In vitro evaluation of ivermectin, moxidectin, albendazole and pyrantel against cyathostomins of horses

Cyathostomins are the most prevalent nematodes of horses, and multidrug resistance has been reported worldwide. There is a need to implement alternative drug monitoring analytical tests. The objective of this study was to determine the consistency (5 repetitions) of the larval migration on agar test (LMAT) using ivermectin, moxidectin, pyrantel or albendazole against cyathostomin infective-stage larvae in eight different concentrations. LMAT showed a strong coefficient of determination (R2 > 0.91), between the test repetitions (n=5). The average 50% effective concentration (EC50) for ivermectin, moxidectin, pyrantel and albendazole were 0.0404, 0.0558, 0.0864 and 0.0988 nMol, respectively. The results of the EC50 for albendazole showed the greatest range of concentration. Ivermectin and moxidectin had the lowest in between-test variation. In the future, internationally certified susceptible isolates could be used for screening new drug candidates, or to follow up the pattern of drug efficacy from field populations.(AU)

Ciatostomíneos são os nematodas mais prevalentes em equinos e a resistência múltipla foi relatada em todo o mundo. Existe a necessidade de implementar o monitoramento dos produtos com testes analíticos alternativos. O objetivo deste estudo foi determinar a consistência (5 repetições) do teste de migração larval em ágar (TMLA) usando ivermectina, moxidectina, pirantel e albendazole contra larvas infectantes de ciatostomíneos em oito concentrações diferentes. O TMLA demonstrou um coeficiente de determinação (R2) acima de 0,91 entre as repetições do teste. A concentração efetiva para 50% (CE50) para ivermectina, moxidectina, pirantel e albendazole foi de 0,0404; 0,0558; 0,0864 e 0,0988 nMol, respectivamente. A CE50 do albendazole demonstrou a maior amplitude entre os testes. A ivermectina e a moxidectina tiveram as menores variações das doses entre as repetições. No futuro, isolados certificados susceptíveis poderão ser testados com o TMLA para indicação de novos produtos e mesmo para acompanhar o perfil de eficácia de populações do campo.(AU)

In vitro evaluation of ivermectin, moxidectin, albendazole and pyrantel against cyathostomins of horses / Avaliação in vitro da ivermectina, moxidectina, albendazole e pirantel contra ciatostomíneos de equinos

Cyathostomins are the most prevalent nematodes of horses, and multidrug resistance has been reported worldwide. There is a need to implement alternative drug monitoring analytical tests. The objective of this study was to determine the consistency (5 repetitions) of the larval migration on agar test (LMAT) using ivermectin, moxidectin, pyrantel or albendazole against cyathostomin infective-stage larvae in eight different concentrations. LMAT showed a strong coefficient of determination (R2 > 0.91), between the test repetitions (n=5). The average 50% effective concentration (EC50) for ivermectin, moxidectin, pyrantel and albendazole were 0.0404, 0.0558, 0.0864 and 0.0988 nMol, respectively. The results of the EC50 for albendazole showed the greatest range of concentration. Ivermectin and moxidectin had the lowest in between-test variation. In the future, internationally certified susceptible isolates could be used for screening new drug candidates, or to follow up the pattern of drug efficacy from field populations.(AU)

Ciatostomíneos são os nematodas mais prevalentes em equinos e a resistência múltipla foi relatada em todo o mundo. Existe a necessidade de implementar o monitoramento dos produtos com testes analíticos alternativos. O objetivo deste estudo foi determinar a consistência (5 repetições) do teste de migração larval em ágar (TMLA) usando ivermectina, moxidectina, pirantel e albendazole contra larvas infectantes de ciatostomíneos em oito concentrações diferentes. O TMLA demonstrou um coeficiente de determinação (R2) acima de 0,91 entre as repetições do teste. A concentração efetiva para 50% (CE50) para ivermectina, moxidectina, pirantel e albendazole foi de 0,0404; 0,0558; 0,0864 e 0,0988 nMol, respectivamente. A CE50 do albendazole demonstrou a maior amplitude entre os testes. A ivermectina e a moxidectina tiveram as menores variações das doses entre as repetições. No futuro, isolados certificados susceptíveis poderão ser testados com o TMLA para indicação de novos produtos e mesmo para acompanhar o perfil de eficácia de populações do campo.(AU)

In vitro evaluation of ivermectin, moxidectin, albendazole and pyrantel against cyathostomins of horses / Avaliação in vitro da ivermectina, moxidectina, albendazole e pirantel contra ciatostomíneos de equinos

Cyathostomins are the most prevalent nematodes of horses, and multidrug resistance has been reported worldwide. There is a need to implement alternative drug monitoring analytical tests. The objective of this study was to determine the consistency (5 repetitions) of the larval migration on agar test (LMAT) using ivermectin, moxidectin, pyrantel or albendazole against cyathostomin infective-stage larvae in eight different concentrations. LMAT showed a strong coefficient of determination (R2 > 0.91), between the test repetitions (n=5). The average 50% effective concentration (EC50) for ivermectin, moxidectin, pyrantel and albendazole were 0.0404, 0.0558, 0.0864 and 0.0988 nMol, respectively. The results of the EC50 for albendazole showed the greatest range of concentration. Ivermectin and moxidectin had the lowest in between-test variation. In the future, internationally certified susceptible isolates could be used for screening new drug candidates, or to follow up the pattern of drug efficacy from field populations.(AU)

