Separation of coriander seeds by red, green and blue image processing / Separação de sementes de coentro por processamento de imagens red, green e blue

Coriander seeds have high socio-economic value in several regions of Brazil, especially in the North and Northeast. Seed maturation determined by color influences the seed quality. With this, digital image processing has become an important tool for separating seeds by color since this classification is usually performed by humans and is highly susceptible to error. The study established parameters for separating coriander seeds by red green and blue (RGB) image analysis, seeking a better selection of coriander seeds according to their color, and evaluating the physiological quality by the germination test. Separation was carried out from two coriander seed lots to obtain samples of 20 g each in three shades: yellowish, gray, and mixed. Images were acquired by the HP C4480 Scanner and processed in the MATLAB software; then, a histogram was constructed for each color analyzed in each sample by the RGB system. ANOVA tested the averages of the scales to ratify the difference in the components' distributions. The germination test was performed to confirm the results of seed separation using image analysis. The best selection of coriander seeds was achieved by the blue scale, and the germination test indicated that yellow seeds have a higher physiological quality than brownish/greyish seeds.

As sementes de coentro possuem alto valor socioeconômico em diversas regiões do Brasil, especialmente no Norte e Nordeste. A maturação de sementes determinada pela coloração influencia a qualidade da semente. Com isso, o processamento digital de imagens se tornou uma importante ferramenta para separação de sementes por meio da sua coloração, tendo em vista que essa separação normalmente é realizada por humanos e está altamente suscetível ao erro. O estudo tem como objetivo estabelecer parâmetros para separação de sementes de coentro por meio de processamento de análises de imagem red green and blue (RGB), buscando uma melhor seleção de sementes de coentro em função da sua coloração, assim como, avaliar a qualidade fisiológica por meio do teste de germinação. A partir de dois lotes de sementes de coentro, realizou-se a separação para obter amostras de 20g cada, em três tonalidades: amareladas, cinzas e mistas. As imagens foram adquiridas através da Scanner HP C4480 e processadas através do programa MATLAB, em seguida gerou-se um histograma para cada coloração analisada em cada amostra, por meio do sistema RGB. Na sequência, os resultados das médias das escalas foram analisados por ANOVA com a finalidade de ratificar a diferença das distribuições das componentes. Realizou-se o teste de germinação para ratificar os resultados da separação de sementes de coentro por meio de análises de imagens. A melhor seleção das sementes de coentro ocorreu através da escala em azul e o teste de germinação indicou que as sementes amarelas possuem qualidade fisiológica superior as sementes amarronzadas/acinzentadas.

Effects of breed, age and gender on equine platelet rich plasma and correlation of platelet count with its physical aspect / [Efeitos de raça, idade e gênero sobre o plasma rico em plaquetas em equinos e correlação da contagem plaquetária com seu aspecto físico]

Platelet rich plasma samples from 50 healthy horses of five different breeds (Thoroughbreds - TB, Brazilian Criollo Horses - BCH, Brazilian Sport Horses - BSH, Miniature Horses - MH and Crossbred Horses - CB), were investigated as to breed, age, and gender effect for platelet concentration. Moreover, a score for physical analysis was established to correlate PRP physical aspect with platelet count. Platelet count was performed by an automatic hematology analyzer and by manual count. PRP physical analysis was based on color, aspect, and capacity to separate blood components. MH showed significant higher platelet concentration than BSH (p<0.05), while the other breed comparisons showed no significant difference. There was no significant difference for gender but there was a weak correlation of age with PRP platelet concentrations (rs = -0.24). Most of the PRP presented yellow color, the separation of blood components showed no correlation, but the aspect showed a moderate correlation (rs = 0.30) with platelet count. Results suggest that PRP platelet concentration can be influenced by intrinsic factors such as breed. Additionally, the analysis of PRP aspect can help to evaluate the quality of the product when there is no access to platelet counts.

Amostras de plasma rico em plaquetas de 50 cavalos saudáveis, de cinco raças diferentes (Puro Sangue de Corrida, Crioula, Brasileiro de Hipismo, Pônei Brasileiro e sem raça definida), foram investigadas quanto à concentração plaquetária em relação à raça, à idade e ao sexo. Além disso, um escore foi estabelecido para correlacionar o aspecto físico do PRP com a contagem plaquetária. A contagem celular foi realizada por um analisador hematológico automático e pelo método manual. A análise física baseou-se na cor, no aspecto e na capacidade de separar hemocomponentes. Pôneis tiveram concentração plaquetária significativamente maior que os Brasileiros de Hipismo (P<0,05), mas as demais comparações entre raças não apresentaram diferença quanto à contagem plaquetária. Não houve diferença para o gênero, mas a idade demonstrou correlação fraca com as concentrações plaquetárias do PRP (rs = -0,24). A maioria dos PRPs apresentaram coloração amarela, e a separação dos hemocomponentes não mostrou correlação com a contagem plaquetária, mas o aspecto apresentou uma correlação moderada (rs = 0,30). Os resultados deste estudo sugerem que a concentração plaquetária do PRP pode ser influenciada por fatores intrínsecos, como a raça. Além disso, a análise do aspecto do PRP pode ajudar na avaliação da qualidade do produto quando não há acesso à contagem plaquetária.

Cellular components and TGF-beta1 content of a closed Tube system for Platelet Rich Plasma acquisition in horse] / [Componentes celulares e TGF-beta1 do plasma rico em plaquetas obtido por sistema fechado em equinos]

Platelet-rich plasma (PRP) has been proposed as an agent to accelerate the healing process and stimulate the regenerative capacity of tissues due to its abundance of growth factors. A large variety of kits and protocols are available to obtain PRP by different cell-separation systems. However, the lack of standardization may lead to inconsistent results. The aim of this study was to characterize cellular composition, platelet parameters using the ADVIA 120 flow cytometer, and TGF-ß1 concentration from the PRP product obtained through a closed system, using simple centrifugation. Six clinically healthy horses were used in this study. The protocol in the closed system resulted in approximately 1.6-fold higher platelet and approximately 2.0-fold lower white blood cell concentrations in comparison with whole blood values. The evaluated system was efficient in concentrating platelets and in retrieving a small number of leukocytes, using a protocol of single centrifugation at low speed.

O plasma rico em plaquetas (PRP) tem sido proposto como um agente para acelerar o processo de cicatrização e estimular a capacidade regenerativa dos tecidos, devido à sua abundância de fatores de crescimento. Uma grande variedade de kits e de protocolos está disponível para obtenção de PRP, utilizando-se diferentes sistemas de separação de células. No entanto, a falta de padronização pode levar a resultados inconsistentes. O objetivo deste estudo foi caracterizar a composição celular, os parâmetros plaquetários pelo citômetro de fluxo ADVIA 120 e a concentração de TGF-ß1 do PRP obtido em sistema fechado, por centrifugação simples. Seis cavalos clinicamente saudáveis ​​foram usados ​​neste estudo. O protocolo no sistema fechado resultou em concentrações de plaquetas aproximadamente 1,6 vez maior e concentrações de leucócitos aproximadamente 2,0 vezes menores em comparação com os valores do sangue total. O sistema avaliado foi eficiente na concentração de plaquetas e na recuperação de um pequeno número de leucócitos, utilizando um protocolo de centrifugação única em baixa velocidade.

Volatile chemical composition of Piper sancti-felicis Trel essential oil and its biocidal action against Tribolium castaneum (Herbst)

This research assessed the fumigant activity of the essential oil from Piper sancti-felicis Trel and five of its components on the Tribolium castaneum (Herbst) biological model. Hydrodistillation was used for extraction of the essential oil, with separation and identification of the compounds through gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). The fumigant was evaluated through gas dispersion on the T. castaneum. The majority compounds found in the EO were b-nerolidol (15.4%), 3-carene (14.9%), p-cymene (9.1%), spathulenol (8.2%), a-cubebene (6.2%) and calamenene (5.2%). Piper sancti-felicis displayed fumigant activity with a LC50 = 108.5 & 956;g L-1 air, and other individual monoterpenes tested such as & 945;-terpinolene (LC50 = 110.1 & 956;g L-1 air), p-cymene (LC50 = 120.3 & 956;g L-1 air), 3-carene (LC50 = 130.6 & 956;g L-1 air), (R) -limonene (CL50 = 189.6 & 956;g L-1 air), and a-pinene (LC50 = 213.1 & 956;g L-1 air), were significantly less toxic than methyl pyrimiphos used as a positive control, CL50 = 87.4 & 956;g L-1 air. The essential oil of P. sancti-felicis can be considered as a natural source of biocides.

