RESUMO
ABSTRACT Background: Helicobacter pylori (H. pylori) is a gram-negative bacterium associated with the etiology of several gastrointestinal tract pathologies, and cagA-positive (cagA+) strains are found in populations with gastric ulcers and precancerous lesions, inducing pro-inflammatory responses. The development of neoplasms is related to microRNA (miRNA) dysregulation, indicating highly expressed miRNA-629. The article aims to correlate the expression level of miRNA-629 with the presence of H. pylori and the pathogenicity marker cagA. Methods: 203 gastric biopsy samples were evaluated from individuals with normal gastric tissue (n=60), gastritis (n=96), and gastric cancer (n=47) of both genders and over 18 years old. The samples were subdivided according to the presence or absence of H. pylori, detected by polymerase chain reaction (PCR). RNA was extracted using a commercial kit and quantified. Complementary DNA (cDNA) was synthesized using commercial kits, and the relative expression was calculated using the 2-ΔΔCt method. Results: Individuals infected with H. pylori are nine times more likely to develop gastric cancer. Cancer patients appeared to have decreased expression of miRNA-629; however, the presence of the bacterium would not influence this reduction. Individuals in the cancer group showed lower miRNA-629 expression when cagA+; however, in the control group, the expression was higher when cagA+. Conclusion: H. pylori is a factor involved in the etiology and progression of gastric diseases. Reduction in miRNA-629 expression in cancer patients occurs independent of the presence of the bacterium, but when the cagA pathogenicity marker is present, it induces changes in the gene expression of the respective miRNA.
RESUMO Contexto: Helicobacter pylori (H. pylori) é uma bactéria gram-negativa associada à etiologia de várias patologias do trato gastrointestinal, e cepas positivas para cagA (cagA+) são encontradas em populações com úlceras gástricas e lesões pré-cancerígenas, induzindo respostas pró-inflamatórias. O desenvolvimento de neoplasias está relacionado à desregulação do microRNA (miRNA), indicando miRNA-629 altamente expresso. O artigo tem como objetivo correlacionar o nível de expressão do miRNA-629 com a presença de H. pylori e o marcador de patogenicidade cagA. Métodos: Foram avaliadas 203 amostras de biópsia gástrica de indivíduos com tecido gástrico normal (n=60), gastrite (n=96) e câncer gástrico (n=47) de ambos os sexos e com mais de 18 anos. As amostras foram subdivididas de acordo com a presença ou ausência de H. pylori, detectado por reação em cadeia da polimerase (PCR). O RNA foi extraído usando um kit comercial e quantificado. O DNA complementar (cDNA) foi sintetizado usando kits comerciais, e a expressão relativa foi calculada usando o método 2-ΔΔCt. Resultados: Indivíduos infectados com H. pylori têm nove vezes mais chances de desenvolver câncer gástrico. Pacientes com câncer parecem ter diminuição da expressão do miRNA-629; no entanto, a presença da bactéria não influenciaria essa redução. Indivíduos no grupo do câncer apresentaram menor expressão do miRNA-629 quando cagA+; no entanto, no grupo controle, a expressão foi maior quando cagA+. Conclusão: H. pylori é um fator envolvido na etiologia e progressão das doenças gástricas. A redução na expressão do miRNA-629 em pacientes com câncer ocorre independentemente da presença da bactéria, mas quando o marcador de patogenicidade cagA está presente, induz mudanças na expressão gênica do respectivo miRNA.
