Molecular epidemiology of KPC-producing Klebsiella pneumoniae isolated from patients in two public hospitals in Carabobo and Zulia states, Venezuela. / Epidemiología molecular de aislados clínicos de Klebsiella pneumoniae productores de carbapenemasas tipo KPC provenientes de dos hospitales públicos en los estados Carabobo y Zulia, Venezuela.

Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC)-producing bacteria (K. pneumonia carbapenemase) are the most important causative agents of nosocomial infections worldwide. These isolates have been identified in Venezuela, but little is known about their local spread. The aim of this study was to perform molecular epidemiology of KPC-producing K. pneumoniae isolated from two public hospitals in the Carabobo and Zulia states of Venezuela. Thirty-two K. pneumoniaei solates, phenotypically classified as KPC producers were subjected to PCR to detect the presence of blaKPC genes and their location within transposon Tn4401, and the blaKPC product was sequenced to identify the KPC allele. Genotypic analysis was performed using repeated extragenic palindromic PCR (rep-PCR) and Multi Locus Sequence Typing (MLST). Finally, a conjugation assay determined whether the blaKPC genes were carried on transferable plasmids. The results indicate that the 32 isolates contained the blaKPC-2 variant associated with isoform Tn4401b, and were distributed in nine sequence types (ST), one of which was new. Conjugation assays indicate that 87.5% of the isolates contain the gene blaKPC on mobilizable plasmids. In these hospitals, the blaKPC-2 gene is spreading through the plasmids carrying the transposon Tn4401b. The most common ST belongs to Clonal Complexes CC258 and CC147, which play an important role in the dispersion of resistance to carbapenems worldwide.

Association between Helicobacter pylori and intestinal parasites in an Añu indigenous community of Venezuela.

BACKGROUND: Helicobacter pylori (Hp) and enteroparasite infections are highly prevalent in populations with poor living conditions, like the Amerindian communities. Identifying associations between both types of infectious agents could help to detect shared risk factors or transmission routes in these minority ethnic groups. Therefore, the prevalence and association between Hp and enteroparasites were investigated in an indigenous community whose living conditions favor such infectious diseases. METHODS: Seropositivity (anti-Hp-specific IgG) and active infection (stool antigen test), intestinal parasitosis (direct and concentrated coproparasitological test, methylene blue, and Kinyoun stains), and risk factors for fecal-oral transmission were determined in 167 children and 151 adults of the Añu indigenous community living at the Sinamaica Lagoon, in Venezuela. RESULTS: A high rate of Hp infection (seropositivity and active infection) and enteroparasitosis was evidenced, as expected. Some significant associations were detected: direct associations between Hp and polyparasitic infection, helminths, and protozoan (particularly in children); inverse association between Hp and Giardia lamblia. No shared epidemiological factors were identified for Hp and the detected intestinal parasites, probably due to overlapping factors. CONCLUSION: Direct associations detected support the participation of the fecal-oral route in the transmission of the involved infectious agents. Inverse relationship (Hp) and G. lamblia may suggest the existence of antagonistic interactions between them. Further research is required to elucidate the mechanisms underlying these associations.

Fluconazol como alternativa terapéutica en infecciones asociadas a Mycobacterium tuberculosis / Fluconazole as a therapeutic alternative in infections associated with Mycobacterium tuberculosis

Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis) es un microorganismo cuya importancia como agente infeccioso ha permanecido a través de los años, pero que se ha convertido en una emergencia y un grave problema de salud pública, como respuesta a la evolución en su comportamiento ante los antimicrobianos de primera línea para su tratamiento y al surgimiento de cepas multi-resistentes, lo que amerita el uso de alternativas terapéuticas que permitan su control. El objetivo del trabajo fue evaluar el comportamiento in vitro de M. tuberculosis ante el antimicótico fluconazol, para su posible uso como alternativa terapéutica. Para ello, se evaluaron 6 cepas de M. tuberculosis: 2 resistentes a rifampicina, 2 resistentes a isoniazida y 2 sensibles a ambos antimicrobianos, Se utilizó el método de Concentración Inhibitoria Mínima, utilizando la técnica en microplaca con Azul de Alamar y la técnica de dilución en tubo. Ambas metodologías mostraron sensibilidad ante bajas concentraciones de fluconazol (0,0625 µg/ml). Todas las cepas fueron sensibles a la combinación fluconazol/isoniazida; mientras que, a la combinación fluconazol/rifampicina mostraron resistencia, indicando el efecto antagónico de la rifampicina sobre el fluconazol. Los resultados permiten concluir y sugerir el posible uso terapéutico del fluconazol ante las infecciones asociadas por M. tuberculosis.

Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis) is a microorganism whose importance as an infectious agent has remained over the years but which has become a recent emergency and a serious public health problem in response to the evolution in its behavior against first-line antimicrobials, for its treatment and the emergence of multi-resistant strains, which require the use of therapeutic alternatives that allow its control. The objective of the work was to evaluate the in vitro behavior of M. tuberculosis before the antifungal agent fluconazole, for its possible use as a therapeutic alternative. To this, six strains were evaluated M. tuberculosis: 2 resistants to rifampicin, 2 resistants to isoniazid and 2 sensitive to both antimicrobials. We used the method of Minimum Inhibitory Concentration, using the microplate technique with Alamar Blue and the tube technique. Both methodologies showed sensitivity to low concentrations of fluconazole (0.0625 µg/ml). All strains were sensitive to the fluconazole / isoniazid combination; whereas, when exposed to the fluconazole / rifampicin combination, the strains showed resistance, indicating the antagonistic effect of rifampicin on fluconazole. The results allow us to conclude and suggest the possible therapeutic use of fluconazole against infections associated with M. tuberculosis.

Epidemiología molecular de aislados clínicos de Klebsiella pneumoniae productores de carbapenemasas tipo KPC provenientes de dos hospitales públicos en los estados Carabobo y Zulia, Venezuela / Molecular epidemiology of KPC-producing Klebsiella pneumoniae isolated from patients in two public hospitals in Carabobo and Zulia states, Venezuela

Klebsiella pneumoniae productora de carbapenemasas tipo KPC es uno de los principales agentes causante de infecciones nosocomiales a nivel mundial. En Venezuela se han identificado aislados de esta bacteria, sin embargo, se conoce poco sobre su dispersión. El objetivo de este estudio fue realizar la epidemiología molecular de aislados de K. pneumoniae productores de KPC provenientes de dos hospitales públicos ubicados en los estados Carabobo y Zulia. Se seleccionaron 32 aislados de K. pneumoniae clasificados fenotípicamente como productores de KPC, se les realizó la detección del gen bla KPC así como su ubicación en el transposón Tn4401 a través de PCR. El producto de PCR del gen blaKPC se secuenció para identificar los alelos circulantes. El análisis genotípico se realizó empleando las técnicas de amplificación por PCR de las secuencias repetidas extragénicas palindrómicas (rep-PCR) y la secuenciación de múltiples loci (MLST). Mediante ensayos de conjugación, se determinó si los genes bla KPC se encontraban en moléculas plasmídicas.Los resultados indican que los 32 aislados contenían la variante del gen bla KPC-2 asociada a la isoforma Tn4401 b y se distribuyeron en 9 secuencias tipo (ST), siendo una de ellas nueva. Los ensayos de conjugación indican que el 87,5% de los aislados tienen al gen bla KPC en plásmidos movilizables. En estos hospitales el gen bla KPC-2 se está dispersando a través de plásmidos que llevan al transposón Tn4401 b. Las ST más comunes pertenecen a los Complejos Clonales CC258 y CC147, que desempeñan un papel importante en la dispersión de la resistencia a carbapenemes a nivel mundial.

Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC)-producing bacteria ( K. pneumoniae carbapenemase ) are the most important causative agents of nosocomial infections worldwide. These isolates have been identified in Venezuela, but little is known about their local spread. The aim of this study was to perform molecular epidemiology of KPC-producing K. pneumoniae isolated from two public hospitals in the Carabobo and Zulia states of Venezuela. Thirty-two K. pneumoniaei solates, phenotypically classified as KPC producers were subjected to PCR to detect the presence of bla KPC genes and their location within transposon Tn4401 , and the bla KPC product was sequenced to identify the KPC allele. Genotypic analysis was performed using repeated extragenic palindromic PCR (rep-PCR) and Multi Locus Sequence Typing (MLST). Finally, a conjugation assay determined whether the bla KPC genes were carried on transferable plasmids. The results indicate that the 32 isolates contained the bla KPC-2 variant associated with isoform Tn4401 b, and were distributed in nine sequence types (ST), one of which was new. Conjugation assays indicate that 87.5% of the isolates contain the gene bla KPC on mobilizable plasmids. In these hospitals, the bla KPC-2 gene is spreading through the plasmids carrying the transposon Tn4401 b. The most common ST belongs to Clonal Complexes CC258 and CC147, which play an important role in the dispersion of resistance to carbapenems worldwide.