Ciatostomíneos são os nematodas mais prevalentes em equinos e a resistência múltipla foi relatada em todo o mundo. Existe a necessidade de implementar o monitoramento dos produtos com testes analíticos alternativos. O objetivo deste estudo foi determinar a consistência (5 repetições) do teste de migração larval em ágar (TMLA) usando ivermectina, moxidectina, pirantel e albendazole contra larvas infectantes de ciatostomíneos em oito concentrações diferentes. O TMLA demonstrou um coeficiente de determinação (R2) acima de 0,91 entre as repetições do teste. A concentração efetiva para 50% (CE50) para ivermectina, moxidectina, pirantel e albendazole foi de 0,0404; 0,0558; 0,0864 e 0,0988 nMol, respectivamente. A CE50 do albendazole demonstrou a maior amplitude entre os testes. A ivermectina e a moxidectina tiveram as menores variações das doses entre as repetições. No futuro, isolados certificados susceptíveis poderão ser testados com o TMLA para indicação de novos produtos e mesmo para acompanhar o perfil de eficácia de populações do campo.(AU)

In vitro evaluation of ivermectin, moxidectin, albendazole and pyrantel against cyathostomins of horses

Abstract Cyathostomins are the most prevalent nematodes of horses, and multidrug resistance has been reported worldwide. There is a need to implement alternative drug monitoring analytical tests. The objective of this study was to determine the consistency (5 repetitions) of the larval migration on agar test (LMAT) using ivermectin, moxidectin, pyrantel or albendazole against cyathostomin infective-stage larvae in eight different concentrations. LMAT showed a strong coefficient of determination (R2 > 0.91), between the test repetitions (n=5). The average 50% effective concentration (EC50) for ivermectin, moxidectin, pyrantel and albendazole were 0.0404, 0.0558, 0.0864 and 0.0988 nMol, respectively. The results of the EC50 for albendazole showed the greatest range of concentration. Ivermectin and moxidectin had the lowest in between-test variation. In the future, internationally certified susceptible isolates could be used for screening new drug candidates, or to follow up the pattern of drug efficacy from field populations.

Resumo Ciatostomíneos são os nematodas mais prevalentes em equinos e a resistência múltipla foi relatada em todo o mundo. Existe a necessidade de implementar o monitoramento dos produtos com testes analíticos alternativos. O objetivo deste estudo foi determinar a consistência (5 repetições) do teste de migração larval em ágar (TMLA) usando ivermectina, moxidectina, pirantel e albendazole contra larvas infectantes de ciatostomíneos em oito concentrações diferentes. O TMLA demonstrou um coeficiente de determinação (R2) acima de 0,91 entre as repetições do teste. A concentração efetiva para 50% (CE50) para ivermectina, moxidectina, pirantel e albendazole foi de 0,0404; 0,0558; 0,0864 e 0,0988 nMol, respectivamente. A CE50 do albendazole demonstrou a maior amplitude entre os testes. A ivermectina e a moxidectina tiveram as menores variações das doses entre as repetições. No futuro, isolados certificados susceptíveis poderão ser testados com o TMLA para indicação de novos produtos e mesmo para acompanhar o perfil de eficácia de populações do campo.

In vitro evaluation of ivermectin, moxidectin, albendazole and pyrantel against cyathostomins of horses

Abstract Cyathostomins are the most prevalent nematodes of horses, and multidrug resistance has been reported worldwide. There is a need to implement alternative drug monitoring analytical tests. The objective of this study was to determine the consistency (5 repetitions) of the larval migration on agar test (LMAT) using ivermectin, moxidectin, pyrantel or albendazole against cyathostomin infective-stage larvae in eight different concentrations. LMAT showed a strong coefficient of determination (R2 > 0.91), between the test repetitions (n=5). The average 50% effective concentration (EC50) for ivermectin, moxidectin, pyrantel and albendazole were 0.0404, 0.0558, 0.0864 and 0.0988 nMol, respectively. The results of the EC50 for albendazole showed the greatest range of concentration. Ivermectin and moxidectin had the lowest in between-test variation. In the future, internationally certified susceptible isolates could be used for screening new drug candidates, or to follow up the pattern of drug efficacy from field populations.

Resumo Ciatostomíneos são os nematodas mais prevalentes em equinos e a resistência múltipla foi relatada em todo o mundo. Existe a necessidade de implementar o monitoramento dos produtos com testes analíticos alternativos. O objetivo deste estudo foi determinar a consistência (5 repetições) do teste de migração larval em ágar (TMLA) usando ivermectina, moxidectina, pirantel e albendazole contra larvas infectantes de ciatostomíneos em oito concentrações diferentes. O TMLA demonstrou um coeficiente de determinação (R2) acima de 0,91 entre as repetições do teste. A concentração efetiva para 50% (CE50) para ivermectina, moxidectina, pirantel e albendazole foi de 0,0404; 0,0558; 0,0864 e 0,0988 nMol, respectivamente. A CE50 do albendazole demonstrou a maior amplitude entre os testes. A ivermectina e a moxidectina tiveram as menores variações das doses entre as repetições. No futuro, isolados certificados susceptíveis poderão ser testados com o TMLA para indicação de novos produtos e mesmo para acompanhar o perfil de eficácia de populações do campo.

