na pele e foi reisolado Saprolegnia aenigmatica. Assim, a infecção com zoósporos ou com iscas colonizadas por S. aenigmatica, com o uso de dexametasona e abrasivo epitelial são formas eficazes de infecção experimental em P. mesopotamicus.

Hematologia e histopatologia de tilápia-do-nilo exposta a concentrações sub-letais de selenito de sódio (Na2SeO3 Se4+) / Hematological and histopathological analysis in Nile tilapia, exposed to sublethal concentrations of sodium selenite (Na2SeO3 Se4+)

The aim of this study was to analyze the effects of chronic toxicity of sodium selenite (Na2SeO3 SE4+) on juvenile Nile tilapia Oreochromis niloticus. Therefore, a toxicity test was carried out with three sub-lethal concentrations of that salt (0.4 mgSe L-1, 0.04 mgSe L-1 and 0.01 mgSe L-1), plus a control group. The experiment was carried out for 14 days, sampling six individuals per treatment in intervals of 0, 3, 7, 10 and 14 days. Effects of chronic sublethal concentrations of selenite were evaluated by routine haematological and histopathological analysis. There were significant differences (P 0.05) in the rate of hemoglobin, mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH) and mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) and an increase of the total number of leukocytes, mainly due to the increased number of lymphocytes, monocytes, and neutrophils. Severe gill hyperplasia was found on the fourteenth day. Nephrosis were found in the cephalic kidney, characterized by glomerulonephritis and tubular vacuolar degeneration, which was a result of the necrosis or secondary infection, glomerular atrophy and glomerulosclerosis, proliferative glomerulonephritis, nephrosis, nephrosclerosis, tubular calcification, edema and hemorrhage. It was found that selenite, at the tested concentrations despite being sublethal, caused histological and hematological changes in Nile tilapia.(AU)

Este trabalho teve como objetivo analisar os efeitos da toxicidade crônica do selenito de sódio (Na2SeO3 Se4+) em jovens de tilápia-do-nilo Oreochromis niloticus. Para tanto, um teste de toxicidade foi realizado com três concentrações sub-letais deste sal (0,4 mgSe L-1, 0,04 mgSe L-1 e 0,01 mgSe L-1) e 0 mgSe L-1 (controle). O experimento foi conduzido por 14 dias, com amostragem de seis indivíduos por tratamento nos intervalos 0, 3, 7, 10 e 14 dias para a avaliação dos efeitos crônicos sub-letais por meio de análises hematológicas de rotina e análises histopatológicas. Diferença significativa (P 0,05) ocorreu na concentração de hemoglobina, volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM) e concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) e aumento do número total de leucócitos, causados principalmente pelo aumento do número de linfócitos, monócitos e neutrófilos. Nas brânquias dos peixes expostos ao selenito de sódio foi encontrada hiperplasia grave no décimo quarto dia. No rim cefálico ocorreu nefrose caracterizada pela degeneração vacuolar tubular e glomerulonefrite, atrofia glomerular e glomeruloesclerose, glomerulonefrite proliferativa, nefroesclerose, calcificação tubular, edema e hemorragia. Conclui-seo selenito de sódio nas concentrações utilizadas provocaram alterações hematológicas e histológicasem tilápia-do-nilo, embora tenham sido usadas concentrações sub-letais neste ensaio.(AU)

Hematologia e histopatologia de tilápia-do-nilo exposta a concentrações sub-letais de selenito de sódio (Na2SeO3 Se4+) / Hematological and histopathological analysis in Nile tilapia, exposed to sublethal concentrations of sodium selenite (Na2SeO3 Se4+)

The aim of this study was to analyze the effects of chronic toxicity of sodium selenite (Na2SeO3 SE4+) on juvenile Nile tilapia Oreochromis niloticus. Therefore, a toxicity test was carried out with three sub-lethal concentrations of that salt (0.4 mgSe L-1, 0.04 mgSe L-1 and 0.01 mgSe L-1), plus a control group. The experiment was carried out for 14 days, sampling six individuals per treatment in intervals of 0, 3, 7, 10 and 14 days. Effects of chronic sublethal concentrations of selenite were evaluated by routine haematological and histopathological analysis. There were significant differences (P 0.05) in the rate of hemoglobin, mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH) and mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) and an increase of the total number of leukocytes, mainly due to the increased number of lymphocytes, monocytes, and neutrophils. Severe gill hyperplasia was found on the fourteenth day. Nephrosis were found in the cephalic kidney, characterized by glomerulonephritis and tubular vacuolar degeneration, which was a result of the necrosis or secondary infection, glomerular atrophy and glomerulosclerosis, proliferative glomerulonephritis, nephrosis, nephrosclerosis, tubular calcification, edema and hemorrhage. It was found that selenite, at the tested concentrations despite being sublethal, caused histological and hematological changes in Nile tilapia.

