Occurrence of Cryptosporidium in Anglonubian goats in the municipality of Teresina, state of Piauí, Brazil / Ocorrência de Cryptosporidium em cabras da raça Anglonubiana no município de Teresina, estado do Piauí, Brasil

This research aimed to investigate the occurrence of Cryptosporidium and correlate it with types of housing, feces consistency, and physiological parameters related to the reproductive status of Anglo-Nubian goats reared in the State of Piauí, Brazil. A total of 180 fecal samples were collected from 60 non-pregnant and lactating goats with a mean weight of 35 kg, a body condition score of 3.5, and a mean age of three years from an experimental herd at the Federal University of Piauí (UFPI). Oocysts of protozoa of the genus Cryptosporidium could be found in the studied animals using the modified Ziehl-Neelsen technique in fecal smears and the image analysis system to perform morphometry. Each independent variable in the quantitative and qualitative analyses, that is, weight, body condition score (BCS), physiological status (non-pregnant or lactating), feces consistency (normal, pasty, or diarrheal), and floor types (concrete and slatted), was tested with the dependent variable (positive samples, i.e., the presence of Cryptosporidium oocysts). Twenty-four out of the total number of fecal samples were considered positive for the presence of the protozoan, which means that 13.3% of the animals were parasitized. Moreover, 100% of the positive feces samples had normal consistency (firm) and all parasitized animals were reared in pens with a concrete floor. A statistical variation was observed in the BCS of parasitized animals compared to non-parasitized ones (p > 0.0253). The results showed that the occurrence of Cryptosporidium in experimental goats located in the municipality of Teresina, State of Piauí, Brazil, was considered low, requiring sanitary management measures to prevent infection in animals and humans. This is the first report of Cryptosporidium infection in goats in the State of Piauí.

O objetivo desta pesquisa foi investigar a ocorrência de Crypstoporidium e correlacionar com tipos de alojamento, consistência das fezes e parâmetros fisiológicos ligados ao estado reprodutivo de cabras da raça Anglonubiana criadas no estado do Piauí, Brasil. Foram utilizadas 180 amostras de fezes de 60 cabra, com peso médio de 35kg, escore de condição corporal de 3,5, com idade em média de três anos, e cabras vazias e lactantes, de um rebanho experimental da Universidade Federal do Piauí (UFPI). Utilizando-se a técnica de Ziehl-Neelsen modificada em esfregaço fecal e sistema de análise de imagens para a realização da morfometria, foi possível encontrar oocistos de protozoários do gênero Crypstoporidium nos animais estudados. Nas análises quantitativa e qualitativa, cada variável independente: peso, escore de condição corporal (ECC), estado fisiológico (vazia ou lactante), consistência das fezes (normal, pastosa ou diarreica) e tipos de piso (concreto e ripado), foi testada com a variável dependente (amostras positivas, ou seja, presença de oocistos de Cryptosporidium). Do total de amostras fecais analisadas, 24 delas foram consideradas positivas à presença do protozoário, o que significa que 13,3% dos animais estavam parasitados na ocasião da pesquisa. Foi observado que 100% das amostras de fezes positivas apresentaram consistência normal (firme) e que todos os animais parasitados eram criados em aprisco com piso de concreto. Houve uma variação estatística no ECC dos animais parasitados comparados aos não parasitados (p > 0,0253). Os resultados evidenciaram que a ocorrência de Cryptosporidium em caprinos experimentais localizados no município de Teresina, no estado do Piauí, foi considerada baixa, sendo necessária medidas de manejo sanitário para prevenir a infecção nos animais e no homem. Este é o primeiro relato da infecção por Cryptosporidium em cabras no estado do Piauí.

Evaluation of fecal smear methods for research on Cryptosporidium spp. oocysts in the feces of dairy calves / Avaliação dos métodos de esfregaço fecal para a pesquisa de oocistos de Cryptosporidium spp. nas fezes de bezerros da bovinocultura de leite

The objective of this study is to compare the direct fecal smear (DFS) and centrifugal sedimentation (CS) methods in the detection of Cryptosporidium spp. oocysts in fecal samples of dairy calves. One hundred and fourteen fecal samples were collected from calves aged up to six months from 10 dairy farms located in Palotina and Francisco Alves, Paraná, Brazil. The microscopic analysis revealed the presence of Cryptosporidium spp. oocysts in 51.75% (59/114) of the samples in both methods. In CS, 48.25% (55/114) of the samples were positive, while in DFS slides, only 6.14% (7/114) were positive. Only 4 samples were positive exclusively in DFS. To ensure that there were no false-negative results in the microscopic analysis, the 55 samples that were negative in both DFS and CS were selected for molecular analysis using the nested PCR (nPCR). Of these 55 samples, 24% (13/55) were positive and forwarded for sequencing part of the genome, which made it possible to identify C. parvum, C. bovis and C. ryanae. Besides the characterization of the Cryptosporidium species, it was possible to identify bacteria of the genus Acinetobacter interfering directly in the analyzed samples. The microscopic analysis also revealed higher sensitivity when CS was used to make the fecal smears. However, some samples that were negative in this technique had positive PCR results. Thus, molecular analysis is indicated to confirm cases of Cryptosporidium spp. Further studies are necessary to prove the specificities of the used primers since the results obtained in nPCR were positive for the protozoan but, when genetic sequencing was performed, Acinetobacter spp. was identified.(AU)

O objetivo deste trabalho foi comparar os métodos de esfregaço fecal direto (DFS) e centrífugo sedimentação (CS) para a pesquisa de oocistos de Cryptosporidium spp. em amostras fecais de bezerros leiteiros. Foram coletadas 114 amostras fecais de bezerros com até seis meses de idade, provenientes de dez propriedades leiteiras localizadas nos municípios de Palotina e Francisco Alves, Paraná. Por meio da análise microscópica, foi possível observar oocistos de Cryptosporidium spp. em 51,75% (59/114) das amostras. Pelo método da CS foi identificada positividade em 48,25% (55/114) das amostras, enquanto nas lâminas pelo método do esfregaço fecal direto (DFS), apenas 6,14% (7/114) foram positivas. Somente 4 amostras foram positivas exclusivamente no método do DFS. Para assegurar que na análise microscópica não houvesse resultados falso-negativos, as 55 amostras negativas para os dois métodos de confecção de lâminas (DFS e CS) foram selecionadas para análise molecular por meio da técnica de Nested PCR. Das 55 amostras submetidas a nPCR, 24% (13/55) apresentaram-se positivas e foram encaminhadas para o sequenciamento genético de uma porção do genoma, o qual possibilitou identificar as espécies de C. parvum, C. bovis e C. ryanae. Além da caracterização das espécies de Cryptosporidium, foi possível identificar a presença de bactérias do gênero Acinetobacter interferindo diretamente nas amostras analisadas. A análise microscópica revelou maior sensibilidade quando o método de CS foi usado para a confecção dos esfregaços fecais, entretanto, amostras negativas por meio dessa metodologia apresentaram resultados positivos na nPCR. Desta forma, para a confirmação dos casos de Cryptosporidium spp., é indicado a realização da análise molecular. Novos estudos são necessários para se comprovar a especificidade dos primers utilizados, uma vez que na nPCR o resultado obtido foi positivo, porém ao realizar o sequenciamento genético houve a identificação de Acinetobacter spp.(AU)

Prevalence of intestinal parasitic diseases in school children of rural areas of district Lower Dir, Pakistan

Abstract Present study was conducted among school children to recognize the prevalence of IPIs in rural communities of district Dir Lower, Pakistan. A sum of 324 samples of stool were collected (210 boys and 114 girls). Used direct smear method and formol ether sedimentation concentration technique for processing the samples. The result shows that 82% (n=266) were found infected comprised 64.8% male and 35.1% females. Children of the age group 10 to 12 years were found extremely infected 94.2% while 4-6 year age group were having minimum ratio of infection 72%. Current study shows mono parasitism in 50.6% of the students while 22.2% were infected with 2 species and 7.40% were infected with three species of parasites. Seven species of intestinal parasites were reported include Ascaris lumbricoid in male (n=122) 58.0% and in female (n=65) 57.0% followed by Hook worm (n=88) 41.9% and (n=44) 38.5%; Tania saginata (n=44) 20.9% and (n=24) 21.0%; Entrobius vermicularis (n=32) 15.2% and (n=16) 14.0%; Trichuris trichura (n=25) 11.9% and (n=22) 19.2%; Hymenolepis nana (n=24) 11.4% and (n=18) 15.7% and Entameoba histolytica (n=16) 7.61% and (n=14) 12.2% in male and females respectively. The study indicates that most occurring intestinal parasite in the current study were Ascaris lumbricoides 58.0% (n=122) followed by hookworms 41.9% (n=88). Male students were more infected than females in the present study.

