RESUMO
The increasing resistance of malarial parasites to almost all available drugs calls for the identification of new compounds and the detection of novel targets. Here, we establish the antimalarial activities of risedronate, one of the most potent bisphosphonates clinically used to treat bone resorption diseases, against blood stages of Plasmodium falciparum (50% inhibitory concentration [IC50] of 20.3±1.0 µM). We also suggest a mechanism of action for risedronate against the intraerythrocytic stage of P. falciparum and show that protein prenylation seems to be modulated directly by this drug. Risedronate inhibits the transfer of the farnesyl pyrophosphate group to parasite proteins, an effect not observed for the transfer of geranylgeranyl pyrophosphate. Our in vivo experiments further demonstrate that risedronate leads to an 88.9% inhibition of the rodent parasite Plasmodium berghei in mice on the seventh day of treatment; however, risedronate treatment did not result in a general increase of survival rates.
Assuntos
Antimaláricos/uso terapêutico , Ácido Etidrônico/análogos & derivados , Plasmodium falciparum/efeitos dos fármacos , Plasmodium falciparum/metabolismo , Animais , Cromatografia em Camada Fina , Ácido Etidrônico/uso terapêutico , Concentração Inibidora 50 , Masculino , Camundongos , Camundongos Endogâmicos BALB C , Plasmodium falciparum/patogenicidade , Prenilação de Proteína/efeitos dos fármacos , Ácido Risedrônico , Terpenos/metabolismoRESUMO
Nerolidol is a naturally occurring sesquiterpene found in the essential oils of many types of flowers and plants. It is frequently used in cosmetics, as a food flavoring agent, and in cleaning products. In addition, nerolidol is used as a skin penetration enhancer for transdermal delivery of therapeutic drugs. However, nerolidol is hemolytic at low concentrations. A simple and fast GC-MS method was developed for preliminary quantification and assessment of biological interferences of nerolidol in mouse plasma after oral dosing. Calibration curves were linear in the concentration range of 0.010-5 µg/mL nerolidol in mouse plasma with correlation coefficients (r) greater than 0.99. Limits of detection and quantification were 0.0017 and 0.0035 µg/mL, respectively. The optimized method was successfully applied to the quantification of nerolidol in mouse plasma.
Assuntos
Plasma/química , Sesquiterpenos/sangue , Sesquiterpenos/química , Animais , Calibragem , Cosméticos/química , Cromatografia Gasosa-Espectrometria de Massas/métodos , Limite de Detecção , Masculino , Camundongos , Camundongos Endogâmicos BALB C , Óleos Voláteis/químicaRESUMO
O preparo de suspensão bacteriana é procedimento importante para avaliação da inflamação e podeser obtida por diferentes métodos que precisam ou não do passo de armazenamento. O objetivo destetrabalho foi investigar a influência do armazenamento de suspensão de Staphylococcus aureus na viabilidade bacteriana e sua influência na inflamação in vivo. A suspensão bacteriana de S. aureus ATCC 6538 foi preparada visualmente seguindo o grau 4 da Escala de McFarland. A viabilidade bacteriana nessa solução foi determinada pela contagem de UFC, a qual foi utilizada para induzir artrite séptica e peritonite. O armazenamento por 24 h reduziu as UFC de S. aureus. Essa redução da viabilidadebacteriana resultou em diminuição da hiperalgesia mecânica, edema e recrutamento leucocitário na artriteséptica, e recrutamento leucocitário e produção de citocinas na peritonite bacteriana. Estes resultadosdemonstraram que o armazenamento de suspensão bacteriana afetou sua viabilidade, resultando emdiminuição da resposta inflamatória in vivo, sugerindo a importância de padronizar procedimentos parao preparo de suspensão bacteriana. Uma abordagem concebível seria determinar o número de UFC em um específico grau da Escala de McFarland, o qual permitirá o preparo e o uso de uma suspensão bacteriana no mesmo dia para os testes in vivo.