Este trabalho teve como objetivo analisar os efeitos da toxicidade crônica do selenito de sódio (Na2SeO3 Se4+) em jovens de tilápia-do-nilo Oreochromis niloticus. Para tanto, um teste de toxicidade foi realizado com três concentrações sub-letais deste sal (0,4 mgSe L-1, 0,04 mgSe L-1 e 0,01 mgSe L-1) e 0 mgSe L-1 (controle). O experimento foi conduzido por 14 dias, com amostragem de seis indivíduos por tratamento nos intervalos 0, 3, 7, 10 e 14 dias para a avaliação dos efeitos crônicos sub-letais por meio de análises hematológicas de rotina e análises histopatológicas. Diferença significativa (P 0,05) ocorreu na concentração de hemoglobina, volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM) e concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM) e aumento do número total de leucócitos, causados principalmente pelo aumento do número de linfócitos, monócitos e neutrófilos. Nas brânquias dos peixes expostos ao selenito de sódio foi encontrada hiperplasia grave no décimo quarto dia. No rim cefálico ocorreu nefrose caracterizada pela degeneração vacuolar tubular e glomerulonefrite, atrofia glomerular e glomeruloesclerose, glomerulonefrite proliferativa, nefroesclerose, calcificação tubular, edema e hemorragia. Conclui-seo selenito de sódio nas concentrações utilizadas provocaram alterações hematológicas e histológicasem tilápia-do-nilo, embora tenham sido usadas concentrações sub-letais neste ensaio.

Growth performance and intestinal histomorphology of Nile tilapia juveniles fed probiotics / Desempenho produtivo e histomorfologia intestinal de juvenis de tilápia do Nilo alimentados com probióticos

The objective of this study was to assess the growth performance and the histomorphometric characterization of the middle intestine of GIFT strain Nile tilapia, Oreochromis niloticus juveniles fed probiotics, added either before or after the feed processing. The experimental design was completely randomized, with five treatments and five replications: pelleted feed without any probiotic; pelleted feed with inclusion of probiotic before the processing; pelleted feed with inclusion of probiotic after the processing; extruded feed without any probiotic and extruded feed with inclusion of probiotic after the processing. Two hundred and fifty juveniles were distributed in 25 aquaria (20L) and fed for 63 days. Differences in the mean values of total weight were found at the end of the experiment. After 42 days of feed intake, significant differences in feed conversion were verified for treatments with extruded diets when compared to the pelleted ones. The fishes fed diets supplemented with probiotic presented increase in the thickness of the epithelium of the intestine. The best zootechnical performance was observed in the extruded diet supplemented with probiotic added after the feed processing. The inclusion of 4.0 x 10⁸ CFU g-¹of Bacillus subtilis and 4.0 x 10⁸ CFU g-¹ of Bacillus toyoi in both the pelleted and the extruded diets promoted an cincrease in the thickness of the epithelial layer of the middle intestine.(AU)

Objetivou-se avaliar o desempenho zootécnico e a caracterização histomorfométrica do intestino médio de juvenis de tilápias do Nilo, Oreochromis niloticus, variedade GIFT, alimentadas com probiótico, incluído antes e após o processamento de ração. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com cinco tratamentos e cinco repetições composto pelos seguintes tratamentos: ração peletizada sem probiótico; ração peletizada com inclusão do probiótico antes e após o processamento; ração extrusada sem probiótico e ração extrusada com inclusão do probiótico após o processamento. Duzentos e cinquenta juvenis foram distribuídos em 25 aquários (20L) e alimentados durante 63 dias. Foram constatadas diferenças para os valores médios do peso total no final do experimento. Após 42 dias de alimentação foram verificadas diferenças significativas na conversão alimentar para tratamentos com as dietas extrusadas comparadas com as peletizadas. Os peixes alimentados com as dietas suplementados com o probiótico apresentaram aumento na espessura da camada epitelial do intestino. O melhor desempenho zootécnico foi observado, na dieta extrusada suplementada de probiótico incorporado após o processamento de ração, e a inclusão de 4.0 x 10⁸ CFU g-¹ of Bacillus subtilis e 4.0 x 10⁸ CFU g-¹ of Bacillus toyoi, em dietas peletizadas e extrusadas, promoveu o aumento na espessura da camada epitelial do intestino médio.(AU)

