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BMC Cell Biol ; 5: 8, 2004 Feb 02.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-15018653

RESUMO

BACKGROUND: "Protein-trap" is a method that allows epitope-tagging of endogenous proteins. This method allows for the identification of endogenously expressed proteins that exhibit specific localization of interest. This method has been recently reported for its application in the study of Drosophila development by using a relatively large epitope, green-fluorescent-protein (GFP). RESULT: Herein, we report a new "protein-trap" vector for mammalian cells. This new method utilizes a much smaller epitope-tag and also allows for drug-selection prior to the epitope-tagging. Pre-selection by drug resulted in the highly efficient protein-trapping frequency. CONCLUSION: The "protein-trap" method based on this new vector is expected to serve as a complimentary approach to the previously reported GFP-based method.


Assuntos
Clonagem Molecular/métodos , Biossíntese de Proteínas , Anticorpos Monoclonais , Western Blotting , Carcinoma/química , Carcinoma/genética , Carcinoma/patologia , Carcinoma/virologia , Epitopos/biossíntese , Epitopos/genética , Éxons/genética , Éxons/imunologia , Matriz Extracelular/fisiologia , Vetores Genéticos/biossíntese , Vetores Genéticos/genética , Humanos , Espaço Intracelular/química , Neoplasias Pulmonares/química , Neoplasias Pulmonares/tratamento farmacológico , Neoplasias Pulmonares/genética , Neoplasias Pulmonares/patologia , Transporte Proteico/fisiologia , Proteínas/imunologia , Proteínas Recombinantes de Fusão/biossíntese , Proteínas Recombinantes de Fusão/genética , Retroviridae/genética , Transdução de Sinais/fisiologia , Células Tumorais Cultivadas
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