Resumo O presente estudo foi conduzido entre crianças em idade escolar para reconhecer a prevalência de IPIs em comunidades rurais do distrito de Dir Lower, Paquistão. Foram coletadas 324 amostras de fezes (210 meninos e 114 meninas). Método de esfregaço direto usado e técnica de concentração de sedimentação de formol éter para processar as amostras. O resultado mostra que 82% (n = 266) dos infectados eram 64,8% do sexo masculino e 35,1% do feminino. Crianças da faixa etária de 10 a 12 anos foram encontradas extremamente infectadas 94,2%, enquanto a faixa etária de 4 a 6 anos apresentava proporção mínima de infecção de 72%. O estudo atual mostra monoparasitismo em 50,6% dos alunos, enquanto 22,2% estavam infectados com 2 espécies e 7,40% estavam infectados com três espécies de parasitas. Sete espécies de parasitas intestinais foram relatadas incluindo Ascaris lumbricoid em machos (n = 122) 58,0% e em fêmeas (n = 65) 57,0% seguido por anzol (n = 88) 41,9% e (n = 44) 38,5%; Tania saginata (n = 44) 20,9% e (n = 24) 21,0%; Entrobius vermicularis (n = 32) 15,2% e (n = 16) 14,0%; Trichuris trichura (n = 25) 11,9% e (n = 22) 19,2%; Hymenolepis nana (n = 24) 11,4% e (n = 18) 15,7% e Entameoba histolytica (n = 16) 7,61% e (n = 14) 12,2% em homens e mulheres, respectivamente. O estudo indica que os parasitas intestinais que mais ocorreram no presente estudo foram Ascaris lumbricoides 58,0% (n = 122), seguidos por ancilóstomos 41,9% (n = 88). Estudantes do sexo masculino foram mais infectados do que do sexo feminino no presente estudo.

Prevalence of intestinal parasitic diseases in school children of rural areas of district Lower Dir, Pakistan / Prevalência de doenças parasitárias intestinais em escolares de áreas rurais do distrito de Lower Dir, Paquistão

Present study was conducted among school children to recognize the prevalence of IPIs in rural communities of district Dir Lower, Pakistan. A sum of 324 samples of stool were collected (210 boys and 114 girls). Used direct smear method and formol ether sedimentation concentration technique for processing the samples. The result shows that 82% (n=266) were found infected comprised 64.8% male and 35.1% females. Children of the age group 10 to 12 years were found extremely infected 94.2% while 4-6 year age group were having minimum ratio of infection 72%. Current study shows mono parasitism in 50.6% of the students while 22.2% were infected with 2 species and 7.40% were infected with three species of parasites. Seven species of intestinal parasites were reported include Ascaris lumbricoid in male (n=122) 58.0% and in female (n=65) 57.0% followed by Hook worm (n=88) 41.9% and (n=44) 38.5%; Tania saginata (n=44) 20.9% and (n=24) 21.0%; Entrobius vermicularis (n=32) 15.2% and (n=16) 14.0%; Trichuris trichura (n=25) 11.9% and (n=22) 19.2%; Hymenolepis nana (n=24) 11.4% and (n=18) 15.7% and Entameoba histolytica (n=16) 7.61% and (n=14) 12.2% in male and females respectively. The study indicates that most occurring intestinal parasite in the current study were Ascaris lumbricoides 58.0% (n=122) followed by hookworms 41.9% (n=88). Male students were more infected than females in the present study.

O presente estudo foi conduzido entre crianças em idade escolar para reconhecer a prevalência de IPIs em comunidades rurais do distrito de Dir Lower, Paquistão. Foram coletadas 324 amostras de fezes (210 meninos e 114 meninas). Método de esfregaço direto usado e técnica de concentração de sedimentação de formol éter para processar as amostras. O resultado mostra que 82% (n = 266) dos infectados eram 64,8% do sexo masculino e 35,1% do feminino. Crianças da faixa etária de 10 a 12 anos foram encontradas extremamente infectadas 94,2%, enquanto a faixa etária de 4 a 6 anos apresentava proporção mínima de infecção de 72%. O estudo atual mostra monoparasitismo em 50,6% dos alunos, enquanto 22,2% estavam infectados com 2 espécies e 7,40% estavam infectados com três espécies de parasitas. Sete espécies de parasitas intestinais foram relatadas incluindo Ascaris lumbricoid em machos (n = 122) 58,0% e em fêmeas (n = 65) 57,0% seguido por anzol (n = 88) 41,9% e (n = 44) 38,5%; Tania saginata (n = 44) 20,9% e (n = 24) 21,0%; Entrobius vermicularis (n = 32) 15,2% e (n = 16) 14,0%; Trichuris trichura (n = 25) 11,9% e (n = 22) 19,2%; Hymenolepis nana (n = 24) 11,4% e (n = 18) 15,7% e Entameoba histolytica (n = 16) 7,61% e (n = 14) 12,2% em homens e mulheres, respectivamente. O estudo indica que os parasitas intestinais que mais ocorreram no presente estudo foram Ascaris lumbricoides 58,0% (n = 122), seguidos por ancilóstomos 41,9% (n = 88). Estudantes do sexo masculino foram mais infectados do que do sexo feminino no presente estudo.

Prevalence of intestinal parasitic diseases in school children of rural areas of district Lower Dir, Pakistan / Prevalência de doenças parasitárias intestinais em escolares de áreas rurais do distrito de Lower Dir, Paquistão

Present study was conducted among school children to recognize the prevalence of IPIs in rural communities of district Dir Lower, Pakistan. A sum of 324 samples of stool were collected (210 boys and 114 girls). Used direct smear method and formol ether sedimentation concentration technique for processing the samples. The result shows that 82% (n=266) were found infected comprised 64.8% male and 35.1% females. Children of the age group 10 to 12 years were found extremely infected 94.2% while 4-6 year age group were having minimum ratio of infection 72%. Current study shows mono parasitism in 50.6% of the students while 22.2% were infected with 2 species and 7.40% were infected with three species of parasites. Seven species of intestinal parasites were reported include Ascaris lumbricoid in male (n=122) 58.0% and in female (n=65) 57.0% followed by Hook worm (n=88) 41.9% and (n=44) 38.5%; Tania saginata (n=44) 20.9% and (n=24) 21.0%; Entrobius vermicularis (n=32) 15.2% and (n=16) 14.0%; Trichuris trichura (n=25) 11.9% and (n=22) 19.2%; Hymenolepis nana (n=24) 11.4% and (n=18) 15.7% and Entameoba histolytica (n=16) 7.61% and (n=14) 12.2% in male and females respectively. The study indicates that most occurring intestinal parasite in the current study were Ascaris lumbricoides 58.0% (n=122) followed by hookworms 41.9% (n=88). Male students were more infected than females in the present study.

