Proteomic analysis of the venom from the fish eating coral snake Micrurus surinamensis: novel toxins, their function and phylogeny.

The protein composition of the soluble venom from the South American fish-eating coral snake Micrurus surinamensis surinamensis, here abbreviated M. surinamensis, was separated by RP-HPLC and 2-DE, and their components were analyzed by automatic Edman degradation, MALDI-TOF and ESI-MS/MS. Approximately 100 different molecules were identified. Sixty-two components possess molecular masses between 6 and 8 kDa, are basically charged molecules, among which are cytotoxins and neurotoxins lethal to fish (Brachidanios rerio). Six new toxins (abbreviated Ms1-Ms5 and Ms11) were fully sequenced. Amino acid sequences similar to the enzymes phospholipase A2 and amino acid oxidase were identified. Over 20 additional peptides were identified by sequencing minor components of the HPLC separation and from 2-DE gels. A functional assessment of the physiological activity of the six toxins was also performed by patch clamp using muscular nicotinic acetylcholine receptor assays. Variable degrees of blockade were observed, most of them reversible. The structural and functional data obtained were used for phylogenetic analysis, providing information on some evolutionary aspects of the venom components of this snake. This contribution increases by a factor of two the total number of alpha-neurotoxins sequenced from the Micrurus genus in currently available literature.

Equivalencia terap‚utica e intercambiabilidad de medicamentos / Therapeutic equivalence and intercambiabilidad of medicines

El amplio desarrollo de los medicamentos gen‚ricos, y la demostración de fallas en la biodisponibilidad a partir de la d‚cada de los 70 condujo a la introducci¢n de requerimientos de bioequivalencia en pa¡ses del hemisferio norte, los que se han incorporado progresivamente en las regulaciones propuestas por la Organización Mundial de la Salud, la FDA y la EMEA, y luego entre la legislación de diferentes paises a diferente velocidad. Dos medicamentos son terap‚uticamente equivalentes si ellos son equivalentes farmac‚uticos o alternativas farmacéuticas y después de la administración en la misma dosis molar, sus efectos, con respecto a eficacia y seguridad, ser n esencialmente los mismos cuando sean administrados a pacientes por la misma v¡a de administración bajo las condiciones especificadas en el inserto. La decisión de intercambiabilidad es una inferencia luego de la demostración de equivalencia terapéutica, que supone que un medicamento puede ser reemplazado por otro que contenga lamisma dosis molar del medicamento en la misma forma farmacéutica y adminstrado en la misma v¡a e intervalo, esper ndose que los efectos farmacodin micos sean los mismos. En este trabajo se revisan los tipos de estudios utilizados para evaluar la equivalencia terapéutica, sus requisitos principales as¡ como los criterios de aceptabilidad y rechazo de los estudios. Se revisa la exigencia de estudios de equivalencia e intercambiabilidad se¤alados a la ley de medicamentos peruana aprobada en 2009.

The extensive development of generic drugs, and bioavailability failures from the 70s led to introduce bioequivalence requeriments in north region of the world, which progressively incorporated into regulations of WHO, FDA and EMEA, and then between different countries laws. Two drugs are therapeutically equivalent if they are pharmaceutical equivalents or pharmaceutical alternatives and after administration in the same molar dose, their efficacy effects and safety, will be essentially the same when administered to patients by the same route of administration under the conditions specified in the insert. The decision of interchangeability is an inference after show the therapeutic equivalence, which means that a drug can be replaced by another containing the same molar dose in the same dosage form and in the same via e interval, expected that pharmacodynamic effects are the same. In this article we review the types of studies used to evaluate the therapeutic equivalence, the requirement and criteria of acceptability and rejection of the studies. Likewise review the requirement for equivalence and interchangeability studies appointed in the Peruvian Drug Act in 2009.

