Renovação de diluidor na tecnologia de sêmen de pequenos ruminantes / Extender renewal in the technology of small ruminants semen

O objetivo desta revisão foi compilar o que se tem na literatura a respeito do efeito da renovação de diluidor seminal, mediante centrifugação, na qualidade do sêmen refrigerado de caprinos e ovinos e no tempo de viabilidade seminal. Um dos primeiros estudos publicados com essa metodologia foi realizado com sêmen de cão, em 2005, por Verstegen et al., seguido por estudos em outras espécies, como a equina e suína. Nosso grupo de pesquisa desenvolveu alguns estudos com diferentes metodologias para avaliar a eficiência do método, a necessidade do uso da centrífuga refrigerada nesse processo, o uso de antioxidantes no diluidor para renovação e o tempo de renovação do diluidor em pequenos ruminantes.(AU)

The objective of this revision was to compile what exists in literature regarding the effect of seminal diluent renewal, through centrifugation, in the quality of cooled semen of goat and sheep and during seminal viability time. One of the first studies published with this methodology was performed with dog semen in 2005 by Verstegen et al., followed by studies in other species, such as equine and swine. Our research group developed some studies using different methodologies to evaluate method efficiency, the need to use a cooled centrifuge in this process, the use of antioxidants in the diluent for renewal and the diluent renewal time in small ruminants.(AU)

Refrigeração de sêmen canino em meio diluente à base de água de coco (Cocos nucifera) natural / Canine semen refrigeration in a natural coconut water (Cocos nucifera)-based extender / Refrigeración de semen canino en un medio diluyente natural a base de agua de coco (Cocos nucifera)

A inseminação artificial em cadelas contribui para o melhoramento genético da espécie, previne algumas doenças sexualmente transmissíveis a partir da cópula e possibilita a reprodução de animais que não poderiam copular de forma natural, seja por motivos anatômicos, geográficos ou comportamentais. Todavia, nem sempre é possível utilizar o sêmen fresco, sendo assim necessário um diluente para resfriar e mantê-lo viável por determinado período. Diante disso, o objetivo com este trabalho foi analisar o sêmen canino diluído em água de coco e refrigerado, à 5 ºC em diferentes tempos. Foram utilizados cinco cães da raça Hounds do Brasil, realizando três colheitas de sêmen de cada animal, com intervalos de sete dias. Os ejaculados foram mantidos a temperatura de 37ºC e realizado análises macroscópicas (volume, cor, aspecto e odor) e microscópicas (motilidade, vigor, concentração e morfologia espermática). Em seguida, os ejaculados foram diluídos em água de coco natural a uma concentração de 200 milhões de espermatozoides/mL, e mantidos à temperatura de 5 °C, por até 72 horas. Nos intervalos de seis, doze, vinte e quatro, trinta e seis, quarenta e oito, e setenta e duas horas, as amostras foram avaliadas quanto a motilidade e vigor espermático. Os ejaculados frescos apresentaram em média volume de 6,2 mL, cor branca, aspecto aquoso a leitoso, odor "sui generis", motilidade espermática de 89,5 %, vigor espermático 4,3, concentração média de 418 x106espermatozoides/mL e 7,3% de alterações patológicas. Após o início do resfriamento à 5 ºC, os valores de motilidade e vigor diminuíram com o passar do tempo, sendo os menores valores encontrados após 48 e 72 horas. O diluente a água de coco in natura mostrou-se eficiente para refrigeração de sêmen canino, à 5 ºC, conservando-o por um período de até 36h após a colheita, conforme preconizado pelo Colégio Brasileiro de Reprodução Animal.(AU)

improvement of the species, prevents some sexually transmitted diseases through copulation and allows the reproduction of animals that could not copulate naturally, either for anatomical, geographic or behavioral reasons. However, it is not always possible to use fresh semen, thus requiring a diluent to cool and keep it viable for a certain period. Therefore, the objective of this work was to analyze canine semen diluted in coconut water and refrigerated at 5 ºC at different times. Five Brazilian Hounds were used, performing three semen collections from each animal, with intervals of seven days. The ejaculates were kept at a temperature of 37 ºC and macroscopic (volume, color, appearance and odor) and microscopic (motility, vigor, concentration and sperm morphology) analyzes were performed. Then, the ejaculates were diluted in natural coconut water at a concentration of 200 million sperm/mL, and kept at a temperature of 5 °C for up to 72 hours. At intervals of six, twelve, twenty-four, thirty-six, forty-eight, and seventy-two hours, samples were evaluated for sperm motility and vigor. Fresh ejaculates had an average volume of 6.2 mL, white color, watery to milky appearance, "sui generis" odor, 89.5% sperm motility, 4.3 sperm vigor, average concentration of 418 x106 spermatozoa/mL and 7.3%pathological changes. After the beginning of cooling at 5 °C, the values of motility and vigor decreased over time, with the lowest values found after 48 and 72 hours. The in natura coconut water extender proved to be efficient for cooling canine semen at5 ºC, keeping it for a period of up to 36 hours after harvest, as recommended by the Brazilian College of Animal Reproduction.(AU)

Artificial insemination in bitches contributes to the genetic La inseminación artificial en perras contribuye a la mejora genética de la especie, previene algunas enfermedades de transmisión sexual a través de la cópula y permite la reproducción de animales que no podrían copular de forma natural, ya sea por razones anatómicas, geográficas o de comportamiento. Sin embargo, no siempre es posible utilizar semen fresco, por lo que se requiere un diluyente para enfriarlo y mantenerlo viable durante un cierto período. Por tanto, el objetivo de este trabajo fue analizar semen canino diluido en agua de coco y refrigerado a 5 ºC en diferentes tiempos. Se utilizaron cinco sabuesos brasileños, realizándose tres colectas de semen de cada animal, con intervalos de siete días. Los eyaculados se mantuvieron a una temperatura de 37 ºC y se realizaron análisis macroscópicos (volumen, color, apariencia y olor) y microscópicos (motilidad, vigor, concentración y morfología espermática). Luego, los eyaculados se diluyeron en agua de coco natural a una concentración de 200 millones de espermatozoides/mL y se mantuvieron a una temperatura de 5 °C hasta por 72 horas. A intervalos de seis, doce, veinticuatro, treinta y seis, cuarenta y ocho y setenta y dos horas, se evaluó la motilidad y el vigor de los espermatozoides en las muestras. Los eyaculados frescos tuvieron un volumen promedio de 6,2 mL, color blanco, apariencia acuosa a lechosa, olor "sui generis", motilidad espermática de 89,5%, vigor espermático de 4,3, concentración promedio de 418 x106 espermatozoides/mL y cambios patológicos de 7,3%. Después del inicio del enfriamiento a 5 °C, los valores de motilidad y vigor disminuyeron con el tiempo, encontrándose los valores más bajos a las 48 y 72 horas. El diluyente de agua de coco in natura demostró ser eficaz para enfriar el semen canino a5 ºC, manteniéndolo por un período de hasta 36 horas después de la cosecha, según lo recomendado por el Colegio Brasileño de Reproducción Animal.(AU)

Effect of Different Extenders on Sperm Motility and Vitality in Goose Semen Cryopreservation

