Lactobacillus casei regulates differentiation of Th17/Treg cells to reduce intestinal inflammation in mice.

ABSTRACT

In order to study the ability of Lactobacillus casei to ameliorate murine enteritis, 18 mice were randomly divided into 3 groups the enteritis group, intervention group, and control group. The interleukin (IL)-6 and transforming growth factor-ß (TGF)-ß content in mouse peripheral blood and duodenum was detected using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The number of CD4+CD25+Foxp3+ T-regulatory cells (Tregs) and CD4+IL-17A+ Th17 cells in the mesenteric lymph nodes (MLN) and spleen were detected using flow cytometry, and quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (PCR) and western blot analysis were used to measure Foxp3 and retinoid-related orphan receptor-γ (RORγt) mRNA and protein expression in the MLN. Histological changes in the duodenum were observed. Results indicate that in the intervention group, IL-6 content in mouse peripheral blood and duodenum was significantly lower than in the enteritis group (P < 0.05), while TGF-ß content was significantly increased compared to the enteritis group (P < 0.05). For the intervention group, the percentages of CD4+CD25+Foxp3+ Tregs in spleen and MLN were increased (P < 0.05), while the percentages of CD4+IL-17A+ Th17 cells were decreased compared to the enteritis group (P < 0.05). The expression of Foxp3 mRNA and protein in the intervention group was higher than in the enteritis group, while RORγt mRNA and protein were significantly lower (P < 0.05). After mice in the enteritis group were treated with L. casei, duodenal inflammation was relieved. This study demonstrated that L. casei could have possible implications for the enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) induced intestinal inflammation by regulating the ratio imbalance of Th17/Treg cells.

Afin d'étudier la capacité de Lactobacillus casei à soulager l'entérite murine, 18 souris ont été réparties de manière aléatoire en trois groupes le groupe entérite, le groupe intervention, et le groupe témoin. Les quantités d'interleukine (IL)-6 et de facteur de croissance transformant ß (FCT-ß) dans le sang périphérique et le duodénum de souris furent détectées à l'aide d'une épreuve immunoenzymatique (ELISA). Les cellules T régulatrices (Tregs) CD4+CD25+Foxp3+ et les cellules CD4+IL-17A+ Th17 dans les noeuds lymphatiques mésentériques (NLM) et la rate ont été détectées et dénombrées par cytométrie en flux, et réaction d'amplification en chaîne quantitative avec la transcriptase réverse, et l'analyse par immunobuvardage fut utilisée afin de mesurer l'expression de l'ARNm et de la protéine Foxp3 et du récepteur orphelin γ apparenté au rétinoïde (RORγt) dans les NLM. Les changements histologiques dans le duodénum ont été observés. Les résultats indiquent que dans le groupe intervention, le contenu en IL-6 dans le sang périphérique et le duodénum était significativement moindre que dans le groupe entérite (P < 0,05), alors que le contenu en FCT-ß était augmenté de manière significative comparativement au groupe entérite (P < 0,05). Pour le groupe intervention, les pourcentages de Tregs CD4+CD25+Foxp3+ dans la rate et le NLM étaient augmentés (P < 0,05), alors que les pourcentages de cellules CD4+IL-17A+ Th17 étaient diminués comparativement au groupe entérite (P < 0,05). L'expression de l'ARNm et de la protéine Foxp3 dans le groupe intervention était plus élevée que dans le groupe entérite, alors que l'expression de l'ARNm et de la protéine RORγt était significativement moindre (P < 0,05). Suite au traitement des souris du groupe entérite avec L. casei, l'inflammation duodénale était résorbée. La présente étude a démontré que L. casei pourrait avoir des implications possibles dans l'inflammation intestinale induite par Escherichia coli entérotoxinogène en régulant le débalancement du ratio de cellules Th17/Treg.(Traduit par Docteur Serge Messier).