RESUMO
BACKGROUND: There are no studies comparing the gingival crevicular fluid (GCF) cytokines expression with its corresponding values from the same tissue's sites. Such comparison might be of great value since most of the cytokine function is related to cell and/or tissue receptors. AIMS: Our aim was to use minimally invasive biopsies to evaluate the expression of interferon-gamma, interleukin 1 (IL-1) ß, IL-6, IL-17A, IL-17F, and their correlation with the expression in gingival fluid in patients with chronic periodontitis. MATERIALS AND METHODS: The collection of gingival fluid comprised 22 samples from 11 patients (mean age 46.73 ± 10.16 standard deviation years) with chronic periodontitis. The collection of biopsies comprised 22 samples from the same patients. Gingival fluid and biopsy were taken from the same site in one shallow and one deep site per patient. Gingival fluid samples were collected with periopaper® and analyzed using Luminex®. Biopsies were taken with a 2 mm diameter punch and analyzed for the same mediators using immunohistochemistry. RESULTS: The gingival fluid showed higher amounts for IL-1-ß in deep sites. Immunohistochemical markers were observed in the analyzed cells groups, both in deep and shallow sites, without significant differences between them. In the comparative analysis between immunohistochemical markers and GCF, IL-1-ß showed high concordance in shallow and deep sites. CONCLUSIONS: The use of a standardized punch of 2 mm diameter for periodontal tissue biopsies seems to be suitable for immunohistochemistry analysis and showed that the GCF may not express all the markers in the same proportion at the corresponding tissue.
Assuntos
Periodontite Crônica/metabolismo , Citocinas/metabolismo , Líquido do Sulco Gengival/química , Mediadores da Inflamação/metabolismo , Biópsia/métodos , Feminino , Humanos , Imuno-Histoquímica , Masculino , Pessoa de Meia-IdadeRESUMO
O objetivo foi avaliar o efeito do tratamento periodontal não cirúrgico, após 1 ano, na expressão salivar dos marcadores do metabolismo ósseo: TNF-α, SOST, PTH, OPG, OPN, OC, Leptina, IL-6, IL-1ß e FGF-23; em pacientes com periodontite crônica generalizada. Participaram deste estudo 15 pacientes com periodontite crônica generalizada (idade média 56,0 ï± DP 9,6 anos). Quinze pacientes com gengivite (idade média 39,7 ï± DP 4,4 anos) foram utilizados como controles. Foram utilizados os seguintes parâmetros clínicos: profundidade de bolsa à sondagem (PBS); nível de inserção clínica (NIC); índice de placa visível (IPV); índice de sangramento gengival (ISG) e índice de sangramento à sondagem (ISS). Foi realizada a coleta de saliva não estimulada (1ml) e congelada à -70°C para posterior análise. Os pacientes de ambos os grupos receberam tratamento periodontal não cirúrgico. Todos os dados foram coletados em 3 visitas no grupo com periodontite (baseline, 6 meses e 1 ano); e em 2 visitas no grupo com gengivite (baseline e 1 ano). Os biomarcadores foram mensurados por meio de um imunoensaio multiplex. No grupo com periodontite, houve redução significativa dos parâmetros % PBS ≥ 6 (p<0,001) e % NIC ≥ 5 (p<0,001), nas visitas 6 meses e 1 ano. Para os dados clínicos do grupo com gengivite, houve diminuição significativa após 1 ano para: % placa (p=0,001), % sangramento marginal (p=0,001), % sangramento sondagem (p=0,001), PBS (média pac.) (p=0,020) e NIC (média pac.) (p=0,001). Após o tratamento no grupo com periodontite, observou-se redução significativa da IL-1ß, IL-6, Leptina e TNF-α, entre a visita baseline e 6 meses (p=0,006; p=0,050; p=0,047; p= 0,014; respectivamente). Entre o baseline e 1 ano, houve diferença significante para a IL-1ß (p=0,010) e OPG (p=0,050). Já a IL-6 e OPG, mostraram uma tendência a redução após 1 ano (p=0,074; p=0,063; respectivamente). No grupo com gengivite, não foram observadas diferenças significativas entre as visitas baseline e 1 ano para todos os biomarcadores. No grupo com periodontite, na visita 1 ano, observamos correlação negativa significativa da OPG com % sangramento sondagem ( τ-b = -0,524 / p=0,006); no grupo com gengivite, na visita baseline, observamos correlação positiva significativa da IL-6 com % placa (τ-b= 0,548 / p= 0,005). Já na visita 1 ano, a Leptina passou a se correlacionar de forma mais forte com % placa (τ-b=0,624 / p=0,010) e com % sangramento marginal (τ-b=0,751 / p= 0,001). Concluindo, a terapia periodontal não cirúrgica levou a uma melhora significativa dos parâmetros clínicos periodontais associada à uma redução significante nos níveis de TNF-α, Leptina e IL-1ß; e uma tendência à redução dos biomarcadores OPG e IL-6. Após 1 ano, verificamos que os níveis dos biomarcadores do grupo com periodontite se aproximaram aos valores do grupo com gengivite, sugerindo que o tratamento periodontal foi capaz de equalizar a resposta imunológica.
