α4-α5 Helices on Surface of KRAS Can Accommodate Small Compounds That Increase KRAS Signaling While Inducing CRC Cell Death.

KRAS is the most frequently mutated oncogene associated with the genesis and progress of pancreatic, lung and colorectal (CRC) tumors. KRAS has always been considered as a therapeutic target in cancer but until now only two compounds that inhibit one specific KRAS mutation have been approved for clinical use. In this work, by molecular dynamics and a docking process, we describe a new compound (P14B) that stably binds to a druggable pocket near the α4-α5 helices of the allosteric domain of KRAS. This region had previously been identified as the binding site for calmodulin (CaM). Using surface plasmon resonance and pulldown analyses, we prove that P14B binds directly to oncogenic KRAS thus competing with CaM. Interestingly, P14B favors oncogenic KRAS interaction with BRAF and phosphorylated C-RAF, and increases downstream Ras signaling in CRC cells expressing oncogenic KRAS. The viability of these cells, but not that of the normal cells, is impaired by P14B treatment. These data support the significance of the α4-α5 helices region of KRAS in the regulation of oncogenic KRAS signaling, and demonstrate that drugs interacting with this site may destine CRC cells to death by increasing oncogenic KRAS downstream signaling.

Forest disturbance and vector transmitted diseases in the lowland tropical rainforest of central Panama.

OBJECTIVE: To explore possible changes in the community attributes of haematophagous insects as a function of forest disturbance. We compare the patterns of diversity and abundance, plus the behavioural responses of three epidemiologically distinct vector assemblages across sites depicting various levels of forest cover. METHODS: Over a 3-year period, we sampled mosquitoes, sandflies and biting-midges in forested habitats of central Panama. We placed CDC light traps in the forest canopy and in the understorey to gather blood-seeking females. RESULTS: We collected 168 405 adult haematophagous dipterans in total, including 26 genera and 86 species. Pristine forest settings were always more taxonomically diverse than the disturbed forest sites, confirming that disturbance has a negative impact on species richness. Species of Phlebotominae and Culicoides were mainly classified as climax (i.e. forest specialist) or disturbance-generalist, which tend to decrease in abundance along with rising levels of disturbance. In contrast, a significant portion of mosquito species, including primary and secondary disease vectors, was classified as colonists (i.e. disturbed-areas specialists), which tend to increase in numbers towards more disturbed forest habitats. At pristine forest, the most prevalent species of Phlebotominae and Culicoides partitioned the vertical niche by being active at the forest canopy or in the understorey; yet this pattern was less clear in disturbed habitats. Most mosquito species were not vertically stratified in their habitat preference. CONCLUSION: We posit that entomological risk and related pathogen exposure to humans is higher in pristine forest scenarios for Culicoides and Phlebotominae transmitted diseases, whereas forest disturbance poses a higher entomological risk for mosquito-borne infections. This suggests that the Dilution Effect Hypothesis (DEH) does not apply in tropical rainforests where highly abundant, yet unrecognised insect vectors and neglected zoonotic diseases occur. Comprehensive, community level entomological surveillance is, therefore, the key for predicting potential disease spill over in scenarios of pristine forest intermixed with anthropogenic habitats. We suggest that changes in forest quality should also be considered when assessing arthropod-borne disease transmission risk.

OBJECTIF: Explorer les changements possibles dans les attributs communautaires des insectes hématophages en fonction de la perturbation des forêts. Nous comparons les modèles de diversité et d'abondance, ainsi que les réponses comportementales de trois assemblages de vecteurs épidémiologiquement distincts sur des sites illustrant divers niveaux de couverture forestière. MÉTHODES: Au cours d'une période de trois ans, nous avons échantillonné des moustiques, des phlébotomes et des moucherons piqueurs dans les habitats forestiers du centre de Panama. Nous avons placé des pièges à lumière CDC dans la canopée de la forêt et dans le sous-étage pour recueillir les femelles en quête de sang. RÉSULTATS: Nous avons collecté un total de 168.405 diptères hématophages adultes, dont 26 genres et 86 espèces. Les environnements de forêt intacts étaient toujours plus diversifiés du point de vue taxonomique que les sites forestiers perturbés, confirmant que les perturbations avaient un impact négatif sur la richesse en espèces. Les espèces de phlébotome et Culicoïdes étaient principalement classés comme climax (spécialiste de la forêt) ou généralistes de perturbation, qui ont tendance à diminuer en abondance parallèlement aux niveaux croissants de perturbation. En revanche, une partie importante des espèces de moustiques, y compris les vecteurs primaires et secondaires de maladies, a été classée dans la catégorie des colons (c'est-à-dire spécialistes des zones perturbées), qui ont tendance à se multiplier vers des habitats forestiers plus perturbés. Dans la forêt vierge, les espèces de phlébotomes et Culicoïdes les plus répandues cloisonnaient la niche verticale en étant actives dans la canopée de la forêt ou dans le sous-étage; pourtant, cette tendance était moins nette dans les habitats perturbés. La plupart des espèces de moustiques n'étaient pas stratifiées verticalement dans leur préférence d'habitat. CONCLUSION: Nous estimons que le risque entomologique et l'exposition associée des agents pathogènes à l'homme est plus élevé dans les scénarios de forêt vierge pour les maladies transmises par les phlébotomes et Culicoïdes, alors que la perturbation des forêts pose un risque entomologique plus élevé pour les infections transmises par les moustiques. Cela suggère que l'hypothèse de l'effet de dilution ne s'applique pas dans les forêts tropicales humides où se reproduisent très abondamment les insectes vecteurs, mais non reconnus, et où des maladies zoonotiques négligées surviennent. Une surveillance entomologique approfondie au niveau de la communauté est donc la clé pour prédire le potentiel de propagation des maladies dans des scénarios de forêt vierge mélangée à des habitats anthropiques. Nous suggérons que les changements dans la qualité des forêts soient également pris en compte lors de l'évaluation du risque de propagation de maladies transmises par les arthropodes.