The preparation of bacterial suspension is an important procedure used in laboratories for inflammatoryevaluation protocols and can be obtained by different methods that need or not need step storage. The aimof this work was investigate the influence of storage of Staphylococcus aureus suspension in bacterialviability and its influence in bacteria-induced inflammation in vivo. The bacterial suspension of S. aureus ATCC 6538 was prepared accordingly to 4th degree of McFarlands Scale by visual comparison. This suspension was used to determine by CFU counting the bacterial viability and for administration to the animals to induce septic arthritis and peritonitis. Twenty four hours of storage reduced the S. aureus CFU. As a consequence of reduced bacterial viability, was detected reduced mechanical hyperalgesia, edema and leukocyte recruitment in septic arthritis and leukocyte recruitment and cytokine production bacterial peritonitis. These results demonstrate that storage of bacterial suspension affected bacterialviability, which resulted in diminished inflammatory response in vivo, raising the importance of standardprocedures for bacterial suspension preparation. A conceivable approach would be to determine the number of CFU at a specific McFarlands scale degree, which will allow the preparation and use a bacterial suspension in the same day for in vivo testing.
Assuntos
Camundongos , Artrite Infecciosa , Staphylococcus aureusRESUMO
A Dietilnitrosamina (DEN), uma substância reconhecidamente hepatotóxica e carcinogênica, foiutilizada na indução da necrose hepática centrolobular em ratos isogênicos Lewis divididos em 5 grupos de 5 animais. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito quimiopreventivo da epigalocatequina-3-galato (EGCG), de Camellia sinensis (chá verde) no tratamento da hepatotoxicidade celular induzida pela DEN. Foi mensurada a concentração sérica da alanina aminotransferase (ALT) e aspartato aminotransferase(AST) dos diferentes grupos experimentais. No ensaio bioquímico para AST e ALT, houve diferença significativa entre os valores médios do grupo controle (163±70,32) comparado ao grupo DEN (1631±1039,44), sugerindo que a DEN influencia na função hepática. Entretanto, não houve diferença significativa entre o grupo DEN e o tratado com epigalocatequina. A lactato desidrogenase (LDH) éconsiderada um marcador bioquímico comum para avaliação da progressão tumoral, e em relação ao LDH, as amostras não apresentaram diferenças significativas entre o grupo DEN (1385,5±43,13) e DEN + EGCG 150mg ou DEN + EGCG 200mg 1537,5±1010,45). Neste trabalho foi demonstrado que a epigalocatequina nas concentrações de 150 e 200 mg/Kg não induziram alterações hepáticas e também não foi possível verificar nenhuma quimioproteção pela EGCG em animais inicialmente tratados comDEN durante 24 horas. Sendo assim, novos experimentos com diferentes concentrações de EGCG sãonecessários para comprovar seu possível efeito quimioprotetor.
Diethylnitrosamine (DEN), a known hepatotoxic and carcinogenic substance, was used in the induction of centrilobular hepatic necrosis in isogenic Lewis rats divided into 5 groups with 5 animals. The aim of this study was to evaluate the chemopreventive effect of epigallocatechin-3-gallate (EGCG)from Camellia sinensis (green tea) in the treatment of cellular hepatotoxicity induced by DEN. It was measured the serum concentration of alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) of the different experimental groups. In the biochemistry assay for AST and ALT, there was significant difference between median values of control group (163±70.32) compared to DEN group(1631±1039.44), suggesting that DEN influences on hepatic function. However, there was no significant difference between DEN group to that treated with epigallocatechin. Lactate dehydrogenase (LDH) is considered a common biochemical marker for evaluation of tumor progression, and regarding LDH,the samples presented no significant differences between the DEN group (1385.5±43.13) and DEN + EGCG 150mg or DEN + EGCG 200mg (1537.5± 1010.45). In this work it was demonstrated that epigallocatechin concentrations of 150 and 200 mg/kg did not induce liver alterations and though was not verified any chemoprotective effect by EGCG in animals initially treated with DEN for 24 hours. Moreover, new experiments with different concentrations of EGCG are needed to verify its possiblechemoprotector effect.
