RESUMO
In this study, we characterize proviral DNA of 20 HIV-1 asymptomatic antiretroviral-naive patients from Venezuela in env, gag, and pol genes regions. Results from both env/gag HMA subtyping and phylogenetic analysis of pol partial sequences led to the description of clade B in all cases. Nevertheless, the high prevalence of polymorphisms was particularly evident among the protease sequences. A 10% prevalence of major resistance mutations to RTIs was found. Our data also suggested that the protease polymorphisms I62T and V77T could be considered as molecular markers of the subtype B local epidemic. In addition, we show how proviral DNA can be used as a reliable tool to follow trends of resistance mutation transmission.
Assuntos
Farmacorresistência Viral Múltipla/genética , Infecções por HIV/tratamento farmacológico , HIV-1/efeitos dos fármacos , Análise Mutacional de DNA , Feminino , Infecções por HIV/classificação , Infecções por HIV/epidemiologia , Protease de HIV/classificação , Protease de HIV/genética , Transcriptase Reversa do HIV/classificação , Transcriptase Reversa do HIV/genética , HIV-1/classificação , Humanos , Masculino , Dados de Sequência Molecular , Filogenia , Venezuela/epidemiologiaAssuntos
Infecções por HIV/virologia , HIV-1/classificação , DNA Complementar , Genoma Viral , Infecções por HIV/epidemiologia , HIV-1/genética , HIV-1/isolamento & purificação , Epidemiologia Molecular , Dados de Sequência Molecular , Filogenia , Prevalência , RNA Viral , Análise de Sequência de DNA , Homologia de Sequência , Venezuela/epidemiologiaRESUMO
La leishmaniasis visceral (LV) es una enfermedad parasitaria producida por protozoarios del género leishmania, es endémica en muchos países a nivel mundial y representa un problema de salud pública pudiendo ser fatal si no se diagnostica y trata a tiempo. El perro doméstico es el principal reservorio de leishmanias viscerotropas en el Nuevo Mundo y juega un papel muy importante en la transmisión a humanos. Debido a esto es imperante el diagnóstico temprano de los reservorios, mediante la demostración de anticuerpos específicos en el suero con pruebas sensibles, rápidas y costo - efectivas como la ELISA, Dot-ELISA, MABA e IFI que requieren para su realización de un anticuerpo secundario. En el presente trabajo se produjo un anticuerpo anti-IgG canino conjugado con proteínas reporteras para ser evaluado en las técnicas antes mencionadas. Se demostró una mayor sensibilidad de este anticuerpo conjugado con peroxidasa en las pruebas de MABA y ELISA así como el conjugado con fluoresceína en IFI al comparar con el anticuerpo comercial. El uso de estos conjugados en el diagnóstico de la LV canina mostró ser de gran utilidad y costo efectivos si se considera que los volúmenes a preparar se pueden ajustar a los requerimientos de las diversas técnicas diagnósticas siendo altamente sensibles y económicos en comparación con los comerciales.
Visceral leishmaniasis (VL) is a parasitic disease caused by protozoan parasites of the Leishmania genus. Endemic in many countries worldwide, VL represents a serious public health issue and might be fatal if untreated. Infected domestic dogs are the main reservoir of viscerotropic species of Leishmania in the New World and plays an important role as source of infection to humans. Early diagnosis of dog reservoirs are therefore required by demonstrating specific serum antibodies against the parasite with rapid, sensitive and cost-effective test like ELISA, Dot - ELISA, IFI and Multiple Antigen Binding Assay (MABA). Here we produce an anti canine IgG antibody and tested it in those assays by conjugating with reporter proteins. Results demonstrated a higher sensitivity of this antibody conjugated with HRP in MABA and ELISA test, as well as conjugated with FITC on the IFI test, when compare to the commercial peroxidaseconjugated antibody. The use of this conjugate on canine VL diagnosis proved to be useful, highly sensitive and cost effective.