Arthrobotrys cladodes var macroides E Pochonia chlamydosporia COMO CONTROLADORES BIOLÓGICOS DE NEMATÓIDES PARASITOS GASTRINTESTINAIS DE EQUINOS

Os nematóides parasitas gastrintestinais são responsáveis por gerar perdas econômicas significativas para a equideocultura mundial. O surgimento de resistência aos anti-helmínticos tem se tornado frequente e o controle biológico através do uso de fungos nematófagos torna-se uma alternativa para auxiliar na profilaxia das helmintoses gastrintestinais de equinos. Neste trabalho foi avaliada a eficácia do fungo nematófago Arthrobotrys cladodes var. macroides (isolado CG719) em predar larvas infectantes (L3) de ciatostomíneos in vitro, bem como sua atividade predatória após a passagem pelo trato gastrointestinal de equinos (TGI). Os testes in vitro e após passagem pelo TGI apresentaram reduções (p <0,05) de 56,6% e 31,42% respectivamente de L3, confirmando a capacidade de A. cladodes em controlar L3 de ciatostomíneos e suportar a passagem pelo TGI. Esses resultados incentivaram a avaliação da eficácia do fungo A. cladodes em testes com equinos a campo. Nesse ensaio, o fungo foi utilizado em formulações à base de alginato de sódio fornecidas duas vezes por semana, durante 9 meses. Embora os resultados tenham mostrado redução na contagem de ovos por grama de fezes, bem como de larvas recuperadas de coproculturas e de pastagem, não foram observadas diferenças estatisticamente significantes entre o grupo controle e tratado. Isso demonstra que fatores externos, como pluviosidade, temperatura e umidade relativa podem ter afetado sua eficácia a campo. Nesse trabalho, também foi avaliada a eficácia do nematicida biológico Rizotec® formulado com clamidósporos do fungo nematófago Pochonia chlamydosporia (isolado Pc 10). Foram utilizadas diferentes doses de Rizotec® equivalentes a (1x105 , 2,5x105 , 5x105 , 7,5x105 e 1x106 ) clamidósporos. Após 7, 14 e 21 dias de interação, os ovos foram classificados quanto aos efeitos ovicidas tipos 1, 2 e 3. Somente as doses de 14,25 mg e 19,0 mg de Rizotec® apresentaram diferenças (p<0,05) com relação ao efeito lítico tipo 3 com 21 dias de interação em relação ao grupo controle. Foi observada uma tendência de aumento nas percentagens (17,0%, 26,33%, 28,33%, 47,83% e 65,66%) de ovos com esse efeito ao se elevar a dose do produto. As curvas de regressão para as doses testadas mostraram uma tendência de aumento do efeito lítico tipo 3 com o aumento do tempo de interação. Os resultados apresentados neste trabalho confirmam a eficácia dos fungos Arthrobotrys cladodes var. macroides (isolado CG719) e Pochonia chlamydosporia (isolado Pc 10) no controle de formas infectantes e ovos de nematóides gastrintestinais de equinos in vitro.

Gastrointestinal parasitic nematodes are responsible for generating significant economic losses for the world equideoculture. The emergence of resistance to anthelmintics has become frequent and biological control through the use of nematophagous fungi has become a promising alternative to assist in the prophylaxis of gastrointestinal helminths in horses. In this work, the efficacy of the nematophagous fungus Arthrobotrys cladodes var. macroides (CG 719) in predating infective larvae (L3) of cyathostomins in vitro, as well as their predatory activity after passing through the equine gastrointestinal tract (GIT). Tests in vitro and after passing through the GIT showed reductions (p <0.05) of 56.6% and 31.42%, respectively, of L3, confirming the ability of A. cladodes to control cyathostomin L3 and support the passage through the GIT. These results encouraged the evaluation of the effectiveness of the fungus A. cladodes in tests with horses in the field. In this test, the fungus was used in formulations based on sodium alginate supplied twice weekly, for 10 months. Although the results showed a reduction in the egg count per gram of feces, as well as in larvae recovered from coprocultures and pasture, no significant differences were observed between the control and treated groups. This demonstrates that external factors such as rainfall, temperature and relative humidity can affect its effectiveness in the field. In this work, the effectiveness of the biological nematicide Rizotec® (1.9 mg, 4.75 mg, 9.5 mg, 14.25 mg and 19.0 mg) formulated with chlamydospores of the nematophagous fungus Pochonia chlamydosporia (isolated Pc 10) was also evaluated, in destroying Parascaris equorum eggs in vitro. The eggs were classified according to the ovicidal effects (types 1, 2 and 3) caused by the fungus in 7, 14 and 21 days of interaction. Only the doses of 14.25 mg and 19.0 mg of Rizotec® showed differences (p <0.05) in relation to the type 3 lytic effect with 21 days of interaction in relation to the control group. There was a tendency to increase the percentages (17,0%, 26,33%, 28,33%, 47,83% and 65,66%) of eggs with this effect when increasing the product dose. The regression curves for the tested doses showed a tendency to increase the type 3 lytic effect with increasing interaction time. The results presented in this work confirm the efficacy of the fungi A. cladodes and P. chlamydosporia (isolated Pc10) in the control of infectious forms and eggs of gastrointestinal nematodes in horses in vitro

Proteolytic action of the crude extract ofDuddingtonia flagrans on cyathostomins (Nematoda: Cyathostominae) in coprocultures

The objective of this study was to examine the action of the crude extract of Duddingtonia flagrans (isolates AC001 and CG722) on infective larvae (L3) of cyathostomins in coprocultures and to confirm its proteolytic activity by means of a zymogram. The following groups were formed in coprocultures: Group 1: 10 mL of crude extract of D. flagrans (AC001); group 2: 10 mL of crude extract of AC001 with 10 mM of Ca2+; group 3: 10 mL of crude extract of D. flagrans (CG722); group 4: 10 mL of crude extract of CG722 with 10 mM of Ca2+; and group 5: control group (distilled water). The third-stage larvae (L3) were obtained after eight days. The crude extract of D. flagrans was effective in reducing the number of L3, with the following percentage reductions: group 1, 49.5%; group 2, 52.5%; group 3, 36.8%; and group 4, 57.7%; in relation to the control group (p > 0.05). The proteolytic activity of the crude extract was confirmed through the zymogram. The results from this study confirmed that the crude extract of the fungusD. flagrans could be used for controlling cyathostomin L3, and suggested that at least one protease of approximately 38 kDa was present.