RESUMO
Introduction: Several special staining methods are available for H. pylori (Hp) identification in histological sections of chronic gastritis (CG), including the routine hematoxylin-eosin (HE) method. Some reports suggest that ancillary stains are not always needed to establish the diagnosis of Hp infection. In addition, the benefit of using them, when biopsies show minimal inflammation, is not clear. Objective: We performed a retrospective study to compare the usefulness of HE with Giemsa method for the histopathological diagnosis of Hp in tissue sections. Methods: Histological sections from 390 consecutive patients were reviewed. The patients were registered in the histopathology laboratory of Instituto Alfa de Gastroenterologia, Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), Belo Horizonte, Brasil. They were divided in 4 groups according to the gastric inflammatory changes as follows: Group I, gastric mucosa with normal morphology or minimal inflammatory changes (n = 146); Group II, chronic gastritis (CG) with mild inflammatory activity (n = 101); Group III, CG with patent inflammatory activity (n = 123); Group IV, patients with atrophic body gastritis (n = 20). All histological sections were carefully evaluated by 2 examiners at the oil immersion objective (1000×). Results: The identification of Hp was positive by Giemsa and HE, respectively at: Group III, 111 (90.2%) and 93 (75.6%) patients (p < 0.01); Group II, 43 (42.6%) and 29 (28.7%) patients (p < 0.05). Hp was negative in Groups I and IV. Conclusion: The results show that Giemsa stain is superior to HE for histological identification of Hp in CG. Although Hp could be identified by HE stain in the majority of CG cases, a significant number of infected patients may be neglected, regardless the intensity of the inflammatory response. .
Introdução: Diversos métodos de coloração especial estão disponíveis para a identificação da bactéria H. pylori (Hp) em cortes histológicos. Entretanto, questiona-se a utilidade desses métodos na rotina diária dos laboratórios de patologia diagnóstica. Objetivos: Comparar a utilidade da coloração por hematoxilina-eosina (HE) com a do Giemsa para diagnóstico histopatológico do Hp. Materiais e métodos: Foram revistos os cortes histológicos de 390 pacientes consecutivos cadastrados no Laboratório de Histopatologia do Instituto Alfa de Gastroenterologia, Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), Belo Horizonte, Brasil. Os pacientes foram divididos em quatro grupos: Grupo I - mucosa gástrica apresentando morfologia normal (n = 146); Grupo II - gastrite crônica (GC) com atividade inflamatória discreta (n = 101); Grupo III - CG com atividade inflamatória patente (n = 123); Grupo IV - pacientes com gastrite atrófica corpo (n = 20). Todos os cortes histológicos foram cuidadosamente avaliados por dois examinadores no aumento microscópico de imersão (1000×). Resultados: A identificação do Hp foi positiva pelo Giemsa e pela HE em, respectivamente, 111 (90,2%) e 93 (75,6%) pacientes do Grupo III (p < 0,01) e em 43 (42,6%) e 29 (28,7%) pacientes (p < 0,05) do Grupo II, e negativa nos grupos I e IV. Conclusão: Os resultados mostram que a coloração pelo Giemsa é superior à pelo HE para identificação do Hp em cortes histológicos. Conclui-se que o Hp pode ser visualizado pelo HE na maioria dos casos de GC, contudo, um número significativo de pacientes infectados pode ser negligenciado, independentemente da intensidade da resposta inflamatória. .
