RESUMO
Bacillus toyonensis is a probiotic microorganism that for decades has been used in animal nutrition around the world. The objective of this work was to evaluate the immunomodulatory effect of oral B. toyonensis supplementation in dogs vaccinated against canine parvovirus. Puppies were randomly selected and divided in two groups, one received B. toyonensis at a concentration of 2x10 8 viable spores per day and another group without supplementation was left as control. The puppies were vaccinated against canine parvovirus type 2. B. toyonensis supplementation was efficient in stimulating specific IgG for parvovirus with titers of 2, 3, and 2.5-fold higher than controls at 7, 21, and 35 pos-vaccination days respectively. Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from dogs were cultured and stimulated with B. toyonensis DNA, vegetative cell and spores. The mRNA transcription of cytokines IL-4, IL-17, and IFN-γ up modulated by the stimuli. Thus, we conclude in this study that B. toyonensis supplementation may amplify the vaccine immune response against canine parvovirus.(AU)
Bacillus toyonensis é um micro-organismo probiótico que há décadas é utilizado na nutrição animal em todo o mundo. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito imunomodulador da suplementação oral de B. toyonensis em cães vacinados contra o parvovírus canino. Os filhotes foram selecionados aleatoriamente e divididos em dois grupos, um recebeu B. toyonensis na concentração de 2 × 10 8 esporos viáveis por dia e outro grupo sem suplementação como controle. Os filhotes foram vacinados contra o parvovírus canino tipo 2. A suplementação com B. toyonensis foi eficiente em estimular IgG específica para parvovírus com títulos de 2, 3 e 2,5 vezes maior que os controles aos 7, 21 e 35 dias pós-vacinação, respectivamente. Células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de cães foram cultivadas e estimuladas com DNA de B. toyonensis, células vegetativas e esporos. A transcrição do mRNA das citocinas IL-4, IL-17 e IFN-γ foi modulada pelos estímulos. Assim, concluímos neste estudo que a suplementação com B. toyonensis pode amplificar a resposta imune da vacina contra o parvovírus canino.(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Bacillus , Vacinas , Parvovirus Canino , Probióticos , Fatores ImunológicosRESUMO
This study describes a case of parvovirus infection in a river otter (Lontra longicaudis) assisted at the Wildlife Rehabilitation Center and Wildlife Screening Center, Federal University of Pelotas (UFPel), Rio Grande do Sul state, Brazil. Clinical signs included apathy, dark and fetid diarrhea, and crusted lesions on the palmar pads of the fore and hind limbs. The animal died after undergoing support treatment with antibiotics, anti-inflammatory, and fluid therapy. At necropsy, the intestines were reddened and edematous and the right kidney was diminished by one third of its normal size and covered with whitish, spongy material. A female Dioctophyma renale was found free in the abdominal cavity. Histologically, dilatation of the intestinal crypts and fusion and blunting of the intestinal villi were observed. In addition, moderate, multifocal lymphocytic enteritis with lymphoid depletion in Peyer's patches and mesenteric lymph nodes were present. Immunohistochemistry with anti-canine parvovirus monoclonal antibody (anti-CPV) was strongly positive in the bone marrow cells and enterocytes of the intestinal crypts, confirming the diagnosis of parvovirus infection. The peritoneum on the right kidney was expanded with a cuboidal cell border, forming multiple papillary projections associated with eggs of D. renale and severe inflammatory infiltrate (giant cells, macrophages, lymphocytes, eosinophils, and plasma cells). Areas of necrosis and mineralization were also observed. Due to fragmentation and degradation of its natural habitat, the otter approached the urban area and was contaminated with the virus, which is hosted and disseminated by domestic animals. Infection with D. renale can be associated with the large population of parasitized domestic animals, which eliminate the helminth eggs through urine, contaminating the environment where the parasite intermediate and paratenic hosts co-inhabit. The diseases of these animals can be a decline factor of wild populations that inhabit the region and are an alert to spillover risk.(AU)