Volatile chemical composition of Piper sancti-felicis Trel essential oil and its biocidal action against Tribolium castaneum (Herbst)

This research assessed the fumigant activity of the essential oil from Piper sancti-felicis Trel and five of its components on the Tribolium castaneum (Herbst) biological model. Hydrodistillation was used for extraction of the essential oil, with separation and identification of the compounds through gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). The fumigant was evaluated through gas dispersion on the T. castaneum. The majority compounds found in the EO were b-nerolidol (15.4%), 3-carene (14.9%), p-cymene (9.1%), spathulenol (8.2%), a-cubebene (6.2%) and calamenene (5.2%). Piper sancti-felicis displayed fumigant activity with a LC50 = 108.5 & 956;g L-1 air, and other individual monoterpenes tested such as & 945;-terpinolene (LC50 = 110.1 & 956;g L-1 air), p-cymene (LC50 = 120.3 & 956;g L-1 air), 3-carene (LC50 = 130.6 & 956;g L-1 air), (R) -limonene (CL50 = 189.6 & 956;g L-1 air), and a-pinene (LC50 = 213.1 & 956;g L-1 air), were significantly less toxic than methyl pyrimiphos used as a positive control, CL50 = 87.4 & 956;g L-1 air. The essential oil of P. sancti-felicis can be considered as a natural source of biocides.(AU)

Effect of the injection of vitamins AD3E and the seasons on some blood traits, biochemical components and hormones of Arabi rams

The objective of this study was to determine the effect of the injection of different levels of AD3E vitamins in improving the productivity and reproductive performance of the Arabi rams in different seasons. This study was conducted in the animal field of the College of Agriculture - University of Basrah, Karmat Ali, for the period from December 2017 to March 2018 (three months winter) and June 2018 until September 2018 (three months in summer). The study used 21 Arabi sheep with 2.5 years old and weights from 55 to 60 kg, the animals were randomly distributed to three equal groups (each group of 7 rams). The control group was injected with a saline solution (distilled water), the second group with 2 ml of vitamin AD3E and the third group with 4 ml of vitamin AD3E, the injection was performed every two weeks. One month after the injection, the blood samples were collected (4 ml) from the jugular vein. Blood tests (RBC, Hb, PCV, and WBC) and blood plasma separation were performed. The chemical components (total protein, albumin, globulin), some enzymes (AST, ALT), and the hormones (testosterone, ICSH, FSH, and cortisol) were estimated. The summer months significantly (P < 0.05) affected the concentration of hormones (testosterone, ICSH, FSH, and cortisol). AST and ALT of Group 3 was significantly higher (P < 0.05) compared to the rest of the months. Total protein concentration, albumin, and globulin during December, August, and January were significantly higher (P < 0.05) over the rest of the months. G3 was also significantly higher (P < 0.05) than G2 and G1 in concentration. The results showed that WBC, PCV, Hb, and RBC of G3 recorded the highest values (P < 0.05) compared with G2 and G1 during summer.(AU)

Effect of the injection of vitamins AD3E and the seasons on some blood traits, biochemical components and hormones of Arabi rams

The objective of this study was to determine the effect of the injection of different levels of AD3E vitamins in improving the productivity and reproductive performance of the Arabi rams in different seasons. This study was conducted in the animal field of the College of Agriculture - University of Basrah, Karmat Ali, for the period from December 2017 to March 2018 (three months winter) and June 2018 until September 2018 (three months in summer). The study used 21 Arabi sheep with 2.5 years old and weights from 55 to 60 kg, the animals were randomly distributed to three equal groups (each group of 7 rams). The control group was injected with a saline solution (distilled water), the second group with 2 ml of vitamin AD3E and the third group with 4 ml of vitamin AD3E, the injection was performed every two weeks. One month after the injection, the blood samples were collected (4 ml) from the jugular vein. Blood tests (RBC, Hb, PCV, and WBC) and blood plasma separation were performed. The chemical components (total protein, albumin, globulin), some enzymes (AST, ALT), and the hormones (testosterone, ICSH, FSH, and cortisol) were estimated. The summer months significantly (P < 0.05) affected the concentration of hormones (testosterone, ICSH, FSH, and cortisol). AST and ALT of Group 3 was significantly higher (P < 0.05) compared to the rest of the months. Total protein concentration, albumin, and globulin during December, August, and January were significantly higher (P < 0.05) over the rest of the months. G3 was also significantly higher (P < 0.05) than G2 and G1 in concentration. The results showed that WBC, PCV, Hb, and RBC of G3 recorded the highest values (P < 0.05) compared with G2 and G1 during summer.

Quality control in the different stages of producing red blood cell concentrate from dogs / Controle de qualidade nas diferentes etapas de produção do concentrado de hemácias em cães

The objective of this study was to perform a quality control assessment of red blood cells after standardization of the blood production stages. For this purpose, separation of the blood components to obtain red blood cells, the storage of the blood packets and an evaluation of blood quality were performed. The mean (± SD) volume, globular volume, hemoglobin and hemolysis percentage of the red blood cell concentrate were 299.77±30.08mL, 60.87±2.60%, 20.57±0.93g/DL and 0.09±0.07%, respectively. The means (± SD) of the volume, globular volume, total hemoglobin percentage of hemolysis and hemoglobin per unit of packed red blood cells after the storage period (8.83±6.73 days) were 57.55±3.01%, 20.30±0.89 0, 20±0.12%, and 60.90±7.65. The red blood cell packets were within the parameters of quality control established by Health Ministry legislation in humans and allow us to conclude that the standardization of blood production stages involves the selection of donors until the end of storage and is necessary to produce quality red blood cells. Quality control aims to find possible flaws in the procedures to be repaired, increasing transfusion safety.(AU)

O objetivo deste estudo foi realizar o controle de qualidade do concentrado de hemácias após a padronização das etapas de produção do sangue. Para isso, realizou-se separação de hemocomponentes para obtenção de concentrado de hemácias, armazenamento das bolsas de sangue e avaliação da qualidade delas. Os valores médios (± DP) do volume, do volume globular, da hemoglobina e do percentual de hemólise do concentrado de hemácias foram: 299,77±30,08mL, 60,87±2,60%, 20,57±0,93g/DL e 0,09±0,07%, respectivamente. Os valores médios (± DP) do volume globular, da hemoglobina total percentual de hemólise e da hemoglobina por unidade de concentrado de hemácias após o período de armazenamento (8,83±6,73 dias) foram: 57,55±3,01%, 20,30±0,89 0,20±0,12%, 60,90±7,65. As bolsas de concentrado de hemácias ficaram dentro dos parâmetros de controle de qualidade estabelecidos pela legislação do Ministério da Saúde em humanos e possibilitaram concluir que a padronização das etapas de produção do sangue envolve desde a seleção de doadores até o final do armazenamento e é necessária para produzir concentrado de hemácias com qualidade. O controle de qualidade visa encontrar possíveis falhas nos procedimentos para que estas possam ser reparadas, aumentando, assim, a segurança transfusional.(AU)

Quality control in the different stages of producing red blood cell concentrate from dogs / Controle de qualidade nas diferentes etapas de produção do concentrado de hemácias em cães