O presente estudo foi conduzido entre crianças em idade escolar para reconhecer a prevalência de IPIs em comunidades rurais do distrito de Dir Lower, Paquistão. Foram coletadas 324 amostras de fezes (210 meninos e 114 meninas). Método de esfregaço direto usado e técnica de concentração de sedimentação de formol éter para processar as amostras. O resultado mostra que 82% (n = 266) dos infectados eram 64,8% do sexo masculino e 35,1% do feminino. Crianças da faixa etária de 10 a 12 anos foram encontradas extremamente infectadas 94,2%, enquanto a faixa etária de 4 a 6 anos apresentava proporção mínima de infecção de 72%. O estudo atual mostra monoparasitismo em 50,6% dos alunos, enquanto 22,2% estavam infectados com 2 espécies e 7,40% estavam infectados com três espécies de parasitas. Sete espécies de parasitas intestinais foram relatadas incluindo Ascaris lumbricoid em machos (n = 122) 58,0% e em fêmeas (n = 65) 57,0% seguido por anzol (n = 88) 41,9% e (n = 44) 38,5%; Tania saginata (n = 44) 20,9% e (n = 24) 21,0%; Entrobius vermicularis (n = 32) 15,2% e (n = 16) 14,0%; Trichuris trichura (n = 25) 11,9% e (n = 22) 19,2%; Hymenolepis nana (n = 24) 11,4% e (n = 18) 15,7% e Entameoba histolytica (n = 16) 7,61% e (n = 14) 12,2% em homens e mulheres, respectivamente. O estudo indica que os parasitas intestinais que mais ocorreram no presente estudo foram Ascaris lumbricoides 58,0% (n = 122), seguidos por ancilóstomos 41,9% (n = 88). Estudantes do sexo masculino foram mais infectados do que do sexo feminino no presente estudo.

Prevalence of intestinal parasitic diseases in school children of rural areas of district Lower Dir, Pakistan / Prevalência de doenças parasitárias intestinais em escolares de áreas rurais do distrito de Lower Dir, Paquistão

Present study was conducted among school children to recognize the prevalence of IPIs in rural communities of district Dir Lower, Pakistan. A sum of 324 samples of stool were collected (210 boys and 114 girls). Used direct smear method and formol ether sedimentation concentration technique for processing the samples. The result shows that 82% (n=266) were found infected comprised 64.8% male and 35.1% females. Children of the age group 10 to 12 years were found extremely infected 94.2% while 4-6 year age group were having minimum ratio of infection 72%. Current study shows mono parasitism in 50.6% of the students while 22.2% were infected with 2 species and 7.40% were infected with three species of parasites. Seven species of intestinal parasites were reported include Ascaris lumbricoid in male (n=122) 58.0% and in female (n=65) 57.0% followed by Hook worm (n=88) 41.9% and (n=44) 38.5%; Tania saginata (n=44) 20.9% and (n=24) 21.0%; Entrobius vermicularis (n=32) 15.2% and (n=16) 14.0%; Trichuris trichura (n=25) 11.9% and (n=22) 19.2%; Hymenolepis nana (n=24) 11.4% and (n=18) 15.7% and Entameoba histolytica (n=16) 7.61% and (n=14) 12.2% in male and females respectively. The study indicates that most occurring intestinal parasite in the current study were Ascaris lumbricoides 58.0% (n=122) followed by hookworms 41.9% (n=88). Male students were more infected than females in the present study.(AU)

O presente estudo foi conduzido entre crianças em idade escolar para reconhecer a prevalência de IPIs em comunidades rurais do distrito de Dir Lower, Paquistão. Foram coletadas 324 amostras de fezes (210 meninos e 114 meninas). Método de esfregaço direto usado e técnica de concentração de sedimentação de formol éter para processar as amostras. O resultado mostra que 82% (n = 266) dos infectados eram 64,8% do sexo masculino e 35,1% do feminino. Crianças da faixa etária de 10 a 12 anos foram encontradas extremamente infectadas 94,2%, enquanto a faixa etária de 4 a 6 anos apresentava proporção mínima de infecção de 72%. O estudo atual mostra monoparasitismo em 50,6% dos alunos, enquanto 22,2% estavam infectados com 2 espécies e 7,40% estavam infectados com três espécies de parasitas. Sete espécies de parasitas intestinais foram relatadas incluindo Ascaris lumbricoid em machos (n = 122) 58,0% e em fêmeas (n = 65) 57,0% seguido por anzol (n = 88) 41,9% e (n = 44) 38,5%; Tania saginata (n = 44) 20,9% e (n = 24) 21,0%; Entrobius vermicularis (n = 32) 15,2% e (n = 16) 14,0%; Trichuris trichura (n = 25) 11,9% e (n = 22) 19,2%; Hymenolepis nana (n = 24) 11,4% e (n = 18) 15,7% e Entameoba histolytica (n = 16) 7,61% e (n = 14) 12,2% em homens e mulheres, respectivamente. O estudo indica que os parasitas intestinais que mais ocorreram no presente estudo foram Ascaris lumbricoides 58,0% (n = 122), seguidos por ancilóstomos 41,9% (n = 88). Estudantes do sexo masculino foram mais infectados do que do sexo feminino no presente estudo.(AU)

Gastrointestinal helminths in dog feces surrounding suburban areas of Lower Dir district, Pakistan: A public health threat / Helmintos gastrointestinais em fezes de cães que vivem em áreas suburbanas do distrito de Lower Dir, Paquistão: uma ameaça à saúde pública

Data on environmental contamination of the parasites of zoonotic importance is scarce in Pakistan. Soil contamination with feces of dogs hide infective stages of the parasite represents a health-risk to humans. This study was aimed to assess the eggs of gastrointestinal parasites of stray dogs and household dogs in lower Dir district, Pakistan with special consideration to those that can be spread to humans. One hundred and fifty two stool specimens from (stray dogs=90 and household dogs=62) were collected. The helminth eggs were processed by direct smear method and centrifugation techniques and identified by microscopic examination. Of the total examined dogs 26.8% (n=41 /152) were found to be infected with one or more intestinal parasites. The intestinal helminths detected were Dipylidium caninum (n =18, 11.8%), followed by Toxocara canis (n =16, 10.5%), Taenia spp., (n=10, 6.57%) Ancylostoma caninum (n=6, 3.94), Toxascaris spp., Capillaria spp., and Trichuris vulpis (n=2, 1.31% each) in order of their prevalence. Pattern of infection revealed that 27 (65.8%) dogs have single, 13(31.7%) double and 1(2.43%) triple infection. The stray dogs were highly infected 34.4% (n=31) than house hold dogs 16.1% (n=10). The prevalence of infection with intestinal parasites was significantly different among these two groups (p = 0.0097). This study highlight a severe environmental contamination by frequent parasitic stages infectious to humans. There is a higher risk of zoonotic transmission from dogs which indicate an immediate need for the controlling of these parasites and educating the public to take wise action relating to the parasites and pets.(AU)

Dados sobre a contaminação ambiental dos parasitas de importância zoonótica são escassos no Paquistão. A contaminação do solo com fezes de cães, as quais escondem as fases infecciosas do parasita, representa um risco à saúde dos seres humanos. Este estudo teve como objetivo avaliar os ovos de parasitas gastrointestinais de cães de rua e domésticos no distrito de Lower Dir, no Paquistão, com especial atenção para aqueles que podem ser transmitidos aos seres humanos. Foram recolhidos 152 espécimes de fezes de cães, dos quais 90 eram de rua e 62 eram domésticos. Os ovos de helmintos foram processados por método de esfregaço direto e técnicas de centrifugação e identificados por exame microscópico. Do total de cães examinados, verificou-se que 26,8% (n = 41/152) estavam infectados com um ou mais parasitas intestinais. Os helmintos intestinais detectados foram Dipylidium caninum (n = 18; 11,8%), seguido por Toxocara canis (n = 16; 10,5%), Taenia spp. (n = 10; 6,57%), Ancylostoma caninum (n = 6; 3,94%), Toxascaris spp., Capillaria spp. e Trichuris vulpis (n = 2; 1,31% cada) em ordem de prevalência. O padrão de infecção revelou que 27 (65,8%) cães tinham infecção simples, 13 (31,7%), duplas, e 1 (2,43%), tripla. Os cães de rua estavam altamente infectados (34,4%; n = 31) do que os cães domésticos (16,1%; n = 10). A prevalência de infecção por parasitas intestinais foi significativamente diferente entre esses dois grupos (p = 0,0097). Este estudo destaca uma grave contaminação ambiental por frequentes fases parasitárias infecciosas para humanos. Existe um risco maior de transmissão zoonótica de cães, o que indica uma necessidade imediata do controle desses parasitas, além de educar o público quanto à tomada de medidas relativas aos parasitas e aos animais de estimação.(AU)

Gastrointestinal helminths in dog feces surrounding suburban areas of Lower Dir district, Pakistan: A public health threat