Incorporação de probióticos na dieta para juvenis de tilápias-do-Nilo: parâmetros hematológicos, imunológicos e microbiológicos / Incorporation of probiotics in the diet for juvenile Nile tilapias: hematological, immunological and microbiological parameters

Probióticos são, em geral, considerados microrganismos vivos que, quando administrados em quantidades adequadas, conferem um benefício à saúde do hospedeiro. O método de processamento da dieta e a forma de inclusão do probiótico podem interferir nos parâmetros hematológicos, imunológicos e microbiológicos dos peixes. Objetivou-se estimar os parâmetros hematológicos, imunológicos e microbiológicos em juvenis de tilápia-do-nilo, alimentados com probiótico incluído antes e após o processamento de peletização e extrusão da ração. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado,com cinco tratamentos: ração peletizada sem a inclusão do probiótico, ração peletizada com inclusão do probiótico antes e após o processamento, ração extrusada sem probiótico e ração extrusada com inclusão do probiótico após o processamento, e cinco réplicas. Duzentos e cinquenta peixes foram distribuídos em 25 aquários (20L) e alimentados durante 63 dias. Acomposição sanguínea (série vermelha e branca) não mostrou diferenças significativas, exceto a concentração de hemoglobina corpuscular média do controle quando comparados aos demais tratamentos. A capacidade fagocítica dos animais que receberam a dieta extrusada suplementada com probiótico foi significativamente superior, entretanto, para o índice fagocítico, não ocorreram diferenças entre os tratamentos. Os peixes alimentados com a dieta extrusada mostraram melhora na imunidade inespecífica. As bactérias probióticas colonizaram o intestino, pois foi possível recuperá-las. Pode-se afirmar que esses peixes mantiveram-se sadios, pois os parâmetros hematológicos não sofreram alterações durante o período experimental. O estudo revela que qualquer forma de inclusão de probióticos nas rações testadas(antes ou depois da peletização e após a extrusão)pode ser utilizada facilmente pelo piscicultor.(AU)

Probiotics are generally considered as live microorganisms which, when administered in adequate amounts, confer a health benefit to the host. The processing method of diet and the form of inclusion of probiotic can interfere in hematological, immunological and microbiological parameters in fish. The aimwas to estimate the hematological, immunological and microbiological parameters in juveniles of Nile tilapia, fed probiotic, included before and after the process of pelletizationand extrusion. The experimental design was completely randomized, with five treatments: pelleted diet without probiotic, pelleted diet with inclusion of probiotic before and after processing, extruded feed without probiotic and extruded feed with inclusion of probiotic after processingand five replications.Two hundred and fiftyfishwere distributed in 25 aquaria (20L) and fed for 63 days. The blood composition (red and white) showed no significant difference.(AU)

Growth performance and intestinal histomorphology of Nile tilapia juveniles fed probiotics / Desempenho produtivo e histomorfologia intestinal de juvenis de tilápia do Nilo alimentados com probióticos

The objective of this study was to assess the growth performance and the histomorphometric characterization of the middle intestine of GIFT strain Nile tilapia, Oreochromis niloticus juveniles fed probiotics, added either before or after the feed processing. The experimental design was completely randomized, with five treatments and five replications: pelleted feed without any probiotic; pelleted feed with inclusion of probiotic before the processing; pelleted feed with inclusion of probiotic after the processing; extruded feed without any probiotic and extruded feed with inclusion of probiotic after the processing. Two hundred and fifty juveniles were distributed in 25 aquaria (20L) and fed for 63 days. Differences in the mean values of total weight were found at the end of the experiment. After 42 days of feed intake, significant differences in feed conversion were verified for treatments with extruded diets when compared to the pelleted ones. The fishes fed diets supplemented with probiotic presented increase in the thickness of the epithelium of the intestine. The best zootechnical performance was observed in the extruded diet supplemented with probiotic added after the feed processing. The inclusion of 4.0 x 10⁸ CFU g-¹of Bacillus subtilis and 4.0 x 10⁸ CFU g-¹ of Bacillus toyoi in both the pelleted and the extruded diets promoted an cincrease in the thickness of the epithelial layer of the middle intestine.