This study aimed to investigate the usability of different diluents containing 6% Dimethylformamide (DMF) for cryo-preservation of the semen of geese (Anser cygnoides). The diluents of Glucose (G), Tris-Glucose (T), Lactated Ringer's-Glucose (LG), and Lactated Ringer's (L), all of which contained 6% DMF, were used as cryoprotectants. The researchers collected semen samples from four geese, twice a week over a four-week period, by means of abdominal massage; they then calculated how much sperm each goose ejaculated. Next, the semen samples were pooled and their spermatological parameters were determined. Their volume (4x (mL)), concentration (×108/mL), pH, motility (%), and vitality (%) rates were 0.31±0.01, 3.49±0.32, 7.13±1.06, 67.75±1.28, and 70.00±2.03, respectively. Then, these pooled semen samples were equally divided into four groups. Once they were frozen and thawed, the researchers discovered that the diluent L had the highest motility rate: 40.12% ± 1.35. The motility rates of the other diluents were as follows: LG (28.25%± 1.48), G (21.50% ± 1.41), and T (5.12% ± 0.83). Likewise, the vitality rates (%) of the diluents were as follows: L (41.93% ±1.87), LG (31.50%±1.88), G (29.43% ±1.45), and T (10.56%±1.34), respectively. Freezing and thawing appeared to lower each diluent's vitality and motility rates. However, for the Lactated Ringer's (L), this decrease was predictable. Therefore, Lactated Ringer's diluent containing 6% DMF can be used in cryo-preservation of goose semen.(AU)

Trehalose addition to a Tris-fructose egg yolk extender on quality of ram sperm preserved at 0 °C

The present study investigated the effects of various concentrations of trehalose in Tris-fructose egg yolk diluent on ram semen preservation at 0 ℃. Semen was collected by artificial vagina ejaculation from six rams of proven fertility. High-quality ejaculates were diluted with 0 (control), 5, 10, 15, and 20 mM trehalose of Tris-fructose egg yolk extender and control (tris-fructose egg yolk extender without trehalose), respectively. Then, the ejaculates were diluted to a concentration of 5×108 sperm/mL, cooled to 0 ℃ for 90 min, and maintained at that temperature for twelve days. The diluted semen samples were examined, and their sperm progressive motility, membrane functionality, and acrosome integrity recorded at 0, 24, 72, 144, 216, and 288 h. Two hundred ninety-six ewes were transcervically inseminated with the 216-h control (without trehalose) or the optimal trehalose concentration group semen, and the pregnancy and lambing rates were measured. No significant differences were established in the sperm progressive motility and membrane functionality among the control and 5, 10, 15, and 20 mM groups. The sperm samples of trehalose addition groups had no significant difference in the acrosome integrity of sperm, but they were, nonetheless, significantly higher than those in the control. No significant difference was detected in the lambing and pregnancy rates between the 5 mM and control groups. These results suggest that ram sperm is capable of fertilization after cooling and preservation at 0 ℃ by the use of 5 mM trehalose for Tris-fructose egg yolk diluent. Under these conditions, ram sperm can be more effectively preserved than under other four concentrations of diluents.(AU)

Diluente Tris suplementado com óleo de Mauritia flexuoxa sobre a qualidade do sêmen caprino após a criopreservação / Tris diluent supplemented with Mauritia flexuoxa oil on the quality of goat semen after cryopreservation

Objetivou-se verificar os efeitos, nos parâmetros espermáticos, na integridade mitocondrial, acrossomal e de membrana em células espermáticas, desencadeados pelo uso do Tris (Tris hidroximetil aminometano) suplementado com óleo de Mauritia flexuoxa como diluente para criopreservação de sêmen caprino. Quatro caprinos clinicamente saudáveis foram utilizados. Os animais eram alimentados diariamente com volumoso (Pennisetum purpureum, Schum.), concentrado (ração peletizada com teor de 20% proteína, 300 g/animal/dia) e sal mineral específico para Caprinos (Caprinofós®), à vontade. Dois ensaios foram realizados: I Teste de toxicidade; II Criopreservação do sêmen com concentrações ideais. No teste de toxicidade as concentrações avaliadas foram: 5%, 10%, 15% e 20% de diluente a base de óleo de Mauritia flexuoxa. Após o teste de toxicidade, foi escolhido a concentração que apresentou o melhor resultado (5%). Logo após, foram realizadas mais 32 coletas, que foram diluídas em Tris-gema-glicerol (grupo controle) ou diluente contendo óleo vegetal (Mauritia flexuoxa). As amostras foram criopreservadas com auxílio do aparelho Tk3000®. Após o período mínimo de uma semana as palhetas foram descongeladas em banho-maria a 37 °C por 30 segundos, acondicionadas em microtubos de centrifugação e homogeneizadas para a análise imediata de motilidade, vigor espermático e morfologia. Em seguida, por meio de sondas fluorescentes foram avaliadas a integridade de acrossomo, membrana plasmática (Diacetato de Carboxifluresceína e Iodeto de Propídeo) e função mitocondrial sob microscopia de epifluorescência. Quanto a motilidade e vigor, integridade mitocondrial e acrossomal, o grupo buriti foi inferior ao grupo controle. O Tris suplementado com óleo de Mauritia flexuoxa na concentração de 5% não influenciou significativamente a qualidade espermática, porém, observouse morfologia e integridade de membrana favoráveis. Dessa forma, sendo uma alternativa para substituição de diluentes a base de produtos de origem animal.(AU)

The objective was to verify the effects, sperm parameters, mitochondrial, acrosomal and membrane integrity in sperm cells, triggered by the use of Tris (Tris hydroxymethyl aminomethane) supplemented with Mauritia flexuoxa oil as a diluent for cryopreservation of goat semen. Four goats clinically healthy were used. The animals were fed daily with bulky (Pennisetum purpureum, Schum.), concentrate (pelleted feed with 20% protein content, 300 g / animal / day) and mineral salt Specific for Goats (Caprinofós®), ad libitum. Two tests were carried out: I - Toxicity test; II - Semen cryopreservation with ideal concentrations. In the toxicity test as selected were: 5%, 10%, 15% and 20% of Mauritia flexuoxa oil-based diluent. After the toxicity test, the concentration that showed the best result (5%) was chosen. Soon after, a further 32 samples were obtained, which were diluted in Tris-glycerol (control group) or diluent containing vegetable oil (Mauritia flexuoxa). The samples were cryopreserved using the Tk3000® machine. After a minimum of one week, the samples were thawed in a 37 ° C water bath for 30 seconds, packed in centrifugation microtubes and homogenized for immediate analysis of motility, sperm vigor and morphology. Then, by means of fluorescent probes, the integrity of the acrosome, plasma membrane (Carboxyflurescein diacetate and Propidium Iodide) and mitochondrial function under epifluorescence microscopy were evaluated. As for motility and vigor, mitochondrial and acrosomal integrity, the buriti group was inferior to the control group. Tris supplemented with Mauritia flexuoxa oil at a concentration of 5% did not significantly influence sperm quality, however, favorable motility, morphology and membrane integrity were observed. Thus, being an alternative to replace diluents based on products of animal origin.(AU)

Diluente Tris suplementado com óleo de Mauritia flexuoxa sobre a qualidade do sêmen caprino após a criopreservação / Tris diluent supplemented with Mauritia flexuoxa oil on the quality of goat semen after cryopreservation