Abstract Data on environmental contamination of the parasites of zoonotic importance is scarce in Pakistan. Soil contamination with feces of dogs hide infective stages of the parasite represents a health-risk to humans. This study was aimed to assess the eggs of gastrointestinal parasites of stray dogs and household dogs in lower Dir district, Pakistan with special consideration to those that can be spread to humans. One hundred and fifty two stool specimens from (stray dogs=90 and household dogs=62) were collected. The helminth eggs were processed by direct smear method and centrifugation techniques and identified by microscopic examination. Of the total examined dogs 26.8% (n=41 /152) were found to be infected with one or more intestinal parasites. The intestinal helminths detected were Dipylidium caninum (n =18, 11.8%), followed by Toxocara canis (n =16, 10.5%), Taenia spp., (n=10, 6.57%) Ancylostoma caninum (n=6, 3.94), Toxascaris spp., Capillaria spp., and Trichuris vulpis (n=2, 1.31% each) in order of their prevalence. Pattern of infection revealed that 27 (65.8%) dogs have single, 13(31.7%) double and 1(2.43%) triple infection. The stray dogs were highly infected 34.4% (n=31) than house hold dogs 16.1% (n=10). The prevalence of infection with intestinal parasites was significantly different among these two groups (p = 0.0097). This study highlight a severe environmental contamination by frequent parasitic stages infectious to humans. There is a higher risk of zoonotic transmission from dogs which indicate an immediate need for the controlling of these parasites and educating the public to take wise action relating to the parasites and pets.

Resumo Dados sobre a contaminação ambiental dos parasitas de importância zoonótica são escassos no Paquistão. A contaminação do solo com fezes de cães, as quais escondem as fases infecciosas do parasita, representa um risco à saúde dos seres humanos. Este estudo teve como objetivo avaliar os ovos de parasitas gastrointestinais de cães de rua e domésticos no distrito de Lower Dir, no Paquistão, com especial atenção para aqueles que podem ser transmitidos aos seres humanos. Foram recolhidos 152 espécimes de fezes de cães, dos quais 90 eram de rua e 62 eram domésticos. Os ovos de helmintos foram processados por método de esfregaço direto e técnicas de centrifugação e identificados por exame microscópico. Do total de cães examinados, verificou-se que 26,8% (n = 41/152) estavam infectados com um ou mais parasitas intestinais. Os helmintos intestinais detectados foram Dipylidium caninum (n = 18; 11,8%), seguido por Toxocara canis (n = 16; 10,5%), Taenia spp. (n = 10; 6,57%), Ancylostoma caninum (n = 6; 3,94%), Toxascaris spp., Capillaria spp. e Trichuris vulpis (n = 2; 1,31% cada) em ordem de prevalência. O padrão de infecção revelou que 27 (65,8%) cães tinham infecção simples, 13 (31,7%), duplas, e 1 (2,43%), tripla. Os cães de rua estavam altamente infectados (34,4%; n = 31) do que os cães domésticos (16,1%; n = 10). A prevalência de infecção por parasitas intestinais foi significativamente diferente entre esses dois grupos (p = 0,0097). Este estudo destaca uma grave contaminação ambiental por frequentes fases parasitárias infecciosas para humanos. Existe um risco maior de transmissão zoonótica de cães, o que indica uma necessidade imediata do controle desses parasitas, além de educar o público quanto à tomada de medidas relativas aos parasitas e aos animais de estimação.

Gastrointestinal helminths in dog feces surrounding suburban areas of Lower Dir district, Pakistan: A public health threat

Abstract Data on environmental contamination of the parasites of zoonotic importance is scarce in Pakistan. Soil contamination with feces of dogs hide infective stages of the parasite represents a health-risk to humans. This study was aimed to assess the eggs of gastrointestinal parasites of stray dogs and household dogs in lower Dir district, Pakistan with special consideration to those that can be spread to humans. One hundred and fifty two stool specimens from (stray dogs=90 and household dogs=62) were collected. The helminth eggs were processed by direct smear method and centrifugation techniques and identified by microscopic examination. Of the total examined dogs 26.8% (n=41 /152) were found to be infected with one or more intestinal parasites. The intestinal helminths detected were Dipylidium caninum (n =18, 11.8%), followed by Toxocara canis (n =16, 10.5%), Taenia spp., (n=10, 6.57%) Ancylostoma caninum (n=6, 3.94), Toxascaris spp., Capillaria spp., and Trichuris vulpis (n=2, 1.31% each) in order of their prevalence. Pattern of infection revealed that 27 (65.8%) dogs have single, 13(31.7%) double and 1(2.43%) triple infection. The stray dogs were highly infected 34.4% (n=31) than house hold dogs 16.1% (n=10). The prevalence of infection with intestinal parasites was significantly different among these two groups (p = 0.0097). This study highlight a severe environmental contamination by frequent parasitic stages infectious to humans. There is a higher risk of zoonotic transmission from dogs which indicate an immediate need for the controlling of these parasites and educating the public to take wise action relating to the parasites and pets.

Resumo Dados sobre a contaminação ambiental dos parasitas de importância zoonótica são escassos no Paquistão. A contaminação do solo com fezes de cães, as quais escondem as fases infecciosas do parasita, representa um risco à saúde dos seres humanos. Este estudo teve como objetivo avaliar os ovos de parasitas gastrointestinais de cães de rua e domésticos no distrito de Lower Dir, no Paquistão, com especial atenção para aqueles que podem ser transmitidos aos seres humanos. Foram recolhidos 152 espécimes de fezes de cães, dos quais 90 eram de rua e 62 eram domésticos. Os ovos de helmintos foram processados por método de esfregaço direto e técnicas de centrifugação e identificados por exame microscópico. Do total de cães examinados, verificou-se que 26,8% (n = 41/152) estavam infectados com um ou mais parasitas intestinais. Os helmintos intestinais detectados foram Dipylidium caninum (n = 18; 11,8%), seguido por Toxocara canis (n = 16; 10,5%), Taenia spp. (n = 10; 6,57%), Ancylostoma caninum (n = 6; 3,94%), Toxascaris spp., Capillaria spp. e Trichuris vulpis (n = 2; 1,31% cada) em ordem de prevalência. O padrão de infecção revelou que 27 (65,8%) cães tinham infecção simples, 13 (31,7%), duplas, e 1 (2,43%), tripla. Os cães de rua estavam altamente infectados (34,4%; n = 31) do que os cães domésticos (16,1%; n = 10). A prevalência de infecção por parasitas intestinais foi significativamente diferente entre esses dois grupos (p = 0,0097). Este estudo destaca uma grave contaminação ambiental por frequentes fases parasitárias infecciosas para humanos. Existe um risco maior de transmissão zoonótica de cães, o que indica uma necessidade imediata do controle desses parasitas, além de educar o público quanto à tomada de medidas relativas aos parasitas e aos animais de estimação.

Cryptosporidium parvum in captive primates of Parque Municipal Danilo Galafassi, Paraná, Brazil / Cryptosporidium parvum em primatas cativos do Parque Municipal Danilo Galafassi, Paraná, Brasil

A wide variety of terrestrial and aquatic animal species have been identified as hosts of species and genotypes of Cryptosporidium spp., which are important pathogens, however, little is known about their distribution in wild populations. Recent studies associating parasitological findings and molecular techniques have provided a new insight into host specificity and its potential transmission to humans.The objective of this study was to investigate the presence of Cryptosporidium spp. in feces of Callithrixsp. and Ateles paniscus, identify the species, and evaluate their phylogenetic relationships with other representatives of the genus. Four samples of feces were collected from an enclosure where three Callithrix jacchus and one Callithrix penicillate live; in addition, five samples were collected from an enclosure of an Ateles paniscus from Parque Municipal Danilo Galafassi, located in the city of Cascavel-PR. These samples were sent to the UFPR Biotechnology Laboratory, where the modified Ziehl-Neelsen staining technique was performed on microscope slides with fecal smear. Positive samples were submitted to DNA purification, extraction, PCR, and sequencing of the nuclear SSU rRNA region. Phylogenetic analysis based on Maximum Parcimony and Bayesian Inference were performed. Fifty percent (2: 4) of the feces samples from the enclosure of the Callithrix spp. and 60 % (3: 5) of samples from the Ateles paniscus enclosure were positive for Cryptosporidium spp. The phylogenetic analysis showed that the parasite found in both species of primates was recovered nested with others genotypes of C. parvum, and the genotype found in Callithrix spp. has high similarity with that one founded in several domestic animals. This is the first report of C. parvum in A. paniscus. Because it is an important zoonosis which does not have treatment, preventive measures must be adopted to avoid the spread of the disease.(AU)