Riesgo microbiológico asociado al uso de teléfonos móviles en laboratorios clínicos hospitalarios de Maracaibo-Venezuela / Microbiological hazard associated with using of mobile phones in hospital clinical laboratories from Maracaibo-Venezuela

El uso de teléfonos móviles se ha generalizado en las instituciones de salud, inclusive en áreas con riesgos microbiológicos definidos, como los laboratorios clínicos. En el presente estudio, se investigó la presencia de bacterias potencialmente patógenas, en los teléfonos móviles del personal de laboratorio de cuatro instituciones hospitalarias de Maracaibo, Venezuela. Se realizó el cultivo microbiológico cualitativo de hisopados de la superficie de 200 teléfonos. Mediante un cuestionario se indagó la adherencia del personal a las prácticas higiénicas estándar durante la jornada laboral. En 83% de los teléfonos se evidenció contaminación bacteriana y en 29% se identificó agentes con potencial patogénico definido, predominando Enterococcus spp., anaerobios estrictos, Staphylococcus aureus y enterobacterias. Algunas cepas patógenas presentaron patrones de resistencia sugestivos de gérmenes nosocomiales. Un elevado porcentaje del personal abordado admitió no aplicar medidas higiénicas mínimas al utilizar sus teléfonos en el ambiente laboral. Los resultados microbiológicos obtenidos, aunados al bajo nivel de compromiso del personal de laboratorio con las prácticas higiénicas estándar, permiten atribuirle un importante riego microbiológico al uso de teléfonos móviles en los laboratorios clínicos, que podría afectar no sólo a los dueños y manipuladores habituales de tales dispositivos, sino también extenderse a sus manipuladores ocasionales a nivel extrahospitalario.

The use of mobile phones is widespread in health institutions, including areas with defined microbiological risk as clinical laboratories. In this study, the presence of potentially pathogenic bacteria was investigated in mobile phones of laboratory personnel of four hospitals of Maracaibo, Venezuela. Qualitative microbiological culture of swabs from the surface of 200 mobile phones was performed. A questionnaire was applied, to evaluate adherence of staff to standard hygiene practices during the workday. In 83% of phones bacterial contamination was evidenced, and 29% had bacteria with defined pathogenic potential, predominantly Enterococcus spp., strict anaerobes bacteria, Staphylococcus aureus and enterobacteria. Some pathogenic strains showed resistance patterns suggestive of nosocomial bacteria. A high percentage of staff refused to apply minimal hygiene measures to manipulate their phones during the workday. Microbiological results, analyzed together with the low level of adherence of personnel to the standard hygienic practices, allow attributing an important hazard to mobiles phone use in clinical laboratories, which could involve not only owners of such devices and usual manipulators, but also could extend to his occasional manipulators in the community.

Bacterias enteropatógenas en la comunidad étnica añu de la Laguna de Sinamaica, Estado Zulia, Venezuela / Enteropathogenic bacteria in the añu ethnic community from Laguna de Sinamaica, Zulia State, Venezuela

