Genital infection by Aerococcus viridans in a captive african elephant (Loxodonta africana) / Infecção genital por Aerococcus viridans em um elefante africano em cativeiro (Loxodonta africana)

Aerococcus viridans is an emerging pathogen for humans and livestock animals, mainly associated with genitourinary infections cases. Its occurrence in wild mammals has never been reported. The aim of this study was to determine the etiological agent associated with clinical a case of a genital infection in a female African elephant (Loxodonta africana). Phylogenetic analysis and antimicrobial susceptibility profile of the isolate were also addressed. The animal presented frequent cases of genital infection with intermittent white secretion. Purulent secretion was sampled and submitted to bacteriological exam. The isolate obtained was thus identified by phenotypic and molecular methods as A. viridans and was found to be similar to human pathogenic isolates in BLASTn and phylogenetic analysis. The isolate was sensitive to almost all antimicrobials evaluated, presenting resistance to ciprofloxacin and norfloxacin. This is the first report of occurrence of A. viridans infection in the genital tract of an African elephant.(AU)

Aerococcus viridans é um patógeno emergente para seres humanos e animais de produção, principalmente associado a casos de infecções geniturinárias. Sua ocorrência em mamíferos selvagens nunca foi relatada. O objetivo deste estudo foi determinar o agente etiológico associado a um caso clínico de infecção genital em uma fêmea de elefante africano (Loxodonta africana). Análises filogenéticas e perfil de susceptibilidade antimicrobiana do isolado também foram avaliados. O animal apresentou casos frequentes de infecção genital com eliminação de secreção branca intermitente. A secreção purulenta foi coletada e submetida a exame bacteriológico. O isolado obtido foi identificado por métodos fenotípicos e moleculares como A. viridans e apresentou alta similaridade a isolados humanos patogênicos nas análises de BLASTn e filogenética. O isolado foi sensível a quase todos os antimicrobianos avaliados, apresentando resistência à ciprofloxacina e norfloxacina. Este é o primeiro relato de ocorrência de infecção por A. viridans no trato genital de elefante africano.(AU)

Isolation and identification of main mastitis pathogens in Mexico / Isolação e identificação dos micróbios patogênicos principais da mastite em México

The present work is a large epidemiological study aiming to detect the prevalence of subclinical mastitis and to investigate the major udder pathogens in Jalisco State, western Mexico. For this purpose, 2205 dairy cows, representing 33 Mexican dairy herds, were involved. Of 2205 cows, 752 mastitic animals were diagnosed and only 2,979 milk samples could be obtained for further investigation. All 2979 milk samples were subjected to California Mastitis Test (CMT) to differentiate clinical cases from subclinical ones where 1996 samples (67 %) reacted positively. Of these, 1087 samples (54.5%) came from cows suffering from clinical cases of mastitis. Bacteriological identification of the causative agents revealed the presence of a major group of pathogens including the Coagulase negative staphylococci (CNS), S.aureus, S.agalactiae, Corynebacterium spp. and Coliform bacteria which were detected in 464 (15.6%), 175 (5.9%), 200 (6.8%), 417 (14%) and 123 (4.1%) of the 2927 investigated quarters, 295 (15.4%), 118 (15.7%), 111 (14.8%), 227 (30.2%) and 109 (14.5%) of the 752 examined cows and in 33 (100%), 22 (66.7%), 19 (57.6%), 30 (90.1%) and 27 (81.8%) of the 33 herds involved, respectively. Other pathogens could be detected in the investigated milk samples such as S. dysgalactiae (0.4%), S.uberis (0.37%), Bacillus spp. (1%), Nocardia spp. (0.6%) und Candida spp. (0.1%). Meanwhile, others were present in a negligible ratio; including the Aerococcus viridans, and Enterococcus spp., Lactococcus lactis, S. bovis.(AU)