RESUMO
Vários são os esquemas para o tratamento da bactéria HP, sendo o mais utilizado o 'esquema tríplice'. Este compreende IBP (inibidor de bomba de prótons) + claritromicina 500mg + amoxicilina 1000mg, todos, duas vezes ao dia, durante mais comumente em 7 dias. Os índices de erradicação são de 80%, aproximadamente. Quando necessário, a amoxicilina pode ser substituída por tetraciclina. A combinação do 'esquema tríplice' com azitromicina não aumenta a eficácia do tratamento anti-Helicobacter pylori, mas poderia diminuir os seus efeitos colaterais. O 'esquema quádruplo' compreende IBP, 2x ao dia, sais de bismuto 120mg, 4x ao dia, tetraciclina 500mg, 4x ao dia, durante 10 a 14 dias. O 'esquema levofloxacina' consta da combinação de levofloxacina 250mg + amoxicilina 1.000mg + IBP dose usual, duas vezes ao dia, durante 10 a 14 dias. Os probióticos atuam como bactericida, antioxidante e anti-inflamatório. O 'tratamento sequencial' foi utilizado segundo o esquema pantoprazol 40mg + amoxicilina 1.000mg, duas vezes ao dia durante 5 dias, seguidos de pantoprazol 40mg + claritromicina 500mg + tinidazol 500mg durante 5 dias. No II Consenso Brasileiro (2004) foram sugeridos, além do 'esquema tríplice', dois outros: 1. IBP, uma vez ao dia, claritromicina 500mg, duas vezes ao dia, furazolidona 200mg, duas vezes ao dia; e 2. IBP uma vez ao dia, furazolidona 200mg três vezes ao dia, tetraciclina 500mg quatro vezes ao dia (7 dias). Há também 'esquema de curta duração', administrando claritromicina 400mg ao dia, com furazolidona 200mg ao dia, durante uma semana. Há ainda 'esquema alternativo' com três medicamentos: subcitrato de bismuto 480mg ao dia, com tetraciclina 2g ao dia e tinidazol 1g ao dia por 7 dias. Diante várias opções para o tratamento, sugere-se uma sequência na indicação dos esquemas para o tratamento da bactéria. Deve-se iniciar o tratamento com 'esquema tríplice'. Se não houver erradicação do HP, indica-se o 'esquema quádruplo'. Se houver insucesso com este, indica-se o 'esquema levofloxacina'. Os probióticos poderiam ser indicados após o insucesso de esquema terapêutico anti-Helicobacter pylori. A indicação de outro esquema terapêutico mencionado dependerá do estudo e da análise de cada caso individualmente. Para saber se existe a bactéria e se houve erradicação do HP, o exame deve ser realizado 30 dias após o término do tratamento.
There are several ways to treat HP bacteria, and the most common is 'triple therapy'. This is comprised of: PPI (potassium pump inhibitor) + 500mg of clarithromycin + 1000mg of amoxicillin, all of them twice a day, most commonly during 7 days. Indexes of eradication are approximately 80 %. When needed, amoxicillin can be replaced by tetracycline. The combination of azithromycin in triple therapy does not increase the efficacy of treatment against Helicobacter pylori, but it could diminish its side effects. The 'quadruple therapy' comprises: PPI twice a day and 120mg of bismuth salts four times a days, during ten to fourteen days. The 'levofloxacin therapy' is done with the combination of 250mg of levofloxacin + 1000mg of amoxicillin + usual dose of PPI, twice a day, during then to fouteen days. Proibiotics act as an antioxidant bactericide and anti-inflammatory. The 'sequence therapy' was used according to the following: 40mg of pantoprazole + 100mg of amoxicillin, twice a day for five days, then 40mg of pantoprazole + 500mg of clarithromycin + 500mg of tinidazole for five days. At II Brazilian Consensus (2004), two other treatments were suggested: 1) PPI, once a day, 500mg of clarithromycin twice a day, 200mg of furazolidone twice a day; and 2) PPI, once a day, 200mg of furazolidone, three times a day, 500mg of tetracycline four times a days (treatment lasting for seven days). There is also a 'short duration therapy', with the administration of 400mg of clarithromycin, with 200mg of furazolidone, both once a day, during one week. There is still an alternative treatment with three drugs: 480mg of bismuth subcitrate with 2g of tetracycline and 1g of tinidazole, all once a day, for seven days. In face of these many options, it is suggest the indication of a sequence of therapies for treatment against this bacteria. First, the 'triple therapy' must be used. If HP is not eliminated, then the 'quadruple therapy' is indicated. If success is not achieved with it, then 'levofloxacin therapy' is indicated. Proibiotics could be indicated after unsuccessful use of these therapies against Helicobacter pylori. The indication of another therapy will depend on study and analysis of each case individually. To know if the bacteria persist, or if HP bacteria were eradicated, the exam must be repeated 30 days after the ending of the treatment against Helicobacter pylori.