Objetivou-se verificar os efeitos, nos parâmetros espermáticos, na integridade mitocondrial, acrossomal e de membrana em células espermáticas, desencadeados pelo uso do Tris (Tris hidroximetil aminometano) suplementado com óleo de Mauritia flexuoxa como diluente para criopreservação de sêmen caprino. Quatro caprinos clinicamente saudáveis foram utilizados. Os animais eram alimentados diariamente com volumoso (Pennisetum purpureum, Schum.), concentrado (ração peletizada com teor de 20% proteína, 300 g/animal/dia) e sal mineral específico para Caprinos (Caprinofós®), à vontade. Dois ensaios foram realizados: I – Teste de toxicidade; II – Criopreservação do sêmen com concentrações ideais. No teste de toxicidade as concentrações avaliadas foram: 5%, 10%, 15% e 20% de diluente a base de óleo de Mauritia flexuoxa. Após o teste de toxicidade, foi escolhido a concentração que apresentou o melhor resultado (5%). Logo após, foram realizadas mais 32 coletas, que foram diluídas em Tris-gema-glicerol (grupo controle) ou diluente contendo óleo vegetal (Mauritia flexuoxa). As amostras foram criopreservadas com auxílio do aparelho Tk3000®. Após o período mínimo de uma semana as palhetas foram descongeladas em banho-maria a 37 °C por 30 segundos, acondicionadas em microtubos de centrifugação e homogeneizadas para a análise imediata de motilidade, vigor espermático e morfologia. Em seguida, por meio de sondas fluorescentes foram avaliadas a integridade de acrossomo, membrana plasmática (Diacetato de Carboxifluresceína e Iodeto de Propídeo) e função mitocondrial sob microscopia de epifluorescência. Quanto a motilidade e vigor, integridade mitocondrial e acrossomal, o grupo buriti foi inferior ao grupo controle. O Tris suplementado com óleo de Mauritia flexuoxa na concentração de 5% não influenciou significativamente a qualidade espermática, porém, observouse morfologia e integridade de membrana favoráveis. Dessa forma, sendo uma alternativa para substituição de diluentes a base de produtos de origem animal.

The objective was to verify the effects, sperm parameters, mitochondrial, acrosomal and membrane integrity in sperm cells, triggered by the use of Tris (Tris hydroxymethyl aminomethane) supplemented with Mauritia flexuoxa oil as a diluent for cryopreservation of goat semen. Four goats clinically healthy were used. The animals were fed daily with bulky (Pennisetum purpureum, Schum.), concentrate (pelleted feed with 20% protein content, 300 g / animal / day) and mineral salt Specific for Goats (Caprinofós®), ad libitum. Two tests were carried out: I - Toxicity test; II - Semen cryopreservation with ideal concentrations. In the toxicity test as selected were: 5%, 10%, 15% and 20% of Mauritia flexuoxa oil-based diluent. After the toxicity test, the concentration that showed the best result (5%) was chosen. Soon after, a further 32 samples were obtained, which were diluted in Tris-glycerol (control group) or diluent containing vegetable oil (Mauritia flexuoxa). The samples were cryopreserved using the Tk3000® machine. After a minimum of one week, the samples were thawed in a 37 ° C water bath for 30 seconds, packed in centrifugation microtubes and homogenized for immediate analysis of motility, sperm vigor and morphology. Then, by means of fluorescent probes, the integrity of the acrosome, plasma membrane (Carboxyflurescein diacetate and Propidium Iodide) and mitochondrial function under epifluorescence microscopy were evaluated. As for motility and vigor, mitochondrial and acrosomal integrity, the buriti group was inferior to the control group. Tris supplemented with Mauritia flexuoxa oil at a concentration of 5% did not significantly influence sperm quality, however, favorable motility, morphology and membrane integrity were observed. Thus, being an alternative to replace diluents based on products of animal origin.

Eficiência de duas técnicas de recuperação de espermatozoides epididimários de cães e avaliação seminal pós-criopreservação / [Efficiency of two techniques for recovering epididymal spermatozoids from dogs and seminal evaluation post cryopreservation]

O objetivo deste trabalho foi avaliar a recuperação de espermatozoides epididimários de cães castrados, utilizando as técnicas de fluxo retrógrado (FR) e flutuação (FL) em diluidor Tris-gema, antes e após a criopreservação. Foram coletados 30 complexos testículo-epididímos (CTE), sendo 15 para FR e 15 para FL, e, logo após a recuperação dos espermatozoides, foram analisadas as alterações morfológicas nessas células espermáticas. Após a adição do diluidor, foram avaliados os parâmetros de motilidade total (MOT) e vigor (V) espermáticos. O sêmen pós-criopreservado foi submetido ao teste de termorresistência nos tempos T0, T30, T60 e T90 minutos, além da avaliação das membranas plasmática e acrossomal por sondas fluorescentes. Não houve diferença estatística entre as técnicas quanto à MOT e ao vigor no sêmen diluído (FR-MOT: 82,3% e V: 3,4; FL-MOT: 79,6% e V: 3,2) e pós-criopreservado (FR-MOT: 34% e V: 2,8; FL-MOT: 30% e V: 2,7). A partir do T30, houve diferença significativa quanto à MOT e ao vigor nas técnicas utilizadas, e o tempo também prejudicou o acrossoma espermático a partir do T30. Conclui-se que as técnicas de recuperação de espermatozoides epididimários de cães castrados, testadas neste trabalho, podem ser utilizadas para refrigeração e criopreservação de sêmen.(AU)

The objective of this work was to evaluate the recovery of epididymal spermatozoa from castrated dogs using retrograde flow (FL) and flotation (FL) techniques in Tris-egg yolk diluent, before and after cryopreservation. Thirty testicle-epididymal complexes (CTE) were collected, 15 for FR and 15 for FL and soon after spermatozoid recovery, morphological changes in these spermatic cells were analyzed. After addition of the diluent, the parameters of total motility (MOT) and vigor (V) were evaluated. The post-cryopreserved semen was submitted to thermoresistance (TTR) test at T0, T30, T60 and T90 minutes, as well as the plasma and acrosomal membrane evaluation by fluorescent probes. There was no statistically significant difference between techniques tested for MOT and vigor in the diluted semen (FR-MOT: 82.3% and V: 3.4, FL-MOT: 79.6% and V: 3.2) and post-cryopreserved (FR-MOT: 34% and V: 2.8, FL-MOT: 30% and V: 2.7). From the T30 there was a significant difference regarding MOT and vigor in the used techniques, and the time also damaged the spermatic acrosome from the T30. It is concluded that the epididymal spermatozoa recovering techniques from castrated dogs, tested in this study, can be used for semen refrigeration and cryopreservation.(AU)

Efeito da adição de antioxidantes sobre a viabilidade do sêmen bovino / Addition of antioxidants on the feasibility of bovine semen / Efecto de la adición de antioxidantes bajo la viabilidad del semen bovino