O trabalho atual é um estudo epidemiológico que objetiva detectar a predominância da mastite subclínica e investigar os micróbios patogênicos principais do úbere no México ocidental. Com esta finalidade, foram utilizadas 2205 vacas leiteiras, representando 33 rebanhos de leiteiras mexicanas. Além dessas 2205 vacas, 752 animais com mastite foram diagnosticados, considerando-se que somente 2979 amostras do leite poderiam ser obtidas para a posterior investigação. Todas as 2979 amostras do leite foram submetidas ao teste da mastite de Califórnia (CMT) para diferenciar casos clínicos dos subclínicos, visto que 1996 amostras (67%) reagiram positivamente. Além dessas, 1087 amostras (54.5%) vieram das vacas que sofrem de casos clínicos de mastite. A identificação bacteriológica dos agentes causais revelou a presença dos Staphylococcus negativos para coagulase (CNS), S. aureus, S. agalactiae, outros spp. Streptococcal, Corynebacterium spp., e as bactérias de coliformes foram detectadas em 464 (15.6%), 175 (5.9%), 200 (6.8%), 109 (3.9%), 417 (14%) e em 123 (4.1%) dos 2927 quartos investigados; em 295 (15.4%), 118 (15.7%), 111 (14.8%), 95 (12.6%), 227 (30.2%) e em 109 (14.5%) das 752 vacas examinadas e, finalmente, em 33 (100%), 22 (66.7%), 19 (57.6%), 30 (90.1%), 30 (90.1%) e em 27 (81.8%) dos 33 rebanhos envolvidos, respectivamente.(AU)

MICRO-ORGANISMOS DETERIORANTES DO LEITE: ATIVIDADE PROTEOLÍTICA E LIPOLÍTICA DE BACTÉRIAS PSICROTRÓFICAS E TERMODÚRICAS MESÓFILAS

A presença de enzimas microbianas deteriorantes termoestáveis proteolíticas e lipolíticas pode comprometer a qualidade e vida útil do leite processado e derivados, mesmo que o leite cru apresente baixas contagens totais de micro-organismos. Além disso, as formas microbianas vegetativas ou esporuladas podem resistir à pasteurização e também atuarem como deteriorantes do leite pasteurizado. Como passo preliminar para redução dos micro-organismos deteriorantes no leite cru refrigerado, aumento da vida útil e do potencial tecnológico do leite pasteurizado, o presente trabalho teve como objetivo identificar a diversidade genética de micro-organismos psicrotróficos e termodúricos com potencial deteriorante proteolítico e/ou lipolítico no leite cru refrigerado de alta qualidade microbiológica. Foram avaliadas 20 amostras de leite cru refrigerado produzido na bacia leiteira da região de Castro, Paraná, nas quais foram utilizados métodos oficiais para a contagem e isolamento de psicrotróficos e termodúricos e técnicas biomoleculares de agrupamento genético hierárquico (Restriction Fragment Length Polymorphism) e caracterização (sequenciamento parcial do gene 16S rRNA e análise filogenética) dos isolados. As contagens médias de psicrotróficos e termodúricos foram 1,1 x 104 e 3,2 x 102 UFC/mL, respectivamente. Entre os psicrotróficos, 47,8% do total de isolados (n = 295) apresentaram atividade deteriorante, dos quais 30,5% foram proteolíticos e lipolíticos simultaneamente, 31,9% exclusivamente proteolíticos e 37,6% lipolíticos. Pelos dendrogramas foram determinados 36 clusters de psicrotróficos proteolíticos e 47 de lipolíticos com 70% de similaridade hierárquica, cuja identificação filogenética determinou o predomínio das espécies com os mesmos perfis polimórficos de Lactococcus lactis (24,5%), Enterobacter kobei (15,4%), Aerococcus urinaeequi (8,4%) e Acinetobacter lwoffii (6,3%) entre os psicrotróficos deteriorantes. Serratia ureilytica, Enterobacter kobei, Pseudomonas spp. e Yersinia enterocolitica foram os psicrotróficos identificados como potencialmente produtores de metaloprotease alcalina (aprX). Entre os termodúricos, 42,6% do total de isolados (n = 310) foram deteriorantes, dos quais 32,6% apresentaram atividade proteolítica e lipolítica simultaneamente, 31% exclusivamente proteolítica e 36,4% apenas lipolítica. Esses isolados proteolíticos e lipolíticos foram agrupados em 41 e 38 clusters, respectivamente, considerando 50% de similaridade. A análise filogenética das sequências parciais do gene 16S rRNA revelou que predominam entre os termodúricos deteriorantes as espécies Bacillus licheniformis (34,1%), Brachybacterium nesterenkovii (14,4%), Enterococcus faecalis (9,1%) e Streptococcus agalactiae (8,3%). Foi observado que 50% das cepas de termodúricos pertencem aos gêneros Bacillus e Paenibacillus, frequentemente descritos como esporulados que resistem a tratamentos térmicos mais intensos que a pasteurização e que comprometem a vida útil do leite pasteurizado dos Estados Unidos. Os resultados do presente trabalho demonstram que a composição da microbiota é tão importante quanto a sua quantificação. Apesar de baixas contagens, psicrotróficos e termodúricos podem comprometer a qualidade do leite e derivados pela sua atividade deteriorante, sendo um fator limitante na manutenção da qualidade do leite fluido e derivados. Portanto, é necessário desenvolver ferramentas sensíveis e eficientes para monitorar e controlar a presença desses micro-organismos no leite cru.

