RESUMEN
Flow cytometry (FC) is widely used in microbiology, immunology, hematology, and oncology. In the veterinary field, FC enabled the study of the immune response in cattle infected with different pathogens, as well as vaccine testing. However, few fluorochrome-conjugated antibodies recognize bovine antigens, limiting the possible benefits of FC and the implementation of multiparametric analysis for more complex studies. Two cytometry panels with five colors each were designed and implemented for the study and identification of populations and subpopulations of T cells derived from the peripheral blood mononuclear cells of dairy heifers. Both panels detected differences in T cell subpopulations between heifers positively and negatively tested for tuberculin; they detected overexpression of CD25+ and CD45RO+ in tuberculin-positive heifers after stimulation with a culture filtrate protein extract (CFPE) from Mycobacterium bovis (M. bovis). We identified subpopulations of T cells from peripheral blood mononuclear cells using two multicolor panels. These panels could be used to analyze total bovine blood in immunopathogenic studies and vaccine development. The same strategy could be implemented in other species of veterinary interest.
RESUMEN
El objetivo de este trabajo fue comparar la prueba de hemaglutinación pasiva, inhibición de crecimiento e inhibición de película como métodos para el diagnóstico serológico de mastitis causada por Mycoplasma bovis (Mb). El grupo testigo fue de 40 vacas Holstein sin historia de mastitis por Mycoplasma sp. El grupo problema fue un hato de 57 vacas Holstein. De ambos grupos se obtuvieron muestras de sangre y de leche en condiciones de asepsia. Con el suero sanguíneo se hicieron las pruebas del estudio y se intentó hacer el aislamiento de las muestras de leche. Se obtuvieron 16 aislamientos de Mycoplasma bovis. Se encontró que la prueba de hemaglutinación pasiva tenía 25 por ciento de sensibilidad y una especificidad del 90 por ciento. La prueba de inhibición de crecimiento tuvo una sensibilidad del 62.5 por ciento y especificidad del 95 por ciento. La prueba de inhibición de película presentó una sensibilidad del 100 por ciento y una especificidad del 52.5 por ciento. Se encontró que los títulos de hemaglutinación pasiva en animales infectados se incrementaron hasta 1:160; a diferencia del grupo testigo que llegaron hastas 1:40. En cuanto a la inhibición de crecimiento, los halos fueron de 2 hasta 15 mm en el hato problema y en el grupo testigo, la mayoría no presentó inhibición. Se concluyó que la prueba que mejoro funciona a nivel de hato es la de inhibición de crecimiento
Asunto(s)
Bovinos , Animales , Femenino , Serología , Bovinos/microbiología , Pruebas Serológicas , Mastitis Bovina/diagnóstico , Mycoplasma/patogenicidad , Infecciones por Mycoplasma/veterinaria , Hemaglutinación/inmunologíaRESUMEN
Con la finalidad de medir la protección contra pasteurelosis pulmonar que otorgan diferentes inmunógenos de Pasteurella haemolytica A1, éstos se evaluaron en 2 etapas: en condiciones de desafío experimental, y de desafío natural. En la primera, 42 corderos fueron distribuidos en 6 grupos: el Grupo A recibió cultivo vivo, el B sirvió como testigo, al C se le trató con una bacterina comercial, el D con leucotoxina (sobrenadante de cultivo), al E se le administró extracto solubre capsular (ESC) con leucotoxina y el F fue tratado con ESC con leucotoxina más adyuvante. En el día 35 los ovinos fueron expuestos al virus de PI3 y 7 días después fueron desafiados con P. haemolytica por vía transtorácica. Los corderos sobrevivientes fueron sacrificados al día 49, para el registro de lesiones y estudio bacteriológico. Se les tomó diariamente la temperatura rectal y muestras de suero cada 7 días, con el fin de medir anticuerpos anticápsula y antilecotoxina. En la evaluación de campo se trabajó con 4 grupos de 80 animales cada uno. Se midieron niveles de anticuerpos y se registraron parámetros