Bioequivalencia de medicamentos in vivo e in vitro (Bioexención) / Bioequivalence of drugs in vivo and in vitro (Biowaiver)

El desarrollo de los medicamentos químicos de los últimos 50 años ha permitido la obtención de notables mejoras en la salud humana. La calidad, seguridad y eficacia así como las Buenas Prácticas de Manufactura (BPM), y las Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL), son exigencias implantadas en la industria farmacéutica en la mayoría de los países. La aparición y desarrollo de las especialidades farmacéuticas genéricas en los últimos 35 años ha acompañado al desarrollo de los estudios de Biodisponibilidad y Bioequivalencia in vivo e in vitro (Bioexención). Se revisa los avances en estudios de Bioequivalencia en el Perú y los requisitos de la Ley de medicamentos aprobada en 2009. Los estudios de Bioequivalencia principalmente farmacocinéticos constituyen el estándar para que los organismos regulatorios en materia farmacéutica asuman la equivalencia terapéutica. Esta a su vez es un criterio aceptado para asumir intercambiabilidad del medicamento. En este artículo se revisan las definiciones, los diferentes tipos de diseños empleados en los estudios de Bioequivalencia, sus requisitos principales así como los criterios de aceptabilidad y rechazo de los resultados de los estudios de Bioequivalencia. Se hace especial mención a la posición de la OMS, la FDA y EMEA en los últimos años. Se describe la Clasificación Biofarmacéutica (SCB), que considera cuatro grupos y su aplicación para la bioexencin, bajo los criterios de la FDA y de la OMS.

In the last 50 years the development of the chemical medicines has allowed to achieve remarkable improvements in human health care. In many countries the pharmaceutical industry regulations on quality, safety and effectiveness as well as Good Manufacturing Practices (GMP) and Good Laboratory Practices (GLP) are mandatory requirements. Generic pharmaceutical products have been developed in the last 35 years, along with studies of bioavailability, bioequivalence in vivo and in vitro (Biowaiver). In this article the progress in Bioequivalence studies in Peru will be reviewed as well as the requirements of the Medicines Act adopted in 2009. The pharmacokinetic Bioequivalence is the standard for pharmaceutical regulatory agencies; in this way they are able to establish pharmaceutical therapeutic equivalence and this is an accepted criteria for the medication interchangeability. The most important requirements of acceptability and rejection of the results of the studies of Bioequivalence are reviewed in this article, as well as the criteria and the definitions related to them and the different programs designed for these studies. In this article we review definition, different study designs used bioequivalence, their requirements and the criteria of acceptability and rejection of the results bioequivalence studies. The position of the WHO, the FDA and EMEA in the last few years has a special reference in the article. The Biopharmaceutics Classification System (BCS), that consider four groups and their application to biowaiver, under the criteria of FDA and WHO is reviewed.

Control de calidad de preservativos masculinos en el Perú / Quality control of masculine prophylactics in Peru

La calidad de los preservativos de látex (condones) empleados en los programas de la natalidad y prevención de enfermedades transmitidas sexualmente es un factor crítico para la eficacia de los mismo. Sin embargo, son escasos los reportes acerca de la calidad de los preservativos distribuidos en Latinoamérica. En este trabajo se reportan los resultados del control de calidad practicado a 23 lotes de preservativos de difrentes marcas, que fueron examinados por el Centro Nacional de Control de Calidad (INS/MINSA, Perú) en el período de 1988-1994, divididos en 2 grupos según el sistema legal de control vigente a la fecha de recepción de la muestra: control de calidad pre-registro sanitario (grupo PRS, enero de 1988 a julio de 1992, 6 lotes). Cinco de seis lotes del grupo PRS y uno

El doping en el deporte / Sport doping

El doping constituye una seria amenaza al desarrollo sano del deporte, e incluye la administración deliberada de una sustancia o sustancias no alimenticias con el objeto de aumentar artificialmente la condición física y/o mental de un deportista. Puede ser también la manipulación clínica de sustancias naturales en el cuerpo con el mismo objeto de aumentar falsamente la condición física y/o mental del deportista. En este trabajo se revisan los aspectos éticos, históricos y los aspectos farmacológicos básicos de las principales clases farmacológicas de agentes dopantes utilizados en el deporte

El veneno del escorpión: bioquímica y farmacología / The poison of the scorpion: biochemistry and pharmacology

A multidisciplinary revision of scorpion venom include its bio-chemical, pharmacologycal anda toxicological aspects. The deep knowledge of the extensive bibliography and own works make the author an authoritive source on what is known at present on scorpion venom.

