High-throughput microsphiltration to assess red blood cell deformability and screen for malaria transmission-blocking drugs.

The mechanical retention of rigid erythrocytes in the spleen is central in major hematological diseases such as hereditary spherocytosis, sickle-cell disease and malaria. Here, we describe the use of microsphiltration (microsphere filtration) to assess erythrocyte deformability in hundreds to thousands of samples in parallel, by filtering them through microsphere layers in 384-well plates adapted for the discovery of compounds that stiffen Plasmodium falciparum gametocytes, with the aim of interrupting malaria transmission. Compound-exposed gametocytes are loaded into microsphiltration plates, filtered and then transferred to imaging plates for analysis. High-content imaging detects viable gametocytes upstream and downstream from filters and quantifies spleen-like retention. This screening assay takes 3-4 d. Unlike currently available methods used to assess red blood cell (RBC) deformability, microsphiltration enables high-throughput pharmacological screening (tens of thousands of compounds tested in a matter of months) and involves a cell mechanical challenge that induces a physiologically relevant dumbbell-shape deformation. It therefore directly assesses the ability of RBCs to cross inter-endothelial splenic slits in vivo. This protocol has potential applications in quality control for transfusion and in determination of phenotypic markers of erythrocytes in hematological diseases.

Biomonitorización del impacto en la salud y medio ambiente de poblaciones rurales expuestas al uso de Glifosato en la provincia de Santiago del Estero / Biomonitoring of the impact on the health and environment of rural populations exposed to the use of Glyphosate in the province of Santiago del Estero

El objetivo del presente estudio fue demostrar la presencia de glifosato en mieles y asociar el grado de contaminación ambiental por el herbicida con la distancia a la que se encuentran los cultivos genéticamente modificados. Determinar si existe relación entre la contaminación ambiental detectada, la exposición ambiental al glifosato y los niveles del herbicida en fluidos biológicos humanos con el daño genotóxico producido en células humanas in vivo en las poblaciones expuestas en las zonas de cultivos transgénicos. Proponer un modelo teórico de las posibles causas y factores que contribuyen a la contaminación ambiental por el herbicida y el daño genético e identificar posibles biomarcadores de exposición que permitan la biomonitorización y evaluación del riesgo de exposición. Para ellos analizaron 103 muestras de mieles provenientes de dos zonas geográficas de la provincia con y sin exposición a fumigaciones con glifosato. Se analizaron también 183 muestras de orina y células epiteliales bucales de pobladores de zonas expuestas y no expuestas a fumigación con glifosato. En las muestras de orina y mieles se determinaron los niveles de glifosato mediante el ensayo de ELISA de la marca Abraxis. En las células epiteliales bucales se determinó la frecuencia de micronúcleos. Los niveles de glifosato en mieles y orina resultaron estadísticamente diferentes entre las muestras provenientes de zonas expuestas al glifosato en comparación con las no expuestas. La diferencia entre la frecuencia de micronúcleos en población expuesta y no expuesta fue estadísticamente significativa