Human Papillomavirus 16 Lineage D is Associated with High Risk of Cervical Cancer in the Brazilian Northeast Region.

OBJECTIVE: Similar to Human Papillomavirus (HPV) genotypes, different lineages of a genotype also have different carcinogenic capabilities. Studies have shown that specific genotype lineages of oncogenic HPV are associated with variable risks for the development of cervical intraepithelial neoplasia (CIN2/CIN3) and cervical cancer. The present study aimed to analyze the genetic diversity of the HPV16 genotype in women with CIN2/CIN3 and cervical cancer, from the northeast region of Brazil. METHODS: A cross-sectional multicenter study was conducted in the northeast region of Brazil, from 2014 to 2016. This study included 196 cases of HPV16 variants (59 and 137 cases of CIN2/CIN3 and cervical cancer, respectively). The difference of proportion test was used to compare patients with CIN2/CIN3 and cervical cancer, based on the prevalent HPV16 lineage (p < 0.05). RESULTS: According to the histopathological diagnosis, the percentage of lineage frequencies revealed a marginal difference in the prevalence of lineage A in CIN2/CIN3, compared with that in cervical cancer (p = 0.053). For lineage D, the proportion was higher in cancer cases (32.8%), than in CIN2/CIN3 cases (16.9%), with p = 0.023. CONCLUSION: HPV16 lineage A was the most frequent lineage in both CIN2/CIN3 and cervical cancer samples, while lineage D was predominant in cervical cancer, suggesting a possible association between HPV16 lineage D and cervical cancer.

OBJETIVO: Tanto os tipos quanto as linhagens do Papilomavírus Humano (HPV) parecem ter diferentes capacidades carcinogênicas e estão associados a riscos variados para o desenvolvimento de neoplasia intraepitelial cervical (NIC) e câncer de colo do útero. O presente estudo tem como objetivo analisar a diversidade genética do genótipo HPV 16 nos casos de NIC2/NIC3 e câncer de colo de útero em mulheres da região Nordeste do Brasil. MéTODOS: Estudo transversal de base hospitalar realizado na região Nordeste do Brasil no período de 2014 a 2016. A amostra foi composta por 196 casos da variante HPV-16 (59 casos de NIC2/NIC3 e 137 de câncer do colo do útero). O teste de diferença de proporção foi usado para comparar os grupos NIC2/NIC3 e câncer de colo do útero por linhagem viral em relação à prevalência da linhagem HPV-16. Foi considerada significância estatística o valor de p < 0,05. RESULTADOS: As frequências de linhagem por diagnóstico histopatológico mostraram diferença limítrofe da linhagem A no grupo NIC2/NIC3 em relação ao grupo câncer de colo de útero (p = 0,053). Por outro lado, em relação à linhagem D, houve uma proporção maior nos casos de câncer (32,8%) quando comparado ao grupo NIC2/NIC3 (16,9%) e esta diferença se mostrou estatisticamente significante (p = 0,023). CONCLUSãO: A linhagem A do HPV-16 foi a mais frequente tanto nas amostras CIN2/CIN3 quanto nas amostras de câncer de colo de útero, enquanto a linhagem D predominou no câncer de colo do útero, sugerindo uma possível associação da linhagem D de HPV-16 com câncer de colo de útero.

Human Papillomavirus 16 Lineage D is Associated with High Risk of Cervical Cancer in the Brazilian Northeast Region / Papillomavirus humano 16 da linhagem D associado a alto risco de câncer de colo do útero em região do nordeste brasileiro

Abstract Objective Similar to Human Papillomavirus (HPV) genotypes, different lineages of a genotype also have different carcinogenic capabilities. Studies have shown that specific genotype lineages of oncogenic HPV are associated with variable risks for the development of cervical intraepithelial neoplasia (CIN2/CIN3) and cervical cancer. The present study aimed to analyze the genetic diversity of the HPV16 genotype in women with CIN2/CIN3 and cervical cancer, from the northeast region of Brazil. Methods A cross-sectional multicenter study was conducted in the northeast region of Brazil, from 2014 to 2016. This study included 196 cases of HPV16 variants (59 and 137 cases of CIN2/CIN3 and cervical cancer, respectively). The difference of proportion test was used to compare patients with CIN2/CIN3 and cervical cancer, based on the prevalent HPV16 lineage (p < 0.05). Results According to the histopathological diagnosis, the percentage of lineage frequencies revealed a marginal difference in the prevalence of lineage A in CIN2/CIN3, compared with that in cervical cancer (p = 0.053). For lineage D, the proportion was higher in cancer cases (32.8%), than in CIN2/CIN3 cases (16.9%), with p = 0.023. Conclusion HPV16 lineage A was the most frequent lineage in both CIN2/CIN3 and cervical cancer samples, while lineage D was predominant in cervical cancer, suggesting a possible association between HPV16 lineage D and cervical cancer.

