Bem-estar animal nos procedimentos de produção in vivo de embriões na espécie ovina / Animal welfare in the in vivo production of sheep embryos

A presente revisão tem por objetivo abordar aspectos relacionados ao bem-estar animal na produção in vivo de embriões ovinos. A cobrança da sociedade tem impulsionado o uso de práticas que atendam os preceitos de bem-estar na produção animal. Nesse contexto, destaca-se a necessidade de aprimoramento de procedimentos menos invasivos, como a coleta não cirúrgica de embriões. Avanços recentes nos protocolos de dilatação cervical melhoraram os resultados e tornaram essa técnica uma alternativa viável na espécie ovina. No entanto, a avaliação do estado de bem-estar das doadoras submetidas à coleta transcervical mostra a necessidade de melhor controle da dor durante a sua realização. Assim, acreditamos que a associação dos esforços de diferentes pesquisas pode proporcionar a resolução desses entraves e possibilitar maior aplicabilidade comercial da biotécnica.(AU)

This review aims to address aspects related to animal welfare in the in vivo production of ovine embryos. The use of practices that meet the precepts of welfare in animal production has been driven by demands from society. In this context, there is a need to improve less invasive procedures, such as nonsurgical embryo collection. Recent advances in cervical dilation protocols have improved results and made this technique a viable alternative in sheep. However, the assessment of the state of welfare of donors undergoing transcervical collection shows the need for better pain control during its performance. Thus, the association of different research efforts can provide the resolution of these obstacles and enable greater commercial applicability of the biotechnique.(AU)

Desafios e perspectivas na produção comercial de embriões in vivo e in vitro de raças taurinas e sintéticas / Current challenges and perspectives of in vivo and in vitro commercial embryo production of taurine and synthetic breeds

As biotécnicas de produção in vivo e in vitro de embriões bovinos permitem aumentar significativamente o número de descendentes de fêmeas genética e/ou zootecnicamente importantes. Porém, antes de se optar por um dos métodos, deve-se avaliar suas peculiaridades. A produção in vivo pode ser empregada de forma satisfatória tanto em zebuínos quanto em raças sintéticas e taurinas, permitindo a obtenção de, em média, seis a sete embriões viáveis por coleta, com boa tolerância à criopreservação. Já a produção in vitro é mais eficiente em raças zebuínas e sintéticas, visto que possuem maior número de folículos antrais aspiráveis. Além disso, esta técnica permite a produção de embriões sem estímulos hormonais exógenos, porém com menor criotolerância. Desse modo, a presente revisão discute os desafios atuais e perspectivas futuras na produção de embriões in vivo e in vitro com base nos dados da rotina de uma central de doadoras e laboratório de produção de embriões que desenvolve simultaneamente ambas as técnicas de produção de embriões na região Sul do Brasil.(AU)

Biotechniques for in vivo and in vitro production of bovine embryos allow to significantly increase the number of descendants from cows genetically and/or zootechnically superior. However, before opting for one of the methods, one should evaluate its peculiarities. In vivo production can be used satisfactorily both in zebu cattle and in synthetic and taurine breeds, allowing to obtain, on average, six to seven viable embryos per procedure, with good tolerance to cryopreservation. In vitro production is more efficient in Zebu and synthetic breeds, since they have a greater number of aspirable antral follicles. In addition, this technique allows the production of embryos without exogenous hormonal stimuli, but with lower cryotolerance. This review discusses current challenges and future perspectives in in vivo and in vitro embryo production based on routine data from an embryo production center and a laboratory that develop, simultaneously, the two embryo production techniques in southern Brazil.(AU)

Manual collapse of blastocoels in not effective in increasing the viability of vitrified equine embryos / Colabamento manual da blastocele não foi efetivo para aumentar a viabilidade de embriões equinos vitrificados

Embryo cryopreservation methods have been used for commercialization and formation of genetic banks. Cryopreservation of equine embryos <300 µm in diameter, collected at days 6-6.5 after ovulation, allows satisfactory pregnancy rates. However, higher embryo collection rates in mares are obtained when uterine flush is performed between days 7 and 8 after ovulation when embryos are >300 µm in diameter, needing blastocoel collapse for satisfactory resistance to cryopreservation by vitrification. To evaluate the viability of simplified blastocoel collapse by embryo puncture with low technology and low-cost equipment, 22 embryos, collected at day 8 post-ovulation (D8), were allocated to the following groups: (1) micropuncture with a 30 G needle, assisted by a mechanical micromanipulator, before vitrification (n=4); (2) manual blade microsection before vitrification (n=6); (3) no manipulation prior to vitrification (n=8); and (4) freshly inovulated embryos (n=4). Despite the high re-expansion rates observed after vitrification, embryos manipulated prior to vitrification (groups MP and MS) did not result in pregnancy 25 days after transfer. On the other hand, embryos from groups NM (non-micromanipulated) and FR (freshly inovulated) resulted in pregnancies at 25 days. Under the conditions of the present study, manual blastocoel collapse was not efficient in increasing cryotolerance to vitrification among large embryos, requiring improvements to obtain pregnancies.(AU)

Métodos de criopreservação de embriões têm sido utilizados com diversos objetivos. Maiores taxas de coleta embrio-nária em éguas com lavagem uterina realizada 7 a 8 dias pós ovulação. A criopreservação de embriões equinos com diâmetro <300 µm (6-6,5 dias após a ovulação) permite a obtenção de taxas de prenhez satisfatórias. Embriões com diâmetro >300 µm (7º dia pós-ovulação) somente são adequadamente criopreservados quando submetidos a colabamento da blastocele. Objetivando avaliar a viabilidade da punção da blastocele com equipamento de baixa sofisticação e custo, 22 embriões coletados no 8º. dia pós-ovulação (D8) foram alocados aos seguintes grupos: (1) micropunção com uma agulha 30 G assistida por micromanipula-dor antes da vitrificação (n=4); (2) microssecção manual por lâmina antes da vitrificação (n=6); (3) sem manipulação anterior à vitrificação (n=8); e (4) transferidos a fresco (n=4). Apesar de altas taxas de reexpansão após a criopreservação, os embriões manipulados previamente a vitrificação não resultaram em prenhez aos 25 dias. Tanto os embriões não micromanipulados, quanto os transferidos a fresco resultaram em prenhezes aos 25 dias. A microssecção manual não se mostrou eficiente como método para aumento da criotolerância de embriões grandes, necessitando um aprimoramento visando a obtenção de prenhezes.(AU)

In vitro toxicity of Niedenzuella (Tetrapterys) multiglandulosa on bovine embryos / Toxicidade in vitro da Niedenzuella (Tetrapterys) multiglandulosa em embriões bovinos

