Interaction between the mitochondrial adaptor MIRO and the motor adaptor TRAK.

MIRO (mitochondrial Rho GTPase) consists of two GTPase domains flanking two Ca2+-binding EF-hand domains. A C-terminal transmembrane helix anchors MIRO to the outer mitochondrial membrane, where it functions as a general adaptor for the recruitment of cytoskeletal proteins that control mitochondrial dynamics. One protein recruited by MIRO is TRAK (trafficking kinesin-binding protein), which in turn recruits the microtubule-based motors kinesin-1 and dynein-dynactin. The mechanism by which MIRO interacts with TRAK is not well understood. Here, we map and quantitatively characterize the interaction of human MIRO1 and TRAK1 and test its potential regulation by Ca2+ and/or GTP binding. TRAK1 binds MIRO1 with low micromolar affinity. The interaction was mapped to a fragment comprising MIRO1's EF-hands and C-terminal GTPase domain and to a conserved sequence motif within TRAK1 residues 394 to 431, immediately C-terminal to the Spindly motif. This sequence is sufficient for MIRO1 binding in vitro and is necessary for MIRO1-dependent localization of TRAK1 to mitochondria in cells. MIRO1's EF-hands bind Ca2+ with dissociation constants (KD) of 3.9 µM and 300 nM. This suggests that under cellular conditions one EF-hand may be constitutively bound to Ca2+ whereas the other EF-hand binds Ca2+ in a regulated manner, depending on its local concentration. Yet, the MIRO1-TRAK1 interaction is independent of Ca2+ binding to the EF-hands and of the nucleotide state (GDP or GTP) of the C-terminal GTPase. The interaction is also independent of TRAK1 dimerization, such that a TRAK1 dimer can be expected to bind two MIRO1 molecules on the mitochondrial surface.

Etilismo crónico y hepatopatías / Chronic alcoholism and hepatopathy

Se esbozan los antecedentes históricos del alcoholismo y su importancia medicosocial. Se estudian 40 casos de etílicos crónicos con investigaciones quimicoserológicas de laboratorio para el estudio de la función hepática, así como laparoscopia y biopsia hepática. Estos pacientes se estudiaron como paso previo a la imposición de tratamiento de deshabituación alcohólica por voluntad propia, durante su ingreso en la Sala de Psiquiatría de nuestro centro hospitalario, y al mismo tiempo para conocer en nuestro medio la afectación hepática más frecuente que resulta como repercusión del hábito de beber. Este estudio abarca el período que comprende 1 año de trabajo (septiembre de 1983 a septiembre de 1984). Los resultados de las investigaciones de laboratorio efectuadas a todos y cada uno de los pacientes encuestados, tales como bilirrubina, pruebas funcionales hepáticas, transaminasa glutamicopirúvica y bromosulftaleína (retención), se modificaron con significación. Así la bilirrubina estuvo elevada en el 15 % de los casos, la floculación del timol estuvo acelerada en el 12,5 %, la transaminasa glutamicopirúvica estuvo aumentada en el 45 %, y en el 40 % de ellos se evidenciaron cifras de retención de bromosulftaleína por encima del rango normal. Las investigaciones laparoscópicas y biópsias hepáticas de estos sujetos revelaron que el 72,5 % de los mismos son poseedores de alteraciones hísticas, hepáticas, y que existió una casia absoluta correspondencia entre ambos informes. Esto demuestra que en nuestro país, aunque el alcoholismo no es una afección significativa, sí provoca, como lo informado en otros países, degeneraciones hísticas en el hígado del sujeto afecto; la mayor frecuencia de las lesiones esteatósicas son de carácter moderado, con poca repercusión o traducción clínica