The objective of this study was to perform a quality control assessment of red blood cells after standardization of the blood production stages. For this purpose, separation of the blood components to obtain red blood cells, the storage of the blood packets and an evaluation of blood quality were performed. The mean (± SD) volume, globular volume, hemoglobin and hemolysis percentage of the red blood cell concentrate were 299.77±30.08mL, 60.87±2.60%, 20.57±0.93g/DL and 0.09±0.07%, respectively. The means (± SD) of the volume, globular volume, total hemoglobin percentage of hemolysis and hemoglobin per unit of packed red blood cells after the storage period (8.83±6.73 days) were 57.55±3.01%, 20.30±0.89 0, 20±0.12%, and 60.90±7.65. The red blood cell packets were within the parameters of quality control established by Health Ministry legislation in humans and allow us to conclude that the standardization of blood production stages involves the selection of donors until the end of storage and is necessary to produce quality red blood cells. Quality control aims to find possible flaws in the procedures to be repaired, increasing transfusion safety.(AU)

O objetivo deste estudo foi realizar o controle de qualidade do concentrado de hemácias após a padronização das etapas de produção do sangue. Para isso, realizou-se separação de hemocomponentes para obtenção de concentrado de hemácias, armazenamento das bolsas de sangue e avaliação da qualidade delas. Os valores médios (± DP) do volume, do volume globular, da hemoglobina e do percentual de hemólise do concentrado de hemácias foram: 299,77±30,08mL, 60,87±2,60%, 20,57±0,93g/DL e 0,09±0,07%, respectivamente. Os valores médios (± DP) do volume globular, da hemoglobina total percentual de hemólise e da hemoglobina por unidade de concentrado de hemácias após o período de armazenamento (8,83±6,73 dias) foram: 57,55±3,01%, 20,30±0,89 0,20±0,12%, 60,90±7,65. As bolsas de concentrado de hemácias ficaram dentro dos parâmetros de controle de qualidade estabelecidos pela legislação do Ministério da Saúde em humanos e possibilitaram concluir que a padronização das etapas de produção do sangue envolve desde a seleção de doadores até o final do armazenamento e é necessária para produzir concentrado de hemácias com qualidade. O controle de qualidade visa encontrar possíveis falhas nos procedimentos para que estas possam ser reparadas, aumentando, assim, a segurança transfusional.(AU)

Mass fingerprinting and electrophysiological analysis of the venom from the scorpion Centruroides hirsutipalpus (Scorpiones: Buthidae)

Background Centruroides hirsutipalpus, of the family Buthidae, is a scorpion endemic to the Western Pacific region of Mexico. Although medically important, its venom has not yet been studied. Therefore, this communication aims to identify their venom components and possible functions. Methods Fingerprinting mass analysis of the soluble venom from this scorpion was achieved by high-performance liquid chromatography and electrospray mass spectrometry. Furthermore, the soluble venom and its toxic effects were evaluated extensively via electrophysiological assays in HEK cells expressing human voltage-gated Na+ channels (hNav 1.1 to Nav1.6), CHO cells expressing hNav 1.7, potassium channel hERG 1 (Ether-à-go-go-related-gene) and the human K+-channel hKv1.1. Results The separation of soluble venom produced 60 fractions from which 83 distinct components were identified. The molecular mass distribution of these components varies from 340 to 21,120 Da. Most of the peptides have a molecular weight between 7001 and 8000 Da (46% components), a range that usually corresponds to peptides known to affect Na+ channels. Peptides with molecular masses from 3000 to 5000 Da (28% of the components) were identified within the range corresponding to K+-channel blocking toxins. Two peptides were obtained in pure format and completely sequenced: one with 29 amino acids, showing sequence similarity to an "orphan peptide" of C. limpidus, and the other with 65 amino acid residues shown to be an arthropod toxin (lethal to crustaceans and toxic to crickets). The electrophysiological results of the whole soluble venom show a beta type modification of the currents of channels Nav1.1, Nav1.2 and Nav1.6. The main effect observed in channels hERG and hKv 1.1 was a reduction of the currents. ..(AU)

Mass fingerprinting and electrophysiological analysis of the venom from the scorpion Centruroides hirsutipalpus (Scorpiones: Buthidae)

Background Centruroides hirsutipalpus, of the family Buthidae, is a scorpion endemic to the Western Pacific region of Mexico. Although medically important, its venom has not yet been studied. Therefore, this communication aims to identify their venom components and possible functions. Methods Fingerprinting mass analysis of the soluble venom from this scorpion was achieved by high-performance liquid chromatography and electrospray mass spectrometry. Furthermore, the soluble venom and its toxic effects were evaluated extensively via electrophysiological assays in HEK cells expressing human voltage-gated Na+ channels (hNav 1.1 to Nav1.6), CHO cells expressing hNav 1.7, potassium channel hERG 1 (Ether-à-go-go-related-gene) and the human K+-channel hKv1.1. Results The separation of soluble venom produced 60 fractions from which 83 distinct components were identified. The molecular mass distribution of these components varies from 340 to 21,120 Da. Most of the peptides have a molecular weight between 7001 and 8000 Da (46% components), a range that usually corresponds to peptides known to affect Na+ channels. Peptides with molecular masses from 3000 to 5000 Da (28% of the components) were identified within the range corresponding to K+-channel blocking toxins. Two peptides were obtained in pure format and completely sequenced: one with 29 amino acids, showing sequence similarity to an "orphan peptide" of C. limpidus, and the other with 65 amino acid residues shown to be an arthropod toxin (lethal to crustaceans and toxic to crickets). The electrophysiological results of the whole soluble venom show a beta type modification of the currents of channels Nav1.1, Nav1.2 and Nav1.6. The main effect observed in channels hERG and hKv 1.1 was a reduction of the currents. ..

Selection of Coffea canephora parents from the botanical varieties Conilon and Robusta for the production of intervarietal hybrids / Seleção de genitores de Coffea canephora das variedades botânicas Conilon e Robusta visando à produção de híbridos intervarietais

The objective of this research was to quantify the genetic divergence of potential Coffea canephora parents, with the goal of developing progenies that associate the best traits of the Conilon and Robusta botanical varieties for hybrid vigor expression. Thus, 10 morphological and productive characteristics of 130 clones of Conilon and Robusta botanical varieties and their intervarietal hybrids were evaluated over 2 years. The experiment was conducted in a randomized block design with four replicates of four plants per plot. For selection of parents, the main component analysis was used to associate values with reference points obtained from the average of each botanical variety. The first two principal components allowed for the separation of the botanical varieties representing the variability contained in the original data with 76% for the first year and 69% for the second year. Although, the genotype × years interaction had significant effects, there were minor differences in the grouping from one year to the next, which is associated with the higher repeatability estimates observed in this study. It was observed that crosses with the 16-1-81I, 9-1-82L, and 13-1-61I parents of the botanical variety Robusta and the 167I, 890E, and 130I parents of the Conilon botanical variety presented greater potential for obtaining selection gains.

O objetivo deste trabalho foi quantificar a divergência genética entre matrizes de C. canephora visando desenvolver progênies que associem características das variedades botânicas Conilon e Robusta à expressão do vigor do híbrido. Para isso, foram avaliadas dez características morfológicas e produtivas de 130 clones das variedades botânicas Conilon, Robusta e de híbridos intervarietais, ao longo de dois anos, em delineamento de blocos casualizados com quatro repetições de quatro plantas por parcela. Para seleção de genitores foi utilizada a técnica de componentes principais associada a pontos referenciais obtidos a partir da média de cada variedade botânica. Os dois primeiros componentes principais permitiram a separação das variedades botânicas e dos híbridos intervarietais com uma representação da variabilidade contida nos dados originais de 76% no primeiro ano e 69% no segundo ano. Apesar da significância da interação genótipos x anos, observou-se pouca diferença no agrupamento ao longo do tempo, o que está associado às maiores estimativas de repetibilidade observadas nesse estudo. Observou-se que as matrizes 16-1-81I, 9-1-82L e 13-1-61I da variedade botânica Robusta e as matrizes 167I, 890E e 130I da variedade botânica Conilon apresentaram maior potencial para a obtenção de ganhos com a seleção.

