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J Microbiol Methods ; 142: 46-51, 2017 11.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-28870772

RESUMO

In vitro biofilm assays are a vital first step in the assessment of therapeutic effectiveness. Current biofilm models have been found to be limited by throughput, reproducibility, and cost. We present a novel in vitro biofilm model, utilising a sodium alginate substratum for surface biofilm colony formation, which can be readily dissolved for accurate evaluation of viable organisms. The dissolving bead biofilm assay was evaluated using a range of clinically relevant strains. The reproducibility and responsiveness of the assay to an antimicrobial challenge was assessed using standardised methods. Cryo-scanning electron microscopy was used to image biofilm colonies. Biofilms were grown for 20h prior to testing. The model provides a reproducible and responsive assay to clinically-relevant antimicrobial challenges, as defined by established guidelines. Moreover cryo-scanning electron microscopy demonstrates that biofilm formation is localised exclusively to the alginate bead surface. Our results suggest that this simple model provides a robust and adaptable assay for the investigation of bacterial biofilms.


Assuntos
Antibacterianos/farmacologia , Biofilmes/efeitos dos fármacos , Biofilmes/crescimento & desenvolvimento , Farmacorresistência Bacteriana/fisiologia , Gentamicinas/farmacologia , Alginatos/química , Microscopia Crioeletrônica , Enterococcus faecalis/crescimento & desenvolvimento , Enterococcus faecalis/isolamento & purificação , Escherichia coli/crescimento & desenvolvimento , Escherichia coli/isolamento & purificação , Ácido Glucurônico/química , Ácidos Hexurônicos/química , Humanos , Klebsiella pneumoniae/crescimento & desenvolvimento , Klebsiella pneumoniae/isolamento & purificação , Testes de Sensibilidade Microbiana , Microscopia Eletrônica de Varredura , Pseudomonas aeruginosa/crescimento & desenvolvimento , Pseudomonas aeruginosa/isolamento & purificação , Staphylococcus aureus/crescimento & desenvolvimento , Staphylococcus aureus/isolamento & purificação , Streptococcus mutans/crescimento & desenvolvimento , Streptococcus mutans/isolamento & purificação
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