The aim of this study was to evaluate the effect of non-surgical periodontal therapy, after 1 year, on the salivar expression of bone metabolism markers: TNF-α, SOST, PTH, OPG, OPN, OC, Leptin, IL-6, IL-1ß and FGF-23; in patients with generalized chronic periodontitis. Fifteen patients with generalized chronic periodontitis (mean age 56.0 ± SD 9.6 years) were included in this study. Fifteen patients with gingivitis (mean age 39.7 ± SD 4.4 years) were used as controls. Clinical evaluation parameters including probing pocket depth (PD), clinical attachment level (CAL), visible plaque index (VPI), gingival index bleeding (GI) and bleeding on probing (BOP) were used. Non-stimulated whole saliva was collected (1ml) and frozen at -70°C for further analysis. Patients from both groups received non-surgical periodontal treatment. All data were collected in 3 visits in the group with periodontitis (baseline, 6 months and 1 year); and in 2 visits in the group with gingivitis (baseline and 1 year). The biomarkers expression were evaluated through multiplex technology. In the group with periodontitis, there was a significant reduction of the parameters % PD ≥ 6 (p <0,001) and % CAL ≥ 5 (p <0,001), at 6 months and 1 year visits. For the clinical data of the group with gingivitis, there was a significant decrease after 1 year for: plaque (p=0,001), sulcus bleeding (p=0,001), bleeding on probing (p=0,001), PD (p=0,020) and CAL (p=0,001). After treatment in the group with periodontitis, a significant reduction of IL-1ß, IL-6, Leptin and TNF-α was observed between baseline and 6 months visit (p=0,006; p=0,050; p=0,047; p=0,014; respectively). Between baseline and 1 year, there was significant difference for IL-1ß (p=0,010) and OPG (p=0,050). On the other hand, IL-6 and OPG showed a tendency to decrease after 1 year (p=0,074; p=0,063; respectively). In the group with gingivitis, no significant differences were observed between the baseline visits and 1 year for all biomarkers. In the group with periodontitis, at the 1-year visit, we observed a significant negative correlation of OPG with bleeding on probing (τ-b=-0,524 / p=0,006); in the group with gingivitis, at the baseline visit, we observed a significant positive correlation of IL-6 with plaque (τ-b=0,548 / p=0,005). At the 1-year visit, Leptin correlated more strongly with plaque (τ-b=0,624 / p=0,010) and with sulcus bleeding (τ-b=0,751 / p=0,001). In conclusion, non-surgical periodontal therapy led to a significant improvement in periodontal clinical parameters associated with a significant reduction in levels of TNF-α, Leptin and IL-1ß; the OPG and IL-6 showed a tendency to reduce. After 1 year, we observed that the biomarkers levels in the group with periodontitis approximate the values of the group with gingivitis, suggesting that the periodontal treatment was able to equalize the immune response.