Niedenzuella (Tetrapterys) multiglandulosa, a vine plant found in Brazil, has been correlated to outbreaks of poisoning in cattle and buffaloes, generating economic losses related to the death due to heart failure, miscarriage, abortion, stillbirth, and neonatal mortality. The aim of this study was to examine the embryotoxic potential of the aqueous plant extract on in vitro bovine embryos. In vitro study was performed in five replicates of bovine embryo culture assigned in two groups: control, in vitro embryo culture medium without the aqueous plant extract; treated group, with addition of 2.7mg/mL of aqueous plant extract (10%) to the embryo culture on the sixth day of culture. Cleavage rate was evaluated at day 2 of the cell culture. Viability, hatchability and underdevelopment of blastocysts on the seventh, eighth, and ninth days (D7, D8, and D9, respectively) of culture were assessed under stereoscopic microscope. On day 7, blastocysts were submitted to TUNEL assay to determine apoptotic index. In vitro exposure of bovine embryos to of N. multiglandulosa resulted in reduced embryo development and survival, evaluated by dark cytoplasm indicating poor morphology and poor quality with marked reduction of hatchability. We observed a significant reduction of blastocyst production/number of cleaved embryos (60.6% vs 41.5%); reduction of blastocysts production/total number of matured bovine oocytes (35.1% vs 21.3%); and embryonic hatching rates (38.0% vs 10.0%). However, no effects were observed on the apoptotic rate. In conclusion, aqueous extract of N. multiglandulosa leaves reduces bovine embryo viability in vitro, suggesting possible detrimental effects on embryo development.(AU)

Niedenzuella (Tetrapterys) multiglandulosa, uma videira encontrada no Brasil, tem sido correlacionada a surtos de intoxicações em bovinos e búfalos, gerando perdas econômicas relacionadas à morte por insuficiência cardíaca, aborto, natimorto e mortalidade neonatal. O objetivo deste estudo foi examinar o potencial embriotóxico do extrato vegetal aquoso em embriões bovinos in vitro. O estudo in vitro foi realizado em cinco repetições de cultura de embriões bovinos distribuídos em dois grupos: controle, meio de cultura de embriões in vitro sem o extrato aquoso da planta; grupo tratado, com adição de 2,7mg / mL de extrato vegetal aquoso (10%) à cultura do embrião no sexto dia de cultivo. A taxa de clivagem foi avaliada no dia 2 da cultura de células. Viabilidade, eclodibilidade e subdesenvolvimento de blastocistos no sétimo, oitavo e nono dia (D7, D8 e D9, respectivamente) de cultura foram avaliados em microscópio estereoscópico. No dia 7, os blastocistos foram submetidos ao ensaio TUNEL para determinar o índice apoptótico. Observamos redução significativa da produção de blastocisto / número de embriões clivados (60,6% vs 41,5%); redução da produção de blastocistos / número total de oócitos bovinos maturados (35,1% vs 21,3%); e taxas de eclosão embrionária (38,0% vs 10,0%). No entanto, nenhum efeito foi observado na taxa de apoptose. Em conclusão, o extrato aquoso das folhas de N. multiglandulosa reduz a viabilidade do embrião bovino in vitro, sugerindo possíveis efeitos prejudiciais no desenvolvimento embrionário.(AU)

Use of ozone in the culture medium of zebrafish (Danio rerio) embryos / Uso do ozônio no meio de cultura para embriões de zebrafish (Danio rerio)

In this study, we sought to demonstrate the toxicity of different concentrations of ozonated water in zebrafish embryos up to 120 hours postfertilization (hpf ) and their antimicrobial activity advantages. For the test, we placed 40 embryos per treatment in Petri dishes containing 30 ml of solution to be tested. The ozone concentrations used were calculated from an initial concentration of 72 µg/ml using the O&L 1.5 RM ozone generator (Ozone & Life, Brazil). Five serial dilutions 1:1 was performed in egg water to produce the ozone treatments. We also analyzed a treatment with 30 ml of egg water without ozone, with only the addition of methylene blue, and a treatment with 30 ml of egg water without the addition of any antifungal agent. The plates were incubated at 28 ± 1°C, and the embryos were analyzed daily until 120 hpf. The survival rate, incubation period, and possible deformities were analyzed. In addition, egg water microbiological analyses were performed to detect total coliforms and fungi and yeasts. The data were tested for normality, and analysis of variance was performed within Minitab®version 1.8 software. The results showed that there was no significant difference in embryo survival or hatching rate between treatments with different ozone concentrations (p > 0.05), and no embryonic deformities were found under any of the ozone concentrations evaluated. It can be concluded that ozone within the concentrations analyzed is not toxic to zebrafish embryos and has antifungal and antimicrobial action.(AU)

Neste estudo, procuramos demonstrar a toxicidade de diferentes concentrações de água ozonizada em embriões de zebrafish até 120 horas pós-fertilização (hpf ) e suas vantagens na atividade antimicrobiana. Para o teste, colocamos 40 embri-ões por tratamento em placas de Petri contendo 30 ml da solução a ser testada. As concentrações de ozônio utilizadas foram calculadas a partir de uma concentração inicial de 72 µg/ml usando o gerador de ozônio O&L 1,5 RM (Ozone & Life, Brasil). Foram realizadas cinco diluições seriadas 1:1 em Egg Water. Também analisamos um tratamento com 30 ml de Egg Water sem ozônio, apenas com adição de azul de metileno, e um tratamento com 30 ml de Egg Water sem adição de nenhum agente antifúngico. As placas foram incubadas a 28 ± 1°C e os embriões foram analisados diariamente até 120 hpf. A taxa de sobrevi-vência, período de incubação e possíveis deformidades foram analisados. Além disso, foram realizadas análises microbiológicas da Egg Water para detectar coliformes totais, fungos e leveduras. Os dados foram testados quanto à normalidade e a análise de variância foi realizada no software Minitab® versão 1.8. Os resultados mostraram que não houve diferença significativa na sobrevivência de embriões ou taxa de eclosão entre os tratamentos com diferentes concentrações de ozônio (p > 0,05), e não foram encontradas deformidades embrionárias sob nenhuma das concentrações de ozônio avaliadas. Pode-se concluir que o ozônio dentro das concentrações analisadas não é tóxico para embriões de zebrafish e possui ação antifúngica e antimicrobiana.(AU)

Utilização da ozonioterapia como tratamento da endometrite em égua / Use of ozone therapy as endometritis treatment in mare

Conformações perineais inadequadas estão frequentemente associadas à pneumovagina, predispondo animais a processos inflamatórios vaginais e uterinos. Dentre as patologias reprodutivas que acometem éguas, a endometrite é a que ocorre com maior frequência, com forte impacto negativo sobre os índices reprodutivos de um criatório. Para essa afecção, a ozonioterapia se apresenta como tratamento em potencial. Assim, este estudo objetiva relatar um caso de endometrite em égua Quarto de Milha, multípara, de 17 anos de idade, atendida no Hospital Veterinário Sylvio Barbosa Cardoso, da Universidade Estadual de Ceará. Durante a avaliação ginecológica, observou-se alterações na conformação vulvar e teste de Windsucker positivo, indicando pneumovagina. Foram coletadas amostras endometriais para exames laboratoriais, os quais apresentaram citologia com contagem de neutrófilos polimorfonucleares ≥30% e cultura negativa para fungos e bactérias. O exame histopatológico revelou fibrose intersticial endometrial crônica acentuada. Diante do diagnóstico de endometrite, iniciou-se o tratamento com lavagem uterina usando solução ringer lactato ozonizada, seguido por insuflação uterina com ozônio. O animal foi submetido à técnica cirúrgica de Caslick para correção da má conformação vulvar. Após o tratamento, a égua foi inseminada, resultando na coleta de dois embriões viáveis. Diante do exposto, o caso reforça a efetividade da ozonioterapia associada à Caslick para o tratamento de endometrite em éguas.

