Actividad comparativa in vitro de doripenem y otros carbapenemicos frente a pseudomonas aeruginosa aisladas en el laboratorio de microbiología del hospital Vargas de Caracas / Comparative in vitro activity of dorypenem and other carbapenems in pseudomonas aeruginosa isolates on Vargas Caracas Hospital´s Microbiology

Los ensayos de cuantificación de ARN plasmáticos de VIH-1 son importantes para el control de pacientes infectados, así como el monitoreo de la respuesta a la terapia antirretroviral. Por lo tanto, los ensayos comerciales empleados para este propósito deben presentar buena correlación entre si, para dar lugar al manejo terapéutico apropiado. El objetivo del estudio consistió en correlacionar los resultados obtenidos mediante el ensayo de amplificación de señal (bDNA) y PCR en tiempo real (RT-PCR), ambas casas comerciales aprobadas por la FDA y con diferente diana de detección del VIH-1. La validación se realizó con 180 muestras clínicas de pacientes referidos al INHRR. Los resultados fueron comparados con la subpoblación de linfocitos TCD4+ determinados mediante citometría de flujo. El análisis estadístico se realizó empleando el coeficiente de regresión lineal de Pearson (R2) y el valor de contraste de hipótesis con una significancia del 95 %, usando el programa SPSS Statistics v10.0. Se observó una buena correlación entre los ensayos (R2=0.961, p<0.05), siendo la RTPCR más sensible. Las diferencias cuantitativas de carga viral entre las técnicas ensayadas fue menor de 0.5 log10 copias/ml para el 89% de las muestras, y >1 log10 copias/ml solo en dos pacientes, no indicando necesariamente cambio terapéutico. Adicionalmente, se encontró una correlación inversa entre los linfocitos TCD4+ y carga viral del VIH-1 medida por bDNA (R2= 0.20, p<0.05) y RT-PCR (R2= 0.15, p<0.05). Los ensayos evaluados mostraron que ambas técnicas puedes ser empleadas indistintamente para el control de los pacientes VIH positivo.

The assay for quantification of plasma HIV-1 RNA are important for the control of patients infected, as well as the monitoring of the response to antiretroviral therapy. Therefore, the commercial assays used for this purpose must submit good correlation between to give place to the appropriate therapeutic management. In this study, we correlate the results obtained through the testing of signal amplification (bDNA) and real-time PCR (RT-PCR), two comercial technical approved by the FDA and with different targets of detection HIV-1. The validation was carried out with 180 clinical samples of patients referred to the INHRR. The results were compared with the subpopulation of lymphocytes TCD4+ determined by flow cytometry. The statistical analysis was performed using the program SPSS Statistics v10. It was observed good correlation between the tests studied (R2=0.961, p<0.05), with RT-PCR more sensitive. The quantitative differences in viral load between the techniques tested was less than 0.5 log10 copies/ml for the 89% of the samples, and >1 log10 copies/ml in only two patients. Additionally, it was found an inverse correlation between lymphocytes TCD4+ and viral load of HIV-1, measured by bDNA (R2= 0.20, p<0.05) and RT-PCR (R2= 0.15, p<0.05). Therefore, these assays can be employed for the patient control HIV.

Susceptibilidad a ceftarolina en staphylococcus aureus meticilino resistente / Susceptibility ceftaroline in methicillin-resistant staphylococcus aureus

Ceftarolina es un antibiótico de última generación del subgrupo de las cefalosporinas. Es el primer beta-lactámico comercializado que presenta actividad frente a Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (SARM). El objetivo del presente estudio fue describir el patrón de susceptibilidad a ceftarolina en SARM aislados en el Laboratorio de Microbiología del Hospital Vargas de Caracas. Material y métodos: El aislamiento e identificación de las cepas se realizo por pruebas bioquímicas convencionales y las pruebas de susceptibilidad por el método de Difusión en Disco según CLSI 2015. Resultados: Se analizaron un total de 100 cepas SARM, de las cuales el 100% resultó sensible para ceftarolina (≥ 24 mm), con un rango de 26-35 mm, no detectándose ninguna cepa intermedia ni resistente. Conclusión: Ceftarolina muestra una excelente actividad in vitro frente a SARM, por lo que podría presentarse como una alternativa prometedora en el tratamiento de infecciones causadas por este microorganismo.

Ceftaroline is an antibiotic of last generation cephalosporins subgroup. Is the first marketed beta-lactam having activity against Methicillin-resistant S. aureus (MRSA). The aim of this study was to describe the pattern of susceptibility to ceftaroline in MRSA isolated in the Microbiology Laboratory of Hospital Vargas of Caracas. Methods: Isolation and identification of the strains was performed by conventional biochemical tests and susceptibility testing by disk diffusion method according to CLSI 2015. Results: A total of 100 MRSA strains were analyzed, of which 100% he was sensitive to ceftaroline (≥ 24 mm), with a range of 26-35 mm, not detected any intermediate or resistant strain. Conclusion: Ceftaroline shows excellent in vitro activity against MRSA, so it could be presented as a promising alternative in the treatment of infections caused by this organism.