Objetivou-se avaliar o desempenho zootécnico e a caracterização histomorfométrica do intestino médio de juvenis de tilápias do Nilo, Oreochromis niloticus, variedade GIFT, alimentadas com probiótico, incluído antes e após o processamento de ração. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com cinco tratamentos e cinco repetições composto pelos seguintes tratamentos: ração peletizada sem probiótico; ração peletizada com inclusão do probiótico antes e após o processamento; ração extrusada sem probiótico e ração extrusada com inclusão do probiótico após o processamento. Duzentos e cinquenta juvenis foram distribuídos em 25 aquários (20L) e alimentados durante 63 dias. Foram constatadas diferenças para os valores médios do peso total no final do experimento. Após 42 dias de alimentação foram verificadas diferenças significativas na conversão alimentar para tratamentos com as dietas extrusadas comparadas com as peletizadas. Os peixes alimentados com as dietas suplementados com o probiótico apresentaram aumento na espessura da camada epitelial do intestino. O melhor desempenho zootécnico foi observado, na dieta extrusada suplementada de probiótico incorporado após o processamento de ração, e a inclusão de 4.0 x 10⁸ CFU g-¹ of Bacillus subtilis e 4.0 x 10⁸ CFU g-¹ of Bacillus toyoi, em dietas peletizadas e extrusadas, promoveu o aumento na espessura da camada epitelial do intestino médio.

Determination of selenium toxicity to Oreochromis niloticus based on hematological parameters / Determinação da toxicidade do Selênio por meio de análises hematológicas em Oreochromis niloticus

Selenium (Se) is described as an essential micronutrient and participates in different biological functions, as the antioxidant defense systems maintenance and regulation. However, when in high concentrations, Se may cause toxic effects as well as hematological changes in fish. The aim of the present study was to determine the toxicity of selenium in the form of sodium selenate (Na2Se6+O4) in Oreochromis niloticus based on hematological parameters, after exposure to different concentrations (0.01, 0. 14 and 1.4 mg Se 6+ L-1). The erythrocytic and leukocytic series were examined over 14 days at intervals of 0, 3, 5, 7,10 and 14 days. The erythrocytic series showed significant alterations in the first 7 days, including the control group. Neutrophils and monocytes showed variations in the first 3 days at a concentration of 1.40 mgSe6+ L-1 characterizing an acute response. The total number of leukocytes was different in relation to time zero on all Se concentrations. The thrombocyte count also differed statistically from time zero and control in the first 3 days at 0.14 mgSe6+ L-1. These results indicate that different concentrations induce an acute response with diminution of total leukocytes, neutrophilia, monocytosis and thrombocytosis.

O selênio (Se) é descrito como um micronutriente essencial e participa de diversas funções biológicas. No entanto, quando em concentrações elevadas, o Se pode causar efeitos tóxicos, bem como alterações hematológicas em peixes. O objetivo do presente estudo foi determinar a toxicidade do selênio na forma de Selenato de sódio (Na2Se6+ O4) em Oreochromis niloticus com base em parâmetros hematológicos, após a exposição a diferentes concentrações (0,01, 0,14 e 1,4 mg + Se6+ L-1). A série eritrocitária e leucocitária foram examinadas por 14 dias, em intervalos de 0, 3, 5, 7,10 e 14 dias. A série eritrocítica mostrou alterações significativas nos primeiros 7 dias, incluindo o grupo controle. Neutrófilos e monócitos apresentaram variações nos primeiros 3 dias na concentração de 1,40 mgSe6+ L-1, caracterizando uma resposta aguda. O número total de leucócitos foi diferente em relação ao tempo zero em todas as concentrações de Se. A contagem de trombócitos também diferiram estatisticamente entre o tempo zero e os primeiros 3 dias a 0,14 mgSe6+ L-1. O resultados indicam que diferentes concentrações induzem a resposta aguda com diminuição dos leucócitos totais, neutrofilia, monocitose e trombocitose.