Selection of Coffea canephora parents from the botanical varieties Conilon and Robusta for the production of intervarietal hybrids / Seleção de genitores de Coffea canephora das variedades botânicas Conilon e Robusta visando à produção de híbridos intervarietais

The objective of this research was to quantify the genetic divergence of potential Coffea canephora parents, with the goal of developing progenies that associate the best traits of the Conilon and Robusta botanical varieties for hybrid vigor expression. Thus, 10 morphological and productive characteristics of 130 clones of Conilon and Robusta botanical varieties and their intervarietal hybrids were evaluated over 2 years. The experiment was conducted in a randomized block design with four replicates of four plants per plot. For selection of parents, the main component analysis was used to associate values with reference points obtained from the average of each botanical variety. The first two principal components allowed for the separation of the botanical varieties representing the variability contained in the original data with 76% for the first year and 69% for the second year. Although, the genotype × years interaction had significant effects, there were minor differences in the grouping from one year to the next, which is associated with the higher repeatability estimates observed in this study. It was observed that crosses with the 16-1-81I, 9-1-82L, and 13-1-61I parents of the botanical variety Robusta and the 167I, 890E, and 130I parents of the Conilon botanical variety presented greater potential for obtaining selection gains.(AU)

O objetivo deste trabalho foi quantificar a divergência genética entre matrizes de C. canephora visando desenvolver progênies que associem características das variedades botânicas Conilon e Robusta à expressão do vigor do híbrido. Para isso, foram avaliadas dez características morfológicas e produtivas de 130 clones das variedades botânicas Conilon, Robusta e de híbridos intervarietais, ao longo de dois anos, em delineamento de blocos casualizados com quatro repetições de quatro plantas por parcela. Para seleção de genitores foi utilizada a técnica de componentes principais associada a pontos referenciais obtidos a partir da média de cada variedade botânica. Os dois primeiros componentes principais permitiram a separação das variedades botânicas e dos híbridos intervarietais com uma representação da variabilidade contida nos dados originais de 76% no primeiro ano e 69% no segundo ano. Apesar da significância da interação genótipos x anos, observou-se pouca diferença no agrupamento ao longo do tempo, o que está associado às maiores estimativas de repetibilidade observadas nesse estudo. Observou-se que as matrizes 16-1-81I, 9-1-82L e 13-1-61I da variedade botânica Robusta e as matrizes 167I, 890E e 130I da variedade botânica Conilon apresentaram maior potencial para a obtenção de ganhos com a seleção.(AU)

Efeitos de raça, idade e gênero sobre o Plasma Rico em Plaquetas em equinos e correlação da contagem plaquetária com o aspecto físico

O plasma rico em plaquetas (PRP) é uma fonte de diversos fatores de crescimento e outras moléculas que participam na modulação da resposta inflamatória e na reparação tecidual. Na medicina equina o PRP tem se destacado por sua ação benéfica no tratamento de feridas, além do seu uso em diversas afecções nas quais necessita-se redução de inflamação e reparo tecidual. Entretanto, ainda existem fatores intrínsecos que diferem entre os protocolos estabelecidos e podem influenciar na qualidade do produto final. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos de raça, idade e gênero no PRP equino e correlacionar seu aspecto físico com a contagem plaquetária. Foram coletadas 50 amostras de sangue de animais de cinco raças diferentes (Puro Sangue de Corrida - PSC, Brasileiro de Hipismo - BH, Crioulo - C, Pônei Brasileiro - PB e Sem Raça Definida - SRD) para confecção de PRP e os mesmos foram investigados quanto à concentração plaquetária em relação à raça, idade e gênero. Além disso, um escore de análise física do PRP foi estabelecido para correlacioná-lo com a contagem plaquetária. A contagem celular foi realizada pelo método automático e manual, já a análise física do PRP baseou-se na cor, aspecto visual e capacidade de separar hemocomponentes. PB tiveram concentração plaquetária significativamente maior que dos BH (p < 0.05), mas as demais comparações entre raças não apresentaram diferença quanto à contagem plaquetária. Não houve diferença estatística para gênero, mas a idade apresentou correlação fraca com as concentrações plaquetárias do PRP (rs = -0.24). A maioria dos PRPs apresentaram coloração amarela, a separação dos hemocomponentes não apresentou correlação com a contagem plaquetária, mas o aspecto visual apresentou uma correlação moderada (rs = 0,30). Nossos resultados sugerem que a concentração plaquetária do PRP pode ser influenciada por fatores intrínsecos, como a raça. Além disso, a análise do aspecto visual do PRP pode ajudar na avaliação da qualidade do produto, quando não há acesso à contagem plaquetária

Platelet-rich plasma (PRP) is a source of several growth factors and other molecules that participate in modulating the inflammatory response and tissue repair. In equine medicine, PRP has stood out for its beneficial action in the treatment of wounds, in addition to its use in several conditions in which inflammation reduction and tissue repair are needed. However, there are still intrinsic factors that differ between established protocols and can influence the quality of the final product. This study aimed to evaluate the effects of race, age and gender on equine PRP and to correlate its physical appearance with platelet count. Fifty blood samples were collected from animals of five different breeds (Thoroughbred - TB, Brazilian Sport Horses - BSH, Brazilian Criollo Horses - BCH, Miniature Horses - MH and Cross Breed horses - CB) for the preparation of PRP and they were investigated as to platelet concentration in relation to race, age and gender. In addition, a PRP physical analysis score was established to correlate its appearance with the platelet count. Cell count was performed by automatic and manual methods, while the physical analysis of the PRP was based on color, appearance and ability to separate blood components. MH had significantly higher platelet concentration than BSH (p < 0.05), but the other comparisons between breeds showed no difference in platelet count. There was no significant difference for gender but there was a weak correlation of age with PRP platelet concentrations (rs = -0.24). Most of the PRP presented yellow colour, the separation of blood components showed no correlation but the aspect showed a moderate correlation (rs = 0.30) with platelet count. Results suggest that PRP platelet concentration can be influenced by intrinsic factors such as breed. Additionally, the analysis of PRP aspect can help to evaluate the quality of the product, when there is no access to platelet counts.

DINÂMICA DO ESTRATO HERBÁCEO EM ÁREAS DE CAATINGA PASTEJADAS POR CAPRINOS ASSOCIADA À ADUBAÇÃO FOSFATADA

A Caatinga possui diversidade de espécies nativas e elevada disponibilidade de plantas de interesse forrageiro, no entanto a estrutura e produção vegetal variam de acordo com condições ambientais e manejo. Com o objetivo de avaliar a Caatinga sob diferentes doses de adubação fosfatada, no período de maio de 2019 a junho de 2020, foi conduzido um experimento na Estação Experimental de São João do Cariri, pertencente ao Centro de Ciências Agrárias da UFPB, no município de São João do Cariri. A área total experimental utilizada foi de 9,6 hectares, dividida em três subáreas de 3,2 hectares, que foram submetidas durante 10 anos (2007 a 2017) a diferentes intensidades de pastejo por caprinos: 10; 5 e; área sem animais. Durante o período experimental não haviam animais nas áreas. Para avaliação, cada área foi submetida a 4 tratamentos (controle, 30, 60 e 90 kg de P2O5/há), estes apresentados em cinco transectos, três transectos que receberam adubação fosfatada com 400m² (2m de largura x 200m de comprimento) e dois transectos (controle) com menor comprimento e distância mínima de 5 m para não sofrer influência da adubação, onde foram coletadas 10 amostras em cada tratamento totalizando 120 amostras cada mês. Após separação e identificação, as espécies que apresentaram maior disponibilidade (Aristida adscensionis, Diodia teres, Malvaceass e o Pool) foram avaliadas para frequência, dominância e massa de forragem. A adubação promoveu aumento na produção de massa de forragem em áreas de Caatinga do Cariri paraibano, com destaque para a dose de 90 kg de P2O5/há no ano de 2020. No mês de abril de 2020 apresentou a maior produção de massa. A Aristida apresentou maior frequência e dominância entre as espécies, já a Diodia apresentou o menor valor de frequência relativa na área 2 com 16,28%. Para a dominância, a Aristida apresentou superioridade entre as espécies, com uma média de 30,50% nas áreas avaliadas. Avaliando a relação entre o ano e as espécies os dois primeiros componentes principais contribuíram com 89,1% para variação dos dados. Foi observado, maior disponibilidade da Aristida na área 2 no ano de 2020 com média de 58,293 g/m². Considerando a relação entre ano, área e dose de P2O5, o tratamento controle do ano de 2019 apresentou menor valor para massa de forragem. Neste sentido, as doses de adubação fosfatada, juntamente com elevada precipitação, promoveram, independentemente da utilização de uso da área, uma maior produção de massa de forragem.