O objetivo deste trabalho foi estudar a ação do extrato bruto de Duddingtonia flagrans (isolados AC001 e CG722) sobre larvas infectantes (L3) de ciatostomíneos em coproculturas e confirmar a sua atividade proteolítica por meio de um zimograma. Foram formados os seguintes grupos em coproculturas: grupo 1: 10 mL de extrato bruto de D. flagrans (AC001); grupo 2: 10 mL de extrato bruto de AC001 com íons Ca2+ 10 Mm; grupo 3: 10 mL de extrato bruto de D. flagrans (CG722); grupo 4: 10 mL de extrato bruto de CG722 com íons Ca2+ 10 Mm; e grupo 5 como controle (água destilada), obtendo-se as L3 ao final de 8 dias. O extrato bruto de D. flagrans foi eficiente na redução do número de L3 com os seguintes percentuais de redução: grupo 1 (49,5%); grupo 2 (52,5%); grupo 3 (36,8%) e grupo 4 (57,7%) em relação ao grupo controle (p > 0,05). Confirmou-se a atividade proteolítica por meio do zimograma. Os resultados do presente trabalho confirmam a utilização do extrato bruto do fungo D. flagrans no controle de L3de ciatostomíneos e sugere a presença de pelo menos uma protease de aproximadamente 38 kDa.

Fungo nematófago Arthrobotrys musiformis como controlador biológico de nematoides de equinos

Arthrobotrys musiformis é um fungo formador de armadilhas do tipo redes adesivas tridimensionais, capazes de capturar e predar larvas infectantes (L3) de nematoides. Nos equinos, os nematoides gastrintestinais podem levar a condições patológicas que interferem no desenvolvimento corporal e podem, inclusive, levar os animais a óbito. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia do fungo nematófago Arthrobotrys musiformis (isolado A144) no controle de L3 de nematoides estrongilídeos que acometem equinos. Inicialmente foi analisado a capacidade do isolado A144 de passar pelo trato gastrintestinal de equinos e manter a sua atividade predatória sobre larvas infectantes de ciatostomíneos. Coletas de fezes foram feitas 12h, 24, 36, 48 e 72h após a administração de péletes contendo micélio fúngico. Os péletes recuperados na última coleta foram colocados em placas de Petri contendo meio ágar-ágar 2% para germinarem, e larvas infectantes de ciatostomíneos foram adicionadas, para avaliar a atividade do fungo sobre essas. Paralelamente, placas contendo o isolado A144 crescido a partir de colônias mantidas em laboratório também receberam L3 de ciatostomíneos e ao final de sete dias de interação, foram obtidos os percentuais de redução de 96.61% e 96.18% dos grupos contendo o fungo mantido em laboratório e o fungo recuperados dos péletes, respectivamente, demonstrando que o fungo é capaz de passar pelo trato gastrintestinal de equinos e manter a sua capacidade predatória. Diferentes doses de conídios do isolado A144 foram avaliadas em placas, em coproculturas e em bolos fecais depositados em pastagem e o que se observou é que a redução de L3 nas dosagens de conídios testadas apresentou pouca variação entre elas, mas todas apresentaram diferença estatisticamente significativa quando comparadas ao grupo controle. As doses iniciais de esporos avaliadas neste trabalho não foram determinantes na capacidade do isolado A144 em reduzir o número de larvas infectantes de estrongilídeos, tanto em condições controladas, quanto em condições à campo. O isolado A144 do fungo nematófago Arthrobotrys musiformis é capaz de manter sua viabilidade após passagem pelo trato gastrintestinal de equinos e predar larvas infectantes de estrongilídeos. Os resultados encontrados indicam que o fungo Arthrobotrys musiformis (isolado A144) é uma alternativa para o controle das fases de vida livre dos estrongilídeos nematoides de equinos.

Arthrobotrys musiformis is a trap-forming fungus of three-dimensional adhesive nets, capable of capturing and predating infective (L3) nematode larvae. In horses, gastrointestinal nematodes can cause pathological conditions that interfere with body development and can even cause death. The objective of this work was to evaluate the efficacy of the nematophagous fungus Arthrobotrys musiformis (isolate A144) in the control of L3 of strongylid nematodes of horses. Initially, the ability of the isolate A144to pass through the gastrointestinal tract of horses and to maintain its predatory activity on infective Cyathostomin larvae was analyzed. The mycelium of the fungus was incorporated into pellets of sodium alginate and administered orally, in a single dose, to horses. Fecal collections were performed 12h, 24, 36, 48 and 72h after administration of pellets. Pellets recovered in the last collection were placed in Petri dishes containing 2% agar-agar medium to germinate, and infective larvae of cyathostomins were added to evaluate fungus activity on them. In parallel, plaques containing the A144 isolate grown from colonies kept in the laboratory also received L3 from cyathostomins and at the end of seven days of interaction, reduction rates of 96.61% and 96.18% of the L3 in group containing the fungus were kept in the laboratory and the fungus recovered from the pellets, respectively, demonstrating that the fungus is able to pass through the gastrointestinal tract of horses and maintain its predatory capacity. Different doses of conidia of isolate A144 were evaluated in plaques, coprocultures and fecal pats deposited on pasture and was observed that the reduction of L3 in the dosages of conidia tested showed little variation among them, but all presented a statistically significant difference when compared to the control group. The initial doses of spores evaluated in this work were not determinant in the ability of isolate A144 to reduce the number of infectious larvae of strongyles under both controlled and field conditions. The A144 isolate of the nematophagous fungus Arthrobotrys musiformis is able to maintain its viability after passage through the gastrointestinal tract of horses and predate infectious larvae of strongyles. The results indicate that the fungus Arthrobotrys musiformis (isolate A144) is an alternative to the control of free life stages of equine nematodes strongyles.