Uma grande variedade de espécies animais terrestres e aquáticas tem sido identificada como hospedeiros de espécies e genótipos de Cryptosporidium spp., que são importantes agentes patogênicos, mas pouco se conhece sobre a sua distribuição nas populações silvestres. Estudos recentes associando achados parasitológicos e técnicas moleculares têm proporcionado uma nova visão em relação à especificidade do hospedeiro e seu potencial de transmissão para o homem. O objetivo desse estudo foi pesquisar a presença de Cryptosporidium spp. em fezes de Callithrix spp. e Ateles paniscus, identificar a espécie e avaliar o seu relacionamento filogenético com outros representantes do gênero. Foram coletadas quatro amostras de fezes de um recinto onde convivem três Callithrix jacchus e um Callithrix penicillata e cinco amostras de um recinto onde vive um Ateles paniscus do Parque Municipal Danilo Galafassi localizado na cidade de Cascavel-PR. As amostras foram enviadas ao Laboratório de Biotecnologia da UFPR onde foi realizada a técnica de coloração de Ziehl-Neelsen modificado em lâminas de esfregaço de fezes. As amostras positivas foram submetidas à purificação, extração de DNA, PCR, e sequenciamento da região nuclear SSU rRNA. Foram realizadas análises filogenéticas baseadas em Máxima Parcimônia e Inferência Bayesiana. Cinquenta por cento (2:4) das amostras de fezes do recinto dos Callithrix...(AU)

Gastrointestinal helminths in dog feces surrounding suburban areas of Lower Dir district, Pakistan: A public health threat

Abstract Data on environmental contamination of the parasites of zoonotic importance is scarce in Pakistan. Soil contamination with feces of dogs hide infective stages of the parasite represents a health-risk to humans. This study was aimed to assess the eggs of gastrointestinal parasites of stray dogs and household dogs in lower Dir district, Pakistan with special consideration to those that can be spread to humans. One hundred and fifty two stool specimens from (stray dogs=90 and household dogs=62) were collected. The helminth eggs were processed by direct smear method and centrifugation techniques and identified by microscopic examination. Of the total examined dogs 26.8% (n=41 /152) were found to be infected with one or more intestinal parasites. The intestinal helminths detected were Dipylidium caninum (n =18, 11.8%), followed by Toxocara canis (n =16, 10.5%), Taenia spp., (n=10, 6.57%) Ancylostoma caninum (n=6, 3.94), Toxascaris spp., Capillaria spp., and Trichuris vulpis (n=2, 1.31% each) in order of their prevalence. Pattern of infection revealed that 27 (65.8%) dogs have single, 13(31.7%) double and 1(2.43%) triple infection. The stray dogs were highly infected 34.4% (n=31) than house hold dogs 16.1% (n=10). The prevalence of infection with intestinal parasites was significantly different among these two groups (p = 0.0097). This study highlight a severe environmental contamination by frequent parasitic stages infectious to humans. There is a higher risk of zoonotic transmission from dogs which indicate an immediate need for the controlling of these parasites and educating the public to take wise action relating to the parasites and pets.

Resumo Dados sobre a contaminação ambiental dos parasitas de importância zoonótica são escassos no Paquistão. A contaminação do solo com fezes de cães, as quais escondem as fases infecciosas do parasita, representa um risco à saúde dos seres humanos. Este estudo teve como objetivo avaliar os ovos de parasitas gastrointestinais de cães de rua e domésticos no distrito de Lower Dir, no Paquistão, com especial atenção para aqueles que podem ser transmitidos aos seres humanos. Foram recolhidos 152 espécimes de fezes de cães, dos quais 90 eram de rua e 62 eram domésticos. Os ovos de helmintos foram processados por método de esfregaço direto e técnicas de centrifugação e identificados por exame microscópico. Do total de cães examinados, verificou-se que 26,8% (n = 41/152) estavam infectados com um ou mais parasitas intestinais. Os helmintos intestinais detectados foram Dipylidium caninum (n = 18; 11,8%), seguido por Toxocara canis (n = 16; 10,5%), Taenia spp. (n = 10; 6,57%), Ancylostoma caninum (n = 6; 3,94%), Toxascaris spp., Capillaria spp. e Trichuris vulpis (n = 2; 1,31% cada) em ordem de prevalência. O padrão de infecção revelou que 27 (65,8%) cães tinham infecção simples, 13 (31,7%), duplas, e 1 (2,43%), tripla. Os cães de rua estavam altamente infectados (34,4%; n = 31) do que os cães domésticos (16,1%; n = 10). A prevalência de infecção por parasitas intestinais foi significativamente diferente entre esses dois grupos (p = 0,0097). Este estudo destaca uma grave contaminação ambiental por frequentes fases parasitárias infecciosas para humanos. Existe um risco maior de transmissão zoonótica de cães, o que indica uma necessidade imediata do controle desses parasitas, além de educar o público quanto à tomada de medidas relativas aos parasitas e aos animais de estimação.

Occurrence and molecular characterization of Cryptosporidium sp. in sheep / Ocorrência e caracterização molecular de Cryptosporidium sp. em ovinos

Considered a zoonosis of utmost importance, cryptosporidiosis has a worldwide distribution and can infect mammals, birds, reptiles, and amphibians. It is caused by a highly resistant protozoan present in the environment and can cause death in immunosuppressed individuals and pups, as well as in farm animals such as cattle and sheep, generating losses. The aim of this study was to investigate the presence of Cryptosporidium spp. in sheep feces from the farms of Western Paraná, which have different management styles, and compare the results with their respective management methods. One hundred and forty-four stool samples were collected (69 from Property 1 and 75 from Property 2) and analyzed using a fecal smear on slides after staining by the modified Ziehl-Neelsen method. Samples tested positive by this method were subjected to nested PCR and the products obtained were sent for sequencing to determine the species. While 82.60% of the samples from Property 1 were tested positive, only 36% of the samples from Property 2 were tested positive. On analyzing the sequencing data, it was observed that the Cryptosporidium species of samples from Property 1 showed high similarity to Cryptosporidium xiaoi and those from Property 2, to Cryptosporidium ubiquitum. The reason for divergence in results can be attributed to differences in management systems adopted by each property, thus showing the importance of detecting carrier animals, as they can contaminate the environment,especially the water sources, and spread the disease to humans and other animals.(AU)

Considerada uma zoonose de extrema importância, a cryptosporidiose possui distribuição mundial e pode infectar mamíferos, aves, répteis e anfíbios. É causada por um protozoário muito resistente no ambiente, podendo gerar mortes em indivíduos imunossuprimidos e filhotes, principalmente em animais de produção como bovinos e ovinos, gerando prejuízos. O objetivo desse trabalho foi pesquisar a presença de Cryptosporidium spp. em fezes de ovinos de propriedades rurais do Oeste do Paraná, que possuem manejos diferenciados e comparar os resultados encontrados com o respectivo manejo. Foram coletadas 144 amostras de fezes, sendo 69 da Propriedade 1 e 75 da Propriedade 2, analisadas pelo esfregaço de fezes em lâminas após a coloração pelo método de Ziehl-Neelsen modificado. As amostras positivas por esse método foram submetidas à Nested-PCR sendo os produtos obtidos enviados ao sequenciamento para a determinação da espécie. A Propriedade 1 apresentou positividade em 82,60% das amostras, enquanto a Propriedade 2 obteve 36% de amostras positivas. Foi encontrada alta similaridade para Cryptosporidium xiaoi na primeira propriedade e Cryptosporidium ubiquitum na segunda propriedade. A divergência nos resultados pode ser comprovada pela diferente forma de manejo adotada em cada propriedade, mostrando a importância de detectar os animais portadores, uma vez que estes podem contaminar o meio ambiente, especialmente os cursos dágua, e promover a disseminaçãoda doença para outros animais e para o homem.(AU)