Dysfunctional perineal conformations are often associated with pneumovagina, predisposing animals to vaginal and uterine inflammatory processes. Among the reproductive pathologies that affect mares, endometritis is the most frequent, with a strong negative impact on the reproductive indices of a farm. For this condition, ozone therapy presents itself as a potential treatment. The study aimed to report a case of endometritis in a 17-year-old multiparous quarter-mile mare, which was attended at the Veterinary Hospital Sylvio Barbosa Cardoso located in the State University of Ceará. During the gynecological evaluation, changes in vulvar conformation and a positive Windsucker test were observed, indicating pneumovagina. Endometrial samples were collected for laboratory exams, resulting in cytology with polymorphonuclear neutrophil count ≥30% and negative culture for fungi and bacteria. The histopathological examination revealed severe chronic endometrial interstitial fibrosis. Regarding the diagnosis of endometritis, the treatment with uterine lavage using ozonated ringer lactate solution was initiated followed by uterine insufflation with ozone. The animal was submitted to Caslick's surgical technique to correct the vulvar malformation. After treatment, the mare was inseminated, resulting in the collection of two viable embryos. In view of the above, the case reinforces the effectiveness of ozone therapy associated with Caslick`s technique for endometritis treatment in mares.

Increased antral follicle population and in vitro embryo production in pregnant Holstein / Aumento da população folicular antral e produção in vitro de embriões em fêmeas gestantes da raça Holandesa

This study used Holstein cattle to evaluate the following: I) the productive and reproductive characteristics of cows with low, intermediate and high antral follicle counts (AFCs) that were subjected to artificialin semination (AI) and comparison of AFC variability at the time of AI (nonpregnant) and at two time points during pregnancy (30 and 60 days), and II) whether the pregnancy status and different pregnancy periods in heifers improves the efficiency at in vitro embryo production (IVEP). In study I, 75 high-milk production cows with body condition scores (BCSs) of 2.75 to 4.75 and ages of 23 to 99 months were selected. Onthe day of estrus, AFCs (follicles ≥ 3 mm), BCS, body weight, and diameters of the dominant follicle, ovaries and the corpus luteum were evaluated. Posteriorly, AFC was monitored in pregnant cows at 30 days (n =35) and at 60 days for comparison of AFC before pregnancy versus different periods. In study II, heifers (n = 9) with BCS of 2.5 to 3.5 and ages of 10 to 16 months were selected for ovum pick-up and an IVEP program before AI (nonpregnant) as well as at 0 to 30, 31 to 60, and > 60 days of pregnancy. Statistical analysis was performed using PROC GLM and binary logistic regression model (P ≤ 0.05). In study I, AFC was not associated with variations in productive and reproductive parameters. However, AFCs in the low group increased following pregnancy (AI: 14.82 ± 1.36, 30 days: 23.45 ± 2.31 and 60 days: 35.18 ± 3.17 follicles). AFCs increased from AI to 60 days in the intermediate group but did not vary among time points in the high group. AFCs varied among AFC groups in AI and at 30 days of pregnancy but not at 60 days. In study II, the mean of total oocytes (17.43 ± 4.52 vs. 41.67 ± 3.79) and viable oocytes (13.77 ± 3.63 vs. 30.56± 3.45) increased from AI (nonpregnant) to the first 30 days of pregnancy. [...]

Este estudo utilizou fêmeas da raça Holandesa para avaliar: i) variação da contagem de folículos antrais na gestação; ii) resultado da produção in vitro de embriões em doadoras antes e depois da gestação. No estudo I, 75 vacas de alta produção de leite com escores de condição corporal (ECC) de 2,75 a 4,75 e idades de 23 a 99 meses foram selecionadas. No dia do estro a CFA foi avaliada (folículos ≥ 3 mm) além do escore corporal, peso corporal e diâmetros do folículo dominante, ovários e corpo lúteo. Posteriormente, a CFA foi monitorada nas vacas gestantes (n = 35) aos 30 e 60 dias. No estudo II, novilhas (n = 9) com ECC de 2,5 a 3,5 e idades de 10 a 16 meses foram selecionadas para obtenção de oócitos antes e depois da gestação, no primeiro, segundo e acima dos dois meses de gestação. A análise estatística foi realizada usando PROC GLM e modelo de regressão logística binária (P ≤ 0,05). No estudo I, a CFA não foi associada a variações nos parâmetros produtivos e reprodutivos. No entanto, as vacas de baixa CFA apresentaram aumento no número de folículos após início da gestação (IA: 14,82 ± 1,36, 30 dias: 23,45 ± 2,31 e 60 dias:35,18 ± 3,17 folículos). A CFA aumentou da IA para 60 dias no grupo de CFA intermediária, mas não variou ao longo do tempo no grupo de alta CFA. A CFA variou entre os grupos comparando-se o momento da IA e 30 dias de gestação. No estudo II, entre a IA e o primeiro mês de gestação, houve aumento do total de oócitos (17,43 ± 4,52 vs. 41,67 ± 3,79), bem como de oócitos viáveis (13,77 ± 3,63 vs. 30,56 ± 3,45). O número médio de embriões produzidos aumentou durante a gestação, [...]

Increased antral follicle population and in vitro embryo production in pregnant Holstein / Aumento da população folicular antral e produção in vitro de embriões em fêmeas gestantes da raça Holandesa

