Diagnóstico diferencial de filariasis importada mediante técnicas moleculares (2006-2009) / Differential diagnosis of imported filariasis by molecular techniques (2006-2009)

RESUMEN

Introducción: Durante los últimos años se ha registrado un aumento creciente de la población inmigrante y de viajeros procedentes de áreas endémicas de filariasis producidas por Loa loa (L. loa), Mansonella perstans(M. perstans) y Wuchereria bancrofti (W. bancrofti). Esta situación epidemiológica ha hecho necesario el desarrollo de técnicas específicas de diagnóstico molecular, alternativas al método parasitológico clásico.Por lo tanto, el objetivo planteado en este trabajo ha sido la utilización de las técnicas moleculares optimizadas en nuestro laboratorio, nested-PCR e ITS1-RFLP, en el diagnóstico de filariasis importadas, y la comparación de los resultados obtenidos con los derivados del diagnóstico parasitológico. Material y métodos: Se ha estudiado mediante la técnica de concentración de Knott, nested-PCR e ITS1-RFLP un total de 523 muestras (517 sangres, 5 helmintos adultos y un humor vítreo) que fueron remitidas al Servicio de Parasitología del Centro Nacional de Microbiología-Instituto de Salud Carlos III, entre los años 2006 y 2009, por 47 centros sanitarios de las comunidades autónomas. Resultados: Las técnicas moleculares utilizadas demostraron ser más sensibles que el método de concentración de Knott, tanto en el diagnóstico de L. loa (n = 12 frente a n = 4) como en el de M. perstans (n=57frente a n = 25) en el total de muestras de sangre estudiadas. Conclusión: Los métodos de PCR utilizados permiten un diagnóstico específico y más sensible de L. loay M. perstans en muestras clínicas de población inmigrante y viajeros procedentes de áreas endémicas, donde estas especies de filarias son coendémicas. El método de concentración de Knott debe emplearse como técnica complementaria siempre que sea posible (AU)

ABSTRACT

Introduction: The last few years has seen an increase in the number of immigrants and travellers from endemic areas where filariasis are mainly caused by Loa loa (L. loa), Mansonella perstans (M. perstans) and Wuchereria bancrofti (W. bancrofti) species. These demographic changes has led to the need for better filariae species-specific molecular diagnostic tests to solve problems, as alternatives to the more time consuming classic parasitology methods. Thus, the objective of the present work was the implementation of optimised molecular protocols (nested-PCR and ITS1-RFLP) developed in our laboratory, for the differential diagnosis of filarial parasites. The results obtained were compared with those obtained using the conventional parasitological methods. Material and methods: A total of 523 samples (517 peripheral blood, 5 adult worms and one vitreous body)were sent to Parasitology Department of the National Microbiology Centre, Carlos II Research Institute(ISCIII), from 47 Health Centres in the Autonomous Regions of Spain, from 2006 to 2009. The samples were studied by the Knott technique, nested-PCR and ITS1-RFLP.Results: The molecular techniques applied on blood samples showed to be more sensitive that Knott’s concentration technique in the diagnosis of both L. loa (n=12 versus n=4) and M. perstans (n=57 versusn = 25) infections (AU)