The presence of heat-stable spoilage enzymes can compromise the milk and dairy products quality and shelf life, even if raw milk with low total microorganisms counts. In addition, the vegetative or sporulated microbial forms may resist pasteurization and also deteriorate pasteurized milk. The present work aimed to identify the genetic diversity of psychrotrophic and thermoduric microorganisms with proteolytic and/or lipolytic potential in high microbiological quality refrigerated raw milk. Twenty samples of refrigerated raw milk produced in the dairy region of Castro, Paraná State, Brazil, were evaluated per official methods for the counting and isolation of psychrotrophic and thermoduric. Biomolecular techniques of hierarchical genetic grouping (Restriction Fragment Length Polymorphism) and identification by partial sequencing of the 16S rRNA gene and phylogenetic analysis. The mean of psychrotrophic and thermoduric counts were 1.1 x 104 and 3.2 x 102 CFU/mL, respectively. Among the psychrotrophs, 47.8% of the total isolates (n = 295) presented spoilage potential, of which 30.5% were proteolytic and lipolytic simultaneously, 31.9% exclusively proteolytic and 37.6% lipolytic. The dendrograms determined 36 clusters of proteolytic and 47 lipolytic psychrotrophs with 70% genetic hierarchical similarity, whose phylogenetic identification shows the predominance of the species with the same polymorphic profiles of Lactococcus lactis (24.5%), Enterobacter kobei (15.4%), Aerococcus urinaeequi (8.4%) and Acinetobacter lwoffii (6.3%) among the deteriorating psychrotrophs. Serratia ureilytica, Enterobacter kobei, Pseudomonas spp. and Yersinia enterocolitica were the psychrotrophs identified as potentially producing of alkaline metalloprotease (aprX gene positive). Among the thermoduric, 42.6% of the total isolates (n = 310) shows spoilage potential, of which 32.6% presented proteolytic and lipolytic activity simultaneously, 31% were exclusively proteolytic and 36.4% only lipolytic. These proteolytic and lipolytic isolates were grouped in 41 and 38 clusters, respectively, considering 50% of genetic similarity. Phylogenetic analysis of partial sequences of 16S rRNA gene revealed that Bacillus licheniformis (34.1%), Brachybacterium nesterenkovii (14.4%), Enterococcus faecalis (9.1%) and Streptococcus agalactiae (8.3%). It was observed that 50% of the thermoduric strains belong to the genus Bacillus and Paenibacillus, often described as sporulated that resist heat treatments that are more intense at pasteurization and that compromise the shelf life of the pasteurized milk in the United States. The results of the present study demonstrate that the microbiota composition of raw milk as so important that your quantification. Although low counts, psychrotrophic and thermoduric can compromise the milk quality and dairy produtcs by their deteriorating activity, being a limiting factor for the maintenance of the quality. Therefore, it is necessary to development of a sensitive and efficient tools to monitor and control the presence of these microorganisms in raw milk.