This study used Holstein cattle to evaluate the following: I) the productive and reproductive characteristics of cows with low, intermediate and high antral follicle counts (AFCs) that were subjected to artificialin semination (AI) and comparison of AFC variability at the time of AI (nonpregnant) and at two time points during pregnancy (30 and 60 days), and II) whether the pregnancy status and different pregnancy periods in heifers improves the efficiency at in vitro embryo production (IVEP). In study I, 75 high-milk production cows with body condition scores (BCSs) of 2.75 to 4.75 and ages of 23 to 99 months were selected. Onthe day of estrus, AFCs (follicles ≥ 3 mm), BCS, body weight, and diameters of the dominant follicle, ovaries and the corpus luteum were evaluated. Posteriorly, AFC was monitored in pregnant cows at 30 days (n =35) and at 60 days for comparison of AFC before pregnancy versus different periods. In study II, heifers (n = 9) with BCS of 2.5 to 3.5 and ages of 10 to 16 months were selected for ovum pick-up and an IVEP program before AI (nonpregnant) as well as at 0 to 30, 31 to 60, and > 60 days of pregnancy. Statistical analysis was performed using PROC GLM and binary logistic regression model (P ≤ 0.05). In study I, AFC was not associated with variations in productive and reproductive parameters. However, AFCs in the low group increased following pregnancy (AI: 14.82 ± 1.36, 30 days: 23.45 ± 2.31 and 60 days: 35.18 ± 3.17 follicles). AFCs increased from AI to 60 days in the intermediate group but did not vary among time points in the high group. AFCs varied among AFC groups in AI and at 30 days of pregnancy but not at 60 days. In study II, the mean of total oocytes (17.43 ± 4.52 vs. 41.67 ± 3.79) and viable oocytes (13.77 ± 3.63 vs. 30.56± 3.45) increased from AI (nonpregnant) to the first 30 days of pregnancy. [...](AU)

Este estudo utilizou fêmeas da raça Holandesa para avaliar: i) variação da contagem de folículos antrais na gestação; ii) resultado da produção in vitro de embriões em doadoras antes e depois da gestação. No estudo I, 75 vacas de alta produção de leite com escores de condição corporal (ECC) de 2,75 a 4,75 e idades de 23 a 99 meses foram selecionadas. No dia do estro a CFA foi avaliada (folículos ≥ 3 mm) além do escore corporal, peso corporal e diâmetros do folículo dominante, ovários e corpo lúteo. Posteriormente, a CFA foi monitorada nas vacas gestantes (n = 35) aos 30 e 60 dias. No estudo II, novilhas (n = 9) com ECC de 2,5 a 3,5 e idades de 10 a 16 meses foram selecionadas para obtenção de oócitos antes e depois da gestação, no primeiro, segundo e acima dos dois meses de gestação. A análise estatística foi realizada usando PROC GLM e modelo de regressão logística binária (P ≤ 0,05). No estudo I, a CFA não foi associada a variações nos parâmetros produtivos e reprodutivos. No entanto, as vacas de baixa CFA apresentaram aumento no número de folículos após início da gestação (IA: 14,82 ± 1,36, 30 dias: 23,45 ± 2,31 e 60 dias:35,18 ± 3,17 folículos). A CFA aumentou da IA para 60 dias no grupo de CFA intermediária, mas não variou ao longo do tempo no grupo de alta CFA. A CFA variou entre os grupos comparando-se o momento da IA e 30 dias de gestação. No estudo II, entre a IA e o primeiro mês de gestação, houve aumento do total de oócitos (17,43 ± 4,52 vs. 41,67 ± 3,79), bem como de oócitos viáveis (13,77 ± 3,63 vs. 30,56 ± 3,45). O número médio de embriões produzidos aumentou durante a gestação, [...](AU)

Lentivirus vectors fail to deliver transgenes into bovine zygotes after co-incubation with sperm during in vitro fertilization / [Lentivírus falham na entrega de transgenes em zigotos bovinos após coincubação com espermatozoide, durante fertilização in vitro]

As vantagens dos animais transgênicos têm sido demonstradas em diferentes aplicações, entretanto muitas metodologias usadas para gerar animais geneticamente modificados (GM) apresentam baixas taxas de eficiência. O objetivo deste estudo foi avaliar a entrega dos vetores lentivirais (VLs) em zigotos durante a fertilização in vitro (FIV), para gerar embriões GM, com o gene da proteína verde fluorescente (GFP) ou do fator IX de coagulação humana (FIX). Vetores lentivirais com os genes GFP (pLGW-GFP-LV) ou FIX (pLWE2-FIX-LV) foram utilizados na FIV ou na cultura de embriões in vitro (CIV). A coincubação de pLWE2-FIX-LV com espermatozoides e complexos oócitos-células do cumulus (COCs) durante a FIV diminuiu (P<0,05) as taxas de clivagem e de blastocistos, enquanto com pLGW-GFP-LV diminuiu (P<0,05) a taxa de blastocisto quando se comparou ao controle sem VL. A coincubação de pLWE2-FIX-LV e pLGW-GFP-LV com presumíveis zigotos durante a CIV não afetou (P>0,05) o desenvolvimento embrionário. A expressão da proteína GFP não foi detectada em embriões após a coincubação de FIV ou CIV, embora as células do cumulus expressassem a proteína até o dia oito de cultivo in vitro. Reações em cadeia da polimerase (PCR) não detectaram os genes GFP ou FIX em embriões, mas ambos foram detectados em células do cumulus. Assim, a coincubação de VL com espermatozoide bovino e COCs não é eficaz para produzir embriões geneticamente modificados por meio de FIV.(AU)

Comparison of cattle embryo collection between Ringer's lactate solution and Dulbecco's phosphatebuffered saline

The objective of this study was to determine the efficiency of Ringer's lactate solution (RL) and RL + 1% fetal bovine serum (FBS) and compare them with the efficiency of Dulbecco's phosphate-buffered saline (D-PBS). Twenty-two Wagyu female cattle were subjected to superovulation and were randomly distributed to form three groups: group 1 ­ uterine flushing with RL (n = 8), group 2 ­ uterine flushing with RL + 1% FBS (n = 7), and group 3 ­ uterine flushing with D-PBS (n = 7, control group). Cows received a CIDR® device containing 1.9 g of progesterone at random stages of the estrous cycle (day 0). Progesterone withdrawal occurred on day 8 in the morning. For heifers, 160 mg of porcine follicle-stimulating hormone (FSH-P) was used and for cows, 200 mg. Prostaglandin F2α was also injected on the eighth day of FSH-P administration. On day 9, in the morning, hCG was administered. Females were superovulated and inseminated twice in a fixed time for embryo transfer. On the 16th day, females were subjected to uterine flushing for embryo collection. We collected 76 embryos from 22 females subjected to superovulation, of which 52 were transferable and 24 had degenerated. The total of embryos collected was 23, 16, and 23 for groups 1, 2, and 3, respectively. The embryo recovery rates per group were 13.86±4.23, 15.39±4.61 and 27.16±13.33%, in groups 1, 2, and 3, respectively. The means for the total structures collected per female were 2.88±0.85, 3.00±1.23, and 4.57±1.72 in groups flushed with RL, RL + 1% FBS, and D-PBS, respectively. We conclude that Ringer's lactate solution and Ringer's lactate solution + 1% of FBS and Dulbecco's phosphate-buffered saline showed no significant differences in terms of embryo quality or quantity, suggesting that Ringer's lactate solution is an alternative for collecting embryos in cattle.