Descreve-se um caso de parvovirose em uma lontra (Lontra longicaudis) enviada ao Núcleo de Reabilitação da Fauna Silvestre e Centro de Triagem de Animais Silvestres da Universidade Federal de Pelotas, Rio Grande do Sul, Brasil. O animal estava debilitado, apático, apresentava diarreia escura e fétida e lesões crostosas nos coxins palmares dos membros torácicos e pélvicos, morrendo após tratamento de suporte com antibiótico, anti-inflamatório e fluidoterapia. Na necropsia os intestinos estavam edematosos e avermelhados e o rim direito estava recoberto de material brancacento e esponjoso, com comprometimento de cerca de um terço do órgão. Foi observado, também, um exemplar de Dioctophyma renale, fêmea, livre na cavidade abdominal. Histologicamente havia fusionamento das vilosidades, dilatação das criptas intestinais com enterite linfocítica moderada multifocal e depleção linfoide nos linfonodos mesentéricos. Na técnica de imuno-histoquímica (IHQ) com anticorpo monoclonal anti-Parvovírus canino (Anti-CPV) houve marcação positiva nos enterócitos da base das vilosidades intestinais e na medula óssea, confirmando o diagnóstico de parvovirose. O peritônio sobre o rim direito estava espessado e revestido por células cuboides, formando múltiplas projeções papilares, nas quais observava-se acentuado infiltrado de células gigantes, macrófagos, linfócitos, eosinófilos e plasmócitos. Entre as projeções papilares havia ovos de Dioctophyma renale, áreas de necrose, calcificação e células gigantes. Conclui-se que a lontra, em função da fragmentação e degradação de seu habitat natural, aproximou-se do centro urbano e contaminou-se com o vírus, o qual é mantido e disseminado por animais domésticos. Por sua vez, a infecção por D. renale pode estar relacionada com a presença de animais domésticos parasitados, os quais eliminam ovos do helminto através da urina contaminando o ambiente, onde coabitam hospedeiros intermediários e paratênicos do parasito. As doenças desses animais podem ser um fator de declínio das populações de animais silvestres e alerta para o risco de spill-over na região.(AU)
Assuntos
Animais , Lontras/virologia , Infecções por Enoplida/parasitologia , Parvovirus CaninoRESUMO
Canine parvovirus type 2c (CPV-2c) emerged in Europe in the early 2000's and rapidly spread out worldwide. Clinical and molecular data have demonstrated its circulation in Brazilian dogs, yet detailed descriptions of cases are still lacking. This article describes the epidemiological, clinical and pathological features of 24 cases of CPV-2c-associated disease in dogs submitted to veterinary clinics and laboratory diagnosis in southern Brazil (2014-2016). Most affected dogs presented signs/lesions suggestive of parvovirus enteritis: diarrhea, vomiting, hyperemia and hemorrhage of the serous membrane of the small intestine, diffuse segmental granulation, atrophy of the villi, necrosis and fusion of crypts, squamous metaplasia and epithelial syncytia. A number of cases presented features divergent from the classical presentations, including a wide variation in the color of feces (reddish and/or yellowish, light-brownish, orange-brown and brownish), involvement of adults (4/24) and vaccinated dogs (12/24), extensive involvement of the small intestine (8/20) and the presence of pulmonary edema (7/24) and convulsions (3/24). Feces and intestinal fragments submitted to PCR for the CPV-2 VP2 gene and to virus isolation in cell culture yielded positive results in 100% and 58.3% (14/24) of the cases, respectively. Nucleotide sequencing revealed a high nucleotide identity in VP2 (99.4 to 100%) and a consistent mutation at amino acid 426 (asparagine to glutamic acid), considered a signature of CPV-2c. These results confirm the involvement of CPV-2c in the described cases and demonstrate the importance of CPV-2c infection among Brazilian dogs, calling attention of veterinarians to correctly diagnose the disease, mainly considering the frequent atypical presentations.(AU)