Identification of fragments from Autographa californica polyhedrin protein essential for self-aggregation and exogenous protein incorporation.

BACKGROUND: Baculoviruses are widely used for the production of recombinant proteins, biopesticides and as gene delivery systems. One of the viral forms called polyhedra has been recently exploited as a scaffold system to incorporate or encapsulate foreign proteins or peptide fragments. However, an efficient strategy for foreign protein incorporation has not been thoroughly studied. RESULTS: Based on the crystal structure of polyhedrin, we conducted an in silico analysis of the baculovirus Autographa californica nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) polyhedrin protein to select the minimum fragments of polyhedrin that could be incorporated into polyhedra. Using confocal and transmission electron microscopy we analyzed the expression and cellular localization of the different polyhedrin fragments fused to the green fluorescent protein (EGFP) used as reporter. The amino fragment 1-110 contains two repeats formed each of two ß sheets followed by a α helix (amino acids 1-58 and 58-110) that are important for the formation and stability of polyhedra. These fragments 1-58, 58-110 and 1-110 could be incorporated into polyhedra. However, only fragments 1-110 and 58-110 can self-aggregate. CONCLUSIONS: These results demonstrate that 58-110 is the minimum fragment that contributes to the assembly of the recombinant polyhedra via self-aggregation. This is the minimum sequence that can be used to efficiently incorporate foreign proteins into polyhedra.

Successful treatment of Naegleria fowleri meningoencephalitis by using intravenous amphotericin B, fluconazole and rifampicin.

BACKGROUND: Primary amebic meningoencephalitis (PAM) is an emerging disease with a rapidly fatal outcome. Only eight reports of cured cases have appeared in the medical literature to date. METHODS: A 10-year-old boy developed PAM caused by Naegleria fowleri 1 week after swimming in an irrigation canal. He was admitted to our hospital after 9 h of severe headache and vomiting, fever, ataxic gait, mild confusion, and seizures were evident. Trophozoites were identified in the cerebrospinal fluid (CSF). Treatment with intravenous (i.v.) dexamethasone, amphotericin B, fluconaloze, and oral rifampicin was started. After several hours of conflicting clinical signs, recovery began, and on the third day he was conscious again. Hospital discharge occurred on day 23, after a normal brain CT scan. There was no sequel to the disease during the following 12 months. RESULTS: The amebas present in the CSF were identified and confirmed as N. fowleri after observation of wet mounts and of cultures seeded on 1.5% non-nutrient agar plates covered with Escherichia coli, vegetative and cystic forms, enflagellation experiments in distilled water at 98 degrees F, temperature tolerance testing and by indirect immunofluorescence using N. fowleri LEE antibody. The genotype was determined by PCR amplification and sequencing of the internal transcribed spacers (ITS) including the 5.8S rDNA. CONCLUSIONS: Early treatment of PAM by i.v. administration of amphotericin B and fluconazole, and oral administration of rifampicin can offer some hope of cure for this devastating disease.

