O papel da microbiota intestinal na competência vetorialdo Lutzomyia longipalpis para a Leishmania (Leishmania)infantum chagasi e a transmissão do parasito ao vertebradopela da picada / The role of the intestinal microbiota in vector competence Lutzomyia longipalpis for the Leishmania (Leishmania) infantum chagasi and transmission of the parasite to the vertebrate by the bite

RESUMO

As Leishmanioses são doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania etransmitidas pela picada dos flebotomíneos. A doença apresenta diferentes manifestaçõesclínicas, como a leishmaniose visceral (LV). No Brasil a LV é causada pela subespécieLeishmania (L.) infantum chagasi e transmitida principalmente pelo vetor Lutzomyialongipalpis e nos últimos dez anos, a média anual de novos casos foi de 3.379. Oflebotomíneo, durante o repasto sanguíneo, pode ingerir o parasito que é direcionado aointestino médio do inseto, onde entra em contato com a microbiota. In vitro a ação dessamicrobiota sobre o parasito foi avaliada demonstrando a lise na parede celular de Leishmania(L.)infantum chagasi e Leishmania (V.) braziliensis causada por Serratia marcescens, porémainda não esta claro o seu papel no vetor. Neste trabalho foi feita a identificação porsequenciamento de DNA de isolados bacterianos do intestino médio de L. longipalpis de duaslocalidades brasileiras. Nas fêmeas de flebotomíeneos da Gruta da Lapinha foi encontradapela primeira vez a bactéria da família Enterobactereaceae, Providencia sp. Nas fêmeas deJacobina a bactéria encontrada foi a espécie Acinetobacter soli. As duas localidadesapresentaram maior número de bactérias do tipo bacilos Gram negativos. Os machos deJacobina não apresentaram crescimento bacteriano, diferentemente dos machos da Gruta daLapinha. Para análise da influência das bactérias no desenvolvimento do parasito, Fêmeas deL. longipalpis foram infectadas com Leishmania (L.) infantum chagasi e tratadas com doisantibióticos de ação principal sobre bactérias Gram negativas, carbenicilina e gentamicina. Osparasitos do grupo tratado com carbenicilina, além de serem capazes de se estabelecer noflebotomíneos após a digestão, tiveram um aumento no seu número. O grupo tratado comgentamicina apresentou uma queda já no segundo dia pós-infecção, tendo um aumento noquinto dia. Ao incubar as bactérias identificadas no intestino médio com L. (L.) infantumchagasi in vitro, foi possível ver que as bactérias interferem no crescimento do parasito.Analisamos também a expressão de peptídeos antimicrobianos. Gambicina e defensinaapresentaram diferença de expressão entre os grupos Não alimentados e Pós Digestão, sendoque a expressão foi maior em Não alimentados. No processo de interação, estabelecemos nolaboratório a transmissão de L.(L.) infantum chagasi diretamente via picada do flebotomíneo ahamsters e camundongos. Os dois modelos apresentaram uma variação de 4 a 15 mil parasitosinoculados na orelha dos vertebrados.