O parvovírus canino tipo 2c (CPV-2c) surgiu na Europa no início do ano 2000 e rapidamente se espalhou pelas populações de cães ao redor do mundo. Dados clínicos e moleculares demonstraram a sua circulação em cães brasileiros, porém descrições detalhadas desses casos ainda são escassas. Este artigo descreve os aspectos epidemiológicos, clínicos e patológicos de 24 casos de doença gastroentérica associada com a infecção pelo CPV-2c em cães atendidos em clínicas veterinárias e submetidos ao diagnóstico laboratorial no Sul do Brasil (2014-2016). A maioria dos cães afetados apresentaram sinais e/ou lesões sugestivas de enterite por parvovírus: diarreia, vômitos, hiperemia e hemorragia na membrana serosa do intestino delgado, granulação segmentar difusa, atrofia das vilosidades, necrose e fusão de criptas, metaplasia escamosa e sincícios epiteliais. Alguns casos apresentaram características divergentes das apresentações clássicas, incluindo uma grande variação na cor das fezes (avermelhada e/ou amarelada, marrom-claro, marrom-alaranjada ou amarronzada), a participação dos adultos (4/24) e cães vacinados (12/24), um amplo envolvimento do intestino delgado (8/20), a presença de edema pulmonar (7/24) e convulsões (3/24). As fezes e fragmentos intestinais foram submetidos ao teste de PCR para o gene VP2 do CPV-2, e ao isolamento do vírus em cultura de células produziram resultados positivos em 100% e 58,3% (14/24) dos casos, respectivamente. O sequenciamento dos nucleótidos revelou uma alta identidade de nucleótidos na VP2 (99,4-100%) e uma mutação no aminoácido 426 (asparagina para ácido glutâmico), considerada uma assinatura de CPV-2c. Estes resultados confirmam o envolvimento do CPV-2c nos casos descritos e demonstra a importância da infecção pelo CPV-2c entre os cães do Brasil, chamando a atenção de veterinários para diagnosticar corretamente a doença, principalmente considerando-se as apresentações atípicas frequentes.(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Infecções por Parvoviridae/epidemiologia , Infecções por Parvoviridae/patologia , Parvovirus Canino , Brasil/epidemiologia , Gastroenteropatias/veterináriaRESUMO
Since the first isolation of canine parvovirus type 2 (CPV-2) in late 70's new virus types as CPV-2a and CPV-2b have been emerged and becoming prevalent in natural canine population and more recently, a third subtype was identified , CPV-2c. The main purpose of this study was to detect and characterize canine parvovirus currently present in Central-West region of São Paulo state, in Brazil. Fecal samples were collected of vaccinated and non-vaccinated dogs, clinically suspected of having CPV infection brought to the Infectious Diseases Service, Veterinary Hospital of FMVZ-UNESP. All samples (n=30) were screening for canine parvovirus through hemagglutination test and those resulting as positive (n=20) were submitted to PCR and the products were subsequently sequenced for subtype characterization. Results were tested for association with age, hematological values, viral hemagglutination titers in the feces, vaccination status and survival. Leukopenia was found in all animals, death occurred in 30% of unvaccinated dogs and in 42% of vaccinated ones. In a total of 20 positive sequenced samples, 18 were classified as CPV-2b, one as CPV-2c, and one as CPV-2a, being CPV2a and CPV2c detected in unvaccinated puppies. Compared to the reference samples amino acid change at position 426 in those circling virus was identified. The study results demonstrate the predominance of CPV-2b and the presence of CPV-2a and CPV-2c in naturally infected, vaccinated and unvaccinated dogs in in São Paulo region.(AU)
Desde o primeiro isolamento do parvovirus canino tipo 2 (CPV-2) no final dos anos 70 novos subtipos virais como CPV-2a e CPV-2b surgiram e foram se tornando prevalentes na população canina; posteriormente um terceiro subtipo foi identificado, CPV- 2-C. O principal objetivo deste estudo foi detectar e caracterizar os subtipos de parvovírus canino atualmente presente na região Centro-Oeste do Estado de São Paulo-Brasil. Amostras de fezes foram coletadas de cães vacinados e não vacinados, atendidos no Serviço de Enfermidades Infecciosas dos Animais, Hospital Veterinário da FMVZ-UNESP, com suspeita clínica parvovirose . Todas as amostras (n = 30) foram submetidas teste de hemaglutinação para parvovirus canino e as