Resumo Objetivo Tanto os tipos quanto as linhagens do Papilomavírus Humano (HPV) parecem ter diferentes capacidades carcinogênicas e estão associados a riscos variados para o desenvolvimento de neoplasia intraepitelial cervical (NIC) e câncer de colo do útero. O presente estudo tem como objetivo analisar a diversidade genética do genótipo HPV 16 nos casos de NIC2/NIC3 e câncer de colo de útero em mulheres da região Nordeste do Brasil. Métodos Estudo transversal de base hospitalar realizado na região Nordeste do Brasil no período de 2014 a 2016. A amostra foi composta por 196 casos da variante HPV-16 (59 casos de NIC2/NIC3 e 137 de câncer do colo do útero). O teste de diferença de proporção foi usado para comparar os grupos NIC2/NIC3 e câncer de colo do útero por linhagem viral em relação à prevalência da linhagem HPV-16. Foi considerada significância estatística o valor de p < 0,05. Resultados As frequências de linhagem por diagnóstico histopatológico mostraram diferença limítrofe da linhagem A no grupo NIC2/NIC3 em relação ao grupo câncer de colo de útero (p = 0,053). Por outro lado, em relação à linhagem D, houve uma proporção maior nos casos de câncer (32,8%) quando comparado ao grupo NIC2/NIC3 (16,9%) e esta diferença se mostrou estatisticamente significante (p = 0,023). Conclusão A linhagem A do HPV-16 foi a mais frequente tanto nas amostras CIN2/CIN3 quanto nas amostras de câncer de colo de útero, enquanto a linhagem D predominou no câncer de colo do útero, sugerindo uma possível associação da linhagem D de HPV-16 com câncer de colo de útero.

Methylation at 3'LCR of HPV16 can be affected by patient age and disruption of E1 or E2 genes.

CpG methylation at early promoter of HPV16 DNA, in the 3' end of the Long Control Region (3'LCR), has been associated to the presence of episomal forms of viral genome and, consequently, intact E1 and E2 ORFs. The DNA methylation would block the access of E2 viral protein to the E2 binding sites at early-promoter. However, is still unclear if methylation at 3'LCR of HPV16 DNA can also vary depending of other tumor characteristics in addition to viral DNA physical state. In this study, we evaluate whether the methylation level at the five CpG located at 3'LCR of HPV16 is associated to patient age and E1 and/or E2 ORFs integrity. DNA pyrosequencing was used to measure the methylation level in 69 invasive cervical cancer samples obtained from biopsies of patients attended at Brazilian National Institute of Cancer (INCA). PCR amplifications were performed to assess disruption status of E1 and E2 genes of HPV16. The methylation average per sample ranged widely, from <1 to 88.00%. Presence of intact E1/E2 genes and patient age were positively associated with average methylation in both bivariate analyses (p=0.003 and p=0.006, respectively), and multivariate analysis (p=0.002 and p=0.021, respectively), adjusted for tumor type (squamous cell carcinomas or adenocarcinomas) and HPV16 lineage. These findings showed that presence of intact E1/E2 open reading frames was associated with high levels of DNA methylation, and older patients showed higher levels of methylation than younger ones independently of viral genome disruption.

Estudo dos genótipos de HPV presentes em tumores do colo do útero em mulheres tratadas no INCA / [Study of HPV genotypes present in cervical tumors in women treated at INCA]

O câncer do colo do útero é o quarto tipo de câncer mais comum entre as mulheres no mundo. Sua incidência é cerca de duas vezes maior em países menos desenvolvidos em relação aos mais desenvolvidos. Dentre outros cofatores, a infecção pelo papilomavírus humano (HPV) tem sido bem documentada como fator necessário ao desenvolvimento deste tipo de câncer, sendo os tipos HPV16 e HPV18 responsáveis por aproximadamente 70-80% dos casos. A caracterização dos tipos virais mais frequentemente associados ao câncer cervical, permitiu o desenvolvimento de vacinas comerciais, atualmente disponibilizadas ou em fase de testes. Além disso, o interesse em variantes intratipo dos HPVs mais prevalentes está crescendo rapidamente, visto que evidências sugerem que essas variantes podem diferir biologicamente e etiologicamente no desenvolvimento e comportamento do tumor. Tendo em vista a relevância do câncer de colo de útero, a sua associação com diferentes tipos de HPVs, o desenvolvimento de vacinas, e o limitado número de estudos sobre a prevalência de diferentes tipos e subtipos desse câncer no Brasil, o presente projeto teve por objetivos: (1) Identificar a prevalência dos tipos de HPV identificados a partir de amostras de câncer cervical invasivo de 594 mulheres matriculadas no hospital do câncer II do Instituto Nacional do Câncer. (2) Levantar as características socioeconômicas desta coorte de pacientes. (3) Identificar a prevalência das variantes intratipo do HPV 16 e HPV 18. A detecção e genotipagem do HPV foram realizadas a partir da PCR e sequenciamento direto utilizando os iniciadores PGMY/GP, sendo identificados 370 amostras HPV 16; 77 amostras HPV 18; 33 amostras HPV45; 12 amostras HPV 35; 11 amostras HPV 58; 8 amostras HPV 73 e HPV52, respectivamente; 7 amostras HPV31 e HPV33, respectivamente; 6 amostras HPV 59 e HPV 39, respectivamente; duas amostras HPV 26, HPV 51, HPV 56 e HPV 68, respectivamente e, por fim, 1 amostra...

Cervical cancer is the forth most common cancer among women worldwide. The incidence isapproximately two times higher in less developed countries than in the more developed. Among other cofactors, infection with human papillomavirus (HPV) has been well documented as a necessary factor for the development of this cancer, and the HPV16 and HPV18 types account for approximately 70-80% of cases. The characterization of the virus types most commonly associated with cervical cancer has enabled the development of commercial vaccines currently available or being tested. Moreover, the interest invariants of the most prevalent HPV is rapidly growing, since evidence suggests that these variants maydiffer biologically and epidemiologically in the development and tumor behavior. Considering the importance of cervical cancer, its association with different types of HPV, vaccine development, and the limited number of studies on the prevalence of different types and subtypes of cervical cancer in Brazil, this study aimed to: (1) identify the prevalence of HPV types identified from invasive cervical cancer samplesfrom 594 women enrolled in the cancer hospital II of the National Cancer Institute...