Se presenta una revisión multidisciplinaria del veneno de escorpion es sus aspectos bioquímicos, farmacológicos y toxicológicos; los principales métodos utilizados para la obtención de veneno puro y las diferentes técnicas de almacenamiento. La composición química y los aspectos más importantes de la metodología para la obtención y caracterización de los principales farmacológicamente activos del veneno son revisados en detalle. Se discute el rol biológico de los principales activos del envenamiento humano y experimental. Se describe las neurotoxinaas polipeptidicas presentes en el veneno de las especies más peligrosas para el humano; su mecanismo de acción y su composición de anninoácidos asi com las principales actividades enzimáticas detectadas eb en el veneno crudo. Se discute el rol de la serotonina y la histamina en el envenamiento por picadura de escorpión.

Ofidismo en el Hospital General de La Merced: estudio retrospectivo de 116 casos / Ophidism in the Hospital General de La Merced: retrospective study of 116 cases

Se estudió retrospectivamente 116 casos de ofidismo ingresados en el Hospital General de La Merced, ocurridos entre Enero de 1981 y Agosto de 1986. El 61.3% de ellos eran de sexo masculino y la mayoría (78.3%) tenían entre 10 y 49 años de edad. Entre los meses de Noviembro y Mayo, períodos que corresponde aproximadamente a la estación lluviosa, ocurrieron 69% de los accidentes, la mayoría de ellos en el "campo". 72.8% fueron mordidos en la mitad distal de los miembros inferiores. El género Bothrops fue el más frecuentemente involucrado. La demora promedio en llegar al hospital fué de 9.6 horas y 44% de los pacientes habían recibido algún tratamiento antes de su ingreso a éste, lo más frecuente fueron las incisiones sobre las huellas de la mordedura (en 18%) de los casos). Al ingreso se empleó suero antiveneno en 96 (82.7%) de los pacientes. La gran mayoría de los pacientes tuvo un envenenamiento leve o moderado, sólo 2 fallecieron y otros 2 tuvieron secuelas al momento del alta. La complicación más frecuente fue infección local. En general el tratamiento recibido fue adecuado, según lo recomendado actualmente. El 63.8% fue dado de alta en el cuarto día de permanencia en el hospital. No se encontró que un tiempo en el hospital mayor o no que 4 días haya tenido correlación con algunas variables

Farmacología del veneno de Bothrops Pictus (jergón de la costa) / Pharmacology of venoms of the Bothrops pictus (jergon of the coast)

El veneno desecado cristalizado de B. pictus fue estudiaddo en sus propiedades farmacológicas: tóxicas letal, hemorrágica e hipotensora arterial. La toxicidad aguda se determinó en ratones para las vías ip y sc (48 h), obteniéndose valores de DL50 de 4.7 y 26.1 mg/Kg. El veneno provocó hemorragia en la piel del ratón (DHM= 1.2 ug), e hipotensión arterial en perros anestesiados (0.16*1 mg/Kg). Dosis mayores de 0.2 mg/Kg ev., fueron letales en perros. El suero antibotrópico polivalente (INS, Lima Lote 47) impidió el efecto letal del veneno de B. pictus. (DE50 antiletal= 48.7 ul/0.2 mg de veneno)

Evaluación de tres modelos para la estimación de la cantidad individual de veneno producida por serpientes venenosas peruanas / Evaluation of three models for the estimation of the single quantity of poison produced by poisonous peruvian serpents