Os antioxidantes atuam no combate aos efeitos nocivos provocados pelos radicais livres, proporcionando melhor qualidade do sêmen fresco e criopreservado. As mudanças de temperatura provocadas durante os processos de congelação e descongelação são responsáveis pelos danos aos espermatozoides, alterando sua viabilidade e fertilidade. O estudo dos antioxidantes, os quais constituem a primeira linha de combate às espécies reativas de oxigênio (EROs), para a melhora da qualidade do sêmen criopreservado, torna-se de fundamental importância, para desenvolvimento de protocolos padrões e aplicáveis, uma vez que existem muitas controvérsias em relação ao tipo de molécula antioxidante e às doses, o momento adequado para ser acrescentado e possíveis alterações destes aos meios de criopreservação. Assim, este trabalho tem como objetivo estudar o efeito dos antioxidantes: catalase, α-tocoferol e piruvato de sódio adicionados em meio diluidor comercial para melhorar a viabilidade do sêmen bovino criopreservado. Inicialmente foram utilizados três touros, da raça Brahman, selecionados de acordo com o escore de condição corporal e exame andrológico. Oito ejaculados foram colhidos por eletroejaculação e imediatamente avaliados a motilidade e o vigor espermático. Em seguida, foram diluídos conforme os grupos experimentais em meio Botubov® (Botupharma Biotecnologia Animal) com adição do antioxidante piruvato de sódio nas concentrações de 1,5 µM, 3 µM e 5 µM e em seguida, as amostras foram congeladas. Numa segunda etapa, serão utilizados outros antioxidantes e concentrações, conforme descrito: 1) Diluidor BotuBov®; 2) Diluidor BotuBov® contendo 7% de crioprotetor e catalase nas concentrações de 20, 80 e 200 UI; 3) Diluidor BotuBov® contendo 7% de crioprotetor e α-tocoferol nas concentrações de 50 µM, 100 µM e 150 µM; 4) Diluidor BotuBov® contendo 7% de crioprotetor e piruvato de sódio nas concentrações de 1,5 µM; 3,5 µM e 5 µM. Após a descongelação do sêmen com a utilização do piruvato, as amostras foram analisadas quanto à motilidade total e progressiva e vigor espermático. Verificou-se que a adição de piruvato de sódio na concentração de 1,5 µM proporcionou uma melhora nos parâmetros de motilidade total e vigor espermático, demonstrando os benefícios de seu uso.(AU)

Antioxidants act in fighting the harmful effects caused by free radicals, providing better quality of both fresh and cryopreserved semen. Changes in temperature caused during the freezing and thawing processes are responsible for damages to the sperm, changing their viability and fertility. The study of antioxidants, which constitute the first line of combat against reactive oxygen species (ROS) to improve the quality of cryopreserved semen, is of utmost importance for the development of standard and applicable protocols, since there are many controversies regarding the type and the doses of antioxidant molecules, the timing for its addition and likely changes to the cryopreservation media. This paper aims at studying the effects of catalase, α-tocopherol, and sodium pyruvate when added to commercial diluent medium to improve the viability of cryopreserved bovine semen. Initially, three Brahman bulls were selected according to the body condition score and andrological examination. Eight ejaculates were collected by electroejaculation, with motility and spermatic vigor being immediately assessed. Subsequently, the samples were diluted according to the experimental groups in Botubov® (Botupharma Animal Biotechnology) medium with the addition of sodium pyruvate at concentrations of 1.5 µM, 3 µM and 5 µM and were subsequently frozen. In a second step, other antioxidants and concentrations will be used, as follows: 1) BotuBov® Diluent; 2) BotuBov® diluent containing 7% cryoprotectant and catalase at concentrations of 20, 80 and 200 IU; 3) BotuBov® diluent containing 7% cryoprotectant and α-tocopherol at concentrations of 50 µM, 100 µM and 150 µM; 4) BotuBov® diluent containing 7% cryoprotectant and sodium pyruvate at concentrations of 1.5 µM; 3.5 µM and 5 µM. After thawing the semen with pyruvate, the samples were analyzed for total and progressive motility and spermatic vigor. It was found that the addition of 1.5 µM sodium pyruvate provided an improvement in total motility and sperm vigor parameters, demonstrating the benefits of its use.(AU)

Los antioxidantes actúan en el combate a los efectos nocivos provocados por los radicales libres, proporcionando mejor calidad del semen fresco y criopreservado. Los cambios de temperatura provocados durante los procesos de congelación y descongelación son responsables por los daños a los espermatozoides, alterando su viabilidad y fertilidad. El estudio de los antioxidantes, que constituyen la primera línea de combate a las especies reactivas de oxígeno (ERO), para la mejora de la calidad del semen criopreservado, se hace de fundamental importancia para el desarrollo de protocolos estándares y aplicables, ya que existen muchas controversias en relación al tipo de molécula antioxidante y a las dosis, el momento adecuado para ser añadido y posibles alteraciones de éstos a los medios de criopreservación. Así, este estudio ha tenido como objetivo estudiar el efecto de los antioxidantes: catalasa, α-tocoferol y piruvato de sodio añadidos en medio diluidor comercial para mejorar la viabilidad del semen bovino criopreservado. Inicialmente se utilizaron tres toros, de la raza Brahman, seleccionados de acuerdo con la puntuación de condición corporal y examen andrológico. Ocho eyaculados fueron recogidos por electroejaculación e inmediatamente evaluados la motilidad y el vigor espermático. A continuación, se diluyeron de acuerdo con los grupos experimentales en medio Botubov (Botupharma Biotecnología Animal) con adición de antioxidante piruvato de sodio a concentraciones de 1,5 µM, 3 µM y 5 µM, y luego las muestras se congelaron. En una segunda etapa, se utilizarán otros antioxidantes y concentraciones, según se describe: 1) Diluidor BotuBov®; 2) Diluidor BotuBov® conteniendo 7% de crioprotector y catalasa en las concentraciones de 20, 80 y 200 UI; 3) Diluidor BotuBov® que contiene 7% de crioprotector y α-tocoferol en las concentraciones de 50 µM, 100 µM y 150 µM; 4) Diluidor BotuBov® conteniendo 7% de crioprotector y piruvato de sodio en las concentraciones de 1,5 µM; 3,5 µM y 5 µM. Después de la descongelación del semen con la utilización del piruvato, las muestras fueron analizadas en cuanto a la motilidad total y progresiva y vigor espermático. Se comprobó que la adición de piruvato de sodio en la concentración de 1,5 µM proporcionó una mejora en los parámetros de motilidad total y vigor espermático, demostrando los beneficios de su uso.(AU)

Qualidade espermática durante a curva de resfriamento do sêmen suíno diluído em água de coco em pó visando sua criopreservação / Sperm quality during the cooling curve of swine semen diluted in coconut water extender aiming your cryopreservation

A criopreservação seminal apresenta baixos resultados produtivos. Objetivou-se testar a Água de Coco em Pó (ACP-103®) como diluente de ressuspensão após a descongelação seminal e avaliar a qualidade espermática durante a curva de resfriamento até a descongelação do sêmen. Para isso, o sêmen de 15 reprodutores foi coletado uma vez por semana, incubado a 30 oC por 15 minutos, e em seguida diluído em Beltsville Thawing Solution – BTS (controle) ou em ACP-103®, e submetidos a uma curva de resfriamento lenta, onde foram feitas análises de vigor e motilidade em cada passo. O sêmen descongelado foi ressuspenso em seus respectivos diluentes e analisado quanto às características: vigor, motilidade, vitalidade, integridade acrossomal e funcionalidade da membrana. Durante as análises de vigor e motilidade que compõem a curva de resfriamento, e na descongelação, para as análises de vitalidade e membrana acrossomal intacta, observou-se que não houve diferença significativa entre os tratamentos. Já após a descongelação, o BTS apresentou melhores resultados de vigor, motilidade espermática e funcionalidade da membrana. No entanto, a curva de resfriamento e o ACP-103® podem ser utilizadas no protocolo de criopreservação do sêmen suíno, visto que ambas asseguraram qualidade da viabilidade espermática.