Assuntos
Animais , Ratos , Dietilnitrosamina , L-Lactato Desidrogenase , Ratos Endogâmicos LewRESUMO
O câncer em estágio avançado cursa com alterações nutricionais e metabólicas que caracterizam o estado de caquexia neoplásica. Em situações de comprometimento da homeostasia, a glândula adrenal tem papel fundamental na resposta neuroendócrina. Para estudar as alterações morfológicas da adrenal no desenvolvimento do câncer associado à caquexia, utilizamos o modelo experimental de caquexia induzida pelo tumor de Walker-256 em ratos Wistar. Os animais foram sacrificados 12 dias após inoculação tumoral e as adrenais removidas para análise histopatológica por meio da coloração porhematoxilina-eosina. Foram avaliados os parâmetros nutricionais, índice de caquexia e peso das adrenais. Os animais com tumor apresentaram índice de caquexia de 16,6 ± 4%. A média do peso das adrenais foi significativamente maior no grupo tumor (40 mg ± 10) do que no controle (25 mg ± 3). O córtex adrenal dos animais com caquexia apresentou hipertrofia das camadas fasciculada e reticular, exibindo espongiócitos volumosos; a região medular apresentou congestão e estase vascular. Os resultados foram semelhantes nos animais do grupo pair fed e do grupo alimentado ad libitum. Animais com caquexia devido ao câncer apresentam comprometimento morfológico da glândula adrenal que exibe alterações relacionadas à resposta de estresse, compatíveis com maior secreção de catecolaminas e ativação do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal.
Advanced cancer occurs with nutritional and metabolic alterations that characterize neoplastic cachexia.When homeostasis is compromised, the adrenal glands have a fundamental role in the neuroendocrine response. Our purpose in this research was to study morphological alterations of the adrenal glands in the development of cancer associated to cachexia. Cachexia experimental model induced by Walker256 tumor in Wistar rats, was used. Animals were sacrificed 12 days after tumor cells inoculation and adrenal glands removal for histopathologic analysis by means of hematoxylin and eosin stain. Nutritional parameters, cachexia index and adrenal glands weight, were evaluated. Animals with tumor presented cachexia index of 16,6 ± 4%. Adrenal glands average weight was significantly higher in the tumor group (40 mg ± 10) than in the control group (25 mg ± 3). Adrenal cortex of animals with cachexia showed hypertrophy of the zona fasciculata and reticular layer, with voluminous spongiocytes; vascular congestion and stasis were observed in the medullar region. Results were similar in the pairand ad libitum-fed groups. Animals with cancer cachexia showed compromised morphology of the adrenal glands which showed alterations related to stress response, suggesting increased cathecolamine secretion and activation of the hypothalamus-pituitary-adrenal axis.
Assuntos
Animais , Ratos , Sistema Hipófise-Suprarrenal , Glândulas Suprarrenais , Caquexia , Ratos WistarRESUMO
O chá verde e o chá preto são preparados com folhas da mesma planta, Cammellia sinensis. O chá preto é responsável por 75 por cento do chá consumido no mundo e o chá verde, por apenas 22 por cento. O chá que era consumido como medicamento, passou a ser do gosto popular devido as suas características organolépticas. Seus componentes flavonóides e catequinas apresentam uma série de atividades biológicas, antioxidante, quimioprotetora, antiinflamatória e anticarcinogênica. Vários estudos vêm sendo desenvolvidos por pesquisadores em várias regiões do mundo para comprovar estas atividades terapêuticas, objetivando compreender os mecanismos de ação do chá verde. Diante do acima citado, esta revisão tem por finalidade apresentar as várias linhas de pesuisa em andamento e os resultados já obtidos sobre o efeito quimioprotetor/antioxidante do chá verde.