Proteolytic action of the crude extract of Duddingtonia flagrans on cyathostomins (Nematoda: Cyathostominae) in coprocultures / Ação proteolítica do extrato bruto de Duddingtonia flagrans sobre ciatostomíneos (Nematoda: Cyathostominae) em coproculturas

The objective of this study was to examine the action of the crude extract of Duddingtonia flagrans (isolates AC001 and CG722) on infective larvae (L3) of cyathostomins in coprocultures and to confirm its proteolytic activity by means of a zymogram. The following groups were formed in coprocultures: Group 1: 10 mL of crude extract of D. flagrans (AC001); group 2: 10 mL of crude extract of AC001 with 10 mM of Ca2+; group 3: 10 mL of crude extract of D. flagrans (CG722); group 4: 10 mL of crude extract of CG722 with 10 mM of Ca2+; and group 5: control group (distilled water). The third-stage larvae (L3) were obtained after eight days. The crude extract of D. flagrans was effective in reducing the number of L3, with the following percentage reductions: group 1, 49.5%; group 2, 52.5%; group 3, 36.8%; and group 4, 57.7%; in relation to the control group (p > 0.05). The proteolytic activity of the crude extract was confirmed through the zymogram. The results from this study confirmed that the crude extract of the fungus D. flagrans could be used for controlling cyathostomin L3, and suggested that at least one protease of approximately 38 kDa was present.

O objetivo deste trabalho foi estudar a ação do extrato bruto de Duddingtonia flagrans (isolados AC001 e CG722) sobre larvas infectantes (L3) de ciatostomíneos em coproculturas e confirmar a sua atividade proteolítica por meio de um zimograma. Foram formados os seguintes grupos em coproculturas: grupo 1: 10 mL de extrato bruto de D. flagrans (AC001); grupo 2: 10 mL de extrato bruto de AC001 com íons Ca2+ 10 Mm; grupo 3: 10 mL de extrato bruto de D. flagrans (CG722); grupo 4: 10 mL de extrato bruto de CG722 com íons Ca2+ 10 Mm; e grupo 5 como controle (água destilada), obtendo-se as L3 ao final de 8 dias. O extrato bruto de D. flagrans foi eficiente na redução do número de L3 com os seguintes percentuais de redução: grupo 1 (49,5%); grupo 2 (52,5%); grupo 3 (36,8%) e grupo 4 (57,7%) em relação ao grupo controle (p > 0,05). Confirmou-se a atividade proteolítica por meio do zimograma. Os resultados do presente trabalho confirmam a utilização do extrato bruto do fungo D. flagrans no controle de L3 de ciatostomíneos e sugere a presença de pelo menos uma protease de aproximadamente 38 kDa.

Cyathostomin larvae: presence on Brachiaria humidicola grass during the rainy and dry seasons of Brazil / Larvas de ciatostomíneos: disponibilidade em gramínea Brachiaria humidicola nas estações chuvosa e seca do Brasil

The presence of cyathostomin larvae is directly associated to climatic conditions of each region. This study aimed to evaluate the ecology of infective larvae on Brachiaria humidicola during the dry and rainy seasons from October 2007 to September 2008 in a tropical region, Rio de Janeiro state, southeastern Brazil. Stools were collected from the rectum of horses naturally infected with cyathostomins at the beginning of the rainy season (October to March) and dry season (April to September). They were divided into four samples of 500 g and deposited on a grass patch of B. humidicola. Seven days later and every 15 days thereafter samples of feces and grass were collected and processed by the Baermann technique. The mean number of larvae recovered from the grass varied according to the season, with greater recovery of larvae during the peak of the dry season (14,700 L3.kg-¹ DM). There was a statistically significant difference between L3 recovered from feces and grass, but not between L3 recovered from the grass base and apex. These results show that the regions climate favors the development and survival of infective cyathostomin larvae throughout the year, with a greater number of larvae during the dry season.(AU)

A disponibilidade de larvas de ciatostomíneos está diretamente relacionada com as condições climáticas de cada região. Para avaliar o comportamento das larvas infectantes nos períodos seco e chuvoso em gramínea Brachiaria humidicola, realizou-se um estudo, no período de outubro/2007 a setembro/2008, na região da Baixada Fluminense, RJ, de clima tropical. Amostras de fezes foram coletadas diretamente do reto de equinos naturalmente infectados por ciatostomíneos, no início do período chuvoso (outubro a março) e seco (abril a setembro), divididas em quatro amostras de 500 g e depositadas em um canteiro formado por gramínea B. humidicola. Sete dias após o depósito e, posteriormente, a cada 15 dias, amostras de fezes e gramíneas, foram coletadas às 8 horas e processadas pela técnica de Baermann. O número médio de larvas recuperadas da gramínea variou conforme os períodos, ocorrendo maior recuperação no ápice do período seco (14.700 L3.kg-1. MS). Diferença significativa ocorreu entre a contagem de L3 recuperadas das fezes e gramínea e não significativa entre as de L3 recuperadas nas duas alturas da gramínea. Concluiu-se que as condições climáticas da região favorecem o desenvolvimento e a sobrevivência de larvas infectantes de ciatostomíneos durante todo o ano, com maior disponibilidade no período seco.(AU)

Desenvolvimento de ovos de ciatostomíneos (NematodaCyathostominae) em diferentes temperaturas / Development of cyathostomin eggs (Nematoda-Cyathostominae) in different temperatures