Semen cryopreservation is associated with low productivity results. This study aimed to test the Coconut Water Powder (ACP®-103) as a ressuspension diluent after thawing semen, also evaluate sperm quality during the cooling curve until thawing of the semen. For this, the semen was collected from 15 boars once a week, incubated at 30 °C for 15 minutes, and afterwards, the samples were diluted in the diluent Beltsville Thawing Solution – BTS (Control) or ACP-103®, and subjected to a slow cooling curve, where the force and the motility were analyzed in each step. The thawed semen was ressuspended in its respective solvents and analyzed in the characteristics of vigor, motility, vitality, acrosome integrity and functionality of the membrane. During the analysis of vigor and motility that make up the cooling curve, and thawing, for analysis of vitality and intact acrosomal membrane, it was observed that there was no significant difference between treatments. Besides, after thawing, the BTS showed better results of sperm vigor, sperm motility and membrane functionality. However, the cooling curve and coconut water powder can be used in the protocol for cryopreservation of boar semen, as both ensured quality of sperm viability that may be used in artificial insemination.

Qualidade espermática durante a curva de resfriamento do sêmen suíno diluído em água de coco em pó visando sua criopreservação / Sperm quality during the cooling curve of swine semen diluted in coconut water extender aiming your cryopreservation

A criopreservação seminal apresenta baixos resultados produtivos. Objetivou-se testar a Água de Coco em Pó (ACP-103®) como diluente de ressuspensão após a descongelação seminal e avaliar a qualidade espermática durante a curva de resfriamento até a descongelação do sêmen. Para isso, o sêmen de 15 reprodutores foi coletado uma vez por semana, incubado a 30 oC por 15 minutos, e em seguida diluído em Beltsville Thawing Solution BTS (controle) ou em ACP-103®, e submetidos a uma curva de resfriamento lenta, onde foram feitas análises de vigor e motilidade em cada passo. O sêmen descongelado foi ressuspenso em seus respectivos diluentes e analisado quanto às características: vigor, motilidade, vitalidade, integridade acrossomal e funcionalidade da membrana. Durante as análises de vigor e motilidade que compõem a curva de resfriamento, e na descongelação, para as análises de vitalidade e membrana acrossomal intacta, observou-se que não houve diferença significativa entre os tratamentos. Já após a descongelação, o BTS apresentou melhores resultados de vigor, motilidade espermática e funcionalidade da membrana. No entanto, a curva de resfriamento e o ACP-103® podem ser utilizadas no protocolo de criopreservação do sêmen suíno, visto que ambas asseguraram qualidade da viabilidade espermática.(AU)

Semen cryopreservation is associated with low productivity results. This study aimed to test the Coconut Water Powder (ACP®-103) as a ressuspension diluent after thawing semen, also evaluate sperm quality during the cooling curve until thawing of the semen. For this, the semen was collected from 15 boars once a week, incubated at 30 °C for 15 minutes, and afterwards, the samples were diluted in the diluent Beltsville Thawing Solution BTS (Control) or ACP-103®, and subjected to a slow cooling curve, where the force and the motility were analyzed in each step. The thawed semen was ressuspended in its respective solvents and analyzed in the characteristics of vigor, motility, vitality, acrosome integrity and functionality of the membrane. During the analysis of vigor and motility that make up the cooling curve, and thawing, for analysis of vitality and intact acrosomal membrane, it was observed that there was no significant difference between treatments. Besides, after thawing, the BTS showed better results of sperm vigor, sperm motility and membrane functionality. However, the cooling curve and coconut water powder can be used in the protocol for cryopreservation of boar semen, as both ensured quality of sperm viability that may be used in artificial insemination.(AU)

Efeito da adição de antioxidantes sobre a viabilidade do sêmen bovino / Addition of antioxidants on the feasibility of bovine semen / Efecto de la adición de antioxidantes bajo la viabilidad del semen bovino

Os antioxidantes atuam no combate aos efeitos nocivos provocados pelos radicais livres, proporcionando melhor qualidade do sêmen fresco e criopreservado. As mudanças de temperatura provocadas durante os processos de congelação e descongelação são responsáveis pelos danos aos espermatozoides, alterando sua viabilidade e fertilidade. O estudo dos antioxidantes, os quais constituem a primeira linha de combate às espécies reativas de oxigênio (EROs), para a melhora da qualidade do sêmen criopreservado, torna-se de fundamental importância, para desenvolvimento de protocolos padrões e aplicáveis, uma vez que existem muitas controvérsias em relação ao tipo de molécula antioxidante e às doses, o momento adequado para ser acrescentado e possíveis alterações destes aos meios de criopreservação. Assim, este trabalho tem como objetivo estudar o efeito dos antioxidantes: catalase, α-tocoferol e piruvato de sódio adicionados em meio diluidor comercial para melhorar a viabilidade do sêmen bovino criopreservado. Inicialmente foram utilizados três touros, da raça Brahman, selecionados de acordo com o escore de condição corporal e exame andrológico. Oito ejaculados foram colhidos por eletroejaculação e imediatamente avaliados a motilidade e o vigor espermático.(AU)

Antioxidants act in fighting the harmful effects caused by free radicals, providing better quality of both fresh and cryopreserved semen. Changes in temperature caused during the freezing and thawing processes are responsible for damages to the sperm, changing their viability and fertility. The study of antioxidants, which constitute the first line of combat against reactive oxygen species (ROS) to improve the quality of cryopreserved semen, is of utmost importance for the development of standard and applicable protocols, since there are many controversies regarding the type and the doses of antioxidant molecules, the timing for its addition and likely changes to the cryopreservation media. This paper aims at studying the effects of catalase, α-tocopherol, and sodium pyruvate when added to commercial diluent medium to improve the viability of cryopreserved bovine semen. Initially, three Brahman bulls were selected according to the body condition score and andrological examination. Eight ejaculates were collected by electroejaculation, with motility and spermatic vigor being immediately assessed.(AU)

Los antioxidantes actúan en el combate a los efectos nocivos provocados por los radicales libres, proporcionando mejor calidad del semen fresco y criopreservado. Los cambios de temperatura provocados durante los procesos de congelación y descongelación son responsables por los daños a los espermatozoides, alterando su viabilidad y fertilidad. El estudio de los antioxidantes, que constituyen la primera línea de combate a las especies reactivas de oxígeno (ERO), para la mejora de la calidad del semen criopreservado, se hace de fundamental importancia para el desarrollo de protocolos estándares y aplicables, ya que existen muchas controversias en relación al tipo de molécula antioxidante y a las dosis, el momento adecuado para ser añadido y posibles alteraciones de éstos a los medios de criopreservación. Así, este estudio ha tenido como objetivo estudiar el efecto de los antioxidantes: catalasa, α-tocoferol y piruvato de sodio añadidos en medio diluidor comercial para mejorar la viabilidad del semen bovino criopreservado. Inicialmente se utilizaron tres toros, de la raza Brahman, seleccionados de acuerdo con la puntuación de condición corporal y examen andrológico. Ocho eyaculados fueron recogidos por electroejaculación e inmediatamente evaluados la motilidad y el vigor espermático.(AU)