The production of dry snake vnom statistics from the Lima Serpentarium (N.I.H. of Peru) corresnponding to the 1970-1986 period was analyzed. Three different models of linear regression were tested t estimate the quantity of venom produced by a single snake Bothrops atrox "jergón". The regression model of the logarithmic transformation for the quantity of venom obtained per lot (Log CA) versus the logarithm of the number of snakes + 0,01 milked in the lot (Log [CS+0.01] was the best thod of analysis. This model was used to estimate the quantities of venom produced by other ten species of Peruvian poisonous snakes: B. barnetti, B. bilineatus, B. castelnaudi, B. hyopronus, BB. microphtalmus. B. neuwiedi, B. pictus, Crotalus durisus terriricus. Lochesis m. muta and Microrus spixii.

Se revisan las estadísticas de producción de veneno ofídico seco cristalizado del Serpentario de Lima (Instituto Nacional de Salud. Ministerio de Salud), correspondientes al periodo 1970-1986 y se exploran tres aproximaciones de regresion lineal para la estimación de la cantidad individual de veneno producido por serpientes Bothrops atrox "jergon". El mejor modelo fue el de la regresión de la transformación logaritmica de la cantidad de veneno obtenida por lote (Log CA) versus el Logaritmo de la cantidad de serpientes extraidas en el lote + 001 (Log [CS+001]), el que se aplicó para la estimación de las cantidades individuales de veneno producidas por otras 10 especies de serpientes B. barnetti, B. bilineatus, B. castelnaudi, B. hyopronus, BB. microphtalmus. B. neuwiedi, B. pictus, Crotalus durisus terriricus. Lochesis m. muta y Microrus spixii.

Programa en Basic para el cálculo de DL50 por el método de Probits / Basic program for calculation of DL50 by Probits` method

Se describe un programa en lenguaje BASIC, para plataformas MSDOS, diseñado para calcular la Dosis Letal Medica (DL50) de agentes tóxicos utilizando el método de transformación en probits. Para la utilización del programa, el operador provee las dosis del agente tóxico empleado en el ensayo de toxicidad aguda letal, el número de animales utilizados en cada dosis, y el número de animales que murieron con dicha dosis; la DL50, así como los límites fiducidales al 95 (tanto por ciento) de confianza. Asimismo se presentan los valores definitivos y provisionales de la recta. El programa ofrece además la posibilidad de efectuar reanálisis de los datos en los casos en que se desee buscar mayor aproximación de los valores; gráfica, archivo de resultados en discos, y la opción de comparación de dos curvas, para la estimación de potencias relativas

Carcinoma de células en anillo de sello del colon y recto en el Instituto Nacional de Enfermedades Neoplásicas / Colon and rectum signet-ring cell carcinoma in the National Institute of Neoplastics Diseases

Objetivo: El carcinoma de células en anillos de sello primario del colon y recto, es una neoplasia poco frecuente, variedad del adenocarcinoma del intestino grueso. El propósito de este estudio fue establecer su incidencia, historia natural y relación con el cáncer de colon no polipoide hereditario (HNPCC). Métodos: Se revisaron las historias clínicas e histología de 28 pacientes con diagnóstico de carcinoma de células en anillo de sello primario del colón y recto, en el Instituto Nacional de Enfermedades Neoplásicas (INEN), entre los años 1991 al 2002. Resultados: La incidencia del carcinoma de células de sello fue del 5.09 por ciento en relación con los casos de adenocarcinoma primario del colon y recto. Los pacientes fueron diagnosticados en estadios avanzados de enfermedad (C y D de Dukes). En la mayoría de casos la neoplasia comprometió todo el espesor de la pared intestinal (tipo Bormann IV). La relación Hombre - Mujer fue 1.1.5. La edad media de presentación 55.5 años y la mediana 57 años (rango de 11 a 83 años). Conclusiones.- La comparación de nuestros datos con lo reportado en la literatura, muestra algunas diferencias, que pueden estar relacionadas con características biológicas propias de nuestra población y con la aplicación de diferentes criterios de selección de los casos. No es posible establcer en nuestra serie la relación entre HNPCC y carcinoma de células en anillo de sello primario del colon y recto.