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Idoso , Saliva/química , Osso e Ossos/metabolismo , Periodontite Crônica/terapia , Gengivite/terapia , Reabsorção Óssea , Biomarcadores , Índice Periodontal , CitocinasRESUMO
O objetivo desse estudo foi analisar a expressão do interferon gama (INF-γ) em biópsias gengivais de sítios rasos e profundos de pacientes com periodontite crônica severa, e correlacionar a expressão do INF- γ no fluido gengival. Foram coletadas biópsias de 22 sítios profundos, 18 sítios rasos e 14 sítios controles. O fluido gengival foi coletado de 12 sítios profundos e 8 sítios rasos. Profundidade de bolsa à sondagem (PB); nível de inserção clínica (NIC); índice de placa visível (IPV) e índice de sangramento gengival (ISG) foram avaliados. As análises morfológica e imuno-histoquímica dos tecidos removidos foram realizadas. A intensidade da marcação do INF- γ nos tecidos foi avaliada semiquantitativamente. Houve uma tendência a um padrão de marcação similar nos sítios rasos e profundos, com predomínio de marcação fraca nos sítios profundos. Não houve diferenças estatisticamente significantes entre os três grupos. Não houve correlação significante (Spearman) com a expressão do INF- γ nos tecidos epiteliais e conjuntivos com os dados clínicos e o fluido gengival. Concluímos que não foi possível observar diferenças na expressão do INF- γ em biópsias gengivais nos sítios rasos e profundos de pacientes com periodontite quando comparados à indivíduos saudáveis, o que pode ser atribuído ao caráter bifásico do INF- γ.
The aim of this study was to analyze the expression of interferon-gamma (INF-γ) in gingival biopsies from shallow and deep sites in patients with severe chronic periodontitis and correlate the expression of INF-γ in the gingival crevicular fluid (GCF). Biopsies were collected from 22 deep sites, 18 shallow sites and 14 control sites. The GCF samples were collected from 12 deep and 8 shallow sites. Probing pocket in the epithelial and connective tissues with the clinical data and with the GCF. We conclude that there were no differences in the expression of INF-γ in gingival biopsies in shallow and deep sites of pacients with periodontitis compared to healthy subjects, which may be attributed to the biphasic character of INF-γ.
Assuntos
Humanos , Adolescente , Adulto Jovem , Biópsia , Imuno-Histoquímica , Interferon gama , Líquido do Sulco Gengival , PeriodontiteRESUMO
O objetivo desse estudo foi analisar a expressão do interferon-gamma (INF-) em biópsias gengivais de sítios rasos e profundos de pacientes com periodontite crônica severa. O objetivo secundário foi correlacionar a expressão do INF- no fluido gengival com os sítios onde foram coletadas as biópsias gengivais. Foram coletadas biópsias de 22 pacientes portadores de periodontite crônica generalizada ou localizada severas (idade média 45,5 DP 8,9 anos), sendo 22 sítios profundos e 18 sítios rasos. O grupo controle foi composto por 14 pacientes clinicamente saudáveis (idade média 39,35 DP 16,5 anos). No total, foram 54 biópsias coletadas de 36 pacientes. As amostras do fluido gengival foram coletadas de alguns dos mesmos sítios de onde foram realizadas as biópsias, totalizando 12 sítios profundos, 8 sítios rasos e 4 sítios controle. Foram utilizados os parâmetros clínicos de avaliação de profundidade de bolsa à sondagem (PB); nível de inserção clínica (NIC); índice de placa visível (IPV) e índice de sangramento gengival (ISG). O tecido foi removido com punch de 2 mm de diâmetro, na área cirúrgica (grupo controle) ou na consulta para raspagem subgengival com ou sem acesso cirúrgico (grupo teste) e armazenados em Eppendorffs com 1 ml de solução de formaldeído a 10% para posterior análise morfológica e imuno-histoquímica. A intensidade da marcação do INF- foi avaliada semiquantitativamente nas células epiteliais, plasmócitos, macrófagos, fibroblastos e células endoteliais, considerando-se marcação forte (escore 2), marcação fraca (escore 1) ou ausência de marcação (escore 0). O teste de Kruskal-Wallis foi utilizado para comparar a expressão do INF- nos tecidos epitelial e conjuntivo, entre os três grupos (sítios profundos e rasos da periodontite e sítios controle). Observamos uma tendência a um padrão de marcação similar nos sítios rasos e profundos, com predomínio de marcação fraca nos sítios profundos. Nos sítios controle a marcação do...