positivas (n = 20) submetidas a PCR; os produtos amplificados foram subsequentemente sequenciados para caracterização do subtipo viral. Os resultados foram associados com a idade, os valores hematológicos, os títulos de hemaglutinação viral nas fezes, estado de vacinação e sobrevivência. A leucopenia foi encontrada em todos os animais; Obito foi observado em 30% dos cães não vacinados e 42% dos vacinados. Em um total de 20 amostras positivas sequenciadas, 18 foram classificadas como CPV-2b, uma como CPV-2c, e uma como CPV-2a. CPV 2a e CPV2c foram detectados em filhotes não vacinados. Em comparação com a amostra de referência foi evidenciada uma mudança de aminoácido na posição 426 nas amostras virais circulantes. Os resultados do estudo demonstram a predominância de CPV-2b e a presença de CPV-2a e CPV-2c em cães naturalmente infectados, vacinados e não vacinados na região de São Paulo.(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Leucopenia/veterinária , Infecções por Parvoviridae/veterinária , Parvovirus Canino/isolamento & purificação , Testes de Hemaglutinação/veterinária , Reação em Cadeia da Polimerase/veterináriaRESUMO
El parvovirus canino tipo 2 (VPC-2) es el agente causal de una enfermedad infecto-contagiosa que produce gastroenteritis aguda hemorrágica que afecta a caninos jóvenes. El VPC-2 es un virus con genoma ADN, pequeño, desnudo y muy resistente a las condiciones ambientales que emergió y se expandió rápidamente a fines de la década de los años 70. En los años 80 surgieron consecutivamente dos variantes antigénicas, denominadas VPC-2a y VPC-2b. En el 2000 se detectó una nueva variante antigénica llamada VPC-2c, reportándose con frecuencia en comunidades caninas de varios países del mundo. El objetivo de este trabajo consistió en caracterizar un aislamiento cubano de parvovirus canino, atenuado y adaptado a cultivo celular. El material genético fue amplificado por reacción en cadena de la polimerasa y secuenciado posteriormente. Las secuencias obtenidas fueron analizadas y comparadas con secuencias de aislados y cepas conocidas depositadas en las bases de datos, donde se evidenció que el aislamiento cubano era del tipo VPC-2(AU)
The type 2 canine parvovirus (CPV-2) is the causal agent of an infected-contagious disease that produces a hemorrhagic and acute gastroenteritis that affects young canines. The CPV-2 is a virus with a small, naked DNA genome, very resistant to the environmental conditions that emerged and expanded fast at the end of the 70´s decade. In the 1980, two antigenic variants of CPV-2 emerged almost simultaneously. They were called CPV-2a and CPV-2b. In the 2000, a new antigenic variant was detected. It was called CPV-2c, and was frequently reported in canine communities in some countries worldwide. The objective of this work is to characterize a Cuban isolation of canine parvovirus attenuated and adapted to cellular cultivation. The genetic material was amplified by polymerase chain reaction and sequencing later. The obtained sequences were analyzed and compared with sequences of well-known strains placed in the data base where it was evidenced that the Cuban isolation was of CPV-2 type(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Infecções por Parvoviridae , Gastroenterite/complicações , Reação em Cadeia da Polimerase/métodosRESUMO
La parvovirosis canina es una de las principales infecciones que provoca gastroenteritis, fundamentalmente en cachorros, con altos índices de morbiletalidad. Los diagnosticadores más utilizados se basan en la detección de partículas virales excretadas durante la fase aguda de la enfermedad. Algunos requieren equipos especializados, lo que aumenta los costos y el tiempo de diagnóstico. Por esto, la simplificación de estos métodos con alta sensibilidad y especificidad es prioritaria. En Cuba solo se logra un diagnóstico presuntivo sin la completa confirmación de la enfermedad, principalmente por la escasez o ausencia de un medio diagnóstico en toda la red de consultorios y clínicas veterinarias, rápido, eficaz y ajustable a nuestras condiciones. Este trabajo tuvo como objetivo obtener anticuerpos policlonales IgY a partir de yema de huevo de gallina y evaluarlos mediante un sistema de látex-aglutinación, para su posible