Estudios electroforeticos y acción procoagulante del veneno de loxosceles laeta / Electrophoretics studies and procoagulant action of the loxosceles laeta venom

El veneno de arañas adultas Loxósceles laeta fue obtenido mediante electroestimulación y disección glandular. La distribución electroforética de las proteínas del veneno fue obtenida en gel de poliacrilamida a pH 8.6, obteniéndose 19 y 22 bandas proteicas respectivamente. Mediante electroforesis a pH 7.2 en presencia de dodecil sulfato de sodio de sodio se observaron tan solo 18 y 20 respectivamente. Las muestras estudiadas no producen coagulación del fibrinógeno humano, bovino ni plasma humano citratado. El veneno loxoscélico no hidrolizá los substratos BAPna, TAME ni Chromozym TH lo que demuestra la ausencia de Enzima similar a trombina. La presencia de acción procoagulante in vitro del veneno fue demostrada por la aceleración del tiempo de recalcificación del plasma humano. Se discute el rol de esta actividad en el envenenamiento loxoscélico

Aspectos epidemiológicos del loxoscelismo / Epidemiological aspects of loxoscelism

Se revisan los principales aspectos epidemiológicos del loxoscelismo en el Perú. Este araneismo, se tipifica como un accidente principalmente observado en las ciudades de la costa y sierra peruana, producido por picadura de las arañas loxosceles laeta y L. rufipes, y sin predominancia de ninguno de los sexos. Es un accidente de prestación más frecuente en los meses de verano, siendo fundamentalmente un accidente intradomiciliario, que ocurre en horas de la noche y primeras de la mañana. Se evalúan las casuísticas hospitalarias reportadas en el periodo 1943 a 1986, donde se reportan dos sindromes clínicos: cutáneos (74%) y sistémico (26%). La mortalidad se asocia al sindrome sistémico con la insuficiencia renal, siendo la letalidad mayor en pacientes menores de 13 años. Se propone la adopción de medidas de control y prevención de este envenenamiento

Valores referenciales de homocisteína plasmática en adultos aparentemente sanos de Lima-Perú / Reference values of plasmatic homocysteine in apparently halth adults in Lima-Perú

El presente estudio de investigación, prospectivo transversal tuvo como objetivo establecer los valores referenciales de homocisteína en hombres y mujeres de 17 1 60 años aparentemente sanos en la ciudad de Lima-Perú. El dosaje de homocisteína plasmática se realizó , en una muestra no probabilística de 229 donantes voluntarios provenientes de Bancos de Sangre de los Hospitales Nacionales Guillermo Almenara Irigoyen (HNGAI) y Edgardo Rebagliati Martins (HNERM) EsSalud, clínicas San Pablo, Laboratorios Odalab s. R. L., alumnos de la Universidad Mayor de San Marcos y Universidad Cristiana María Inmaculada en el período de julio a noviembre de 1999. Para el dosaje de homocisteína plasmática se utilizó el método de Inmunoensayo de polarización fluorescente (FPIA). Se evaluó la influencia de la edad sobre la homocisteína plasmática en las sub-poblaciones: de 17 a 31 años (X=8.34ñ2.53 µmol/L) y de 32 a 60 años (X=8.39ñ2.34 µmol/L). No se encontraron diferencias significativas en cuanto a la homocisteína entre estos dos grupos de edad. Los valores medios de homocisteína plasmática fueron mayores en varones (X=8.97ñ2.35µmol/L) que en mujeres (X=7.76ñ2.39 µmol/L y no siguen una distribución normal para ambos sexos. Los límites de referencia para homocisteína plasmática en el grupo de donantes estudiados se estimaron mediante método no paramétrico, fueron para el sexo masculino 4.79 y 14.74 µmol/L y para el sexo femenino 4.72 y 13.87 µmol/L.

Homocisteína: ¿un nuevo factor de riesgo de enfermedad cardiovascular? / Hmocysteine: a new risk factor in cardiovascular disease?