Comparação de diluidores comerciais na motilidade, funcionalidade e integridade da membrana plasmática do espermatozoide bovino / Comparison of commercial diluents on motility, functionality and integrity of plasma membrane of bovine spermatozoa

O objetivo do estudo foi comparar o efeito de três diluidores comerciais (Tryladil®, Botu-Bov® e OptiXcell®) na qualidade doespermatozoide bovino após o processo de criogenia. Para tal, foram utilizados oito touros da raça Nelore (2 ejaculados/touro).As amostras de sêmen fresco, diluído e pós-descongelamento foram avaliadas, comparando os parâmetros de motilidade total,vigor, funcionalidade da membrana (HOST) e integridade da membrana (eosina). Os dados foram expressos em média e desviopadrão. As variáveis foram submetidas às análises de ANOVA e Tukey ou teste de Friedman e Dunns, dependendo da normalidade(p 0,05). Os achados mostram que no momento da diluição não houve diferença (p0,005) entre os diluidores comerciais nosparâmetros avaliados (exceto integridade da membrana plasmática). No entanto, no momento do pós-descongelamento osespermatozoides criopreservados utilizando-se o diluidor Tryladil® apresentaram maiores valores (p0,005) referentes a integridade efuncionalidade da membrana plasmática comparado aos diluídos em Botu-Bov® e OptIXcell®. Os parâmetros relacionados a cinéticaespermática (motilidade e vigor) não se diferiram (p0,005) entre os diluidores comerciais utilizados. Em conclusão, no momentopós-descongelamento o diluidor Tryladil® apresentou os melhores resultados nos parâmetros de integridade e funcionalidade damembrana plasmática. Sendo assim, recome

The main of the study was to compare the quality of frozen bull semen processed with three different commercially extenders (Tryladil®, Botu-Bov® and OptiXcell®). For this, eight Nelore bulls (two ejaculate per bull). Sperm samples were analyzed fresh, diluted and frozen-thawed. The parameters analyzed were total motility, sperm vigor, functional integrity of sperm plasma membrane (HOST) and plasma membrane integrity (eosin). Date were expressed as mean and standard deviation. The variables were subjected to ANOVA (Tukey test) or Friedman (Dunns test) test according to normality (p< 0,05). The results indicate that there was no difference (p˃0,005) among all treatments in the parameters evaluated (except plasma membrane integrity) at dilution moment. However, Tryladil extender promoted an increase (p˂0,005) in functional and integrity of sperm plasma membrane compared with others extenders at the post-thawing analyze. After thawing, there was no difference (p˃0,005) among all treatments in the kinetic parameters. In conclusion, the Tryladil® extender promoted an increase in functional and integrity of frozen-thawed sperm plasma membrane. Therefore, the Tryladil® extender is recommended to be use as an extender for Nelore bull sperm cryopreservation.(AU)

Short-term storage of lebranche mullet Mugil liza (Valenciennes, 1836) semen in natura and diluted with CF-HBSS / Armazenamento a curto prazo do sêmen da tainha Mugil liza (Valenciennes, 1836) in natura e diluído com CF-HBSS

The present study aimed to evaluate the activation characteristics of the lebranche mullet spermatozoa in natura and diluted with CF-HBSS for 96h at 4±2°C. The semen was collected from eight wild fish in Florianópolis SC (Brazil) (27°S) in May, during reproductive migration. Three pools of semen were divided into two treatments: in natura and diluted with CF-HBSS 1:3. The semen was activated with seawater (salinity of 34, pH 8.7 and 4±2°C) to determine: motility time, motility rate and sperm cell membrane integrity. Dilution with CF-HBSS 1:3 increased motility time of diluted semen (15- 20% for 6, 12 and 18h). Motility rate was equal to fresh semen for up to 24h of refrigeration and it was 30% higher than in natura semen at 12, 18 and 24h. Cell membrane integrity was maintained in fresh semen up to 6h, and it was 15-20% higher than in natura semen from 6 to 48h (p < 0.05). The use of CF-HBSS as diluent in the ratio 1:3 is recommended for semen refrigeration of lebranche mullet.(AU)

O objetivo do presente estudo foi avaliar em tainha as características de ativação dos espermatozoides in natura e diluídos com CF-HBSS mantidos por 96h a 4±2°C. O sêmen foi coletado de oito peixes selvagens em Florianópolis SC (27°S) em maio, durante a migração reprodutiva. Três pool de sêmen foram divididos em dois tratamentos: in natura e diluído com CF-HBSS 1:3. O sêmen foi ativado com água oceânica (34 de salinidade, pH 8,7 e 4±2°C) para determinar: tempo de motilidade, taxa de ativação espermática e integridade da membrana celular. A diluição com CF-HBSS 1:3 propiciou o aumento no tempo de motilidade do sêmen diluído (15-20% para 6, 12 e 18h); manteve a taxa de motilidade igual ao sêmen fresco por até 24h de refrigeração e foi 30% maior do que em in natura em 12, 18 e 24h; manteve também a integridade da membrana celular igual ao sêmen fresco por 6h e 15-20% maior que em sêmen in natura (p < 0.05) para o período de 6 a 48h. O uso do CF-HBSS como diluidor na proporção 1:3 é recomendado para a refrigeração do sêmen da tainha.(AU)

Short-term storage of lebranche mullet Mugil liza (Valenciennes, 1836) semen in natura and diluted with CF-HBSS / Armazenamento a curto prazo do sêmen da tainha Mugil liza (Valenciennes, 1836) in natura e diluído com CF-HBSS

The present study aimed to evaluate the activation characteristics of the lebranche mullet spermatozoa in natura and diluted with CF-HBSS for 96h at 4±2°C. The semen was collected from eight wild fish in Florianópolis – SC (Brazil) (27°S) in May, during reproductive migration. Three pools of semen were divided into two treatments: in natura and diluted with CF-HBSS 1:3. The semen was activated with seawater (salinity of 34, pH 8.7 and 4±2°C) to determine: motility time, motility rate and sperm cell membrane integrity. Dilution with CF-HBSS 1:3 increased motility time of diluted semen (15- 20% for 6, 12 and 18h). Motility rate was equal to fresh semen for up to 24h of refrigeration and it was 30% higher than in natura semen at 12, 18 and 24h. Cell membrane integrity was maintained in fresh semen up to 6h, and it was 15-20% higher than in natura semen from 6 to 48h (p < 0.05). The use of CF-HBSS as diluent in the ratio 1:3 is recommended for semen refrigeration of lebranche mullet.