The aim of this study was to analyze the expression of interferon-gamma (INF-γ) in gingival biopsies from shallow and deep sites in patients with severe chronic periodontitis. The secondary objective was to correlate the expression of INF-γ in the gingival crevicular fluid (GCF) with sites where the gingival biopsies were collected. Biopsies from 22 patients with chronic generalized or localized severe periodontitis (mean age 45.5 ± SD 8.9 years), 22 deep and 18 shallow sites were collected. The control group consisted of 14 patients clinically healthy (mean age 39.35 ± SD 16.5 years). In total, 54 biopsies were collected from 36 patients. The GCF samples were collected from some of the same sites where biopsies were performed, totaling 12 deep sites, 8 shallow sites and 4 control sites. Clinical evaluation parameters including probing pocket depth (PPD), clinical attachment level (CAL), visible plaque index (VPI) and gingival bleeding index (GBI) were used. The tissue was removed with a 2 mm of diameter punch, in the surgery area (control group) or in the subgingival scaling with or without surgical access (test group) and stored in an Eppendorff with 1 ml of 10% formaldehyde for subsequent morphological and immunohistochemical analysis. The intensity of staining was evaluated semi - quantitatively in the epithelial cells, plasma cells, macrophages, fibroblasts and endothelial cells, considering strong staining (score 2), weak staining (score 1) or absence of staining (score 0). The Kruskal-Wallis test was used to compare the expression of INF-γ in epithelial and connective tissues between the three groups (shallow and deep sites of periodontitis and control sites). We observed a trend for a similar pattern of staining in the shallow and deep sites, with a predominance of weak staining in deep sites. In control sites the staining of the epithelium was predominant. However, we could not demonstrate statistically significant differences between...
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adolescente , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Idoso , Periodontite Crônica , Líquido do Sulco Gengival , Gengiva/patologia , Interferon gama , Estudos Transversais , Imuno-HistoquímicaRESUMO
A doença periodontal é o resultado de uma resposta inflamatória crônica ao biofilme bacteriano dentário e sua progressão está associada a uma combinação de fatores, como a presença de bactérias patogênicas, aspectos relacionados a resposta imunológica do hospedeiro e fatores ambientais. O objetivo desse estudo foi realizar uma revisão de literatura sobre o interferon-g (IFN-g) e o seu papel na doença periodontal. O IFN foi inicialmente conhecido pela sua capacidade de inibir a replicação viral e, posteriormente, foi demonstrado seu envolvimento na regulação do crescimento celular e no efeito imunomodulatório, com elevado potencial terapêutico, sendo utilizado para o tratamento de uma variedade de doenças virais e malignas. Por sua natureza pró-inflamatória, representa uma citocina chave na modulação da osteoclastogênese na doença periodontal, agindo de forma direta, indireta ou de ambas as formas. O IFN-g parece ser importante para o diagnóstico de atividade da doença periodontal e seus níveis elevados no soro e no fluido gengival podem ser associados com a severidade da mesma. O IFN-γ é um bom exemplo do duplo papel de várias citocinas no turnover do osso, uma vez que é capaz de ativar ou inibir a reabsorção óssea osteoclástica, demonstrando ser um assunto bastante confuso ainda hoje. Concluímos então que o IFN-g possui um importante potencial patogênico na severidade da doença periodontal, porém sua importância terapêutica ainda depende da realização de mais estudos para que seus mecanismos possam ser melhor compreendidos e aplicados na prática clínica diária
Periodontal disease is the result of a chronic inflammatory response to dental biofilm and its progression is associated with a combination of factors such as the presence of pathogenic bacteria, aspects of the host immune response and environmental factors. The aim of this study was to conduct a literature review of the interferon-γ (IFN-γ) and their role in periodontal disease. The IFN was initially known for its ability to inhibit viral replication and was subsequently demonstrated its involvement in regulating cell growth and immunomodulatory effect. The high therapeutic potential of INF has being used for the treatment of a variety of viral diseases and malignancies. By its proinflammatory nature, INF represents a key cytokine in the modulation of osteoclastogenesis in periodontal disease, acting directly, indirectly or in both ways. IFN-γ appears to be important for the diagnosis of periodontal disease activity and the presence of elevated levels in serum and gingival fluid can be associated with disease severity. IFN-γ is a good example of the dual role of a cytokine in bone turnover, since it is able to activate or inhibit osteoclastic bone resorption at the same time. Therefore, we concluded that IFN-γ has its importance in the pathogenesis of periodontal disease, but its therapeutic importance needs further studies to understand the mechanisms and its clinical applications in daily practice