Evaluación morfológica y bioquímica de aislados clínicos de Trichophyton spp / Morphological and biochemical evaluation of clinical isolates of Trichophyton spp

Debido al pleomorfismo y variabilidad macroscópica que presenta el género Trichophyton, 1os métodos de identificación basados exclusivamente en caracteres morfológicos no son suficientes para su clasificación. El objetivo fue evaluar las características morfológicas y bioquímicas de aislados clínicos identificados como Trichophyton spp. Se estudiaron 98 cultivos, identificados previamente por macro y micromorfología y se reevaluaron por: microcultivo en lámina, perforación del pelo in vitro, hidrólisis de urea y uso de agares Trichophyton y BCP-MS-G. El análisis morfológico y las pruebas de hidrólisis de urea y perforación del pelo arrojaron 51% T. rubrum, 24% T. mentagrophytes, 16,6% T. interdigitale, 7% T. tonsurans y 2% Trichophyton spp. La prueba de urea evidenció un error de 9,4%. La evaluación mediante el BCP-MS-G permitió diferenciar T. rubrum tipo A algodonoso de T. interdigitale, e identificar Trichophyton spp. como T. rubrum tipo B granular. La concordancia entre la evaluación previa y la reevaluación fue de un 70% y entre las pruebas morfofisiológicas y BCP-MS-G fue de 96%. Se detectó un 30% de sobrediagnóstico de T. rubrum. Se sugiere el empleo del medio BCP-MS-G para diferenciar T. interdigitale de T. rubrum tipo A y otros biotipos de T. rubrum tipo B.

Due to the pleomorphism and macroscopic variability of the Trichophyton genus, identification methods based solely on the morphological characteristics are insufficient for its classification. The objective was to evaluate the morphological and biochemical characteristics of clinical isolates of Trichophyton spp. The study included 98 isolates previously identified by macro and micromorphology that were reassessed by means of microculture sheet, in vitro hair perforation, urea hydrolysis and culture on Trichophyton and BCP-MS-G agars. For morphological analysis, urea hydrolysis tests and in vitro hair perforation results were: T. rubrum 51%, T. mentagrophytes 24%, T. interdigitale 16.6%, T. tonsurans 7% and Trichophyton spp. 2%. The urea hydrolysis test showed 9.4% error. Culture on the BCP-MS-G medium allowed to differentiate T. rubrum cottony A type from T. interdigitale and the identification of Trichophyton spp. as T. rubrum granular B type. The agreement between the previous assessment and reassessment was 70% and when morphophysiological and BCP-MS-G culture were considered, agreement reached 96%. There was 30% overdiagnosis for T. rubrum. Cultures on BCP-MS-G agar are suggested to differentiate T. interdigitale from T. rubrum A type and other biotypes of T. rubrum B type.

Diseminación de enterobacterias productoras de carbapenemasas tipo KCP en Venezuela / Spread of carbapenemase-producing Enterobacteriaceae type KCP in Venezuela

La resistencia a carbapenems en la familia Enterobacteriaceae constituye un problema creciente a nivel mundial, siendo el mecanismo de mayor impacto clínico, epidemiológico y microbiológico, la producción de serino-carbapenemasas KPC. Investigar la presencia de carbapenemasas tipo KPC en aislados de Enterobacterias resistentes a carbapenems, provenientes de diversos centros de salud a nivel nacional, durante el período mayo 2010 - junio 2011. En esta investigación se analizaron 91 aislados de Enterobacterias: K pneumoniae (48), E. cloacae (30), E. aerogenes (4), E. coli (2), C. koseri (1), C. freundil (6), con resistencia a carbapenems provenientes de 14 centros de salud. La susceptibilidad antimicrobiana se evaluó siguiendo los criterios de la CLSI 2011. La detección fenotípica de carbapenemasas se realizó mediante el test de Hodge modificado y evaluando la sinergia con el ácido 3-aminofenilborónico 300 µg/disco. Se realizó el Test de Hodge "doble modificado" a los aislados de Enterobacter y Citrobacter. La detección genotípica de carbapenemasas se llevó a cabo mediante PCR utilizando iniciadores para el gen blaKPC. Todos los aislados presentaron a los deinhibición < 22 mm para meropenem y ertapenem. El 95% de los aislados resultaron positivos para el test de Hogde modificado, el test con ácido borónico, y para el gen blaKPC. En el test de Hodge "doble modificado", se observó 100% de positividad. La resistencia a carbapenems mediada por Carbapenemasas KPC, se ha incrementado en los últimos años en el país y el carácter plasmídico de estas enzimas les permite su fácil diseminación entre diversos géneros de Enterobacterias.

Resistance to carbapenems is the family Enterobacteriaceae is a growing problem around the world, being production of KPC serino-carbapenemase, the mayor impact clinical, epidemiological and microbiological mechanism. To investigate the presence of KPC carbapenemases in isolates of Enterobacterias resistant to carbapenems, from various health centers nationwide, during the period May-2010 June 2011. In this study were analyzed 91 Enterobacterias isolates: K. pneumoniae (48), E. cloacae (30), E. aerogenes (4), E. coli (2), C. koseri (1), C. freundii (6), with resistance to carbapenems from 14 health centers. Antimicrobial susceptibility was evaluated according to the criteria of the CLSI 2011. Phenotypic detection of carbapenemases was performed by Modified Hodge Test and it was evaluated the synergy with the 3-aminophenylboronic 300 µg/disc. Test were done with "double Modified" Hodge to Enterobacter and Citrobacter isolates. Genotypic detection of carbapenemases was performed out by using PCR primers for the gene blaKPC. All isolated showed inhibition zones <22 mm for meropenem and ertapemen. The 95% of the isolates were positive for Hogde Modified Test, test with boronic acid, and to blaKPC gene. By performing "Double Modified" Hodge`s essay , we observed a 100% of positivity. Resistance to carbapenems mediated by KPC carbapenemases has increased in the last few years in the country, and plasmidic characterization of these enzymes allows easily dissemination among different genera of Enterobacteriaceae.