O objetivo do presente estudo foi avaliar em tainha as características de ativação dos espermatozoides in natura e diluídos com CF-HBSS mantidos por 96h a 4±2°C. O sêmen foi coletado de oito peixes selvagens em Florianópolis – SC (27°S) em maio, durante a migração reprodutiva. Três pool de sêmen foram divididos em dois tratamentos: in natura e diluído com CF-HBSS 1:3. O sêmen foi ativado com água oceânica (34 de salinidade, pH 8,7 e 4±2°C) para determinar: tempo de motilidade, taxa de ativação espermática e integridade da membrana celular. A diluição com CF-HBSS 1:3 propiciou o aumento no tempo de motilidade do sêmen diluído (15-20% para 6, 12 e 18h); manteve a taxa de motilidade igual ao sêmen fresco por até 24h de refrigeração e foi 30% maior do que em in natura em 12, 18 e 24h; manteve também a integridade da membrana celular igual ao sêmen fresco por 6h e 15-20% maior que em sêmen in natura (p < 0.05) para o período de 6 a 48h. O uso do CF-HBSS como diluidor na proporção 1:3 é recomendado para a refrigeração do sêmen da tainha.

Influência do tempo de resfriamento e soluções diluentes sobre a congelabilidade do sêmen de Prochilodus brevis / Influence of cooling time and diluents on the freezability of Prochilodus brevis semen

Background: Prochilodus brevis is a rheophilic fish of economic and ecological importance. However, anthropic action has made its population vulnerable. Thus, the development of reproductive biotechnologies, such as seminal conservation, is necessary to subsidize their fish farming. However, seminal collections are often performed in places with few laboratory resources, demanding studies to determine the maximum time for which sperm can be cooled, as well as its process until frozen. Thus, the present study aimed to evaluate the influence of cooling time and the presence of dilution solutions on cryopreservation of P. brevis semen.Material, Methods & Results: After seminal collection, nine pools were formed and analyzed for seminal pH, concentration, membrane integrity, morphology and spermatic kinetics - motility, curvilinear velocity (VCL), average path velocity (VAP) and straight line velocity (VSL). After the analysis of the pools in natura (control 1), they were processed as follows: 1)- immediate freezing (control 2); 2)- cooling: undiluted, diluted in coconut water powder (ACP-104) or diluted in 5% glucose, followed by cooling at different times (6, 12, 24 or 48 h); 3)- Post-refrigeration freezing: the pools were diluted in their respective diluents and 10% dimethyl sulfoxide. After 15 days, the samples were thawed and analyzed for the aforementioned parameters. For the cooled and post-thawed semen, a completely randomized design with 2 (diluent × cooling time) and 3 (storage form × cooling time and storage form × diluent) factors, respectively, was utilized. ANOVA and Dunnett tests were applied to compare the means. In case of seminal cooling, there was no difference (P > 0.05) in sperm motility between control 1 and the undiluted and diluted treatments in ACP-104 for up to 24 h. After 48 h, only the VCL of the sample diluted in ACP-104 was similar (P > 0.05) to that of control 1.[...]

Influência do tempo de resfriamento e soluções diluentes sobre a congelabilidade do sêmen de Prochilodus brevis / Influence of cooling time and diluents on the freezability of Prochilodus brevis semen

Background: Prochilodus brevis is a rheophilic fish of economic and ecological importance. However, anthropic action has made its population vulnerable. Thus, the development of reproductive biotechnologies, such as seminal conservation, is necessary to subsidize their fish farming. However, seminal collections are often performed in places with few laboratory resources, demanding studies to determine the maximum time for which sperm can be cooled, as well as its process until frozen. Thus, the present study aimed to evaluate the influence of cooling time and the presence of dilution solutions on cryopreservation of P. brevis semen.Material, Methods & Results: After seminal collection, nine pools were formed and analyzed for seminal pH, concentration, membrane integrity, morphology and spermatic kinetics - motility, curvilinear velocity (VCL), average path velocity (VAP) and straight line velocity (VSL). After the analysis of the pools in natura (control 1), they were processed as follows: 1)- immediate freezing (control 2); 2)- cooling: undiluted, diluted in coconut water powder (ACP-104) or diluted in 5% glucose, followed by cooling at different times (6, 12, 24 or 48 h); 3)- Post-refrigeration freezing: the pools were diluted in their respective diluents and 10% dimethyl sulfoxide. After 15 days, the samples were thawed and analyzed for the aforementioned parameters. For the cooled and post-thawed semen, a completely randomized design with 2 (diluent × cooling time) and 3 (storage form × cooling time and storage form × diluent) factors, respectively, was utilized. ANOVA and Dunnett tests were applied to compare the means. In case of seminal cooling, there was no difference (P > 0.05) in sperm motility between control 1 and the undiluted and diluted treatments in ACP-104 for up to 24 h. After 48 h, only the VCL of the sample diluted in ACP-104 was similar (P > 0.05) to that of control 1.[...](AU)

Efeito da Insulina-N sobre a Motilidade Espermática em Sêmen Fresco de Ovino durante 60 minutos de armazenamento utilizado Gema de Ovo de Codorna / Insulin- N Effects on Sperm Motility in Ovine Fresh Semen over 60 minutes using Quail Egg of Yolk

The objective of this study was to evaluate the effect of n-type insulin on sheep semen on the time andtemperature motility after 60 minutes of incubation at 45ºC. To therefore 7 sheep were used, the collects weremade with the aid of the Electro ejaculator. The citrate-yolk diluent was used to dilute the ejaculates (25x106sptz/ ml) using quail egg yolk. Each ejaculate was divided into four equal fractions, corresponding to thetreatments: control group (Gcont), using only tris-gem; Group 50 (G500) Diluent plus 50 IU / ml N-type Insulin;Group 100 (G100) diluent plus 100 IU / ml Insulin type N; Group 200 (G200) diluent plus 200 UI / ml N-typeInsulin. After dilution, the semen remained in a water bath at 45°C for the fast thermoresistance test on the timeevaluation (0, 20, 40, 60 Minutes), for sperm motility and vigor. The data, were submitted to the t test, and thosethat did not present parameters with normal distribution were compared by the Friedman test. According to theobtained data, the insulin in the concentrations used experimentally, it was not possible to verify positive effectof the supplementation of the same, and high concentrations decrease the sperm viability.(AU)

Efeito da Insulina-N sobre a Motilidade Espermática em Sêmen Fresco de Ovino durante 60 minutos de armazenamento utilizado Gema de Ovo de Codorna / Insulin- N Effects on Sperm Motility in Ovine Fresh Semen over 60 minutes using Quail Egg of Yolk

The objective of this study was to evaluate the effect of n-type insulin on sheep semen on the time andtemperature motility after 60 minutes of incubation at 45ºC. To therefore 7 sheep were used, the collects weremade with the aid of the Electro ejaculator. The citrate-yolk diluent was used to dilute the ejaculates (25x106sptz/ ml) using quail egg yolk. Each ejaculate was divided into four equal fractions, corresponding to thetreatments: control group (Gcont), using only tris-gem; Group 50 (G500) Diluent plus 50 IU / ml N-type Insulin;Group 100 (G100) diluent plus 100 IU / ml Insulin type N; Group 200 (G200) diluent plus 200 UI / ml N-typeInsulin. After dilution, the semen remained in a water bath at 45°C for the fast thermoresistance test on the timeevaluation (0, 20, 40, 60 Minutes), for sperm motility and vigor. The data, were submitted to the t test, and thosethat did not present parameters with normal distribution were compared by the Friedman test. According to theobtained data, the insulin in the concentrations used experimentally, it was not possible to verify positive effectof the supplementation of the same, and high concentrations decrease the sperm viability.

