RESUMO
Calcium-dependent protein kinases play a crucial role in intracellular calcium signaling in plants, some algae and protozoa. In Plasmodium falciparum, calcium-dependent protein kinase 1 (PfCDPK1) is expressed during schizogony in the erythrocytic stage as well as in the sporozoite stage. It is coexpressed with genes that encode the parasite motor complex, a cellular component required for parasite invasion of host cells, parasite motility and potentially cytokinesis. A targeted gene-disruption approach demonstrated that pfcdpk1 seems to be essential for parasite viability. An in vitro biochemical screen using recombinant PfCDPK1 against a library of 20,000 compounds resulted in the identification of a series of structurally related 2,6,9-trisubstituted purines. Compound treatment caused sudden developmental arrest at the late schizont stage in P. falciparum and a large reduction in intracellular parasites in Toxoplasma gondii, which suggests a possible role for PfCDPK1 in regulation of parasite motility during egress and invasion.
Assuntos
Adenina/análogos & derivados , Antimaláricos/farmacologia , Cicloexilaminas/farmacologia , Regulação Enzimológica da Expressão Gênica/genética , Malária/parasitologia , Plasmodium falciparum/enzimologia , Proteínas Quinases/efeitos dos fármacos , Proteínas Quinases/genética , Proteínas de Protozoários/antagonistas & inibidores , Adenina/química , Adenina/farmacologia , Adenina/uso terapêutico , Animais , Antimaláricos/química , Antimaláricos/uso terapêutico , Células CHO , Linhagem Celular , Proliferação de Células/efeitos dos fármacos , Cricetinae , Cricetulus , Cicloexilaminas/química , Cicloexilaminas/uso terapêutico , Avaliação Pré-Clínica de Medicamentos , Ativação Enzimática/efeitos dos fármacos , Regulação Enzimológica da Expressão Gênica/efeitos dos fármacos , Células HeLa , Humanos , Estágios do Ciclo de Vida/efeitos dos fármacos , Malária/tratamento farmacológico , Malária/imunologia , Masculino , Camundongos , Camundongos Endogâmicos BALB C , Modelos Moleculares , Estrutura Molecular , Peso Molecular , Movimento/efeitos dos fármacos , Análise de Sequência com Séries de Oligonucleotídeos/métodos , Testes de Sensibilidade Parasitária , Plasmodium falciparum/crescimento & desenvolvimento , Proteínas Quinases/fisiologia , Proteínas de Protozoários/genética , Proteínas de Protozoários/fisiologia , Proteínas Recombinantes/antagonistas & inibidores , Proteínas Recombinantes/genética , Bibliotecas de Moléculas Pequenas , Estereoisomerismo , Relação Estrutura-Atividade , Distribuição TecidualRESUMO
The genetic background of a patient determines in part if a person develops a mild form of malaria and recovers, or develops a severe form and dies. We have used a mouse model to detect genes involved in the resistance or susceptibility to Plasmodium berghei malaria infection. To this end we first characterized 32 different mouse strains infected with P. berghei and identified survival as the best trait to discriminate between the strains. We found a locus on chromosome 6 by linking the survival phenotypes of the mouse strains to their genetic variations using genome wide analyses such as haplotype associated mapping and the efficient mixed-model for association. This new locus involved in malaria resistance contains only two genes and confirms the importance of Ppar-gamma in malaria infection.