Os ciatostomíneos (Cyathostominae) são os nematóides mais abundantes no intestino grosso dos equinos e os ovos eliminados nas fezes podem chegar a 12x106 ovos/dia se o número de ovos por grama de fezes (OPG) for igual a 1000. Variáveis ambientais como temperatura, pluviosidade e umidade influenciam no desenvolvimento e sobrevivência de ovos e de larvas nas fezes e pastagem. O efeito da temperatura sobre o desenvolvimento de ovos dos ciatostomíneos e o tempo de armazenamento são pouco estudados. Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito das temperaturas de ±10ºC e -4ºC sobre as diferentes fases dos ovos. Fezes de equinos foram coletadas, divididas em seis amostras de aproximadamente 1kg, sendo três amostras mantidas a ±10ºC e três a -4ºC. Durante 18 meses, alíquotas de 4g de fezes foram retiradas semanalmente, de cada temperatura respectiva, para recuperação de ovos que foram mantidos em placas de Petri com água por 24h para observação e contagem das fases de desenvolvimento e contagem dos ovos viáveis e inviáveis e/ou inférteis. Sob a temperatura de ±10ºC, 75% dos ovos encontravam-se na fase de mórula e 20% em gástrula; a -4ºC, 90% em mórula e 10% em gástrula. Houve diferença significativa no número de ovos em mórula, gástrula e para o OPG entre as temperaturas. Os ovos resistiram a -4ºC, desenvolveram-se até a fase seguinte e o tempo até ovo larvado foi maior que 24h a ±25ºC. Mais estudos estão em andamento a fim de esclarecer vários aspectos do efeito da temperatura sobre ovos de ciatostomíneos estocados.

The cyathostomin (Cyathostominae) are the most abundant nematodes in the large intestine of horses. A number of eggs per gram of faeces (EPG) equal to 1000 represents a pasture contamination with eggs per 12x106 day. The environmental variables as temperature, rainfall and humidity influence the development and survival of eggs and larvae in the faeces and pasture. Studies about the storage and the effect of temperature on the development are scarce. The aim of this study was to evaluate the effect of temperatures ± 10°C and -4°C on the development of cyathostomin eggs. Feces collected from horses were divided into six samples of 1kg, three stored at ± 10ºC and three stored at -4ºC. Each seven days a sample of 4g was evaluated for counting and observation of the egg stage for a period of 18 months. At ± 10ºC temperature, 75% of eggs were at the morula stage and 20% gastrula; at -4ºC, 90% were at the morula stage and 10% in gastrula. There were significant differences in the number of eggs in morula, gastrula and the OPG between the temperatures evaluated. Eggs stored at ± 10°C and -4°C remained viable during 18 months, indicating that resistence to freezing temperature. More studies are in process to know many questions about it.

Desenvolvimento de ovos de ciatostomíneos (NematodaCyathostominae) em diferentes temperaturas / Development of cyathostomin eggs (Nematoda-Cyathostominae) in different temperatures

Os ciatostomíneos (Cyathostominae) são os nematóides mais abundantes no intestino grosso dos equinos e os ovos eliminados nas fezes podem chegar a 12x106 ovos/dia se o número de ovos por grama de fezes (OPG) for igual a 1000. Variáveis ambientais como temperatura, pluviosidade e umidade influenciam no desenvolvimento e sobrevivência de ovos e de larvas nas fezes e pastagem. O efeito da temperatura sobre o desenvolvimento de ovos dos ciatostomíneos e o tempo de armazenamento são pouco estudados. Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito das temperaturas de ±10ºC e -4ºC sobre as diferentes fases dos ovos. Fezes de equinos foram coletadas, divididas em seis amostras de aproximadamente 1kg, sendo três amostras mantidas a ±10ºC e três a -4ºC. Durante 18 meses, alíquotas de 4g de fezes foram retiradas semanalmente, de cada temperatura respectiva, para recuperação de ovos que foram mantidos em placas de Petri com água por 24h para observação e contagem das fases de desenvolvimento e contagem dos ovos viáveis e inviáveis e/ou inférteis. Sob a temperatura de ±10ºC, 75% dos ovos encontravam-se na fase de mórula e 20% em gástrula; a -4ºC, 90% em mórula e 10% em gástrula. Houve diferença significativa no número de ovos em mórula, gástrula e para o OPG entre as temperaturas. Os ovos resistiram a -4ºC, desenvolveram-se até a fase seguinte e o tempo até ovo larvado foi maior que 24h a ±25ºC. Mais estudos estão em andamento a fim de esclarecer vários aspectos do efeito da temperatura sobre ovos de ciatostomíneos estocados.(AU)

The cyathostomin (Cyathostominae) are the most abundant nematodes in the large intestine of horses. A number of eggs per gram of faeces (EPG) equal to 1000 represents a pasture contamination with eggs per 12x106 day. The environmental variables as temperature, rainfall and humidity influence the development and survival of eggs and larvae in the faeces and pasture. Studies about the storage and the effect of temperature on the development are scarce. The aim of this study was to evaluate the effect of temperatures ± 10°C and -4°C on the development of cyathostomin eggs. Feces collected from horses were divided into six samples of 1kg, three stored at ± 10ºC and three stored at -4ºC. Each seven days a sample of 4g was evaluated for counting and observation of the egg stage for a period of 18 months. At ± 10ºC temperature, 75% of eggs were at the morula stage and 20% gastrula; at -4ºC, 90% were at the morula stage and 10% in gastrula. There were significant differences in the number of eggs in morula, gastrula and the OPG between the temperatures evaluated. Eggs stored at ± 10°C and -4°C remained viable during 18 months, indicating that resistence to freezing temperature. More studies are in process to know many questions about it.(AU)

Distribuição sazonal de larvas infectantes de ciatostomíneos (nematoda-cyathostominae) na baixada fluminense do Rio de Janeiro / Seazonal distribution of Cyathostomin (Nematoda-Cyathostominae) infective larvae in baixada fluminense, Rio de Janeiro, Brazil