Atividade antioxidante do extrato aquoso de noni em diluente para congelação de sêmen ovino / Antioxidant activity of aqueous extract of noni in dilutent for ram semen cryopreservation

O noni (Morinda citrifolia L) é um fruto consumido no mundo por apresentar propriedades nutricionais e terapêuticas devido a grande quantidade de compostos fenólicos, o que desperta o interesse da comunidade científica. Com o intuito de buscar novas fontes naturais de antioxidantes objetivou-se avaliar o desempenho do noni em diluente para congelação de sêmen ovino. Foi utilizado um delineamento inteiramente casualizado com quatro tratamentos e três repetições por tratamento. Os tratamentos diferiram quanto à concentração do extrato aquoso do noni adicionado ao meio diluidor: controle, sem adição do extrato; e com três concentrações 24 µg/mL; 72 µg/mL; 120 µg/mL. Foram avaliadas as variáveis físicas e químicas do fruto maduro para acidez total (8,78), pH (4,12) e sólidos solúveis (8,18%). Para vitamina C, foi obtido 309,42 mg em 100 g de matéria fresca. O extrato aquoso do noni também foi avaliado quanto à quantificação de compostos fenólicos totais, atividade antioxidante e capacidade de inibição da peroxidação lipídica. O extrato aquoso do noni apresentou moderada quantidade de compostos fitoquímicos do tipo fenólicos de 47,96 ± 1,95 mg Eq. ácido gálico/100 g do extrato. A concentração de 72 e 120 µg/mL do extrato aquoso do noni inibiu a lipoperoxidação no meio diluidor para congelação de sêmen na ordem de 21,75% e 51,32%, respectivamente, e a menor concentração (24 µg/mL) não apresentou efeito positivo. O índice de atividade antioxidante do noni foi de 33,33, o que representa atividade antioxidante muito forte. O extrato aquoso do noni apresenta capacidade antioxidante muito forte e quando incluso ao meio diluidor para criopreservação de sêmen é capaz de inibir a lipoperoxidação a partir da concentração de 72 µg/mL...

Noni (Morinda citrifolia L.) is a fruit consumed worldwide because of its nutritional and therapeutic properties resulting from the large amount of phenolic compounds, which has aroused interest of the scientific community. In order to identify new natural sources of antioxidants, the objective of this study was to evaluate the performance of noni in diluent for ram semen cryopreservation. A completely randomized design consisting of four treatments and three repetitions per treatment was used. The treatments differed in terms of the concentration of the aqueous extract of noni added to the diluent: control, no addition of the extract, and three concentrations (24, 72, and 120 µg/mL). The physical and chemical variables of the mature fruit were evaluated: total acidity (8.78), pH (4.12), and soluble solids (8.18%). The vitamin C content was 309.42 mg per 100 g fresh matter. The aqueous extract of noni was also evaluated regarding the quantity of total phenolic compounds, antioxidant activity, and lipid peroxidation inhibition capacity. The aqueous extract contained a moderate amount of phenolic compounds (47.96 ± 1.95 mg gallic acid equivalent/100 g extract). The concentrations of the aqueous extract of 72 and 120 µg/mL in diluent used for semen cryopreservation inhibited lipid peroxidation by 21.75% and 51.32%, respectively. There was no positive effect of the lowest concentration (24 µg/mL). The antioxidant activity index of noni was 33.33, corresponding to very strong antioxidant activity. The aqueous extract of noni exhibits very strong antioxidant activity and its addition to the diluent for semen cryopreservation at a concentration of 72 µg/mL is able to inhibit lipid peroxidation...

Atividade antioxidante do extrato aquoso de noni em diluente para congelação de sêmen ovino / Antioxidant activity of aqueous extract of noni in dilutent for ram semen cryopreservation

O noni (Morinda citrifolia L) é um fruto consumido no mundo por apresentar propriedades nutricionais e terapêuticas devido a grande quantidade de compostos fenólicos, o que desperta o interesse da comunidade científica. Com o intuito de buscar novas fontes naturais de antioxidantes objetivou-se avaliar o desempenho do noni em diluente para congelação de sêmen ovino. Foi utilizado um delineamento inteiramente casualizado com quatro tratamentos e três repetições por tratamento. Os tratamentos diferiram quanto à concentração do extrato aquoso do noni adicionado ao meio diluidor: controle, sem adição do extrato; e com três concentrações 24 µg/mL; 72 µg/mL; 120 µg/mL. Foram avaliadas as variáveis físicas e químicas do fruto maduro para acidez total (8,78), pH (4,12) e sólidos solúveis (8,18%). Para vitamina C, foi obtido 309,42 mg em 100 g de matéria fresca. O extrato aquoso do noni também foi avaliado quanto à quantificação de compostos fenólicos totais, atividade antioxidante e capacidade de inibição da peroxidação lipídica. O extrato aquoso do noni apresentou moderada quantidade de compostos fitoquímicos do tipo fenólicos de 47,96 ± 1,95 mg Eq. ácido gálico/100 g do extrato. A concentração de 72 e 120 µg/mL do extrato aquoso do noni inibiu a lipoperoxidação no meio diluidor para congelação de sêmen na ordem de 21,75% e 51,32%, respectivamente, e a menor concentração (24 µg/mL) não apresentou efeito positivo. O índice de atividade antioxidante do noni foi de 33,33, o que representa atividade antioxidante muito forte. O extrato aquoso do noni apresenta capacidade antioxidante muito forte e quando incluso ao meio diluidor para criopreservação de sêmen é capaz de inibir a lipoperoxidação a partir da concentração de 72 µg/mL...(AU)

Noni (Morinda citrifolia L.) is a fruit consumed worldwide because of its nutritional and therapeutic properties resulting from the large amount of phenolic compounds, which has aroused interest of the scientific community. In order to identify new natural sources of antioxidants, the objective of this study was to evaluate the performance of noni in diluent for ram semen cryopreservation. A completely randomized design consisting of four treatments and three repetitions per treatment was used. The treatments differed in terms of the concentration of the aqueous extract of noni added to the diluent: control, no addition of the extract, and three concentrations (24, 72, and 120 µg/mL). The physical and chemical variables of the mature fruit were evaluated: total acidity (8.78), pH (4.12), and soluble solids (8.18%). The vitamin C content was 309.42 mg per 100 g fresh matter. The aqueous extract of noni was also evaluated regarding the quantity of total phenolic compounds, antioxidant activity, and lipid peroxidation inhibition capacity. The aqueous extract contained a moderate amount of phenolic compounds (47.96 ± 1.95 mg gallic acid equivalent/100 g extract). The concentrations of the aqueous extract of 72 and 120 µg/mL in diluent used for semen cryopreservation inhibited lipid peroxidation by 21.75% and 51.32%, respectively. There was no positive effect of the lowest concentration (24 µg/mL). The antioxidant activity index of noni was 33.33, corresponding to very strong antioxidant activity. The aqueous extract of noni exhibits very strong antioxidant activity and its addition to the diluent for semen cryopreservation at a concentration of 72 µg/mL is able to inhibit lipid peroxidation...(AU)