Microbiota oral de ratos e camundongos: estudo da prevalência de bactérias gram positivas / /Rats and mouse oral microbiota: gram positives bacterias prevalance study

Devido a potencialidade das bactérias presentes na microbiota normal dos modelos biológicos interferirem nos resultados experimentais, neste estudo foi analisada a prevalência da população de bactérias Gram positivas, em populações submetidas à mesma dieta e condições ambientais. Material e métodos: 30 ratos e 99 camundongos adultos foram recebidos no laboratório para controle sanitário de rotina; após o procedimento de eutanásia (300 mg/kg de cloridrato de cetamina/ 30 mg/kg de cloridrato de xilazina) a cavidade oral foi mantida aberta com o auxílio de pinças e o material foi coletado através de swabs nos dentes, pálato mole, pálato duro e embaixo da língua. Após incubaçãoem meios específicos, as colônias das bactérias Gram positivas e catalase positivas foram submetidas a provas bioquímicas para identificação do gênero e espécie desses microrganismos. Resultados e conclusão: A prevalência de bactérias Gram positivas na cavidade oral de ratos e camundongos foi, respectivamente para ratos e camundongos: 10% e 36,6% de Enterococcus faecalis (E); 6,6% e 10,1% de Staphylococcus simulans (S); 6,6% e 8,08% de S. capitis; 30% e 3,03% de S. aureus; 6,6% e 2,02% de S. lentus; sendo ainda isolados S. xylosus, Lactococcus lactis ssp., Aerococcus urinae, S. sciuri, S. haemolyticus, S. lentus, S. cohnii, S. sanguis, S. saprophyticus, S. auriculares, S. epidermidis, S. anginosus, Streptococcus sanguis, Leuconostoc citreum e E. faecium em porcentagens que variaram de 1 a 13%. CEUA Nº 0140/201.

This study analyzed the prevalence of the population of Gram positive populations have undergone the same diet and environmental conditions. Methods: 30 adult mice and 99 rats were received at laboratory for sanitary control routine; after euthanasia procedure (300 mg / kg of ketamine hydrochloride / 30 mg / kg xylazine hydrochloride) oral cavity was kept open with forceps and the material was collected by swabs teeth, soft palate, hard palate and under the tongue. After incubation in specific media, colonies of Gram positive and catalase positive were subjected to biochemical tests to identify the genus and species of these microorganisms. Results and Conclusion: The prevalence of Gram positive bacteria in the oral cavity of rats and mice was, respectively, for rats and mice: 10% and 36.6% of Enterococcus faecalis (E), 6.6% and 10.1% of Staphylococcus simulans (S), 6.6% and 8.08% S. capitis; 30% and 3.03% S. aureus, 6.6% and 2.02% S. lentus; still being isolated S. xylosus, Lactococcus lactis ssp., Aerococcus urinae, S. sciuri, S. haemolyticus, S. lentus, S. cohnii, S. sanguis, S. saprophyticus, S. auriculares, Streptococcus epidermis, S. anginosus, Streptococcus sanguis Leuconostoc citreum and E. faecium in percentages that ranged from 1 to 13%. CEUA No. 0140/201.

Microbiota oral de ratos e camundongos: estudo da prevalência de bactérias gram positivas / /Rats and mouse oral microbiota: gram positives bacterias prevalance study

Devido a potencialidade das bactérias presentes na microbiota normal dos modelos biológicos interferirem nos resultados experimentais, neste estudo foi analisada a prevalência da população de bactérias Gram positivas, em populações submetidas à mesma dieta e condições ambientais. Material e métodos: 30 ratos e 99 camundongos adultos foram recebidos no laboratório para controle sanitário de rotina; após o procedimento de eutanásia (300 mg/kg de cloridrato de cetamina/ 30 mg/kg de cloridrato de xilazina) a cavidade oral foi mantida aberta com o auxílio de pinças e o material foi coletado através de swabs nos dentes, pálato mole, pálato duro e embaixo da língua. Após incubaçãoem meios específicos, as colônias das bactérias Gram positivas e catalase positivas foram submetidas a provas bioquímicas para identificação do gênero e espécie desses microrganismos. Resultados e conclusão: A prevalência de bactérias Gram positivas na cavidade oral de ratos e camundongos foi, respectivamente para ratos e camundongos: 10% e 36,6% de Enterococcus faecalis (E); 6,6% e 10,1% de Staphylococcus simulans (S); 6,6% e 8,08% de S. capitis; 30% e 3,03% de S. aureus; 6,6% e 2,02% de S. lentus; sendo ainda isolados S. xylosus, Lactococcus lactis ssp., Aerococcus urinae, S. sciuri, S. haemolyticus, S. lentus, S. cohnii, S. sanguis, S. saprophyticus, S. auriculares, S. epidermidis, S. anginosus, Streptococcus sanguis, Leuconostoc citreum e E. faecium em porcentagens que variaram de 1 a 13%. CEUA Nº 0140/201.(AU)