Peach palm plantlet growth in different culture media in a temporary immersion system / Crescimento de mudas de pupunheira em diferentes meios de cultura em um sistema de imersão temporária

Peach palm is a domesticated palm commercially important for the production of fruits and hearts of palm. Somatic embryogenesis, an effective technique for mass propagation, was successfully established for this species. Furthermore, a temporary immersion system improved plant regeneration. However, production can be further improved by understanding the peach palms growth dynamic and modifications of culture media. The aims of this study were to evaluate the growth of plantlets cultured in different culture media in a temporary immersion system and to correlate the results with nutrient uptake during the growth period. Somatic embryo-derived young plantlets approximately 1 cm in length were cultivated for 12 weeks in a twin flask system containing MS, Y3 or N6 salts, Morel and Wetmore vitamins and 3% sucrose, with a monthly medium refreshment. Growth was measured and mineral analysis of the plantlets was carried out after 12 weeks of culture. The Y3 and MS salts were the most appropriate for the plant growth. Number of roots was 52.52% higher and the root size was 40.42% between the N6 and MS medium and the root number in Y3 medium was 37.74% greater than in MS medium, which is important for post acclimatization survival. K and Na are important elements for peach palm. N is not required at such a high concentration as in Murashige and Skoog formulation. The Chu (N6) medium did not generate high quality plantlets, possibly due to the absence of some micronutrients, like Mo, Cu and Co.(AU)

A pupunheira é uma palmeira comercialmente importante para a produção de palmito. A embriogênese somática, técnica efetiva para propagação massal, foi estabelecida com sucesso para essa espécie. Além disso, um sistema de imersão temporária aumentou a regeneração de plantas. Entretanto, a produção pode ser melhorada através da compreensão da dinâmica de crescimento e modificações do meio de cultura. O estudo objetivou avaliar o crescimento de plantas em diferentes meios de cultura em um sistema de imersão temporária e correlacionar os resultados com a absorção de nutrientes durante o período de crescimento. Plantas derivadas de embriões somáticos, com aproximadamente 1 cm de comprimento, foram cultivadas por 12 semanas em um sistema tipo frasco gêmeo contendo sais do MS, Y3 ou N6, vitaminas de Morel e Wetmore e 3% de sacarose, com renovação mensal do meio de cultura. O crescimento e os teores de nutrientes nas plantas foram determinados após 12 semanas de cultivo. Os sais do MS e Y3 foram os mais apropriados para o crescimento vegetal. O número e comprimento de raízes foi 52,52% e 40,42% maior no meio MS do que no meio N6, respectivamente, e o número de raízes no meio Y3 foi 37,74% maior que no meio MS, o que é importante para a sobrevivência após a aclimatização. K e Na foram os nutrientes mais importantes para a pupunheira. O N não foi requerido em altas concentrações como verificado na formulação do meio Murashige e Skoog. O meio de Chu (N6) não gerou plantas de boa qualidade, possivelmente devido à ausência dos micronutrientes Mo, Cu e Co.(AU)

Physiological potential of corn seeds treated with different dosages of molybdenum and potassium / Potencial fisiológico de sementes de milho tratadas com diferentes doses de molibdênio e potássio

Corn is important in agriculture for its dual is uses as food and animal feed. The use of quality seeds is fundamental for outcomes in the field. The treatment of seeds with molybdenum may increase the productive capacity and uniformity of the corn. For this to work, the amount applied to the seeds must be adequate to promote development and increase the final crop production. Thus, the objective of this work was to verify the effects of molybdenum and potassium application on the germination and vigor of corn seeds. The physiological quality of the seeds was evaluated by germination, first count, seedling length (shoot and root), seedling dry matter mass, emergence, and the cold test. Six treatments (T1–T6) were performed, with T1 free of molybdenum and potassium and the others with varying dosages. The seeds were treated with a commercial product that containing molybdenum and potassium. The design was completely randomized, with four replications and six treatments. Smaller doses of molybdenum resulted in a higher percentage of normal seedlings. Based on the length and dry mass of the seedlings, it was verified that maize seeds were negatively impacted by increasing doses of molybdenum and potassium. In the emergence tests in sand, treatments T5 and T6 presented a greater number of seedlings. The physiological quality of corn seeds was not significantly influenced(AU)

O milho possui importância no cenário agrícola e é utilizado na alimentação humana e animal. O uso de sementes de qualidade é fundamental para o desempenho desta no campo. O tratamento de sementes com molibdênio pode contribuir para o aumento da capacidade produtiva e maior uniformidade do milho, desta maneira, a quantidade aplicada desse elemento nas sementes deve ser adequada para provir o desenvolvimento e a produção da cultura. Assim, o objetivo deste trabalho foi verificar os efeitos da aplicação de molibdênio e potássio sobre a germinação e o vigor de sementes de milho. A qualidade fisiológica das sementes foi avaliada por meio dos testes de germinação, primeira contagem, comprimento da plântula (parte aérea e raiz), massa da matéria seca de plântula, emergência e teste de frio. Foram realizados seis tratamentos (T1- T6) sendo, T1 ausente de molibdênio e potássio e os demais com diferentes dosagens do produto. As sementes foram tratadas com produto comercial composto por molibdênio e potássio. O delineamento foi inteiramente casualizado, com quatro repetições e seis tratamentos. Doses menores de molibdênio favoreceram uma maior porcentagem de plântulas normais. Verificou-se pelos testes de comprimento e massa seca das plântulas, que as sementes de milho foram influenciadas negativamente por doses crescentes de molibdênio e potássio. No teste de emergência em areia os tratamentos T5 e T6 apresentam um maior número de plântulas. A qualidade fisiológica das sementes de milho não foi influenciada significativamente pela aplicação de doses de Molibdênio e potássio na primeira contagem e germinação no teste de frio e no teste de germinação.(AU)

Physiological potential of corn seeds treated with different dosages of molybdenum and potassium / Potencial fisiológico de sementes de milho tratadas com diferentes doses de molibdênio e potássio

Corn is important in agriculture for its dual is uses as food and animal feed. The use of quality seeds is fundamental for outcomes in the field. The treatment of seeds with molybdenum may increase the productive capacity and uniformity of the corn. For this to work, the amount applied to the seeds must be adequate to promote development and increase the final crop production. Thus, the objective of this work was to verify the effects of molybdenum and potassium application on the germination and vigor of corn seeds. The physiological quality of the seeds was evaluated by germination, first count, seedling length (shoot and root), seedling dry matter mass, emergence, and the cold test. Six treatments (T1–T6) were performed, with T1 free of molybdenum and potassium and the others with varying dosages. The seeds were treated with a commercial product that containing molybdenum and potassium. The design was completely randomized, with four replications and six treatments. Smaller doses of molybdenum resulted in a higher percentage of normal seedlings. Based on the length and dry mass of the seedlings, it was verified that maize seeds were negatively impacted by increasing doses of molybdenum and potassium. In the emergence tests in sand, treatments T5 and T6 presented a greater number of seedlings. The physiological quality of corn seeds was not significantly influenced