Probiotic in feeding of juvenile matrinxã (Brycon amazonicus): economic viability / Probiótico na alimentação de juvenis de matrinxã, Brycon amazonicus: viabilidade econômica

This study aimed to analyze the economic feasibility of supplement probiotics Bacillus subtilis to "matrinxã" Brycon amazonicus, raised in cages. The experiment was conducted at the Polo Regional Vale do Ribeira, in Pariquera-açu municipality, São Paulo State, Brazil, from February to July 2009. A total of 960 juvenile matrinxã were stocked in twelve 2.7 m³-net cages (1.5 x 1.5 x 1.2 m), in ponds with a total area of 600 m2 and an average depth of 1.50 m. The tests were conducted with a control treatment (T1) and two probiotic doses (T2 = 5 g and T3 = 10 g kg-1 of diet) with four replicates. Results showed that T2 produced better economic performance for matrinxã at the juvenile stage in intensive rearing system.

Objetivou-se analisar a viabilidade econômica do uso do probiótico Bacillus subtilis na alimentação de matrinxã Brycon amazonicus, em tanques-rede. O experimento foi conduzido no Polo Regional do Vale do Ribeira, no município de Pariquera-Açu, São Paulo, Brasil, entre fevereiro e julho de 2009. Foram avaliados 960 peixes juvenis, divididos em 12 tanques-rede de 2,7 m³ (1,5 x 1,5 x 1,2 m) em uma área total de 600 m2 , com profundidade média de 1,50 m. Os testes foram conduzidos com um tratamento testemunha (T1), duas doses de probiótico (T2 = 5 g e T3 = 10 g kg-1 de ração) e quatro repetições. Os resultados mostraram que o T2 proporcionou melhor desempenho zootécnico e econômico da matrinxã na fase de engorda no sistema intensivo de criação.

Hematology, micronuclei and nuclear abnormalities in fishes from São Francisco river, Minas Gerais state, Brazil / Hematologia, micronúcleos e anomalias nucleares em peixes do rio São Francisco, Estado de Minas Gerais, Brasil

This study aimed to determine the variables leukocytary, erythrocytary,frequency of micronuclei and nuclear abnormalities in peripheral erythrocytes of Prochilodusargenteus, Pimelodus maculatus and Myleus micans from São Francisco river basin, Minas GeraisState, during the summer and winter. Thrombocytes, hematocrit and leukocyte ofP.argenteus series, was influenced by climatic conditions. In P. maculatus, not were significantdifferences for all leukocytes and thrombocytes. In M. micans, values are unprecedented inthe literature, with MCV and absolute number of leukocytes found superior to otherspecies of the family Characidae. The frequency of micronuclei and nuclear abnormalitiesin erythrocytes, the three species not showed seasonal differences between the sites.However, the highest values were found in summer. Furthermore, we observed a positivecorrelation between the increase in the percentage of micronuclei with nuclearabnormalities(AU)

O presente estudo teve como objetivo,determinar as variáveis leucocitárias, eritrocíticas, freqüência de micronúcleos e anomaliasnucleares nos eritrócitos do sangue periférico de Prochilodus argenteus, Pimelodus maculatus eMyleus micans de um trecho da bacia do rio São Francisco, Minas Gerais, no verão e inverno.Trombóctios, hematócrito e a serie leucocítária de P.argenteus, foi influenciado pelasazonalidade. Em P. maculatus, não ocorreram diferenças significativas para todos osleucócitos e trombócitos. Em M. micans, os valores são inéditos na literatura, apresentandoVCM e número absoluto de leucócitos superior ao encontrados para outras espécies dafamília Characidae. A freqüência de micronúcleos e de anomalias nucleares nos eritrócitos,nas três espécies não apresentou diferenças sazonais e entre os pontos amostrais. Noentanto, os valores mais altos foram encontrados no verão. Além disso, foi possível observarcorrelação positiva entre o aumento da porcentagem de anomalias nucleares commicronúcleos.(AU)

Hematology, micronuclei and nuclear abnormalities in fishes from São Francisco river, Minas Gerais state, Brazil / Hematologia, micronúcleos e anomalias nucleares em peixes do rio São Francisco, Estado de Minas Gerais, Brasil