uso como terapia y principalmente en el diagnóstico. Se inmunizaron por vía intramuscular dos gallinas de raza Leghorn con una cepa atenuada de parvovirus canino (PVC) tipo 2. Se aplicaron 8 inoculaciones por ave cada 15 días. Se cosecharon los huevos y se purificaron los anticuerpos por el método de sulfato de dextrana/sulfato de sodio. Se determinó el título de IgY anti-PVC por el método de Inhibición de la Hemoaglutinación (IH) y con antígeno de PVC acoplado a partículas de látex de poliestireno. Por IH se obtuvo un título de IgY anti-PVC de 1:1024. Las mezclas de anticuerpos con títulos alto y medio de ambas gallinas aglutinaron con los reactivos preparados con 230 y 460 Ág/mL de antígeno. La mayor intensidad de la reacción y la mejor detectabilidad correspondieron a los reactivos elaborados con los anticuerpos de mayor título(AU)
The canine parvovirosis is fundamentally one of the main infections causing gastroenteritis in puppies, with high morbilethality rates. The most used diagnostic tests are based on the detection of viral particles excreted during the acute phase of the disease. Some tests require specialized teams, which increases the costs and the time of diagnosis. For this reason, the simplification of these methods with high sensitivity and specificity has a priority. A presumptive diagnosis is only achieved in Cuba, without the complete confirmation of the disease, mainly for the shortage or absence of a diagnostic kit in the whole net of doctorÆs offices and veterinary clinics, quick, effective and adjustable to our conditions. This study aimed at obtaining IgY polyclonal antibodies from chicken egg yolk for its possible use in therapies and a latex agglutination diagnostic system. Two leghorn hens were intramuscularly hyper immunized with an attenuated strain of type 2 canine parvovirus (CPV). Eight inoculations were applied per bird every 15 days. The eggs were harvested and the antibodies were purified by the method of dextran sulfate/sodium sulfate. The titer of anti-CPV IgY was determined by the method of Hemagglutination Inhibition (HI) and with canine parvovirus antigen coupled to polystyrene latex particles. A title of IgY anti-CPV of 1:1024 was obtained by HI. Mixtures of antibodies with medium and high titers of both hens agglutinated with the reagents prepared with 230 and 460 Ág/mL of antigen. The greatest intensity of the reaction and the best detectability corresponded to reagents prepared with the antibodies of higher titer(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Infecções por Parvoviridae/diagnóstico , Gastroenterite/complicações , Testes de Fixação do LátexRESUMO
Since the late 1970s, canine parvovirus type 2 (CPV-2) has emerged as a causative agent of fatal severe acute hemorrhagic enteritis in dogs. To date, three antigenic types of CPV-2 were described worldwide (CPV-2a/b/c). This study was conducted to determine the variants of CPV-2 circulating in dogs from the Cuiabá Municipality in Midwestern Brazil. Out of 50 fecal samples, collected between 2009 and 2011, 27 tested positive for CPV-2. A 583 bp fragment of the VP2 gene was amplified by PCR, 13 representative samples were analyzed further by DNA sequencing. All strains were characterized as CPV-2c, displayed a low genetic variability although observed several amino acid substitution. These findings indicated that CPV-2c has been circulating in dogs from the Cuiabá Municipality in Midwestern Brazil.
Desde o final dos anos de 1970, o parvovírus canino tipo 2 (CPV-2) tem emergido como agente de severa e fatal enterite hemorrágica, principalmente em cães com idade inferior a seis meses. Três variantes antigênicas de CPV-2 foram descritas mundialmente (CPV-2a/b/c). O objetivo do estudo foi determinar a presença do CPV-2 e suas variantes circulantes em cães no Município de Cuiabá, Centro-oeste, Brasil. Das 50 amostras fecais, coletadas entre 2009 e 2011, 27 foram positivas para CPV-2 na PCR, sendo 13 analisadas pelo sequenciamento de um fragmento de 583 pares de base do gene VP2. Todas as cepas foram caracterizadas como CPV-2c e apresentaram baixa variabilidade genética. Estes achados indicaram que o CPV-2c está circulando na população canina do Município de Cuiabá, Região Centro-Oeste do Brasil.