DETECÇÃO DE HEMOPATÓGENOS E Neospora caninum E SOROPREVALÊNCIA DE Toxoplasma gondii EM REBANHOS COMERCIAIS DE OVINOS LEITEIROS DO ESTADO DE MINAS GERAIS, BRASIL

O Brasil contabiliza aproximadamente 13,5 milhões de ovinos em estabelecimentos agropecuários, sendo que a ovinocultura leiteira brasileira se mostra em ascensão. Em busca de expandir o mercado e alcançar altos níveis de produção de leite, a manutenção da saúde do rebanho ovino por meio de um adequado manejo sanitário é imprescindível. Neste contexto, conhecer a prevalência das enfermidades no rebanho é fundamental, auxiliando na adoção de medidas corretivas e profiláticas. Assim, o objetivo deste trabalho foi realizar levantamento molecular de hemopatógenos e Neospora caninum e soroepidemiológico de Toxoplasma gondii, busca por ectoparasitos e levantamento dos fatores de risco associados a esses patógenos em propriedades comerciais de ovinos leiteiros do estado de Minas Gerais. O estudo foi realizado em três municípios: Glaura, Itapecerica e Jaboticatubas, totalizando quatro propriedades e 270 amostras sanguíneas. Para as análises moleculares foi realizada a Reação em Cadeia de Polimerase PCR e para as análises sorológicas o Ensaio de Imunoabsorção Enzimática ELISA. Ademais, análises parasitológicas em amostras de sangue foram realizadas, como esfregaço sanguíneo periférico e de sangue total, buffy coat, técnica de Woo e mensuração do volume globular. Ainda, a contagem de ovos por grama de fezes OPG foi realizada em amostras de 197 animais a procura de ovos de tricostrongilídeos a fim de associar com a presença de anemia. A busca por ectoparasitos foi realizada por meio de catação manual e por puçá. Ainda, por meio do questionário zoosanitário aplicado nas propriedades, verificou-se quais os fatores de risco para as enfermidades estudadas neste trabalho. Os resultados foram expostos de acordo com a frequência de positividade, apresentados em percentual. Com os dados dos questionários, os resultados dos testes moleculares, sorológicos, VG, OPG e presença/ausência de ectoparasitos, as associações entre as variáveis foram realizadas por meio do teste estatístico Razão de Verossimilhança. Contudo, em situações onde frequência foi igual a zero, o teste utilizado foi utilizado o Teste Exato de Fischer. O nível de significância nas análises foi de 5% (p0,05). Apenas em uma propriedade foram encontrados ectoparasitos, sendo uma pulga (Ctenocephalides felis felis) e uma ninfa de carrapato (Amblyomma sp.). Por meio da PCR, resultados positivos foram obtidos para os hemopatógenos: Mycoplasma ovis (71,48%), Anaplasma spp. (4,07%), Anaplasma marginale (2,96%), Ehrlichia monocítica (2,96%), Babesia spp. (0,74%), e Ehrlichia/Anaplasma de granulócitos (0,38%). Todas as propriedades apresentaram coinfecções entre algum dos agentes estudados neste trabalho. A PCR para N. caninum apresentou 25,55% de positividade. A sororreatividade para T. gondii foi encontrada em 59 amostras (22,1%) com o índice de reatividade (I.R.) 1,0. Por meio da análise dos esfregaços sanguíneos, buffy coat e Técnica de Woo, não foi encontrado nenhum patógeno. Já a mensuração do volume globular demonstrou que 43,71% dos animais apresentavam-se anêmicos no momento da coleta. O resultado do OPG foi negativo em 42,13% (83/197) das amostras analisadas e contagem com valores inferiores a 500 ovos ocorreu em 20,81% (41/197) das amostras analisadas. Infecção grau leve (500-800 ovos) foi detectada em 6,59% (13/197) das amostras, grau moderado (800-1.500 ovos) em 4,56% (09/197) e grau elevado (<1.500 ovos) em 26,90% (53/197). Os fatores de riscos com significância na positividade para os patógenos foram: o reuso de agulhas para M. ovis; a presença de ectoparasitos para Anaplasma spp. e Ehrlichia monocítica; propriedades com as fontes de água poço, nascente e cisterna para N. caninum; ovinos pertencentes à categoria >24 meses de vida para N. caninum; e na sororreatividade para T. gondii a presença de gatos, fontes de água poço e nascente e a ocorrência de distúrbios reprodutivos. As hemoparasitoses estavam presentes em todos os rebanhos analisados devendo ser considerada um diagnóstico diferencial para ovinos anêmicos. Além disso, são indispensáveis o estabelecimento de medidas para o controle da toxoplasmose nos rebanhos e o maior entendimento do papel de N. caninum nos distúrbios reprodutivos desses animais.

Brazil accounts for approximately 13.5 million sheep in agricultural establishments and the Brazilian dairy sheep industry is on the rise. In order to expand the market and achieve high levels of milk production, maintaining the health of the sheep herd through proper sanitary management is essential. In this context, knowing the prevalence of diseases in the herd is essential, helping in the adoption of corrective and prophylactic measures. Thus, the objective of this work was to carry out a molecular survey of hemopathogens and Neospora caninum and Toxoplasma gondii seroepidemiological, search for ectoparasites and survey of risk factors associated with these pathogens in commercial properties of dairy sheep in the state of Minas Gerais. The study was carried out in three municipalities: Glaura, Itapecerica and Jaboticatubas, totaling four properties and 270 blood samples. For the molecular analyzes, the Polymerase Chain Reaction PCR was performed and for the serological analyzes the Enzyme Immunoabsorbent Assay ELISA. In addition, parasitological analyzes on blood samples were performed, such as peripheral and whole blood smear, buffy coat, Woo technique and measurement of globular volume. Also, the eggs per gram EPG was carried out on samples from 197 animals looking for trichostrongylid eggs in order to associate with the presence of anemia. The search for ectoparasites was carried out by manual collection and by puçá. Still, through the zoosanitary questionnaire applied in the properties, it was verified which are the risk factors for the diseases studied in this work. The results were exposed according to the frequency of positivity, presented as a percentage. With the data from the questionnaires, the results of the molecular, serological, VG, EPG tests and the presence / absence of ectoparasites, the associations between the variables were performed using the Likelihood Ratio statistical test. However, in situations where frequency was equal to zero, the test used was the Fischer Exact Test. The level of significance in the analyzes was 5% (p0.05). Ectoparasites were found in only one property, being a flea (Ctenocephalides felis felis) and a tick nymph (Amblyomma sp.). Through PCR, positive results were obtained for hemopathogens: Mycoplasma ovis (71.48%), Anaplasma spp. (4.07%), Anaplasma marginale (2.96%), Ehrlichia monocítica (2.96%), Babesia spp. (0.74%), and Ehrlichia / Anaplasma Granulocyte (0.38%). All properties showed co-infections among some of the agents studied in this work. The PCR for N. caninum showed 25.55% positivity. The seroreactivity for T. gondii was 59 (22.1%) with a reactivity index (I.R.) 1.0. Through the analysis of blood smears, buffy coat and Woo's technique, no pathogen was found. The measurement of the globular volume showed that 43.71% of the animals were anemic at the time of collection. The EPG result was negative in 42.13% (83/197) of the analyzed samples and counting with values below 500 eggs occurred in 20.81% (41/197) of the analyzed samples. Mild grade infection (500-800 eggs) was detected in 6.59% (13/197) of the samples, moderate grade (800-1,500 eggs) in 4.56% (09/197) and high grade (<1,500 eggs) in 26.90% (53/197). The risk factors with significance in the positivity for the pathogens were: the reuse of needles for M. ovis, the presence of ectoparasites for Anaplasma spp. and Ehrlichia monocytic; properties with well, spring and cistern water sources for N. caninum; sheep belonging to the categories > 24 months old for N. caninum; and in seroreactivity for T. gondii the presence of cats, well and spring water sources and the occurrence of reproductive disorders. Hemoparasitosis were present in all the herds analyzed and should be considered a differential diagnosis for anemic sheep. In addition, it is essential to establish measures for the control of toxoplasmosis in herds and a greater understanding of the role of N. caninum in the reproductive disorders of these animals.