Tratamiento artroscópico de la gonartrosis y osteotomía tibial con fijadores externos. Experiencia personal del tratamiento de 40 rodillas / Arthroscopic treatment for gonarthrosis and tibial osteotomy with external fixators. Personal experience in 40 knees

Se trató a 32 pacientes con 40 rodillas artrósicas, con o sin conservación de la alineación de las mismas y con edades superiores a los 50 años, sin intervención quirúrgica previa. Por medio de artroscopía se les hizo desbridamiento, perforaciones y sinovectomía, así como osteotomía de alineación fijada con fijadores externos, que se hizo en 10 casos, por tener una deformidad mayor de 10 grados. Los grados más comunes de artrosis fueron del IV al VI. En esta serie a todos se les aplicó bupivacaína y dexametasona, que fueron de gran ayuda en el control del dolor postoperatorio y en la prevención de adherencias postoperatorias. La recuperación total fue en promedio después de 7 meses de la cirugía. Los resultados se consideraron excelentes en 20 casos, buenos en 10, regulares en 2 y malos en 2.

Limpieza articular artroscópica asociada o no a osteotomía tibial / Arthroscopic knee joint debridement with or without tibial osteotomy

Se presentan tres series de pacientes con artrosis de las rodillas que fueron distribuidos en la forma siguiente: grupo I, 26 rodillas tratadas con limpieza articular por artroscopía; grupo II, 18 rodillas tratadas por osteotomía tibial proximal sola y grupo III, 20 rodillas tratadas con limpieza articular artroscópica y osteomía tibial. Los resultados fueron buenos en el 61.3 por ciento para el grupo I, 44.4 por ciento para el grupo II y 45 por ciento para el grupo III

Sutura meniscal por artroscopía con el uso de aguja de punción lumbar. Técnicas de acceso interior y exterior. Reporte preliminar de 10 casos / Arthroscopic meniscal repair with a lumbar punction needle. Interior and exterior aproach. Preliminar report of 10 cases

Con base en el concepto genralizado de la conveniencia de salvar los meniscos de la rodilla para prevenir la artrosis, se presentan las técnicas de reparación de las lesiones meniscales periféricas, con posibilidades de dirigir las suturas de adentro a afuera, o de afuera a adentro, bajo control artroscópico, utilizando una aguja de punci'n lumbar. La revisión a corto plazo en esta serie (uno a 10 meses de posoperatorio) pesenta inicialmente buenos resltados en siete a 10 pacientes, con aparición de hidrartrosis recurrente temporal en dos enfermos, al final resuelta, y dolor persistente en el sitio de la sutura subcutánea en uno. En todos desaparecieron los síntomas meniscales. En ningún caso hubo lesión de los elementos neurovasculares del hueco poplíteo. Todos los pacientes regresaron a sus actividades laborales y deportivas.

¿Afecta la temperatura inguinal y abdominal a un testículo no descendido? / Affects the undescended testicle the inguinal and abdominal temperature?

En el maldescenso testicular, uno de los factores claves con que se justifica la orquiopexia es impedir el daño que la alta temperatura inflige a la gónada afectada. El presente estudio se diseño para conocer sí, en pacientes con permeabilidad del conducto peritoneovaginal, hay diferencias térmicas significativas entre las regiones donde puede ubicarse un testículo no descendido. Para esto, se realizaron termometrías de la cavidad abdominal, de la región inguinal subcutánea, de la cavidad escrotal y de la cavidad oral, en el curso de 72 intervenciones quirúrgicas indicadas por persistencia del conducto peritoneovaginal en niños (hernia inguinal indirecta, hidrocele, testículo no descendido). Se encontró que la cavidad abdominal tuvo temperatura significativamente más alta que la región inguinal subcutánea y que la cavidad escrotal, pero entre esta últimas dos regiones no hubo diferencias térmicas significativas. Se concluyó que la temperatura sí puede ser un factor nocivo para los testículos intraabdominales, pero no para los testículos ubicados fuera de la cavidad abdominal.

Torsión del epiplón mayor, causa de abdomen agudo en escolares y adolescentes / Great omuntum torsion, cause of acute abdomen in scholars and adolescents

La torsión del delantal epiploico, segmento libre del epiplón mayor, es un evento clínico poco frecuente sobre todo entre los infantes. En el Hospital de Especialidades No. 1 del Centro Médico Nacional del Noroeste, Ciudad Obregón, Sonora, en los últimos cinco años se han identificado cuatro casos en tres niños y una niña, con edades entre ocho y 10 años. Todos tuvieron como rasgo común la obesidad moderada o marcada y el antecedente de contusión abdominal reciente. El principal dato clínico fue el dolor abdominal continuo y progresivo en los cuadrantes derechos, con una evolución de tres días sin estar acompañado de síndrome infeccioso. En ningún caso se estableció diagnóstico preoperatorio, indicándose el procedimiento quirúrgico por la sospecha de apendicitis aguda. Durante la laparotomía se encontró el apéndice cecal sano y al palpar internamente el alto abdomen derecho se identificó el plastrón hemorrágico de un segmento del epiplón mayor, muy cercano a su borde derecho, en el que histopatológicamente se documentó necrosis y hemorragía. La resección fue curativa en todos