The Caatinga has a diversity of native species and high availability of plants of forage interest, however the structure and plant production vary according to environmental conditions and management. In order to evaluate the Caatinga under different doses of phosphate fertilization, from May 2019 to June 2020, an experiment was conducted at the Experimental Station of São João do Cariri, belonging to the Center for Agricultural Sciences of UFPB, in the city of São João do Cariri. The total experimental area used was 9.6 hectares, divided into three sub-areas of 3.2 hectares, which were submitted for 10 years (2007 to 2017) to different grazing intensities by goats: 10; 5 and; area without animals. During the experimental period there were no animals in the areas. For evaluation, each area was subjected to 4 treatments (control, 30, 60 and 90 kg of P2O5/há), these presented in five transects, three transects that received phosphate fertilization with 400m² (2m wide x 200m long) and two transects (control) with shorter length and minimum distance of 5 m so as not to be influenced by fertilization, where 10 samples were collected in each treatment, totaling 120 samples each month. After separation and identification, the species that showed greater availability (Aristida adscensionis, Diodia teres, Malvaceas and the Pool) were evaluated for frequency, dominance and forage mass. Fertilization promoted an increase in forage mass production in areas of Caatinga do Cariri in Paraíba, with emphasis on the dose of 90 kg of P2O5/há in 2020. At the month of April 2020 presented the highest mass production. Aristida had the highest frequency and dominance among species, while Diodia had the lowest relative frequency value in area 2 with 16.28%. For dominance, Aristida showed superiority among species, with an average of 30.50% in the evaluated areas. Assessing the relationship between year and species, the first two main components contributed with 89.1% to data variation. It was observed, greater availability of Aristida in area 2 in the year 2020 with an average of 58.293 g/m². Considering the relationship between year, area and P2O5 dose, the control treatment for the year 2019 had a lower forage mass value. In this sense, the doses of phosphate fertilization, together with high precipitation, promoted, regardless of the use of the area, a greater production of forage mass.

RESPOSTAS DE MARCADORES MUSCULARES, COMPORTAMENTO E TRANSPORTADORES DE MONOCABOXILATOS DE RATOS SOB CONDIÇÃO DE OVERREACHING

Incrementos na carga de treino são realizados com intuito de melhorar o desempenho esportivo, sendo que, frequentemente, as prescrições crônicas de sessões de treino podem exceder a capacidade física do atleta. A síndrome do overtraining (SOT), induzida pelo desequilíbrio no ciclo estímulo-recuperação, é importante causa da redução do desempenho esportivo dos atletas. Protocolos de indução overtraining em modelos experimentais para investigação de alterações comportamentais bem como alterações em marcadores musculares associados a alterações nos transportadores de monocarboxilatos 1 e 4 (MCT1 e MCT4) no músculo esquelético, são escassos. O propósito da presente Tese foi auxiliar a compreender as possíveis alterações comportamentais, bioquímicas, marcadores musculares e transportadores de monocarboxilatos que podem contribuir efetivamente para o desencadeamento da condição NFOR/SOT induzido pelo desequilíbrio entre carga externa e períodos de recuperação. Utilizaram-se ratos machos, jovens, como massa corporal inicial entre 150 e 200g, distribuídos nos grupos: ativo (AT, n = 16); treinados (TR, n = 33). Os ratos deste último grupo manifestaram as condições overreaching funcional (FOR, n = 19) e overreaching não funcional (NFOR, n = 14). O grupo AT foi submetido a um programa de condicionamento leve. O grupo TR realizou o protocolo de overtraining (PO), que consistiu em 12 semanas de treinamento em esteira, dividido em 5 fases (F1-F5). A F1 foi elaborada por 4 semanas de aumento progressivo de velocidade e duração das sessões de treino; a F2 durou 4 semanas, sendo mantidas a velocidade e a duração atingidas no final da F1. Nas fases 3, 4 e 5 foram aumentadas a frequência das sessões diárias (2, 3, 4/dia), reduzindo-se o período de recuperação entre estas (4, 3 e 2 horas, respectivamente), levando ao desequilíbrio entre esforço físico e recuperação. Para avaliação da aptidão física, os ratos foram submetidos a nove testes máximos de performance (TMP). Logo após os TMP-7, oito ratos de cada grupo experimental foram submetidos à eutanásia para coleta de amostras de sangue para análise de corticosterona e lactato, bem como coletas musculares e hepáticas para análises de glicogênio, citrato sintase e expressão dos MCTs. Ao final do PO, todos os grupos foram submetidos a análises comportamentais. Aplicou-se General Linear Model (GLM) para as variáveis endócrinas, desempenho, massa corporal, lactato e glicose. Para as variáveis glicogênio e corticosterona entre TMP-7 e TMP-9 aplicou se ANOVA-two way. As análises de componentes principais (ACP) foram baseadas na matriz de correlação entre as variáveis. Após as três semanas adaptativas, foi obtido percentual de ratos corredores de 75%. Com relação aos resultados, constataram-se valores inferiores de massa corporal (MC) para os grupos FOR e NFOR em relação ao grupo AT (P < 0,001), sendo que em TMP-8 houve redução notória do grupo NFOR em relação ao grupo AT (P < 0,01). No que se refere ao desempenho, os grupos FOR e NFOR aumentaram a sua aptidão física a partir do TMP-2 (P < 0,001). FOR e NFOR começaram a se diferenciar a partir do TMP-5 (P < 0,001), sendo que este comportamento permaneceu até o TMP-7 (P < 0,001). NFOR teve redução notória de desempenho no TMP-7 (P = 0,001). Não houve diferença significativa na atividade bem como na quantificação proteica da citrato sintase pela técnica de western blotting entre os grupos AT, FOR e NFOR. Com relação ao glicogênio, houve redução dos estoques no músculo sóleo dos grupos FOR e NFOR e redução no músculo gastrocnêmio medial para o NFOR em relação ao AT. O grupo NFOR apresentou uma redução do glicogênio no músculo gastrocnêmio lateral de TMP-7 para TMP-9. Todos os grupos apresentaram significante depleção de glicogênio no músculo semimembranáceo em TMP-9. Redução do glicogênio hepático para os grupos FOR e NFOR de TMP-7 para TMP-9 também foram observadas. Houve aumento nas concentrações de corticosterona para todos os grupos em TMP-9 quando comparado ao TMP-7. A análise de componentes principais (ACP) revelou que o comportamento foi responsável por 63,48% da variância observada para o teste de campo aberto. Para o teste de labirinto em cruz elevado, os dois componentes principais foram responsáveis por 94,1% da variância observada. Houve redução nas concentrações de lactato e da glicose para os grupos FOR e NFOR em TMP-6. Pode-se observar redução da expressão da isoforma MCT4 para grupo NFOR. Para os índices somáticos, em uma análise ACP em TMP-7, os dois componentes principais foram responsáveis por 72,22% da variação sendo que a disposição gráfica das variáveis para os grupos evidenciou separação dos grupos AT, FOR e NFOR. Em conclusão, nosso estudo demonstrou que o protocolo de overtraining utilizado induziu reduções nas concentrações de MCT4 no grupo NFOR. Nos testes máximos e submáximos, obtivemos reduções nas concentrações de lactato e redução nas concentrações glicose em TMP-6. Ademais, observou-se depleção de glicogênio em uma análise geral. A análise de ACPs tanto comportamentais quanto de índice somáticos se mostraram eficazes e promissoras na identificação e separação dos grupos FOR e NFOR.