O milho possui importância no cenário agrícola e é utilizado na alimentação humana e animal. O uso de sementes de qualidade é fundamental para o desempenho desta no campo. O tratamento de sementes com molibdênio pode contribuir para o aumento da capacidade produtiva e maior uniformidade do milho, desta maneira, a quantidade aplicada desse elemento nas sementes deve ser adequada para provir o desenvolvimento e a produção da cultura. Assim, o objetivo deste trabalho foi verificar os efeitos da aplicação de molibdênio e potássio sobre a germinação e o vigor de sementes de milho. A qualidade fisiológica das sementes foi avaliada por meio dos testes de germinação, primeira contagem, comprimento da plântula (parte aérea e raiz), massa da matéria seca de plântula, emergência e teste de frio. Foram realizados seis tratamentos (T1- T6) sendo, T1 ausente de molibdênio e potássio e os demais com diferentes dosagens do produto. As sementes foram tratadas com produto comercial composto por molibdênio e potássio. O delineamento foi inteiramente casualizado, com quatro repetições e seis tratamentos. Doses menores de molibdênio favoreceram uma maior porcentagem de plântulas normais. Verificou-se pelos testes de comprimento e massa seca das plântulas, que as sementes de milho foram influenciadas negativamente por doses crescentes de molibdênio e potássio. No teste de emergência em areia os tratamentos T5 e T6 apresentam um maior número de plântulas. A qualidade fisiológica das sementes de milho não foi influenciada significativamente pela aplicação de doses de Molibdênio e potássio na primeira contagem e germinação no teste de frio e no teste de germinação.

Physiological quality of white oat seeds at different temperatures / Qualidade fisiológica de sementes de aveia branca em diferentes temperaturas

White oats are cereals that are grown in different regions of the globe because they have good adaptability and final destination. Thus, their cultivation has shown significant increases in order to meet demand, especially for forage production, grains, and animal and human consumption. High-quality seeds are necessary for crop cultivation and white oats are sown in winter when thermal fluctuations may occur. Therefore, the objective of this study was to evaluate the physiological changes in oat seeds exposed to different temperatures during the germination phase. The experiment was a completely randomized design with four replications in a 6 × 4 factorial design. Six cultivars were evaluated: Aphrodite, Altiva, Artemis, Brava, Corona, and Guará at temperatures of 15, 20, 25, and 30 °C, and the following measurements were taken: first germination count, germination, germination speed index (IVG), and seedling length and mass. The results were analyzed using analysis of variance (F test) and the means were compared using Tukey’s test. The cultivars were physiologically affected at the minimum and maximum temperatures. At 15 °C, normal seedlings did not form, whereas the highest germination values were recorded at 20 and 25 ºC, which showed that these temperatures were the most favorable temperatures for the germination process. Vigor declined at 30 °C and there was a greater number of abnormal seedlings and dead seeds.

A aveia branca é um cereal cultivado em diversas regiões do mundo, pois possui boa adaptabilidade e destino final, de modo que seu cultivo tem apresentado acréscimos significativos visando atender a demanda, com destaque para produção de forragem, grãos e alimentação animal e humana. O uso de sementes de alta qualidade é necessário para a formação da lavoura. O cultivo acontece no inverno e ocorrem oscilações térmicas durante a implantação da cultura, sendo assim, o objetivo do presente trabalho foi avaliar as alterações fisiológicas em sementes de aveia expostas a diferentes temperaturas durante a fase de germinação. O experimento foi disposto em delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições, em fatorial 6 × 4. Foram avaliadas seis cultivares, Afrodite, Altiva, Artemis, Brava, Corona e Guará nas temperaturas 15, 20, 25 e 30 °C por meio de testes de primeira contagem de germinação, germinação, índice de velocidade de germinação (IVG), comprimento e massa seca de plântulas. Os resultados foram submetidos à análise de variância (teste F) e as médias comparadas pelo teste Tukey. As cultivares foram afetadas fisiologicamente nas temperaturas mínima e máxima. A 15 °C não houve formação de plântulas normais. A 20 e 25 ºC foram obtidos os maiores valores de germinação, mostrando-se, portanto, como temperaturas mais propícias ao processo germinativo. A 30 °C, o vigor foi reduzido, apresentando ainda uma tendência de maior número de plântulas anormais e sementes mortas.

Physiological quality of white oat seeds at different temperatures / Qualidade fisiológica de sementes de aveia branca em diferentes temperaturas

White oats are cereals that are grown in different regions of the globe because they have good adaptability and final destination. Thus, their cultivation has shown significant increases in order to meet demand, especially for forage production, grains, and animal and human consumption. High-quality seeds are necessary for crop cultivation and white oats are sown in winter when thermal fluctuations may occur. Therefore, the objective of this study was to evaluate the physiological changes in oat seeds exposed to different temperatures during the germination phase. The experiment was a completely randomized design with four replications in a 6 × 4 factorial design. Six cultivars were evaluated: Aphrodite, Altiva, Artemis, Brava, Corona, and Guará at temperatures of 15, 20, 25, and 30 °C, and the following measurements were taken: first germination count, germination, germination speed index (IVG), and seedling length and mass. The results were analyzed using analysis of variance (F test) and the means were compared using Tukeys test. The cultivars were physiologically affected at the minimum and maximum temperatures. At 15 °C, normal seedlings did not form, whereas the highest germination values were recorded at 20 and 25 ºC, which showed that these temperatures were the most favorable temperatures for the germination process. Vigor declined at 30 °C and there was a greater number of abnormal seedlings and dead seeds.(AU)

A aveia branca é um cereal cultivado em diversas regiões do mundo, pois possui boa adaptabilidade e destino final, de modo que seu cultivo tem apresentado acréscimos significativos visando atender a demanda, com destaque para produção de forragem, grãos e alimentação animal e humana. O uso de sementes de alta qualidade é necessário para a formação da lavoura. O cultivo acontece no inverno e ocorrem oscilações térmicas durante a implantação da cultura, sendo assim, o objetivo do presente trabalho foi avaliar as alterações fisiológicas em sementes de aveia expostas a diferentes temperaturas durante a fase de germinação. O experimento foi disposto em delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições, em fatorial 6 × 4. Foram avaliadas seis cultivares, Afrodite, Altiva, Artemis, Brava, Corona e Guará nas temperaturas 15, 20, 25 e 30 °C por meio de testes de primeira contagem de germinação, germinação, índice de velocidade de germinação (IVG), comprimento e massa seca de plântulas. Os resultados foram submetidos à análise de variância (teste F) e as médias comparadas pelo teste Tukey. As cultivares foram afetadas fisiologicamente nas temperaturas mínima e máxima. A 15 °C não houve formação de plântulas normais. A 20 e 25 ºC foram obtidos os maiores valores de germinação, mostrando-se, portanto, como temperaturas mais propícias ao processo germinativo. A 30 °C, o vigor foi reduzido, apresentando ainda uma tendência de maior número de plântulas anormais e sementes mortas.(AU)

Estacionalidade e a produção de oócitos e embriões in vitro em vacas Gir leiteiro na região sudeste do Brasil / Seasonality and the production of oocytes and in vitro embryos in Gir dairy cows in the southeast region of Brazil