MÉTODOS ALTERNATIVOS DE MUDA FORÇADA E SUA INFLUÊNCIA NO DESENVOLVIMENTO DA SALMONELLA ENTERITIDIS EM CODORNAS JAPONESAS (Coturnix cortunix japonica)

A muda forçada é uma técnica de manejo utilizada para promover, intencionalmente, a pausa produtiva de ovos, seguida de um rejuvenescimento do aparelho reprodutor de aves de postura comercial, com o intuito de prolongar a vida útil da ave e reduzir custos com a aquisição de novos animais. O método comumente utilizado é o jejum alimentar, no entanto este manejo causa alterações imunológicas na ave o que pode torná-la susceptível a várias infecções. Portanto, a utilização de métodos alternativos, como a oferta de farelo de trigo e óxido de zinco, evitam o estresse do jejum alimentar e, consequentemente, a depressão do sistema imunológico evitando doenças como a Salmonelose. O objetivo do presente estudo foi de verificar a interferência que os variados métodos alternativos de muda forçada tem sobre a excreção da Salmonella Enteritidis em codornas. Foram utilizadas 192 codornas japonesas com 60 semanas de idade distribuídas em oito tratamentos e seis repetições, seguindo: grupos inoculados por via oral com 2x109 unidade formadora de colônia (UFC) de Salmonella Enteritidis submetidos a muda forçada pelo método de jejum alimentar, farelo de trigo, óxido de zinco e controle, assim como grupos de aves não incoculadas utilizando os mesmos métodos de muda forçada citados. Foram coletadas amostras de fezes e esfregaço cloacal nos dias 1, 4, 7 e 14 pós inoculação e os ovos durante os primeiros seis dias da semana na qual se inicia o experimento e duas semanas após a muda. Todas as amostras foram submetidas a análises bacteriológicas para recuperação de Salmonella Enteritidis em esfregaços cloacais, fezes e ovos. A Salmonella Enteritidis foi isolada das amostras de suabe cloacal e de amostras de fezes das codornas inoculadas submetidas aos tratamentos: farelo de trigo, óxido de zinco, controle e jejum alimentar, variando o isolamento entre 16,6 a 100% de positividade. Os ovos recolhidos foram negativos para Salmonella Enteritidis na análise microbiológica. Em conclusão, o estudo reafirma que o jejum reduz a imunidade das codornas japonesas e que, devido à elevada concentração do inóculo bacteriano ingerido, provocou uma excreção contínua de Salmonella Enteritidis, independentemente do método de muda forçada utilizado.

Forced moulting is a management technique used to intentionally promote the production pause of eggs, followed by a rejuvenation of the reproductive apparatus of commercially-laying birds, in order to prolong the bird's life expectancy and reduce costs with the acquisition of new animals. The commonly used method is feeding fasting, however this management causes immunological changes in the bird which may make it susceptible to various infections. Therefore, the use of alternative methods, such as the supply of wheat bran and zinc oxide, avoids the stress of fasting and consequently the depression of the immune system avoiding diseases such as Salmonellosis. The objective of the present study was to verify the interference that the various alternative methods of forced moulting have on the excretion of Salmonella Enteritidis in quails. A total of 192 60-week-old Japanese quails were used in eight treatments and six repetitions following: groups inoculated orally with 2x109 colony forming unit (CFU) of Salmonella Enteritidis submitted to forced moulting using the food fasting method, wheat bran, zinc oxide and control, as well as groups of birds not incoculated using the same forced moulting methods mentioned. Faeces samples and cloacal swabs were collected on days 1, 4, 7 and 14 after inoculation and eggs were collected during the first six days of the week in which the experiment starts and two weeks after the moulting. All samples were subjected to bacteriological analyses for recovery of Salmonella Enteritidis on cloacal swabs, faeces and eggs. Salmonella Enteritidis was isolated from cloacal swabs and faeces samples from the inoculated quails submitted to the treatments: wheat bran, zinc oxide, control and food fasting, the isolation ranging from 16.6 to 100% positivity. The eggs collected were negative for Salmonella Enteritidis in microbiological analysis. In conclusion, the study reaffirms that fasting reduces the immunity of Japanese quails and that, due to the high concentration of the ingested bacterial inoculum, it caused a continuous excretion of Salmonella Enteritidis, regardless of the forced moulting method used.

EFEITOS DA REPOSIÇÃO ESTROGÊNICA NA ADIPOSIDADE E NA MICROBIOTA FECAL DE GATAS PREVIAMENTE CASTRADAS

A castração felina é fator de risco para obesidade e diabetes mellitus. O tratamento da obesidade é desafiador e busca por estratégias inovadoras, como a restauração dos efeitos hipofágicos do estrógeno por meio de sua reposição e a manipulação da microbiota de perfil magro. Este trabalho avaliou os efeitos do valerato de 17 -estradiol sobre o consumo alimentar, ganho de peso, perfil bioquímico, morfometria adipocitária e microbiota em 12 gatas divididas em três grupos: OH+E2 (gatas ovariohisterectomizadas com reposição estrogênica), OH (gatas ovariohisterectomizadas sem reposição estrogênica) e SHAM (gatas submetidas apenas à celiotomia). Utilizou-se a dose de 4 g durante três meses (E1), e após um intervalo de 20 dias a dose foi aumentada para 12 g durante três meses (E2). O registro do consumo alimentar e do peso foi diário e semanal, respectivamente. Amostras de sangue para exames bioquímicos e esfregaço vaginal para colpocitologia foram obtidos a cada seis semanas, sob sedação, e amostras de tecido adiposo subcutâneo foram colhidas sob anestesia no momento anterior ao experimento e ao final de E1 e E2. Amostras de fezes foram colhidas no último dia do experimento, armazenadas a -800C e submetidas ao sequenciamento das regiões V3/V4 do gene 16S rRNA. A reposição com 4 g não exerceu os efeitos hipofágicos e de perda de peso, enquanto a reposição com 12 g resultou em perda de peso (p= 0,03), hipofagia nas primeiras quatro semanas e presença de células superficiais na colpocitologia. As dosagens bioquímicas apresentaram-se dentro dos valore de referência, com aumento de triglicérides (p=0,004) e ALT no grupo OH, enquanto a reposição com 12 g mantiveram-nas em declínio. Houve aumento da área dos adipócitos em todos os grupos, sendo significativo no grupo OH (p= 0,026). A hipertrofia adipocitária foi mais discreta no grupo com reposição. Não houve diferença quanto à alfa diversidade da microbiota fecal entre os grupos, enquanto a beta diversidade mostrou uma diferença entre a estrutura das comunidades nos grupos. A relação Firmicutes/Bacteroidetes foi maior nos grupos OH e OH+E2 em comparação com SHAM, impulsionada pela maior abundância de Megasphaera, Megamonas e Dialister (p= 0,020) no grupo OH+E2, em comparação com SHAM. Como conclusão, a reposição de 17 -estradiol na dose de 12 g promoveu um maior controle da adiposidade associado à presença de células superficiais na colpocitologia e diferença na beta diversidade da microbiota fecal.

Feline castration is a risk factor for obesity and diabetes mellitus. The treatment of obesity is challenging and seeks innovative strategies, such as the restoration of the hypophagic effects of estrogen through its replacement and the manipulation of the thin profile microbiota. This work evaluated the effects of 17 -estradiol valerate on food consumption, weight gain, biochemical profile, adipocyte and microbiota morphometry in 12 cats divided into three groups: OH + E2 (ovariohysterectomized cats with estrogen replacement), OH (cats ovariohysterectomized without estrogen replacement) and SHAM (cats submitted to celiotomy only). The dose of 4 g was used for three months (E1), and after an interval of 20 days the dose was increased to 12 g for three months (E2). Food consumption and weight were recorded daily and weekly, respectively. Blood samples for biochemical examinations and vaginal smear for colpocytology were obtained every six weeks, under sedation, and samples of subcutaneous adipose tissue were collected under anesthesia before the experiment and at the end of E1 and E2. Stool samples were collected on the last day of the experiment, stored at -800C and subjected to the sequencing of the V3 / V4 regions of the 16S rRNA gene. The replacement with 4 g did not have the hypophagic and weight loss effects, while the replacement with 12 g resulted in weight loss (P = 0.03), hypophagia in the first four weeks and the presence of superficial cells in the colpocytology. Biochemical measurements were within the reference values, with an increase in triglycerides (P = 0.004) and ALT in the OH group, while replacement with 12 g kept them in decline. There was an increase in the area of adipocytes in all groups, being significant in the OH group (P = 0.026). Adipocyte hypertrophy was more discreet in the replacement group. There was no difference regarding the alpha diversity of the fecal microbiota between the groups, while the beta diversity showed a difference between the structure of the communities in the groups. The Firmicutes / Bacteroidetes ratio was higher in the OH and OH + E2 groups compared to SHAM, driven by the greater abundance of Megasphaera, Megamonas and Dialister (P = 0.020) in the OH + E2 group, compared to SHAM. In conclusion, the replacement of 17 -estradiol at a dose of 12 g promoted a greater control of adiposity associated with the presence of superficial cells in colpocytology and difference in the beta diversity of the fecal microbiota.