Increments in the training load are carried out in order to improve sports performance, and the chronic prescriptions of training sessions can often exceed the athlete's physical capacity. The overtraining syndrome (SOT), induced by the imbalance in the stimulus-recovery cycle, is an important cause of reduced athletes' sporting performance. Overtraining induction protocols in experimental models for investigating behavioral changes as well as changes in muscle markers associated with changes in monocarboxylate transporters 1 and 4 (MCT1 and MCT4) in skeletal muscle are scarce. The purpose of this Thesis was to help understand the possible behavioral, biochemical, muscle markers and monocarboxylate transporters that can effectively contribute to the triggering of the NFOR / SOT condition induced by the imbalance between external load and recovery periods. Young male rats were used as initial body mass between 150 and 200g, distributed in the groups: active (AT, n = 16); trained (TR, n = 33). The rats in the latter group showed the conditions of functional overreaching (FOR, n = 19) and non-functional overreaching (NFOR, n = 14). The AT group was submitted to a light conditioning program. The TR group performed the overtraining protocol (PO), which consisted of 12 weeks of treadmill training, divided into 5 phases (F1-F5). F1 was designed for 4 weeks of progressive increase in speed and duration of training sessions; F2 lasted 4 weeks, maintaining the speed and duration reached at the end of F1. In phases 3, 4 and 5 the frequency of daily sessions was increased (2, 3, 4 / day), reducing the recovery period between these (4, 3 and 2 hours, respectively), leading to an imbalance between physical effort and recovery. To assess physical fitness, the rats were subjected to nine maximum performance tests (TMP). Right after TMP-7, eight rats from each experimental group were euthanized to collect blood samples for analysis of corticosterone and lactate, as well as muscle and liver collections for analyzes of glycogen, citrate synthase and expression of MCTs. At the end of the PO, all groups were subjected to behavioral analysis. General Linear Model (GLM) was applied for the endocrine variables, performance, body mass, lactate and glucose. For the variables glycogen and corticosterone between TMP-7 and TMP 9, ANOVA-two way was applied. Principal component analyzes (PCA) were based on the correlation matrix between variables. After the three adaptive weeks, a percentage of runner rats of 75% was obtained. Regarding the results, lower values of body mass (BM) were found for the FOR and NFOR groups in relation to the AT group (P <0.001), whereas in TMP-8 there was a notable reduction in the NFOR group in relation to the AT group (P <0.01). Regarding performance, the FOR and NFOR groups increased their physical fitness from TMP-2 (P <0.001). FOR and NFOR started to differentiate from TMP-5 (P <0.001), and this behavior remained until TMP-7 (P <0.001). NFOR had a noticeable reduction in performance in TMP-7 (P = 0.001). There was no significant difference in activity as well as in protein quantification of citrate synthase using the western blotting technique between groups AT, FOR and NFOR. Regarding glycogen, there was a reduction in stocks in the soleus muscle of the FOR and NFOR groups and a reduction in the medial gastrocnemius muscle for the NFOR in relation to the AT. The NFOR group showed a reduction in glycogen in the lateral gastrocnemius muscle from TMP-7 to TMP-9. All groups showed significant glycogen depletion in the semimembrane muscle in TMP-9. Reduction of hepatic glycogen for the FOR and NFOR groups from TMP-7 to TMP-9 was also observed. There was an increase in corticosterone concentrations for all groups in TMP-9 when compared to TMP-7. Principal component analysis (PCA) revealed that the behavior was responsible for 63.48% of the variance observed for the open field test. For the elevated plus-maze test, the two main components were responsible for 94.1% of the observed variance. There was a reduction in lactate and glucose concentrations for the FOR and NFOR groups in TMP-6. A reduction in the expression of the MCT4 isoform can be observed for the NFOR group. For somatic indices, in an ACP analysis on TMP-7, the two main components were responsible for 72.22% of the variation, with the graphic layout of the variables for the groups showing separation of the AT, FOR and NFOR groups. In conclusion, our study demonstrated that the overtraining protocol used induced reductions in MCT4 concentrations in the NFOR group. In the maximum and submaximal tests, we obtained reductions in lactate concentrations and reduction in glucose concentrations in TMP-6. In addition, glycogen depletion was observed in a general analysis. The analysis of both behavioral and somatic index ACPs proved to be effective and promising in the identification and separation of the FOR and NFOR groups.

CARACTERÍSTICAS DE CARCAÇA E QUALIDADE DE CARNE DE OVINOS CLASSIFICADOS POR DIFERENTES MEDIDAS DE EFICIÊNCIA ALIMENTAR

O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos de duas medidas de eficiência alimentar nos índices zoométricos, nas características de carcaça e qualidade de carne. Foram utilizados 40 machos ovinos, não castrados, da raça Santa Inês, com idade inicial média de 187±30 dias e peso inicial médio de 44,5±4,1 kg. O consumo de matéria seca (CMS) foi registrado durante 61 dias e os animais foram pesados a cada 14 dias para obtenção do ganho médio diário (GMD). Foram calculados o peso vivo médio metabólico (PVMM), a taxa de crescimento relativo (TCR), a taxa de Kleiber (TK), a conversão alimentar (CA), o consumo de matéria seca em relação ao peso vivo (CMSPV), o consumo alimentar residual (CAR) e o consumo e ganho residual (CGR). Medidas morfométricas foram registradas no início e no final do experimento para o cálculo dos índices zoométricos. Após o abate foram registrados os pesos dos componentes não carcaça, peso de carcaça quente, pH, temperatura e foram aferidas as medidas do trato gastrointestinal. Após o resfriamento as carcaças foram avaliadas quanto a conformação, escore de acabamento, medidas internas e externas e separação dos cortes comerciais. Em seguida foi registrada a área de olho de lombo, espessura de gordura, perdas por cocção, força de cisalhamento (FC) e análise físico-química da carne. As análises estatísticas foram realizadas pelos procedimentos CORR e GLM (SAS, Inst., Inc.,Care, NC, USA). A análise de correlação (PROC CORR) foi feita pelo método de Pearson e a análise de variância (PROC GLM) foi realizada incluindo no modelo o efeito de classes de CAR ou RIG (SAS, Inst., Inc.,Care, NC, USA). A análise de correlação entre as características de eficiência, características de carcaça, qualidade de carne e índices zoométricos foram feitas pelo método de Pearson pelo PROC CORR (SAS, Inst., Inc., Care, NC, USA). Os animais mais eficientes pelo CAR e CGR tiveram um consumo de matéria seca de 0,700 Kg e 0,400 Kg, respectivamente, menor do que os menos eficientes. Os menores valores de conversão alimentar foram apresentados pelo grupo dos cordeiros mais eficientes, sendo 6,29 e 6,37, para CAR - e CGR +. Apesar destas variações nas medidas de eficiência, o ganho médio diário (0,230 kg/dia) não diferiu entre os grupos (P>0,05), assim como as demais variáveis de desempenho avaliadas. Ao analisar os índices zoométricos, as características de carcaça, os componentes não carcaça, os rendimentos dos cortes e a análise físico-química não foi observado diferença (P>0,05) entre os grupos classificados para CAR e para CGR, com exceção da FC, na qual os animais menos eficientes apresentaram uma carne com menor FC. A utilização de ambas as medidas estudadas são adequadas para identificar animais mais eficientes dentro de um grupo padronizado, sem causar prejuízos no desempenho, nas características de carcaça e qualidade de carne. .