Assuntos
Animais , Cães , Enterite/veterinária , Parvovirus Canino/genética , Parvovirus Canino/isolamento & purificação , Reação em Cadeia da Polimerase/veterinária , Epidemiologia , FilogeniaRESUMO
The aim of this study was to evaluate the rapid tests currently used for canine parvovirus (CPV) diagnosis: hemagglutination test (HA), enzyme immunoassay (EIA) and polymerase chain reaction (PCR). A total of 112 fecal samples collected from diarrheic puppies up to one year of age were tested. The EIA was able to detect CPV antigen in 44 samples. By HA, 32 samples tested highly positive with titers >128, eight tested weakly positive (titers 32 and 64) and 72 were negative (titers <16). Using PCR, 57 samples were found positive including 13 EIA-negative and 19 HA-negative samples. The best correlation was observed between EIA and PCR (88.4%). These tests were able to detect all types of CPV, including CPV-2c. Considering that 23%-33% of dogs presenting enteritis did not show infection by EIA nor HA, negative results from the antigen detection tests should be confirmed through molecular methods.
Avaliaram-se os métodos rápidos rotineiramente utilizados para diagnóstico da infecção por parvovírus canino (CPV): teste de hemaglutinação (HA), ensaio imunoenzimático (EIE) e reação em cadeia pela polimerase (PCR). Um total de 112 amostras fecais de cães diarreicos com até um ano de idade foi testado. O EIE foi capaz de detectar o antígeno do CPV em 44 amostras. Por HA, 32 amostras foram consideradas fortemente positivas com títulos >128, oito fracamente positivas (títulos 32 e 64) e 72 negativas (títulos <16). Por PCR, 57 amostras foram positivas incluindo 13 EIE-negativas e 19 HA-negativas. A melhor correlação foi observada entre EIE e PCR (88,4%). Os testes foram capazes de detectar todos os tipos de CPV, incluindo o CPV-2c. Considerando-se que em 23%-33% dos filhotes com enterite a infecção por CPV não foi diagnosticada pelos testes de EIE e HA, os resultados negativos nos testes de detecção de antígeno devem ser confirmados por meio de métodos moleculares.
Assuntos
Animais , Cães , Parvovirus Canino , Testes Laboratoriais/análise , DiagnósticoRESUMO
This study was designed to evaluate whether an ethanolic extract of green propolis (EEP) can interfere with p roduction of specific antibodies after immunization against parvovirus (CPV) and canine coronavirus (CCoV). Mice were vaccinated with CPV and CCoV (0.75, 1.5 and 3 x 106 TCID50) with or without 400 μg/dose of the EEP. Twenty one days after the third dose was measured serum IgG. The co-administration of the EEP significantly enhanced serum specific IgG responses to CPV in animals inoculated with the highest concentration of the antigen, and had no influence on levels of antibodies to CCoV. The results indicate that the EEP has immunomodulatory action closely dependent on the type and concentration of antigen used, being able to increase the levels of antibodies to CPV.
Este estudo foi realizado para avaliar se extrato etanólico de própolis verde (EEP) pode interferir na produção de anticorpos específicos após imunização contra parvovírus (CPV) e coronavírus canino (CCoV). Camundongos foramvacinados com CPV e CCoV (0.75, 1.5 e 3 x 106 TCID50) com ou sem 400 μg/dose de EEP. Vinte e um dias após a terceira dose foi mensurado IgG sérica. A coadministração de EEP aumentou significativamente os níveis de IgG específica para o CPV em animais inoculados com a maior concentração do antígeno, e não teve influência sobre os níveis de anticorpos para CCoV. Os resultados indicam que o EEP tem ação imunomoduladora intimamente dependente do tipo e concentração do antígeno utilizado, sendo capaz de aumentar os níveis de anticorpos contra CPV.
