Application of CRISPR/Cas9 for Rapid Genome Editing of Pseudorabies Virus and Bovine Herpesvirus-1.

The CRISPR/Cas9 system is widely used to manipulate viral genomes. Although Alphaherpesvirinae genomes are large and complicated to edit, in recent years several Pseudorabies virus (PRV) mutants have been successfully generated using the CRISPR/Cas9 system. However, the application of CRISPR/Cas9 editing on another member of alpha herpesviruses, bovine herpesvirus-1 (BHV-1), is rarely reported. This paper reports a rapid and straightforward approach to manipulating herpesviruses genome using CRISPR/Cas9. The recombinant plasmids contained the left and right arm of the thymidine kinase (TK) gene of PRV or of the glycoprotein I (gI) and glycoprotein E (gE) of BHV-1. Upon the cleavage of the TK or gIgE gene by Cas9 protein, this was replaced by the enhanced green fluorescence protein (eGFP) by homologous recombination. With this approach, we generated recombinant TK-/eGFP+ PRV and gIgE-/eGFP+ BHV-1 mutants and then proceeded to characterize their biological activities in vitro and in vivo. In conclusion, we showed that alpha herpesvirus, including PRV and BHV-1, can be rapidly edited using the CRISPR/Cas9 approach paving the way to the development of animal herpesvirus vaccines.

Lactancia materna exclusiva: factores intervinientes en el abandono antes de los 6 meses / Exclusive breastfeeding: factors involved in the abandonment before 6 months

La lactancia maternal (LM) proporciona el alimento ideal para el crecimiento saludable y el desarrollo de los infantes en los primeros meses de vida. La leche materna es el primer alimento natural para los lactantes, les provee toda la energía y nutrientes que necesitan en los primeros meses de vida, y continúa proveyendo hasta la mitad o más de las necesidades nutricionales durante la segunda mitad del primer año, y un tercio durante el segundo año de vida. La lactancia materna exclusiva (LME) es la alimentación con leche materna exclusivamente sin el agregado de otros componentes como por ejemplo agua. La OMS recomienda LME durante los primeros seis meses de vida y a partir de este momento comenzar con la introducción de alimentos manteniendo siempre la LM, hasta los dos años en contextos de pobreza...