Se revisan la bioquímica, el metabolismo y las alteraciones genéticas del metabolismo de la metionina y homocisteína. Se discute el rol de la elevación de la homocisteína plamática como factor de riesgo an las enfermedades cardiovasculares, infarto de miocardio, enfermedad trombótica, arteriosclerosis, enfermedades vasculares cerebrales e infarto cerebral, así como el rol de las vitaminas B6, B12 y el ácido fólico en el metabolismo de la homocisteína, y la génesis de la hiperhomocisteinemia por déficit de estas vitaminas. Se revisan los valores referenciales peruanos en relación con los valores plasmáticos referenciales internacionales para homocisteína plasmática en población normal, y se analizan las ventajas y desventajas de los métodos analíticos disponibles para la medición de la homocisteína plasmática.

Proyecto cooperativo interuniversitario UPCH-UNMSM. Loxoscelismo experimental: aspectos farmacológicos y anatomopatológicos / Interuniversitary cooperative project UPCH-UNMSM. Experimental loxoscelism: pharmacological and anatomopathological aspects

Se obtuvo veneno de arañas Loxosceles sp. procedente de dos localidades del Departamento de Lima (Perú): Urb. Santa María de Chosica y Santa Rosa de Quives (Km. 60). La técnica de estimulación eléctrica para obtención de veneno fue modificado con la finalidad de descartar la contaminación con regurgitado gástrico, obteniéndose 0.33 a 0.76 ul/araña adulta, el que fue utilizado en los ensayos de toxicidad aguda en conejos, y en los estudios bioquímicos. Un segundo método alternativo para la obtención de extractos tóxicos utilizado fue la microdiseccción y homogenización glandular total. La dosis letal media, fue estimado a diferentes intervalos de tiempo, utilizando un programa computarizado del método de transformación en probits. La LD50 intraperitoneal y endovenosa obtenida en ratones, fue de 0.299 y 0.165 glándulas/ratón, respectivamente. Un método de envenenamiento por picadura directa fue desarrollado para el estudio de toxicidad aguda en conejos, y los resultados fueron comparados con los producidos por inyección del veneno obtenido mediante estimulación eléctrica. Los efectos cutáneos del Loxoscelismo en conejos fueron tipificados y biopsias de lesiones en diferentes estadíos evolutivos fueron analizados mediante estudio histológico. El cuadro sistémico en conejos estuvo caracterizado por hemoproteinuria, ausencia de hematuria, lesiones cutáneas variables y muerte. Se determinó la potencia neutralizante in vitro del suero antiloxoscélico comercial (INS, Perú), demostrándose que 0.3ml. del suero, inactivan los efectos letales de una glándula de veneno loxoscélico. Se descarta la probable acción protectora del suero de rata sobre el efecto letal del veneno loxoscélico en el ratón.

El conejo: un modelo experimental de loxoscelismo cutaneo viscerohemolitico / The rabbit: an experimental model of cutaneous viscerohemolytic loxoscelism

Se envenenaron conejos Nueva Zelanda mediante inyección intradérmica con veneno de la araña casera L. laeta obtenido mediante electroestimulación, a 2 niveles de dosis y los efectos se evaluaron hasta las 48 horas post-inyección del veneno. Los efectos del envenenamiento fueron cutáneos y sistémicos. Los conejos desarrollaron evolutivamente lesiones cutáneas locales de aspectos eritemato-papular, edema hemorragia puntiforme equimosis y necrosis. Los efectos sistemicos incluyeron anemia, leucocitosis, hemoproteínuria, incremento de los niveles plasmáticos de urea y creatinina y muerte. La emisión de orina hemoproteínurica fue observada después de las 9 horas de envenenamiento, correlacionada con la severidad del envenenamiento. La hemoproteína fue caracterizada química y electroforeticamente como hemoglobina. Se analizan los resultados obtenidos con la aplicación de dosis única de lcc endovenoso de suero anti-loxoscélico comercial luego de 4 horas de envenenamiento