This study analyzed the prevalence of the population of Gram positive populations have undergone the same diet and environmental conditions. Methods: 30 adult mice and 99 rats were received at laboratory for sanitary control routine; after euthanasia procedure (300 mg / kg of ketamine hydrochloride / 30 mg / kg xylazine hydrochloride) oral cavity was kept open with forceps and the material was collected by swabs teeth, soft palate, hard palate and under the tongue. After incubation in specific media, colonies of Gram positive and catalase positive were subjected to biochemical tests to identify the genus and species of these microorganisms. Results and Conclusion: The prevalence of Gram positive bacteria in the oral cavity of rats and mice was, respectively, for rats and mice: 10% and 36.6% of Enterococcus faecalis (E), 6.6% and 10.1% of Staphylococcus simulans (S), 6.6% and 8.08% S. capitis; 30% and 3.03% S. aureus, 6.6% and 2.02% S. lentus; still being isolated S. xylosus, Lactococcus lactis ssp., Aerococcus urinae, S. sciuri, S. haemolyticus, S. lentus, S. cohnii, S. sanguis, S. saprophyticus, S. auriculares, Streptococcus epidermis, S. anginosus, Streptococcus sanguis Leuconostoc citreum and E. faecium in percentages that ranged from 1 to 13%. CEUA No. 0140/201.(AU)

Queijo minas artesanal fresco de produtores não cadastrados da mesorregião de Campos das Vertentes- MG: Qualidade microbiológica e físico-química em diferentes épocas do ano.

A produção de queijo Minas artesanal (QMA) é uma atividade tradicional em vários municípios de Minas Gerais. Preconiza-se a utilização de leite-cru e soro-fermento, popularmente conhecido como pingo, nas regiões produtoras. O queijo Minas artesanal apresenta uma microbiota diversificada influenciada pelas características históricas, agro- ecológicas e climáticas de cada região do estado onde é produzido. Após a identificação legal de Campo das Vertentes como produtora de queijo Minas artesanal, tem-se visto, na região, um número cada vez maior de produtores interessados em obter o cadastramento no Serviço de Inspeção Estadual. Nesse sentido, caracterizar o queijo Minas artesanal elaborado por produtores não cadastrados na região de Campo das Vertentes se faz necessário tanto para o conhecimento do queijo produzido quanto para a legalização destes produtores. O objetivo do trabalho foi comparar, dos pontos de vista microbiológico e físico-químico, queijos Minas artesanais frescos elaborados por produtores não cadastrados no Instituto Mineiro de Agropecuária nos períodos da seca e da chuva. Foram coletadas amostras de água, leite cru, soro-fermento e queijo com um dia de produção de propriedades rurais localizadas na região de Campo das Vertentes. Em relação as amostras de água, houve maior contagem de mesófilos aeróbios, menor pH e menor concentração de cloro residual no período da chuva (p<0,05). As médias de CCS e medianas de CBT das amostras de leite foram semelhantes (p>0,05), independentemente da época do ano. A gordura do leite cru foi superior (p<0,05) no período da chuva. As medianas de NMP de coliformes a 30°C e coliformes a 45°C das amostras de queijo e leite cru e, no caso do soro-fermento, apenas as medianas de NMP de coliformes a 30°C, foram superiores (p<0,05) no período da chuva. O queijo elaborado no período da seca apresentou maior contagem de bactérias ácido-láticas, no meio ágar M17, de bolores e leveduras e maior acidez titulável (p<0,05). Os queijos apresentaram altos teores de umidade sendo classificados como queijos de alta umidade e muito alta umidade, na chuva e seca, respectivamente. Staphylococcus spp. foi encontrado em contagens elevadas, sendo que queijo e soro-fermento coletados no período da chuva apresentaram maior contagem de Staphylococcus coagulase positivo (p<0,05). Do total de manipuladores de queijo Minas artesanal, 42,86% foram portadores de Staphylococcus coagulase positivo em suas mãos. Salmonella spp. não foi isolada nas amostras de leite cru, soro-fermento e queijo Minas artesanal fresco. Bactérias ácido-láticas foram encontradas em elevadas contagens nas amostras de leite cru, soro-fermento e queijo. Dentre as amostras identificadas por biologia molecular, Enterococcus faecalis apresentou frequência de isolamento (44%) mais elevada nas amostras de leite, soro-fermento e queijo, seguida por Lactococcus lactis (20%) e Lactobacillus plantarum (16%). Enterococcus durans, Enterococcus pseudoavium, Aerococcus viridans e Lactobacillus brevis foram isolados de soro-fermento utilizado na elaboração de queijo Minas artesanal fresco, sem haver descrições prévias na literatura pesquisada da presença desses micro-organismos neste tipo de produto. Os resultados deste trabalho indicaram, de forma geral, maior contaminação do queijo e de suas matérias-primas no período da chuva. A estação do ano também influenciou, em menor intensidade, nos parâmetros físico-químicos de água, leite cru e queijo. Adicionalmente, este estudo reforçou a necessidade de adequações na cadeia de produção do QMA, nas propriedades não cadastradas da região de Campo das Vertentes, para a garantia de um produto seguro, competitivo e valorizado por suas características tradicionais.