Assuntos
Animais , Alergia e Imunologia/tendências , Anticorpos/análise , Própole/uso terapêutico , Coronavirus/patogenicidade , Parvovirus/patogenicidadeRESUMO
The presence of canine parvovirus type 2 (CPV-2), 2a and 2b has been described in Brazil, however, the type 2c had not been reported until now. In the current study, seven out of nine samples from dogs with diarrhea were characterized as CPV-2c, indicating that this virus is already circulating in the Brazilian canine population.
No Brasil, a presença do parvovírus canino do tipo 2 (CPV-2), 2a e 2b já havia sido descrita, contudo, ainda não havia sido verificada a presença do tipo 2c. No presente trabalho, sete de nove amostras de cães com diarréia foram caracterizadas como CPV-2c, indicando que este vírus já está circulando na população canina no Brasil.
RESUMO
Noventa e seis cães com lesões macroscópicas sugestivas de parvovirose canina foram necropsiados no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul no período de março de 2005 a novembro de 2006. Tecidos destes caninos foram analisados através de histologia e imuno-histoquímica. Aumento das placas de Peyer do intestino delgado e hiperemia da mucosa e serosa intestinal foram os achados macroscópicos mais observados. Microscopicamente, foi visualizada enterite necrótica em 77 por cento dos cães. Em 17,7 por cento as alterações histológicas do intestino delgado ficaram prejudicadas pela autólise, dificultando a interpretação. O teste de imuno-histoquímica em cortes de intestino delgado, linfonodo mesentérico, timo, baço, tonsila, língua e medula óssea de todos os 96 casos, foi positivo em 91,6 por cento (88/96) dos casos. O intestino delgado demonstrou o melhor resultado, obtendo-se marcações em 77 por cento (74/96) dos casos. A análise final do exame paramétrico de Fisher demonstrou uma fraca associação entre autólise intestinal e resultado positivo da imuno-histoquímica onde as chances de um intestino delgado autolisado histologicamente apresentar resultado positivo na imuno-histoquímica é 0,33 vezes menor (OR=0,33; 95 por centoIC: 0,10-1,17) quando comparada a um intestino delgado não autolisado.
Ninety-six dogs with gross lesions suggestive of canine parvovirus infection were selected and necropsied in the Faculty of Veterinary Medicine, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, between March 2005 and November 2006. The main gross lesions were enlargement of the Peyer's patches in the small intestine and hyperemia in the intestinal mucosa and serosa. Microscopically, the small intestine showed necrotizing enteritis in 77 percent (74/96) of the dogs examined. However, in 17.7 percent of the histological evaluation in the small intestine were damaged due to autolytic changes making it difficult to obtain an appropriate interpretation. The immunohistochemistry test was performed in tissues of small intestine, mesenteric lymph nodes, thymus, spleen, tonsils, tongue, and bone marrow in all the 96 selected cases. Parvovirus antigen was detected in 91.6 percent (88/96) of the dogs necropsied. The best result of the IHC test was seen in samples of small intestine which was positive in 77 percent (74/96) of the cases. The statistical analysis (Fisher test) showed a weak association between intestinal autolysis and positive result of the IHC test. The chance of the autolysed intestine showing a positive result in the immunohistochemistry test was 0.33 less (OR=0.33, 95 percent CI:0.10-1.17) when compared with small intestine not autolysed.
Assuntos
Animais , Cães , Histologia , Imuno-Histoquímica , Intestino Delgado , Parvovirus CaninoRESUMO
Canine parvovirus (CPV) is an emerged pathogen in dogs, first isolated in 1978 in the USA. The original 1978 strain was designated CPV type 2 (CPV-2). However, analysis of CPV isolates in the USA by restriction enzymes and monoclonal antibodies have shown that around the year 1979 a CPV variant strain, designated CPV type 2a (CPV-2a), became widespread. Subsequently, a new antigenic strain, designated CPV type 2b (CPV-2b), was also observed by analysis of CPV isolates from various parts of the world, although the proportion of each strains was different between countries. In this study, the Haemagglutination Inhibition (HI) test with a panel of monoclonal antibodies was used to type canine parvovirus strains in 29 fecal samples collected from symptomatic dogs from 1980 to 1986 and from 1990 to 1995. The results showed a strong predominance of the antigenic type 2a indicating that the CPV epizooty in Brazil followed the same pattern observed in European and Asian countries.