This study aimed to determine the variables leukocytary, erythrocytary, frequency of micronuclei and nuclear abnormalities in peripheral erythrocytes of Prochilodus argenteus, Pimelodus maculatus and Myleus micans from São Francisco river basin, Minas Gerais State, during the summer and winter. Thrombocytes, hematocrit and leukocyte of P.argenteus series, was influenced by climatic conditions. In P. maculatus, not were significant differences for all leukocytes and thrombocytes. In M. micans, values are unprecedented in the literature, with MCV and absolute number of leukocytes found superior to other species of the family Characidae. The frequency of micronuclei and nuclear abnormalities in erythrocytes, the three species not showed seasonal differences between the sites. However, the highest values were found in summer. Furthermore, we observed a positive correlation between the increase in the percentage of micronuclei with nuclear abnormalities

O presente estudo teve como objetivo, determinar as variáveis leucocitárias, eritrocíticas, freqüência de micronúcleos e anomalias nucleares nos eritrócitos do sangue periférico de Prochilodus argenteus, Pimelodus maculatus e Myleus micans de um trecho da bacia do rio São Francisco, Minas Gerais, no verão e inverno. Trombóctios, hematócrito e a serie leucocítária de P.argenteus, foi influenciado pela sazonalidade. Em P. maculatus, não ocorreram diferenças significativas para todos os leucócitos e trombócitos. Em M. micans, os valores são inéditos na literatura, apresentando VCM e número absoluto de leucócitos superior ao encontrados para outras espécies da família Characidae. A freqüência de micronúcleos e de anomalias nucleares nos eritrócitos, nas três espécies não apresentou diferenças sazonais e entre os pontos amostrais. No entanto, os valores mais altos foram encontrados no verão. Além disso, foi possível observar correlação positiva entre o aumento da porcentagem de anomalias nucleares com micronúcleos.

Toxicity of zinc sulphate for tadpoles of bullfrog (Lithobates catesbeianus): acute toxicity, chronic toxicity and hematological parameters / Toxicidade do sulfato de zinco para girinos de rã-touro (Lithobates catesbeianus): toxicidade aguda, crônica e parâmetros hematológicos

The aim of this study was to evaluate the effect of zinc sulfate (ZnSO4) on hematological parameters of bullfrog tadpoles, Lithobates catesbeianus, through acute and chronic toxicity tests. Although the toxicity of zinc for several species of fish has been studied, the toxicity of this metal is not well known to all aquatic organisms, especially for amphibians. The action of this metal ion on the respiratory system of fish occurs by precipitation of the mucus produced by the gills of fish that die by asphyxiation. The acute toxicity tests showed that LC50-96h (median lethal concentration) of zinc sulfate was 2.78 mg L-1, level considered below that set by CONAMA. Chronic toxicity tests were performed on three concentrations: CL50-96h/100 (0.0278 mg ZnSO4 L-1), LC50-96h/10 (0.278 mg ZnSO4 L-1) and LC50-96h (2.78 mg ZnSO4 L-1) during 312 hours under semi-static, and a control group (without addition of zinc sulfate). Analyses of hematological parameters indicate the occurrence of changes, showing the possibility of chronic effects in tadpoles of L. catesbeianus, which should be better studied.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do sulfato de zinco (ZnSO4) sobre os parâmetros hematológicos de girinos de rã-touro, Lithobates catesbeianus, por meio de testes de toxicidade aguda e crônica. Embora a toxicidade de zinco para várias espécies de peixes já tenha sido estudada, a toxicidade deste metal não é bem conhecida para todos os organismos aquáticos, principalmente para os anfíbios. A ação desse íon metálico sobre o sistema respiratório dos peixes ocorre pela precipitação da secreção da mucosa produzida pelas brânquias dos peixes, que morrem por asfixia. Os testes de toxicidade aguda mostraram que a CL50-96h (concentração letal média) do sulfato de zinco foi 2,78 mg L-1, nível inferior ao estabelecido pelo CONAMA. Os testes de toxicidade crônica foram realizados em três concentrações: CL50-96h/100 (0,0278 mg ZnSO4 L-1), CL50-96h/10 (0,278 mg ZnSO4 L-1) e CL50-96h (2,78 mg ZnSO4 L-1), durante 312 horas em sistema semiestático, além de um grupo controle (sem adição de sulfato de zinco). As análises dos parâmetros hematológicos evidenciaram a ocorrência de alterações, indicando a possibilidade de ocorrerem efeitos crônicos em girinos de L. catesbeianus, que devem ser melhor estudados.