Sob condições de clima tropical da Baixada Fluminense do Rio de janeiro, foi desenvolvido um experimento com amostras de fezes depositadas em gramínea Tyfton 85 (Cynodon spp. Cv.Tifton 85), no início de cada estação do ano. O objetivo do estudo foi avaliar a distribuição das larvas infectantes (L3) de ciatostomíneos nas fezes, na gramínea e no solo, verificando o horário de maior recuperação de larvas. As coletas iniciaram-se uma semana após cada depósito e a partir daí de quinze em quinze dias durante as estações. Maior número de larvas foi encontrado na gramínea no outono e no inverno, meses com predominância na estação seca, e menor número de larvas foi encontrado na primavera e principalmente no verão, meses com predominância na estação chuvosa. No horário das 8 horas, foi recuperado o maior número de larvas. Não se observou diferença significativa entre os horários de coleta para cada estação do ano. Reduzido número de larvas foi recuperado nos 10 cm do solo analisado. As condições climáticas da região estudada permitiram o desenvolvimento e a sobrevivência de L3 de ciatostomíneos na massa fecal, assim como a migração para a gramínea, durante todo o ano, com maior risco de infecção para os equinos no outono e no inverno.

Distribution of cyathostomin infective larvae (L3) in feces, soil and in Tifton 85 (Cynodon spp. cv. Tifton 85) pasture was studied in the different seasons under tropical climate of Baixada Fluminense, Rio de Janeiro state, Brazil. The aim of this study was to evaluate the distribution of L3 in the feces, pasture and soil, verifying the time of higher larvae recovery. The collections began one week after deposit, and then every 15 days. L3 were recovered in higher number in the fall and winter, dry period, when compared to spring and mainly the summer, rainy period. More larvae were recovered at 8:00 o’clock, although no statistic difference was observed among the collection times for each season. The soil did not demonstrate to be a potential L3 reservoir, considering the low larvae recovery. The environmental conditions of the studied area rendered possible the L3 development and survival in fecal mass, as well as the migration for the pasture, making possible the infection of horses.

Distribuição sazonal de larvas infectantes de ciatostomíneos (nematoda-cyathostominae) na baixada fluminense do Rio de Janeiro / Seazonal distribution of Cyathostomin (Nematoda-Cyathostominae) infective larvae in baixada fluminense, Rio de Janeiro, Brazil

Sob condições de clima tropical da Baixada Fluminense do Rio de janeiro, foi desenvolvido um experimento com amostras de fezes depositadas em gramínea Tyfton 85 (Cynodon spp. Cv.Tifton 85), no início de cada estação do ano. O objetivo do estudo foi avaliar a distribuição das larvas infectantes (L3) de ciatostomíneos nas fezes, na gramínea e no solo, verificando o horário de maior recuperação de larvas. As coletas iniciaram-se uma semana após cada depósito e a partir daí de quinze em quinze dias durante as estações. Maior número de larvas foi encontrado na gramínea no outono e no inverno, meses com predominância na estação seca, e menor número de larvas foi encontrado na primavera e principalmente no verão, meses com predominância na estação chuvosa. No horário das 8 horas, foi recuperado o maior número de larvas. Não se observou diferença significativa entre os horários de coleta para cada estação do ano. Reduzido número de larvas foi recuperado nos 10 cm do solo analisado. As condições climáticas da região estudada permitiram o desenvolvimento e a sobrevivência de L3 de ciatostomíneos na massa fecal, assim como a migração para a gramínea, durante todo o ano, com maior risco de infecção para os equinos no outono e no inverno.(AU)

Distribution of cyathostomin infective larvae (L3) in feces, soil and in Tifton 85 (Cynodon spp. cv. Tifton 85) pasture was studied in the different seasons under tropical climate of Baixada Fluminense, Rio de Janeiro state, Brazil. The aim of this study was to evaluate the distribution of L3 in the feces, pasture and soil, verifying the time of higher larvae recovery. The collections began one week after deposit, and then every 15 days. L3 were recovered in higher number in the fall and winter, dry period, when compared to spring and mainly the summer, rainy period. More larvae were recovered at 8:00 oclock, although no statistic difference was observed among the collection times for each season. The soil did not demonstrate to be a potential L3 reservoir, considering the low larvae recovery. The environmental conditions of the studied area rendered possible the L3 development and survival in fecal mass, as well as the migration for the pasture, making possible the infection of horses.(AU)

Desenvolvimento e migração de larvas infectantes de ciatostomíneos (Nematoda: Cyathostominae) em gramínea coast cross (Cynodon dactylon) em clima tropical, na Baixada Fluminense, RJ, Brasil

A study following the development and migration of Cyathostominae infective larvae was conducted from July 2003 to November 2004 in tropical climate, Baixada Fluminense, RJ, Brazil. Samples of naturally infected feces were placed on 12 m² plot each month on a cyathostomin-free "Bermuda grass" pasture (Cynodon dactylon). After Seven days, samples of feces and grass were collected every week at 8 a.m, 1 and 5 p.m., weighed and processed by Baermann technique. Higher survival of L3 was found at dry season, 15 and 12 weeks on feces and sward respectively, at rainy season the survival was smaller. The multivariable analysis of main components was evident the influence of time and environment variables on L3 recovery from feces and grass. Close relationship between time and the number of L3 in feces could be noted, in contrast with L3 in sward. The climatic conditions influenced directly the number of infective larvae. The infective larvae were recovered during three times and the Kruskal-Wallis test did not present significance among them.

