Simultaneous dual-color fluorescence lifetime imaging with novel red-shifted fluorescent proteins.

Laviv, Tal; Kim, Benjamin B; Chu, Jun; Lam, Amy J; Lin, Michael Z; Yasuda, Ryohei

Laviv, Tal; Kim, Benjamin B; Chu, Jun; Lam, Amy J; Lin, Michael Z; Yasuda, Ryohei.

Afiliação

Laviv T; Neuronal Signal Transduction Group, Max Planck Florida Institute for Neuroscience, Jupiter, Florida, USA.
Kim BB; Department of Bioengineering, Stanford University, Stanford, California, USA.
Chu J; Department of Bioengineering, Stanford University, Stanford, California, USA.
Lam AJ; Department of Pediatrics, Stanford University, Stanford, California, USA.
Lin MZ; Department of Bioengineering, Stanford University, Stanford, California, USA.
Yasuda R; Department of Pediatrics, Stanford University, Stanford, California, USA.

Nat Methods ; 13(12): 989-992, 2016 Dec.

Article em En | MEDLINE | ID: mdl-27798609

ABSTRACT

ABSTRACT

We describe a red-shifted fluorescence resonance energy transfer (FRET) pair optimized for dual-color fluorescence lifetime imaging (FLIM). This pair utilizes a newly developed FRET donor, monomeric cyan-excitable red fluorescent protein (mCyRFP1), which has a large Stokes shift and a monoexponential fluorescence lifetime decay. When used together with EGFP-based biosensors, the new pair enables simultaneous imaging of the activities of two signaling molecules in single dendritic spines undergoing structural plasticity.

Assuntos

Técnicas Biossensoriais/métodos; Transferência Ressonante de Energia de Fluorescência/métodos; Corantes Fluorescentes/química; Proteínas de Fluorescência Verde/química; Proteínas Luminescentes/química; Imagem Óptica/métodos; Animais; Eletroporação; Retículo Endoplasmático/metabolismo; Feminino; Corantes Fluorescentes/metabolismo; Proteínas de Fluorescência Verde/metabolismo; Células HEK293; Células HeLa; Humanos; Proteínas Luminescentes/metabolismo; Camundongos; Microscopia de Fluorescência por Excitação Multifotônica; Fotodegradação; Gravidez; Proteínas Recombinantes de Fusão/química; Proteínas Recombinantes de Fusão/metabolismo; Transfecção; Proteína Vermelha Fluorescente

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Texto completo: 1 Base de dados: MEDLINE Assunto principal: Técnicas Biossensoriais / Transferência Ressonante de Energia de Fluorescência / Proteínas de Fluorescência Verde / Imagem Óptica / Corantes Fluorescentes / Proteínas Luminescentes Limite: Animals / Female / Humans / Pregnancy Idioma: En Ano de publicação: 2016 Tipo de documento: Article

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