The production of artisanal Minas cheese is traditional in Minas Gerais. This cheese is made using raw cow' milk and endogenous culture. The artisanal Minas cheese presents a diverse microbiota influenced by region of the state where it is produced. There are few data about the microbiota present in this food. The aim of this study was to determine the microbiological and physical-chemical characteristics of artisanal Minas cheese produced by non-registered cheesemakers from Campos das Vertentes region, Minas Gerais, in two different seasons, rainy and dry seasons. Samples of water, raw milk, endogenous culture and cheese from rural properties were analyzed. In water, Aerobic Plate Count (APC) was higher (p <0.05) in the rainy season. However, the pH and residual chlorine was higher (p <0.05) in the dry season (p <0.05). There were not any differences on the Somatic Cell Counts (SCC) and Total Bacterial Count (TBC) in samples of milk when seasons were compared. The fat of the raw milk was higher (p <0.05) in the rainy season. The most probable number of total and thermotolerant coliforms was significant difference (p <0.05) in samples of raw milk and cheese. In endogenous culture, the most probable number of thermotolerant coliforms was higher (p<0.05) in the dry rainy season.The cheese exhibited higher counts of lactic acid bacteria, in M17 medium, molds and yeasts and higher acidity in the dry season (p <0.05). The cheeses exhibited high moisture regardless of the season. Staphylococcus spp. was found in high numbers in cheeses and Staphylococcus coagulase positive were higher (p <0.05) in cheese and endogenous culture during the rainy season. Fifty percent of artisanal Minas cheese handlers were carriers of Staphylococcus coagulase positive in their hands. Salmonella spp. were not detected in any sample inspected. High counts of lactic acid bacteria (LAB) were observed in all samples. Enterococcus faecalis was the most frequent (44%) species in milk, endogenous culture and cheese, followed by Lactococcus lactis (20%) and Lactobacillus plantarum (16%). Enterococcus durans, Enterococcus pseudoavium, Aerococcus viridans and Lactobacillus brevis were isolated from endogenous culture and it is probably the first description of these LAB in this product. These results indicated more contamination of samples in the rainy season. The seasons also influenced the physical and chemical parameters of water, raw milk and cheese. These results suggest the need of adjustments in the production of artisanal Minas cheese in order to guarantee a safe and competitive food, aside from being valorized for its traditional characteristics.

