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PLoS Genet ; 13(2): e1006611, 2017 02.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-28182654

RESUMO

Germ cells contain non-membrane bound cytoplasmic organelles that help maintain germline integrity. In C. elegans they are called P granules; without them, the germline undergoes partial masculinization and aberrant differentiation. One key P-granule component is the Argonaute CSR-1, a small-RNA binding protein that antagonizes accumulation of sperm-specific transcripts in developing oocytes and fine-tunes expression of proteins critical to early embryogenesis. Loss of CSR-1 complex components results in a very specific, enlarged P-granule phenotype. In a forward screen to identify mutants with abnormal P granules, ten alleles were recovered with a csr-1 P-granule phenotype, eight of which contain mutations in known components of the CSR-1 complex (csr-1, ego-1, ekl-1, and drh-3). The remaining two alleles are in a novel gene now called elli-1 (enlarged germline granules). ELLI-1 is first expressed in primordial germ cells during mid-embryogenesis, and continues to be expressed in the adult germline. While ELLI-1 forms cytoplasmic aggregates, they occasionally dock, but do not co-localize with P granules. Instead, the majority of ELLI-1 aggregates accumulate in the shared germline cytoplasm. In elli-1 mutants, several genes that promote RNAi and P-granule accumulation are upregulated, and embryonic lethality, sterility, and RNAi resistance in a hypomorphic drh-3 allele is enhanced, suggesting that ELLI-1 functions with CSR-1 to modulate RNAi activity, P-granule accumulation, and post-transcriptional expression in the germline.


Assuntos
Proteínas de Caenorhabditis elegans/genética , Caenorhabditis elegans/genética , Grânulos Citoplasmáticos/metabolismo , Células Germinativas/metabolismo , Interferência de RNA , Fatores Genéricos de Transcrição/genética , Alelos , Animais , Animais Geneticamente Modificados , Sequência de Bases , Caenorhabditis elegans/embriologia , Caenorhabditis elegans/crescimento & desenvolvimento , Proteínas de Caenorhabditis elegans/metabolismo , RNA Helicases DEAD-box/genética , RNA Helicases DEAD-box/metabolismo , Perfilação da Expressão Gênica/métodos , Regulação da Expressão Gênica no Desenvolvimento , Proteínas de Fluorescência Verde/genética , Proteínas de Fluorescência Verde/metabolismo , Imuno-Histoquímica , Hibridização in Situ Fluorescente , Microscopia de Fluorescência , Mutação , Proteínas de Ligação a RNA/genética , Proteínas de Ligação a RNA/metabolismo , RNA Polimerase Dependente de RNA/genética , RNA Polimerase Dependente de RNA/metabolismo , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Fatores Genéricos de Transcrição/metabolismo
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