de morbilidad y mortalidad. En la primera fase los títulos de anticuerpos anticápsula y antileucotoxina fueron estadísticamente significativos (P<0.05) en los grupos tratados con bacteria viva, leucotoxina y bacteriana comercial en comparación con el resto de los grupos; las lesiones fueron más severas en los grupos B, E y F. En la fase de campo en los grupos 1,2 y 4 se enfermaron la neumonía clínica 3 (3.75 por ciento), 5 (6.25 por ciento) y 4 (5 por ciento) animales, respectivamente, y en el grupo 3 (testigo) fueron 23 (28.75 por ciento). Con respecto a la mortalidad y los niveles de anticuerpos se encontró diferencia (P<0.05) entre los grupos 1 y 3. Los resultados obtenidos en ambas fases sugieren que la leucotoxina (sobrenadante de cultivo) y la bacteria viva pueden ser una opción importante en la prevención de las neumonías en ovinos
Asunto(s)
Animales , Ovinos/inmunología , Indicadores de Morbimortalidad , Mannheimia haemolytica/virología , Neumonía/inmunologíaRESUMEN
Se evaluó el efecto de la inoculación de cordero con bacterias vivas y citotoxina de Pasteurella heamolytica al desafío. Se utilizaron 40 corderos distribuidos al azar en 4 grupos. l grupo 1 (lote testigo) se le inoculò, por vía subcutánea, sólo medio de cultivo; el grupo 2 fue inmunizado con cultivo vivo de P. Haemolyticaserotipo Al por vía subcutánea; el grupo 3 recibío el mismo inmunógeno por vía intradérmica y el grupo 4 con citotoxina de P. Heamolytica por vía subcutanea más adyuvante completo de Freund. Los animales fueron expuestos al virus de P13 y desafiados una semana después con una cepa de P. Heamolytica Al. fueron sacrificados para la evaluación del daño pulmonar. Los animales del grupo testigo mostraron fiebre después del desafío bacteriano. Los títulos de anticuerpos anticápsula y antitotoxina fueron más altos para los grupos inmunizados. comparados con el grupo testigo (P < 0.05). Las lesiones en pulmón fueron más severas para el grupo testigo (P < 0.05), sin diferncia significativa entre las diversas vías de inmunización. Según los resultados obtenidos, se puede considerar que la protección conferida por la inmunización con P. heamolytica así como con citotoxina, es eficiente para reducir en forma considerable las lesiones pulmonares ocacionadas por esta bacteria experimentalmente. Asimismo, se demostró la inocuidad de los inmunogenos por ausencia de reacciones posvacunales.
Asunto(s)
Animales , Ovinos/inmunología , Pasteurella/inmunología , Neumonía Viral/fisiopatología , Pasteurella/patogenicidadRESUMEN
El presente trabajo se ralizó con el objetivo de aislar y determinar los serotipos capsulares y somáticos de Pasteurella multocida y los serotipos de Pasteurella haemolytica, a partir de pulmones con lesiones inflamatorias de ovinos y caprinos. Con tal propósito de tomaron muestras de 232 lesiones neumónicas , obteniéndose un total de 117 aislamientos positivos a Pasteurellas, de las cuales 42 cepas se identificaron como P. heamolytica y 75 como P. multocida. El 100 por ciento de los aislamientos de P. haemolytica perteneció al biotipo A. Los serotipos determinados por Hemoaglutinación Indirecta (HAI) según la especie animal fueron: En ovinos con 28 cepas el 39 por ciento para el A 8, el 32 por ciento el A , 11 por ciento A 1, 7 por ciento A 6, 4 por ciento A 5 y 7 por ciento no tipificables; en caprinos con 2 cepas, A 5 y A 8 respectivamente. En los aislamientos de P. multocida, según las técnicas de Acriflavina e Hialuronidasa, 60 por ciento perteneció al tipo A y 27 por ciento al D. Los serotipos somáticos por Inmunodifusión en gel representaron en ovinos el 72 por ciento para el serotipo 3, 9 por ciento para el 15, 4 por ciento para el 7, 2 por ciento para el 4, 10, 12 y 14 y 7 por ciento de no tificables: en caprinos con 3 cepas una perteneció al serotipo 3, otra al 15 y la restante no tipificable. Se analizan la distribución de los serotipos de Pasteurella sp encontrados en el presente estudio con otros informes al respecto.