This study aimed to investigate the effects of two feed efficiency measures on zoometric indices, on carcass characteristics and meat quality. Forty non-castrated male Santa Inês sheep were used, with an average initial age of 187±30 days and average starting weight of 44,5±4,1 kg. The dry matter intake (DMI) was recorded for 61 days and the animals were weighed every 14 days to obtain the average daily gain (ADG). There were calculated the metabolic body weight (MBW), relative growth rate (RGR), Kleibers ratio (KR), feed conversion rate (FCR), the dry matter intake in relation to the live weight (DMILW), residual feed intake (RFI) and the residual intake and gain (RIG). Morphometric measurements were recorded at the beginning and at the end of the experiment to calculate the zoometric indices. After slaughter, the weights of the non-carcass components, hot carcass weight, pH, Tº were recorded and the measurements of the gastrointestinal tract were measured. After cooling, the carcasses were classified in terms of conformation, finishing score, internal and external measures and separation of commercial cuts. Then the rib eye area, fat thickness, cooking losses, shear force and physical-chemical analysis of the meat were recorded. Statistical analyzes were performed using the CORR and GLM procedures (SAS, Inst., Inc.,Care, NC, USA). Correlation analysis (PROC CORR) was performed using Pearson's method and analysis of variance (PROC GLM) was performed including the effect of RFI or RIG classes (SAS, Inst., Inc., Care, NC, USA) in the model. The correlation analysis between efficiency characteristics, carcass characteristics, meat quality and zoometrics indices were performed using Persons method by PROC CORR (SAS, Inst., Inc., Care, NC, USA). The most efficient animals by RFI and RIG had a dry matter consumption of 0,700 Kg and 0,400 Kg, respectively, respectively, less than the least efficient. The lowest values of feed conversion were presented by the group of the most efficient lambs, being 6.29 and 6.37, for RFI - and RIG +. Despite these variations in efficiency measures, the average daily gain (0,230 kg / day) did not differ between groups (P> 0.05), as well as the other performance variables evaluated. When analyzing the zoometrics indices, the carcass characteristics, the non-carcass components, the cut yields and the physical-chemical analysis, no difference was observed (P> 0.05) between the groups classified for RFI and for RIG, except for the shear force (SF), in which the less efficient animals presented a meat with greater tenderness. The use of both measures studied are adequate to identify more efficient animals within a standardized group, without causing damage to performance, carcass characteristics and meat quality.

Desenvolvimento e caracterização de filmes poliméricos contendo extrato de cascas de frutos de Punica granatum para uso como cobertura bioativa na farmacoterapia veterinária

A busca por compostos bioativos provenientes de plantas medicinais para uso cicatrizante, o desenvolvimento de novas formas farmacêuticas para veicular os mesmos é uma demanda crescente na atualidade. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo, produzir filmes poliméricos baseados em blendas entre opoli(álcool vinílico) (PVA), amido de milho e o poli(ácido acrílico) (PAA), contendo extrato seco total das cascas de Punica granatum (romã) (ESTCR), com vistas ao uso como cobertura bioativa na farmacoterapia veterinária. O trabalho foi desenvolvido emduas etapas. Na primeira, após determinação da concentração inibitória mínima do ESTCR sobre cepas de bactérias Gram-positivas, Gram-negativas e um fungo e, definição da melhor concentração do extrato nas formulações, foram preparados filmes com diferentes proporções dos polímeros, que foram caracterizados por análises térmicas (DSC e TG/DTG) e tiveram as propriedades de barreira pesquisadas. Ainda, a biocompatibilidade e a capacidade cicatrizante foram preliminarmente avaliadas empregando técnicas in vitro. A partir da análise dos dados, foi eleita a melhor formulação, preparada a partir dos polímeros na razão 75:15:10 (PVA/amido/PAA) e na presença de 1,25% p/p do extrato. Na segunda etapa, a melhorformulação, foi submetida à ensaios complementares de caracterização físico-químicapor microscopia eletrônica de varredura (MEV), espectroscopia na região do infravermelho por transformada de Fourier (FTIR) e difração de raios X (DRX); ensaiosde tração, para pesquisa das propriedades mecânicas; e, a testes de disco-difusão, para avaliação da atividade antifúngica. Foram obtidos filmes lisos, transparentes, brilhantes, de cor amarelo-clara, sem a presença de domínios quando avaliados visualmente. As diferentes proporações dos polímeros nas blendas provocou alterações nas características estudadas dos filmes. A blenda PVA:S:PAA:PPE4originou um filme liso, transparente, livre de domínio e sem separação de fases. Além disso, o filme apresentou propriedades de barreira adequadas para o uso como cobertura bioativa. Quando submetido ao ensaio de atividade hemolítica in vitro, o filme se mostrou não hemolítico e biocompatível. Além da confirmação da atividade antibacteriana sobre as cepas pesquisadas, os filmes foram eficientes em promover a proliferação celular in vitro, em 48 h, sem citotoxicidade. Análises complementares no filme eleito (PVA:S:PAA:PPE4) comprovaram a existência de interações químicas entre os componentes do extrato e os polímeros, contribuindo para a formação de filmes íntegros, uniformes, resistentes ao manuseio e com propriedades mecânicas consideradas apropriadas para o uso como coberturas bioativas. Análises das fotomicrografias das superfícies fraturadas apontam a presença de descontinuidades na matriz, justificando a pequena redução observada nos parâmetros de resistência mecânica quando comparados aos valores para o filme sem extrato. A alteração na organização das cadeias poliméricas também foi confirmada por DRX. Finalmente, os filmes com extrato apresentaram atividade antifúngica sobre a cepa estudada Candida albicans. A análise conjunta de todos os resultados permite inferir que o filme PVA:S:PAA:PPE4, preparado a partir dos polímeros na proporção 75:15:10 (PVA:amido:PAA) contendo o ESTCR na concentração de 1,25% p/p é potencialmente últil para o uso como cobertura bioativa.

The search for bioactive compounds from medicinal plants with healing activity, the development of new pharmaceutical dosage forms to convey them is a growing demand. In this context, the present work aimed to produce polymeric films based on blends between poly(vinyl alcohol) (PVA), corn starch and poly (acrylic acid) (PAA), containing total dry extract of Punica granatum (pomegranate) peels (ESTCR), to use as bioactive wound dressing in veterinary pharmacotherapy. The work was carried out in two stages. In the first phase, the minimum inhibitory concentration of ESTCR on Gram-positive and Gram-negative bacteria strains and a fungus and, the best concentration of the extract in films prepared by solvent casting with different proportions of polymers were defined. The films were characterized by thermal analysis (DSC and TG/DTG) and their barrier properties were evaluated. Furthermore, biocompatibility and healing activity were preliminarily evaluated using in vitro techniques. From the data analysis, the best formuation was chosen, prepared from polymers in the 75:15:10 ratio (PVA/starch/PAA) and in the presence of 1.25% w/w of the extract. In the second phase, the best formulation was submitted to complementary tests of physicochemical characterization: scanning electron microscopy (SEM), Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) and X-ray diffraction (XRD); tensile tests to investigate mechanical properties; and, to disc diffusion tests, to evaluate the antifungal activity. Were obtained smooth, transparent, bright, light yellow films, without the presence of domains when evaluated visually. The different proportions of polymers in the formulations caused changes in the studied characteristics of the films. The PVA:S:PAA:PPE4 produced a smooth, transparent film, free of domination and without phase separation. Furthermore, the film showed barrier properties appropriate for use as a bioactive wound dressing. When submitted to the in vitro hemolytic activity assay, the film proved to be non-hemolytic and biocompatible. In addition to the antibacterial activity on the strains studied, the films were efficient in promoting cell proliferation in vitro, within 48 h, without cytotoxicity. Complementary analysis in the chosen film (PVA:S:PAA:PPE4) proved the existence of interactions between the extract components and the polymers, contributing to the formation of uniform, handling-resistant films with mechanical properties necessary for use as bioactive covers. Analysis of the photomicrographs of the fractured surfaces point to the presence of discontinuities in the matrix, justifying the small reduction observed in the parameters of mechanical resistance when compared to the values for the film without extract. The change in the organization of polymer chains was also confirmed by XRD. Finally, films with extract showed antifungal activity on the studied Candida albicans strain. The analysis of all results allows us to infer that the film PVA:S:PAA:PPE4, prepared from polymers in the proportion 75:15:10 (PVA:starch:PAA) containing ESTCR at a concentration of 1.25% w/w is potentially useful for use as a bioactive cover

Inserção de gene repórter fluorescente em região gênica de SOX2 para estudo da diferenciação celular no desenvolvimento embrionário inicial bovino