A eficiência reprodutiva de doadoras de embriões Bos taurus é afetada pelas estações devido ao estresse calórico em países de clima tropical e temperado. O objetivo do estudo foi avaliar o efeito das condições climáticas de verão e inverno na produção de oócitos e embriões in vitro na raça Gir Leiteiro (Bos indicus) em fazendas da região Sudeste do Brasil. Os parâmetros avaliados foram: total de oócitos recuperados (OT), oócitos viáveis (OV) e percentual de oócitos viáveis sobre o total (POV); embriões produzidos (EP) e percentual de embriões produzidos (PEP) sobre o total de estruturas recuperadas pela aspiração folicular guiada por ultrassonografia (OPU). Os oócitos foram obtidos de 153 doadoras pluríparas de diferentes idades e ordens de parição de 10 rebanhos. As médias obtidas em 380 aspirações foliculares (OPU) nos meses de verão foram: OT=14,8; OV=12,6; EP= 3,4; PEP=22,3%, e no inverno de OT=13,4; OV=10,8; EP=3,5; PEP=26,1%, apresentando coeficiente de variação de até 84%, porém sem diferença estatísticas (p<0,05) entre estes períodos, utilizando-se o teste de Kruscal Wallis s (p<0,05). Apenas a percentagem de oócitos viáveis foi maior (p<0,05) no período de verão (POV=84,4 vs. 80,0%), contudo, o total de embriões PIVE foi semelhante nos dois períodos. Conclui-se que a produção de embriões da raça Gir Leiteiro, criadas na região Sudeste do Brasil, não foi afetada pela sazonalidade climática.

The reproductive performance of B.taurus embryo donors is affected in many tropical and temperate countries. The objective of this study was to evaluate the effects of the climatic conditions of summer and winter climatic conditions on the production of oocytes and in vitro embryos in dairy cows of the breed Gir Leiteiro (Bos indicus) at farms in Southeast of the Brazil. The variable answers evaluated were the total oocytes recovered (TO) and percentage of viable oocytes over the total (PVO); embryo production (EP) and percentage of embryos in viable oocytes (PE) over the total of structures recovered by follicular aspiration guided by ultrasonography (OPU). The oocytes analyzed were obtained from 10 herds and 153 pubertal donors of different ages and orders of parturition. The average from 380 ovum pick up (OPU) during summer were: TO=14.8; PVO=12.6; EP=3.4; PE=22.3%, and TO=13.4; PVO=10.8; EP=3.5; PE=26.1%, with variation coefficient of up to 84%, and no differences evaluated through the Kruscal Wallis (p<0.05). Only the percentage of viable oocytes was higher (p<0.05) in the summer period (PVO=84.4 vs. 80.0%). However, the embryo production (IVEP) was similar in both seasons (summer and winter). Therefore, we could conclude that the embryo production of Dairy Gir cows in Southeast of the Brazil was not affected by weather seasonality.

Estacionalidade e a produção de oócitos e embriões in vitro em vacas Gir leiteiro na região sudeste do Brasil / Seasonality and the production of oocytes and in vitro embryos in Gir dairy cows in the southeast region of Brazil

A eficiência reprodutiva de doadoras de embriões Bos taurus é afetada pelas estações devido ao estresse calórico em países de clima tropical e temperado. O objetivo do estudo foi avaliar o efeito das condições climáticas de verão e inverno na produção de oócitos e embriões in vitro na raça Gir Leiteiro (Bos indicus) em fazendas da região Sudeste do Brasil. Os parâmetros avaliados foram: total de oócitos recuperados (OT), oócitos viáveis (OV) e percentual de oócitos viáveis sobre o total (POV); embriões produzidos (EP) e percentual de embriões produzidos (PEP) sobre o total de estruturas recuperadas pela aspiração folicular guiada por ultrassonografia (OPU). Os oócitos foram obtidos de 153 doadoras pluríparas de diferentes idades e ordens de parição de 10 rebanhos. As médias obtidas em 380 aspirações foliculares (OPU) nos meses de verão foram: OT=14,8; OV=12,6; EP= 3,4; PEP=22,3%, e no inverno de OT=13,4; OV=10,8; EP=3,5; PEP=26,1%, apresentando coeficiente de variação de até 84%, porém sem diferença estatísticas (p<0,05) entre estes períodos, utilizando-se o teste de Kruscal Wallis s (p<0,05). Apenas a percentagem de oócitos viáveis foi maior (p<0,05) no período de verão (POV=84,4 vs. 80,0%), contudo, o total de embriões PIVE foi semelhante nos dois períodos. Conclui-se que a produção de embriões da raça Gir Leiteiro, criadas na região Sudeste do Brasil, não foi afetada pela sazonalidade climática.(AU)

The reproductive performance of B.taurus embryo donors is affected in many tropical and temperate countries. The objective of this study was to evaluate the effects of the climatic conditions of summer and winter climatic conditions on the production of oocytes and in vitro embryos in dairy cows of the breed Gir Leiteiro (Bos indicus) at farms in Southeast of the Brazil. The variable answers evaluated were the total oocytes recovered (TO) and percentage of viable oocytes over the total (PVO); embryo production (EP) and percentage of embryos in viable oocytes (PE) over the total of structures recovered by follicular aspiration guided by ultrasonography (OPU). The oocytes analyzed were obtained from 10 herds and 153 pubertal donors of different ages and orders of parturition. The average from 380 ovum pick up (OPU) during summer were: TO=14.8; PVO=12.6; EP=3.4; PE=22.3%, and TO=13.4; PVO=10.8; EP=3.5; PE=26.1%, with variation coefficient of up to 84%, and no differences evaluated through the Kruscal Wallis (p<0.05). Only the percentage of viable oocytes was higher (p<0.05) in the summer period (PVO=84.4 vs. 80.0%). However, the embryo production (IVEP) was similar in both seasons (summer and winter). Therefore, we could conclude that the embryo production of Dairy Gir cows in Southeast of the Brazil was not affected by weather seasonality.(AU)

Pregnancy rates and luteal phase characteristics of bovine embryo recipients treated with flunixin meglumine / Taxas de prenhez e características da fase lútea de receptoras de embriões tratadas com flunixina meglumina em bovinos

