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Expression and purification of an engineered human endothelin receptor B in a monomeric form.

Mishin, A V; Luginina, A P; Potapenko, A P; Borshchevskiy, V I; Katritch, V; Edelweiss, E; Okhrimenko, I S; Gordeliy, V I; Cherezov, V G.

Dokl Biochem Biophys ; 467(1): 157-61, 2016 Mar.

Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-27193723

RESUMEN

In humans, two endothelin receptors, ETa and ETb, are activated by three endogenous 21-mer cyclic peptides, ET-1, ET-2, and ET-3, which control various physiological processes, including vasoconstriction, vasodilation, and stimulation of cell proliferation. The first stage of this study it to produce a stable solubilized and purified receptor in a monodisperse state. This article is focused on the engineering, expression, purification, and characterization of the endothelin receptor B for subsequent structural and functional studies.

Asunto(s)

Receptor de Endotelina B/química , Receptor de Endotelina B/aislamiento & purificación , Animales , Baculoviridae/genética , Compuestos de Bifenilo/química , Western Blotting , Dipéptidos/química , Antagonistas de los Receptores de Endotelina/química , Endotelinas/química , Ingeniería Genética/métodos , Humanos , Proteínas de la Membrana/genética , Proteínas de la Membrana/metabolismo , Fragmentos de Péptidos/química , Desnaturalización Proteica , Estabilidad Proteica , Receptor de Endotelina B/genética , Receptor de Endotelina B/metabolismo , Proteínas Recombinantes de Fusión/química , Proteínas Recombinantes de Fusión/genética , Proteínas Recombinantes de Fusión/aislamiento & purificación , Proteínas Recombinantes de Fusión/metabolismo , Células Sf9 , Temperatura

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