O Parvovírus Canino (CPV) é um patógeno emergente em cães, isolado pela primeira vez em 1978, nos Estados Unidos. A amostra original de 1978 foi designada CPV tipo 2 (CPV-2). Entretanto, análises de isolados de CPV dos Estados Unidos, por enzimas de restrição e anticorpos monoclonais demonstraram que cerca de 1979, uma amostra variante, designada CPV tipo 2a (CPV-2a) tornou-se prevalente. Subseqüentemente, uma nova amostra antigênica, designada CPV tipo 2b (CPV-2b) também foi observada por análises de isolados de CPV de várias partes do mundo, embora a proporção fosse diferente entre os países. Nesse estudo, foi utilizado o teste de Inibição da Hemaglutinação (HI) com um painel de anticorpos monoclonais para a tipagem de 29 amostras fecais de parvovirus canino, coletadas de cães sintomáticos de 1980 a 1986 e de 1990 a 1995. Os resultados indicaram uma forte predominância do tipo antigênico 2a indicando que a epizootia de CPV no Brasil seguiu o mesmo padrão observados na Europa e países Asiáticos.
Assuntos
Variação Antigênica , Anticorpos Monoclonais/isolamento & purificação , Cães , Parvovirus Canino/isolamento & purificação , Testes de Inibição da Hemaglutinação/métodosRESUMO
A reação em cadeia da polimerase (PCR) e o ensaio de hemaglutinação (HA) foram comparados para a identificação de parvovírus canino (CPV) em fezes de cães com gastrenterite. A prevalência de anticorpos anti-CPV em uma população de cães sem histórico de vacinação foi avaliada pelo ensaio de inibição da hemaglutinação (HI). A variabilidade fenotípica entre uma amostra vacinal e isolados de campo foi investigada utilizando soro hiperimune. Trinta amostras fecais foram obtidas de cães com diarréia e submetidas à PCR e ao HA, e 185 amostras de soro de cães foram submetidas à HI para detectar anticorpos anti-CPV. Considerando-se somente como positivas as amostras que apresentaram HA na diluição igual ou superior a 1:64, detectou-se CPV em 9 (30 por cento) das amostras fecais. Nove amostras fecais apresentaram HA nas diluições entre 1:2 e 1:32 e foram consideradas negativas nesse teste. Todas as amostras que apresentaram HA na diluição igual ou superior a 1:64 foram positivas pela PCR e, das nove amostras que apresentaram HA nas diluições entre 1:2 e 1:32, seis também foram positivas para CPV na amplificação pela PCR. A pesquisa sorológica de amostras de soros caninos indicou que 178 (96,2 por cento) cães tiveram contato prévio com o vírus. Os soros hiperimunes produzidos em cobaias contra a cepa vacinal e dois isolados de campo indicaram possíveis diferenças fenotípicas entre isolados.
The polymerase chain reaction (PCR) and hemaglutination (HA) assay were used to detect canine parvovirus (CPV) in feces from young dogs with gastroenteritis. The hemaglutination inhibition (HI) assay was used to detect the prevalence of anti-CPV antibodies in a non-vaccinated dog population. In addition, hiperimmune serum was used to investigate the phenotypic variability of a vaccine strain and two field isolates of CPV. Thirty fecal samples obtained from dogs with diarrhea were submitted to PCR and HA, and 185 serum samples were submitted to HI to detect anti-CPV antibodies. Nine (30 percent) of the samples demonstrated HA on fecal dilutions equal to or above 1:64 and were considered positive by this test; nine (30 percent) fecal samples had HA activity on dilution from 1:2 to 1:32 and were considered negative, and the remaining samples were negative. All samples with HA activity at dilutions above 1:64 were also positive to PCR and, out of the nine samples with HA activity at dilutions between 1:2 and 1:32, six were also positive by PCR. Serological analysis of the dog serum samples indicated that 178 (96,2 percent) of the dogs had previous contact with the virus. Hiperimmune serum indicated possible phenotypic differences among isolates, in that different HI titers were obtained following cross-HI assay.