RESUMO
The pathogenic yeast Cryptococcus neoformans secretes numerous proteins, such as heat shock proteins, by unconventional mechanisms during its interaction with host cells. Hsp70 is a conserved chaperone that plays important roles in various cellular processes, including the interaction of fungi with host immune cells. Here, we report that sera from individuals with cryptococcosis infection recognize a recombinant C. neoformans Hsp70 (Cn_rHsp70). Moreover, immunofluorescence assays using antibodies against Cn_rHsp70 revealed the localization of this protein at the cell surface mainly in association with the capsular network. We found that the addition of Cn_rHsp70 positively modulated the interaction of C. neoformans with human alveolar epithelial cells and decreased fungal killing by mouse macrophages, without affecting phagocytosis rates. Immunofluorescence analysis showed that there was a competitive association among the receptor, GXM and Cn_rHsp70, indicating that the Hsp70-binding sites in host cells appear to be shared by glucuronoxylomannan (GXM), the major capsular antigen in C. neoformans. Our observations suggest additional mechanisms by which Hsp70 influences the interaction of C. neoformans with host cells.
Assuntos
Cryptococcus neoformans/metabolismo , Proteínas de Choque Térmico HSP70/metabolismo , Proteínas de Membrana/metabolismo , Animais , Anticorpos Antifúngicos/sangue , Anticorpos Antifúngicos/imunologia , Sítios de Ligação , Linhagem Celular , Criptococose/imunologia , Cryptococcus neoformans/patogenicidade , Células Epiteliais/microbiologia , Feminino , Imunofluorescência , Proteínas de Choque Térmico HSP70/genética , Proteínas de Choque Térmico HSP70/imunologia , Interações Hospedeiro-Patógeno , Humanos , Macrófagos/imunologia , Camundongos , Camundongos Endogâmicos BALB C , Fagocitose/imunologia , Polissacarídeos/metabolismo , Ligação ProteicaRESUMO
The purpose of the present study is to compare the tomato juice agar, a well known medium employed to observe ascospore formation, with niger seed agar, casein agar and sunflower seed agar, applied to a differentiation between C. dubliniensis and C. albicans. After 48 hours of incubation at 30 degrees C all 26 (100%) C. dubliniensis isolates tested produced chlamydospores on tomato juice agar as well as in the other three media evaluated. However, when we inoculated all media with C. albicans, the absence of chlamydospores became resulting in the following percents: tomato juice agar (92.47%), niger seed agar (96.7%), casein agar (91.39%), and sunflower seed agar (96.7%). These results indicate that tomato juice agar is another medium which can also be used in the first phenotypic differentiation between C. dubliniensis and C. albicans.
Assuntos
Ágar/química , Candida/classificação , Meios de Cultura/química , Candida/crescimento & desenvolvimento , Candida/isolamento & purificação , Candida albicans/classificação , Candida albicans/crescimento & desenvolvimento , Solanum lycopersicum , Técnicas de Tipagem Micológica/métodos , Esporos Fúngicos/crescimento & desenvolvimentoRESUMO
O presente estudo teve como objetivo comparar o ágar suco de tomate, um tradicional meio utilizado para observação de ascósporos em leveduras, com o ágar semente de niger, ágar caseína e ágar semente de girassol, na diferenciação fenotípica entre C. albicans e C. dubliniensis. Após 48 h de incubação a 30 ºC, os 26 isolados de C. dublinienis (100%) evidenciaram a formação de clamidoconídios igualmente em todos os meios comparados. Entretanto, quando semeados com C. albicans, a formação de clamidoconídios foi raramente observada, resultando nos seguintes percentuais de ausência destas estruturas: ágar suco de tomate (92,47%), ágar niger (96,7%), ágar caseína (91,39%), ágar semente de girassol (96,7%). Estes resultados permitem-nos sugerir a utilização do ágar suco de tomate como mais um meio que, já no primo-isolamento, é capaz de, presuntivamente, diferenciar C. albicans de C. dubliniensis.