Esse estudo foi realizado no período de julho de 2003 a novembro de 2004, para avaliar o desenvolvimento, a sobrevivência, a migração das larvas infectantes em gramínea "coast cross" (Cynodon dactylon) e o horário de maior disponibilidade, em condições de clima tropical, na Baixada Fluminense, RJ, Brasil. De julho de 2003 a setembro de 2004, massas fecais de equinos naturalmente infectados foram depositadas mensalmente sobre a gramínea. Sete dias após, amostras de fezes e gramínea foram coletadas semanalmente em diferentes horários (8, 13 e 17 horas), pesadas e processadas pela técnica de Baermann. O desenvolvimento, a sobrevivência e a migração das larvas infectantes nas fezes e na gramínea foram observados durante todo o período. A sobrevivência das L3 foi de até 15 semanas nas fezes e 12 semanas na gramínea no período seco e de nove e oito semanas, respectivamente, para o período chuvoso. No período chuvoso, maior número de L3 foi recuperado nas fezes e, no período seco, na gramínea. Condições climáticas influenciaram diretamente o número larvas infectantes. Pela análise multivariada, ficou demonstrado uma forte relação entre o tempo e o número de L3 nas fezes, sendo esta relação menos acentuada para a gramínea. Não se observou diferença significativa entre os horários de coleta.

Influência das condições climáticas na migração e sobrevivência de larvas infectantes de ciatostomíneos em Brachiaria humidicola, na Baixada Fluminense do Rio de Janeiro, Brasil / Climatic influence on the development and migration of cyathostominae infective larvae on Brachiaria humidicola in a southeastern tropical region of Brazil

O desenvolvimento e a migração de la rvas infectantes (L3) de ciatostomíneos nas fezes e na pastagem foram avaliados durante o período de setembro de 2004 a setembro de 2006, na região de Baixada Fluminense, RJ, Brasil. Amostras de fezes e gramínea foram processadas pela técnica de Baermann para recuperação de larvas infectantes. Observou-se que a maioria das larvas infectantes foram recuperadas durante o período seco nas fezes (29.158 L3 kg-1 MS), no ápice (458 L3 kg-1 MS) e na base da gramínea (725 L3 kg-1MS). A maior recuperação de L3 foi observada durante o período da manhã, no entanto, não foi observada diferença significativa entre os três horários de coleta. A sobrevivência das larvas nas fezes e na base da gramínea foi maior durante o período seco, já para o ápice da gramínea a sobrevivência foi mais elevada no período chuvoso. Variáveis ambientais exerceram forte influência na recuperação das L3, índice pluviométrico e temperatura amena, foram responsáveis pela grande recuperação de L3 durante o período seco. Os resultados obtidos no presente estudo demonstraram a presença de larvas infectantes de ciatostomíneos durante todo o ano em pastagens da Baixada Fluminense, Brasil(AU)

The development and migration of Cyathsotominae infective larvae (L3) to herbage from experimentally deposited feces samples was evaluated for 24 months in the Baixada Fluminense region of the state of Rio de Janeiro, Brazil. Samples of feces and grass were processed by the Bearmann technique to recover the infective larvae. The greatest number of larvae were recovered in the dry season in the feces (29.158 L3 kg-1dh), grass apex (458 L3 kg-1 dh) and base (725 L3 kg-1dh). Time of day was not significantly related to the number of L3 recovered although larval recovery was greatest in the morning. Larval survival was highest in the feces and grass base in the dry period, and in the rainy period the greatest survival was observed in the grass apex. Climate variables had a strong influence on the number of larvae recovered. Temperature and rainfall were responsible for the greater L3 recovery in the dry period. The cyathostomin infective larvae were present during all months of the year in horse pastures in the Baixada Fluminense region of Brazil(AU)

Influência das condições climáticas na migração e sobrevivência de larvas infectantes de ciatostomíneos em Brachiaria humidicola, na Baixada Fluminense do Rio de Janeiro, Brasil / Climatic influence on the development and migration of cyathostominae infective larvae on Brachiaria humidicola in a southeastern tropical region of Brazil

O desenvolvimento e a migração de la rvas infectantes (L3) de ciatostomíneos nas fezes e na pastagem foram avaliados durante o período de setembro de 2004 a setembro de 2006, na região de Baixada Fluminense, RJ, Brasil. Amostras de fezes e gramínea foram processadas pela técnica de Baermann para recuperação de larvas infectantes. Observou-se que a maioria das larvas infectantes foram recuperadas durante o período seco nas fezes (29.158 L3 kg-1 MS), no ápice (458 L3 kg-1 MS) e na base da gramínea (725 L3 kg-1MS). A maior recuperação de L3 foi observada durante o período da manhã, no entanto, não foi observada diferença significativa entre os três horários de coleta. A sobrevivência das larvas nas fezes e na base da gramínea foi maior durante o período seco, já para o ápice da gramínea a sobrevivência foi mais elevada no período chuvoso. Variáveis ambientais exerceram forte influência na recuperação das L3, índice pluviométrico e temperatura amena, foram responsáveis pela grande recuperação de L3 durante o período seco. Os resultados obtidos no presente estudo demonstraram a presença de larvas infectantes de ciatostomíneos durante todo o ano em pastagens da Baixada Fluminense, Brasil

The development and migration of Cyathsotominae infective larvae (L3) to herbage from experimentally deposited feces samples was evaluated for 24 months in the Baixada Fluminense region of the state of Rio de Janeiro, Brazil. Samples of feces and grass were processed by the Bearmann technique to recover the infective larvae. The greatest number of larvae were recovered in the dry season in the feces (29.158 L3 kg-1dh), grass apex (458 L3 kg-1 dh) and base (725 L3 kg-1dh). Time of day was not significantly related to the number of L3 recovered although larval recovery was greatest in the morning. Larval survival was highest in the feces and grass base in the dry period, and in the rainy period the greatest survival was observed in the grass apex. Climate variables had a strong influence on the number of larvae recovered. Temperature and rainfall were responsible for the greater L3 recovery in the dry period. The cyathostomin infective larvae were present during all months of the year in horse pastures in the Baixada Fluminense region of Brazil