A separação entre massa interna celular (MCI) e trofectoderma (TE) é o primeiro evento de diferenciação celular que ocorre no embrião mamífero, seguida pela diferenciação na MCI do epiblasto (EPI) e endoderma primitivo (PE). Falhas nestes processos de desenvolvimento inicial podem ocasionar perdas embrionárias e consequentemente econômicas. A influência do sistema de produção embrionária nos primeiros eventos de diferenciação celular precisa ser mais elucidada, refletindo em índices que ainda podem ser melhorados na produção de embriões bovinos in vitro. O soro fetal bovino (SFB), apesar de seus efeitos deletérios sobre fatores epigenéticos, ainda é usado em sistemas de produção in vitro e pode influenciar esta diferenciação. Ainda, as técnicas para estudo dos embriões normalmente envolvem a destruição dos mesmos e não permitem acompanhar em tempo real a dinâmica de expressão dos genes relacionados à diferenciação em MCI e TE. Novas técnicas como CRISPR/Cas9 permitem alteração direcionada da sequência de DNA genômico, assim, a introdução direcionada de proteínas fluorescentes repórteres permitiria a visualização em tempo real da expressão de genes de interesse nos embriões. Diante disso, nossos objetivos foram: testar a influência do soro fetal bovino nas primeiras diferenciações e, realizar a inserção dirigida de uma proteína repórter fluorescente na região do gene SOX2 por recombinação homóloga. Ainda, comparamos a eficiência da inserção gênica com uso do sistema CRISPR em diferentes momentos do desenvolvimento embrionário, com diferentes horários pós inseminação e com diferentes concentrações de material injetado. No primeiro experimento observamos que a retirada do SFB do cultivo embrionário não causa alterações na alocação de células na MCI ou TE, quando se alia esta remoção à renovação de uma parte do meio de cultivo às 90 horas pós inseminação (hpi). A ausência de suplementação de SFB ou de meio de cultivo levou à diminuição das células do TE, entretanto não alterou o número de células do PE. No segundo experimento, nenhum embrião produzido apresentou fluorescência, portanto todos os blastocistos tiveram seu DNA extraído para genotipagem. Foi realizada uma amostragem, e de 34 embriões verificados, um apresentou banda correspondente ao local do inserto e também banda correspondente ao embrião controle (wild type), sugerindo mosaicismo. Ao final, observamos que as melhores probabilidades de inserção gênica nos embriões bovinos aconteceram quando a injeção dos componentes do sistema CRISPR foi realizada após 8 horas de FIV e com maiores concentrações. Em conclusão, pudemos remover o SFB do nosso sistema de produção de embriões e surpreendentemente o SFB não influenciou a diferenciação em PE. Ainda, são necessários maiores estudos a fim de se otimizar a ferramenta para a obtenção de knock-in em embriões bovinos, principalmente para que se obtenha taxas de maior sucesso e redução da probabilidade de ocorrência de mosaicismo nestes embriões.

The separation between inner cell mass (ICM) and trophectoderm (TE) is the first cell differentiation event that occurs in the mammalian embryo, followed by differentiation into the epiblast MCI (EPI) and primitive endoderm (PE). Failures in these early development processes can lead to embryonic and subsequent economic losses. The influence of the embryo production system on the first cell differentiation events needs to be further elucidated, reflecting in rates that can still be improved in the production of in vitro bovine embryos. Fetal bovine serum (FBS), despite its deleterious effects on epigenetic factors, is still used in in vitro production systems and may influence this differentiation. Furthermore, the techniques for studying embryos usually involve their destruction and do not allow real-time monitoring of the expression dynamics of genes related to differentiation in ICM and TE. New techniques such as CRISPR/Cas9 allow targeted alteration of genomic DNA sequence, thus targeted introduction of fluorescent reporter proteins would allow real-time visualization of the expression of genes of interest in embryos. Therefore, our objectives were: to test the influence of fetal bovine serum in the first differentiations and to carry out the targeted insertion of a fluorescent reporter protein in the region of the SOX2 gene by homologous recombination. Furthermore, we compared the efficiency of gene insertion using the CRISPR system at different moments of embryonic development, with different times after insemination and with different concentrations of injected material. In the first experiment, we observed that FBS removal from the embryonic culture does not cause changes in cell allocation in the ICM or TE, when this removal is combined with the renewal of a part of the culture medium at 90 hours after insemination (hpi). The absence of FBS or culture medium supplementation led to a decrease in TE cells, however it did not change the number of PE cells. In the second experiment, no embryo showed a fluorescent signal, so all blastocysts had their DNA extracted for genotyping. We sampled 34 embryos and one presented a band corresponding to the insertion site and also a band corresponding to the control embryo (wild type), suggesting mosaicism. We observed that best chances of gene insertion occurred when the injection of components of the CRISPR system was performed after 8 hours of IVF and with higher concentrations. In conclusion, we were able to remove SFB from our embryo production system and surprisingly SFB did not influence differentiation into PE. Still, further studies are needed in order to optimize the tool for obtaining knock-in in bovine embryos, mainly to obtain higher success rates and reduce the probability of occurrence of mosaicism in these embryos. Palavras-chave em inglês (separadas por vírgula): Gene editing. CRISPR/Cas9. Homologous Recombination. Blastocyst

Composição tecidual e atributos qualitativos da carne de cordeiro terminados com dietas contendo grão de soja tratado termicamente / Tissue composition and qualitative attributes of lamb meat of animals finished with diets containing thermally treated soybeans

O objetivo foi avaliar a utilização do grão de soja tratado termicamente (processado) em dietas para a terminação de cordeiros, com dois níveis de concentrado, sobre a composição tecidual e características qualitativas da carne de cordeiro. Vinte cordeiros sem raça definida (SRD) não castrados, com 22,6 ± 2,06 kg de peso corporal inicial foram alojados, durante a fase de terminação, em baias individuais e distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado num arranjo fatorial 2x2 (grão de soja in natura ou processado x 50% ou 80% de concentrado). Os animais foram abatidos ao atingirem a condição corporal 3,0, sendo o peso médio de abate 32,51 ± 3,08 kg. Após o abate e refrigeração das carcaças, amostras do lombo foram coletadas para realização das dissecações e separação dos tecidos componentes do corte comercial. Posteriormente, a porção muscular foi submetida às análises qualitativas. Não houve efeito de interação (P>0,05) entre processamento do grão de soja e nível de concentrado na dieta. O lombo dos animais alimentados com maior nível de concentrado foi mais pesado (0,80 kg). Os animais alimentados com maior proporção de concentrado e com dietas contendo grão de soja processado também apresentaram maior quantidade de músculo (0,56 e 0,54 kg). Os tratamentos com grão de soja processado proporcionaram maior relação músculo:osso (5,62) e maior percentual de músculo (68,13%). Os tratamentos não influenciaram (P>0,05) as características qualitativas da carne. O processamento térmico do grão de soja proporciona melhora na porção comestível, sem alterar as características qualitativas da carne de cordeiros...

The objective of this study was to evaluate the effect of thermally treated (processed) soybeans in finishing diets for lambs containing two levels of concentrate on the tissue composition and qualitative traits of lamb meat. Twenty uncastrated mongrel lambs with an initial body weight of 22.6 ± 2.06 kg were housed in individual pens during the finishing phase and allocated to a completely randomized design in a 2x2 factorial scheme (fresh or processed soybeans x 50% or 80% concentrate). The animals were slaughtered once they had reached a body condition score of 3.0 and the mean slaughter weight was 32.51 ± 3.08 kg. After slaughter and carcass cooling, loin samples were collected for dissection and separation of the tissue components of the commercial cut. Next, the muscle portion was submitted to qualitative analysis. There was no effect of the interaction between soybean processing and concentrate level in the diet (P>0.05). The loin of animals fed the higher concentrate diet was heavier (0.80 kg). A higher quantity of the muscle was also observed in animals fed the higher proportion of concentrate and diets containing processed soybeans (0.56 and 0.54 kg). The treatments including processed soybeans provided a higher muscle:bone ratio (5.62) and higher muscle percentage (68.13%). The treatments did not influence qualitative meat traits (P>0.05). Heat treatment of soybeans improves the edible portion without altering the qualitative traits of lamb meat...