The aim of this study was to evaluate the effects of flunixin meglumine administration on pregnancy rates and luteal phase characteristics in bovine embryo recipients at the moment of embryo transfer. In experiment 1, in vitro produced embryos were transferred to 184 females divided as control and treated group (recipients treated with 1.1mg/kg flunixin meglumine). In experiment 2, 22 females were divided as control group; group 2 (animals submitted to a reproductive tract manipulation similar to an embryo transfer on the 7th day after estrous); and group 3 (females submitted to a manipulation and treatment with 1.1mg/kg flunixin meglumine). In experiment 1 no difference was observed between control and treated groups (40.2% and 44.6%, respectively) for pregnancy rates. In experiment 2 no difference was observed on the length of luteal phase between groups, however, animals in group 2 presented lower plasma progesterone concentrations than the control group and group 3. Therefore, we concluded that although the administration of flunixin meglumine at the moment of embryo transfer inhibited the reduction plasma progesterone concentrations, it was not effective in increasing pregnancy rates of bovine recipients.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da administração de flunixina meglumina sobre as taxas de prenhez e características da fase lútea da receptora no momento da transferência de embriões em bovinos. No experimento 1, embriões produzidos in vitro foram transferidos para 184 fêmeas, divididas em grupos controle e tratado (tratados com 1,1mg/kg de flunixina meglumina). No experimento 2, 22 fêmeas foram divididas em grupo controle (n=7); grupo 2 (n=8; animais submetidos à manipulação do trato reprodutivo semelhante à transferência de embriões no sétimo dia pós-cio); e grupo 3 (n=7; fêmeas submetidas à manipulação e ao tratamento com 1,1mg/kg de flunixina meglumina). No experimento 1, não foi observada diferença nos grupos controle e tratado (40,2% e 44,6%, respectivamente) para as taxas de prenhez. No experimento 2, não houve diferença na extensão da fase lútea entre os grupos, entretanto os animais do grupo 2 apresentaram concentrações plasmáticas de progesterona mais baixas que o grupo controle e o grupo 3. Portanto, conclui-se que a administração de flunixina meglumina no momento da transferência de embriões inibiu a redução das concentrações plasmáticas de progesterona, no entanto não foi eficaz para aumentar as taxas de prenhez de receptoras em bovinos.(AU)

Pregnancy rates and luteal phase characteristics of bovine embryo recipients treated with flunixin meglumine / Taxas de prenhez e características da fase lútea de receptoras de embriões tratadas com flunixina meglumina em bovinos

The aim of this study was to evaluate the effects of flunixin meglumine administration on pregnancy rates and luteal phase characteristics in bovine embryo recipients at the moment of embryo transfer. In experiment 1, in vitro produced embryos were transferred to 184 females divided as control and treated group (recipients treated with 1.1mg/kg flunixin meglumine). In experiment 2, 22 females were divided as control group; group 2 (animals submitted to a reproductive tract manipulation similar to an embryo transfer on the 7th day after estrous); and group 3 (females submitted to a manipulation and treatment with 1.1mg/kg flunixin meglumine). In experiment 1 no difference was observed between control and treated groups (40.2% and 44.6%, respectively) for pregnancy rates. In experiment 2 no difference was observed on the length of luteal phase between groups, however, animals in group 2 presented lower plasma progesterone concentrations than the control group and group 3. Therefore, we concluded that although the administration of flunixin meglumine at the moment of embryo transfer inhibited the reduction plasma progesterone concentrations, it was not effective in increasing pregnancy rates of bovine recipients.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da administração de flunixina meglumina sobre as taxas de prenhez e características da fase lútea da receptora no momento da transferência de embriões em bovinos. No experimento 1, embriões produzidos in vitro foram transferidos para 184 fêmeas, divididas em grupos controle e tratado (tratados com 1,1mg/kg de flunixina meglumina). No experimento 2, 22 fêmeas foram divididas em grupo controle (n=7); grupo 2 (n=8; animais submetidos à manipulação do trato reprodutivo semelhante à transferência de embriões no sétimo dia pós-cio); e grupo 3 (n=7; fêmeas submetidas à manipulação e ao tratamento com 1,1mg/kg de flunixina meglumina). No experimento 1, não foi observada diferença nos grupos controle e tratado (40,2% e 44,6%, respectivamente) para as taxas de prenhez. No experimento 2, não houve diferença na extensão da fase lútea entre os grupos, entretanto os animais do grupo 2 apresentaram concentrações plasmáticas de progesterona mais baixas que o grupo controle e o grupo 3. Portanto, conclui-se que a administração de flunixina meglumina no momento da transferência de embriões inibiu a redução das concentrações plasmáticas de progesterona, no entanto não foi eficaz para aumentar as taxas de prenhez de receptoras em bovinos.(AU)

Use of melatonin in the in vitro production of bovine embryos / Uso da melatonina na produção in vitro de embriões bovinos

We aimed to assess the effects of melatonin in the in vitro production of bovine embryos. Our experiment was conducted at the Laboratório de Reprodução Animal of the Universidade Estadual do Maranhão. The cumulus-oocyte complexes (COCs) were distributed among treatments at concentrations of 0, 10-1, 10-3 and 10-5 µMol/L melatonin. Our experiment was further divided into two: the first was to assess the effect of different concentrations of melatonin (treatments) on the maturation rate of COCs, and the second was to assess the effects of melatonin treatments on the in vitro production of bovine embryos. The results from the first experiment demonstrated no significant difference between the in vitro maturation rate of the cultivated COCs in treatments with melatonin. In the second experiment, however, melatonin treatments yielded statistically higher cleavage, morula and blastocyst rates in the 10-5 µM group (52.9%, 52.9%, and 35.3%, respectively), and lower rates in the 10-1 µM group (19.5%, 19.5% and 7.8%, respectively), compared to the others. The control group (no melatonin) and the 10-3 µM group showed similar results. We concluded that supplementation of melatonin in the in vitro maturation medium resulted in no improvement in the oocyte maturation rate, but in the in vitro production of embryos at different concentrations, the 10-5 µM group displayed better results, but with no improvement in the variables (P < 0.05).(AU)

Objetivou-se avaliar os efeitos da melatonina na produção in vitro de embriões bovinos. O experimento foi conduzido no Laboratório de Reprodução Animal da Universidade Estadual do Maranhão. Os complexos cumulus-oócitos (CCOs) foram distribuídos entre os tratamentos 0, 10-1, 10-3 e 10-5 µmol/L de melatonina. A avaliação foi dividida em dois experimentos, onde o primeiro avaliou o efeito dessas diferentes concentrações de melatonina (tratamentos) sobre a taxa de maturação dos CCOs e o segundo, o efeito desses tratamentos com melatonina sobre a produção in vitro de embriões bovinos. Os resultados no primeiro experimento demonstraram não haver diferença significativa na taxa de maturação in vitro dos CCOs cultivados no tratamento com melatonina. No entanto, o tratamento com melatonina no segundo experimento, as taxas de clivagens, mórulas e blastocistos, o grupo 10-5 µM foi estatisticamente superior (52,9%, 52,9% e 35,3%, respectivamente) e o grupo 10-1 µM inferior (19,5%, 19,5% e 7,8%, respectivamente) aos outros grupos. O grupo controle (sem melatonina) e o grupo 10-3 µM obtiveram resultados semelhantes. Concluiu-se que a suplementação da melatonina no meio de maturação in vitro não evidenciou melhoras na taxa de maturação dos oócitos, porém na produção in vitro de embriões em diferentes concentrações, o grupo 10-5 µM apresentou melhores resultados mesmo não havendo melhorias nas variáveis (P<0,05).(AU)