ESTUDO DAS INFECÇÕES POR HEMOPLASMAS EM CÃES E GATOS DOMÉSTICOS

Hemoplasmas são micoplasmas hemotrópicos que não possuem parede celular e crescem na superfície de eritrócitos podendo causar anemia infecciosa em diferentes espécies de mamíferos. Gatos são infectados por três espécies principais: Mycoplasma haemofelis (Mhf), Candidatus Mycoplasma haemominutum (CMhm) e Candidatus Mycoplasma turicensis (CMt) e em cães as espécies Mycoplasma haemocanis (Mhc) e Candidatus Mycoplasma haematoparvum (CMhp) são as mais prevalentes. O presente estudo teve como objetivos determinar a ocorrência e a filogenia das espécies de hemoplasmas em gatos da capital do Brasil e cidades satélites e de cães da Nigéria, África, e verificar se há correlação com alterações hematológicas. Amostras de sangue foram coletadas de 451 gatos de diferentes origens de Brasília, DF e de 246 cães de Jos, Plateau State, Nigeria e submetidas a avaliação eritrocitária e extração de DNA para PCRs e sequenciamento. No estudo em gatos, hemoplasmas foram encontrados em 13.8% dos animais. CMhm foi a espécie mais prevalente (13.8% dos gatos), seguida pelo Mhf (11.1%) e CMt (4.4%). Mais de 80% dos gatos infectados por hemoplasmas estavam infectados por duas ou mais espécies: 7.1% estavam co-infectados com Mhf/CMhm, 0,4% com CMhm/CMt e 3,9% com Mhf/CMhm/CMt. O gênero masculino estava significativamente associado com infecção por hemoplasmas. Nenhuma associação entre o resultado da qPCR para hemoplasmas e parâmetros hematológicos foi encontrada, porém o número relativo de cópias de CMhm apresentou correlação com o número de eritrócitos e hematócrito. As sequencias do gene 16S rRNA (>1Kb) das espécies de hemoplasmas provenientes de gatos com co-infecções foram obtidos usando oligonucleotídeos espécie específicos, o que permitiu a obtenção de sequencias do gene 16S rRNA apesar do alto nível de co-infecções, que impossibilita o uso de oligonucleotídeos universais para o gene 16S rRNA. Dentro de cada espécie as sequencias de Mhf, CMhm e CMt apresentaram identidade de >99.8%, >98.5% e >98.8%,respectivamente. As sequencias de Mhf, CMhm e CMt apresentaram >99.2%, >98.4% e >97.8% de identidade, respectivamente, com sequencias do GenBank. A análise filogenética demonstrou todas as sequencias do Mhf em um único grupo, enquanto as sequencias de CMhm e CMt se agruparam em 3 subgrupos distintos. Estes achados filogenéticos sugerem a existência de diferentes cepas de CMhm e CMt. No estudo em cães, a qPCR espécie específica detectou infecção por Mhc em 18 dos 245 cães (7,3%) e CMhp em apenas um cão (0,4%). A qPCR de gênero de hemoplasmas foi positiva em 44 dos 245 (17,9%) dos cães. Vinte e cinco cães tiveram resultados discordantes nas qPCRs, nos quais foram positivos na qPCR de gênero de hemoplasmas, mas negativos na qPCR espécie específica. A avaliação desses cães discordantes por meio do sequenciamento do gene 16S rRNA gerou resultados limitados, mas em 5 cães confirmou-se a infecção por espécies diferentes de hemoplasmas: 2 Anaplasma phagocytophilum, 1 Anaplasma ovis, 1 Serratia marcescens e 1 Aerococcus spp. O sequenciamento do gene 16S rRNA dos Mhc mostrou >99,8% de identidade entre elas e >99,6% de identidade com sequencias disponíveis no GenBank e permaneceram no mesmo grupo de outras sequencias de Mhc e Mycoplasma haemofelis, indicando baixa variabilidade genética do gene 16S rRNA entre Mhc de diferentes origens.