Los estudios poblacionales sobre prevalencia de enteropatógenos bacterianos son escasos, particularmente en comunidades indígenas. En el presente estudio se investigó la prevalencia de bacterias enteropatógenas en muestras de materia fecal correspondientes a 378 individuos de la etnia añu, de diferente edad y género, residentes en la Laguna de Sinamaica, estado Zulia. Se realizó el cultivo bacteriológico convencional, excluyendo las categorías diarreogénicas de Escherichia coli. Se obtuvieron 71 cultivos positivos (18,8%), con predominio de las infecciones por un solo agente (58 casos, 81,7%), aunque también se detectaron asociaciones entre dos o tres especies (15,5% y 2,8%, respectivamente). En total se aislaron 86 cepas bacterianas, cuya distribución fue la siguiente: Aeromonas spp.: 34 aislamientos (39,5%), Vibrio spp.: 27 (31,4%), Shigella spp.: 11 (12,8%), Campylobacter spp.: 9 (10,5%), Plesiomonas shigelloides: 3 (3,5%) y Salmonella enterica: 2 (2,3%). V. parahaemolyticus resultó la especie predominante (15/86; 17,4%). El riesgo de infección por bacterias enteropatógenas resultó 2,6 veces superior para niños lactantes y preescolares (p < 0,01). La mayoría de los individuos participantes negó presentar sintomatología gastrointestinal. Los resultados demuestran una alta prevalencia de enteropatógenos bacterianos entre la población añu estudiada, con una distribución mayoritaria de las especies que habitualmente forman parte de la microbiota normal de las aguas.

Population studies on prevalence of enteropathogenic bacteria are few, especially in indigenous communities. In the present study we investigated the prevalence of enteropathogenic bacteria in feces samples corresponding to 378 individuals from the añu ethnic community with various ages and gender, living at the Laguna de Sinamaica, Zulia State. A conventional bacteriological culture was done, excluding Escherichia coli diarrheogenic categories. Seventy one positive cultures were obtained (18.8%) with predominance of single agent infections (58 cases, 81.7%), even though associations between two or three species were also detected (15.5% and 2.8% respectively). A total of 86 bacterial strains were isolated, with the following distribution: Aeromonas spp, 34 (39.5%) isolates; Vibrio spp, 27 (31.4%); Shigella spp, 11 (12.8%); Campylobacter spp, 9 (10.5%); Plesiomonas shigelloides, 3 (3.5); and Salmonella enterica, 2.3%). V. parahaemolyticus turned out to be the predominant species (15/86, 17.4%). The enteropathogenic bacterial infection risk was 2.6 higher for lactating and preschool children (p< 0.01). Most of the participating individuals denied presence of gastrointestinal symptoms. The results showed a high prevalence of bacterial enteropathogens in the añu population studied, with a mayor distribution of the species which habitually are part of normal water microbiology.

Evaluación bacteriológica y contenido de histamina en pescado desmenuzado precocido en Venezuela / Bacteriological evaluation and histamine content in minced pre-cooked fish in Venezuela

Se determinó la calidad bacteriológica y el contenido de histamina en tres marcas comerciales (A, B, C) de pescado desmenizado precocido (mojito) disponible en la ciudad de Maracaibo. Se analizaron 42 muestras (14 de cada marca, tres muestreos), a las cuales se determinó Coliformes Totales (CT), Escherichia coli (EC), Recuento de Aerobios Mesófilos (RAM) y Microorganismos Psicrófilo (MP), según COVENIN; bacterias productoras de histamina (BPH), según Niven modificado por Yoshinaga. Concentración de histamina e histidina, por Cromatografía Líquida de Alta Resolución. El RAM varió entre 4,7 y 7,6 y MP entre 5,6 y 7,9 log UFC/g. Las marcas A y B estuvieron por encima de los límites permitidos por COVENIN y el Servicio Nacional de Pesca de Chile (SERNAPESCA). Los valores de CT variaron entre 2,3 y 2,8 log NMP/g, las tres marcas sobrepasaron los límites establecidos por SERNAPESCA. En las marcas A y B se aislaron EC, en límites inferiores a la norma COVENIN, no así para SERNAPESCA, la cual establece que ésta no debe encontrarse. Las BPH en las marcas A y B pertenecían principalmente a la familia Enterobacteriaceae, con porcentajes de 65,38 y 55,55, respectivamente, mientras que en C se observó igual proporción de enterobacterias y bacilos Gram negativos no fermentadores de la glucosa (BGNNFG), 42,85 por ciento. No se detectaron concentraciones de histamina e histidina. En conclusión las marcas A y B, presentaron una deficiente calidad bacteriológica, posiblemente debido al proceso de desmenuzado manual. La presencia de BPH sugiere contaminación post-cocción durante el desmenuzado