Haemoplasmas are wall less haemotropic mycoplasmas that attach and grown in the surface of erythrocytes and cause anaemia in different mammals species. Cats are infected with three main species: Mycoplasma haemofelis (Mhf), Candidatus Mycoplasma haemominutum (CMhm) and Candidatus Mycoplasma turicensis (CMt), while in dogs the species Mycoplasma haemocanis (Mhc) and Candidatus Mycoplasma haematoparvum (CMhp) are the most prevalent. The aims of the present study were to determine the occurrence and the phylogeny of haemoplasma species from cats in Brasilia and surrounding cities and from dogs in Nigeria, Africa; and assess weather any correlation existed between haemoplasma infection and haematological abnormalities. Blood samples were collected from 451 cats in different origins of Brasília, DF and from 246 dogs from Jos, Plateau State, Nigeria; submitted to erythrocyte evaluation and DNA extraction for PCR analysis and sequencing. In the cats study, haemoplasmas were found in 13.8% of 432 cats. CMhm was the most prevalent species (in 13.8% of cats), followed by Mhf (11.1%) and CMt (4.4%). Over 80% of haemoplasma-infected cats harboured two or more feline haemoplasma species: 7.1% of cats were co-infected with Mhf/CMhm, 0.4% with CMhm/CMt and 3.9% with Mhf/CMhm/CMt. Male gender was significantly associated with haemoplasma infections. No association was found between qPCR haemoplasma status and haematological variables, however CMhm relative copy numbers were correlated with red blood cell (RBC) numbers and packed cell volume (PCV). Haemoplasma 16S rRNA gene sequences (>1Kb) were derived from co-infected cats using novel haemoplasma species-specific oligonucleotides. This allowed 16S rRNA gene sequences to be obtained despite the high level of co-infection, which precluded the use of universal 16S rRNA gene oligonucleotides. Within each species, the Mhf, CMhm and CMt sequences showed >99.8%, >98.5% and >98.8% identity, respectively. The Mhf, CMhm and CMt sequences showed >99.2%, >98.4% and >97.8% identity, respectively, with GenBank sequences. Phylogenetic analysis showed all Mhf sequences to reside in a single clade, whereas the CMhm and CMt sequences each grouped into three distinct subclades. These phylogeny findings suggest the existence of different CMhm and CMt strains. In the dogs study, species-specific qPCR assays found Mhc infection in 18 of 245 dogs (7.3%), and CMhp infection in only one dog (0.4%). The generic haemoplasma qPCR assays were positive in 44 of 245 (17.9%) dogs. Twenty-five dogs had discordant qPCR results in that they were generic haemoplasma qPCR positive but species-specific qPCR negative. Further evaluation of these dogs by 16S rDNA sequencing gave limited results but 5 were confirmed to be infected with non-haemoplasma species: The 16S rRNA gene sequences from Mhc species showed >99.8% identity with each other and >99.6% identity with GenBank sequences, and resided in a single clade with other global Mhc and Mycoplasma haemofelis sequences, indicating low 16S rRNA genetic variability amongst this canine haemoplasma species.

Streptococcus e gêneros relacionados como agentes etiológicos de mastite bovina

Entre os agentes etiológicos de mastite bovina, destacam-se as bactérias do gênero Streptococcus e gêneros relacionados, como os Enterococcus. Esses microrganismos podem causar tanto mastite contagiosa, como é o caso de Streptococcus agalactiae, quanto mastite ambiental, causada pelas demais espécies de Streptococcus e Enterococcus. Mudanças na taxonomia e nomenclatura deste grupo de microrganismos têm ocorrido nas últimas duas décadas, resultado da aplicação de técnicas moleculares que auxiliam no processo de diferenciação de gêneros e espécies bacterianas. Alterações também têm ocorrido no padrão de infecção intramamária nos rebanhos leiteiros em que foram controladas as mastites causadas por agentes contagiosos. Nesses rebanhos, as infecções causadas por patógenos do ambiente são atualmente o alvo dos programas de controle da mastite. O presente artigo apresenta uma revisão dos principais gêneros e espécies bacterianas do grupo dos cocos gram-positivos catalasenegativos que já foram relacionadas com infecções da glândula mamária de bovinos. Esses incluem, além dos gêneros mencionados acima, os gêneros Aerococcus, Lactococcus e Gemella; e dentro do gênero Streptococcus, as espécies S. agalactiae, S. uberis, S. bovis, S. dysgalactiae, S. parauberis, S. equi, S. porcinus, S. canis, S. pluranimalium, S. parasanguinis e S. iniae.

Streptococcus e gêneros relacionados como agentes etiológicos de mastite bovina

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Streptococcus e gêneros relacionados como agentes etiológicos de mastite bovina

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Streptococcus e gêneros relacionados como agentes etiológicos de mastite bovina

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