VALIDAÇÃO DA TÉCNICA TF-Test Coccidia PARA DETECÇÃO DE Cryptosporidium spp. E Giardia spp. EM CRIANÇAS DE PRÉ-ESCOLA E SEUS RESPECTIVOS CÃES (Canis familiaris)

A criptosporidiose e a giardíase são doenças gastrointestinais, com distribuição cosmopolita, causada, respectivamente, por um protozoário coccídio intracelular obrigatório e um parasito flagelado, que pode afetar humanos e animais. O objetivo neste projeto foi detectar por meio da técnica TF-Test Coccidia e pela reação em cadeia da polimerase (RCP), a ocorrência do Cryptosporidium spp. e a Giardia spp. em crianças de pré-escola e seus respectivos cães (Canis familiaris) do Município de Araçatuba, São Paulo, de maneira inédita. Para a identificação dos oocistos do parasito supramencionado foi empregada a nova técnica parasitológica TF-Test Coccidia e RCP. A partir da análise destas amostras, verificou-se que 35,00% (35/100) das crianças estavam infectadas por alguma espécie de parasito intestinal, sendo que 5,00% eram positivas microscopicamente para Cryptosporidium spp. e 30,00% para Giardia spp. Nos cães, 3,13% (1/32) foram considerados positivos para Giardia spp., embora nenhum animal apresentasse oocisto de Cryptosporidium spp. nas fezes. Pela PCR 3,00% das crianças foram positivas para Cryptosporidium spp. e 35,00% para Giardia spp.. Enquanto que para os cães, pela mesma técnica molecular, nenhum animal foi considerado positivo para Cryptosporidium spp. e apenas 6,25% foram positivos para Giardia spp.. Dessa forma, foi verificado que a técnica parasitológica TF-Test Coccidia apresentou boa concentração e morfologia dos parasitos encontrados, com baixa quantidade de debris no esfregaço fecal. Pela primeira vez, Cryptosporidium spp. e a Giardia spp. foram detectados em crianças de pré-escola e seus respectivos cães (Canis familiaris) por meio da técnica TF-Test Coccidia e RCP.

Cryptosporidiosis and giardiasis are gastrointestinal diseases with cosmopolitan distribution, caused respectively by a compulsory intracellular coccidial protozoan and a flagellated parasite, which can affect humans and animals. The objective of this project was to detect by the technique TF-Test Coccidia and polymerase chain reaction (PCR), the occurrence of Cryptosporidium spp. and Giardia spp. in pre-school children and their respective dogs (Canis familiaris) from the Municipality of Araçatuba, São Paulo. For the identification of oocysts of the parasite the new parasitological technique TF-Test Coccidia and PCR were used. From the analysis of these samples, it was verified that 35.00% (35/100) of the children were infected by some kind of intestinal parasite, and 5.00% were microscopically positive for Cryptosporidium spp. and 30,00% for Giardia spp.. In dogs, 3.13% (1/32) were considered positive for Giardia spp., although no animal presented Cryptosporidium spp. Oocyst. in the stool. By PCR 3.00% of the children were positive for Cryptosporidium spp. and 35.00% for Giardia spp.. While for dogs, by the same molecular technique, no animals were considered positive for Cryptosporidium spp. and only 6.25% were positive for Giardia spp.. Thus, was verified that the parasitological technique TF-Test Coccidia presented good concentration and morphology of the parasites found, with a low amount of debris in the fecal smear. For the first time, Cryptosporidium spp. and Giardia spp. were detected in pre-school children and their respective dogs (Canis familiaris) by TF-Test Coccidia and PCR technique.

PREVALÊNCIA E FATORES DE RISCO ASSOCIADOS A INFECÇÃO POR Neospora caninum E Trypanosoma vivax EM BOVINOS LEITEIROS E OCORRÊNCIA DE N. caninum E PARASITOS GASTROINTESTINAIS EM CÃES DE PROPRIEDADES RURAIS DO OESTE DO PARANÁ, BRASIL

Parasitos são seres que se beneficiam de um hospedeiro para sobreviver, podendo causar danos à saúde do animal. Em bovinos, os parasitos que acometem o sistema reprodutor possuem grande importância, principalmente pelos prejuízos econômicos que geram. O objetivo desse trabalho foi pesquisar a prevalência de Neospora caninum e Trypanosoma vivax em bovinos; N. caninum e parasitos grastrintestinais em cães; N. caninum em fetos bovinos, além de determinar os principais fatores de risco associados com os patógenos pesquisados em propriedades rurais de bovinocultura de leite da região Oeste do Paraná. Após a realização do cálculo de amostragem foram coletadas 600 amostras de sangue e 17 fetos bovinos, 163 amostras de sangue e 120 amostras de fezes de cães de propriedades rurais das cidades de Cascavel, Toledo, Marechal Cândido Rondon e Palotina, e aplicado um questionário epidemiológico. Para a detecção de anticorpos anti-Neospora caninum em cães e bovinos foi realizada a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Para o diagnóstico de T. vivax em bovinos foi realizada a RIFI e esfregaço sanguíneo da capa leucocitária. Os Métodos de Willis-Mollay, Hoffman, Pons e Janer e Sheather foram utilizados para a detecção de ovos e/ou oo (cistos) de parasitos em amostras de fezes dos cães. Amostras do cérebro, coração e placenta dos fetos bovinos foram submetidas à técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) para o diagnóstico de Neospora caninum. Os resultados e os dados coletados a partir do questionário epidemiológico foram analisados através do programa EpiInfo. Das amostras de bovinos, 23,67% foram positivas para N. caninum e todas apresentaram resultado negativo para T. vivax. Em nove (52,94%) fetos foi possível amplificar material genético do N. caninum. As principais variáveis associadas com a infecção foram histórico de aborto, baixa produção de leite, criação extensiva e raça Jersey. Das 163 amostras de sangue de cães, 11,66% foram positivas para o N.caninum, não havendo correlação significativa entre os resultados da sorologia dos cães e dos bovinos. Das amostras fecais, 71,67% foram positivas para ao menos um parasito. Os mais encontrados foram Ancylostoma spp. (80,23%), Trichuris vulpis (20,93%), Cystoisospora spp. (17,44%) e Giardia spp. (8,14%). Também foram encontrados Sarcocystis spp., Toxocara spp., Hymenolepis diminuta e Capillaria spp. em um percentual menor. Pseudoparasitos como oocistos da família Adeleidae e Eimeria spp., e ovos da família Ascaridiidae também foram encontrados. De acordo com o gênero/espécie de parasito, associação foi verificada entre fezes pastosas e parasitismo por Cystoisospora spp. e Sarcocystis spp., histórico de verminose e Trichuris vulpis, e condições de vida, ou seja, se vivem soltos ou presos, para e Ancylostoma spp., Cystoisospora spp., Giardia spp. e Trichuris vulpis.

Parasites are beings that benefit from a host to survive, and can cause harm to the health of the animal. In cattle, the parasites that affect the reproductive system are of great importance, mainly for the economic damages that they cause. The objective of this study was to investigate the prevalence of Neospora caninum and Trypanosoma vivax in cattle; N. caninum and gastrointestinal parasites in dogs; N. caninum in bovine fetuses, in addition to the main risk factors associated with the pathogens researched in rural dairy cattle in the western region of Paraná. After the sampling calculation was performed, 600 blood samples and 17 bovine fetuses, 163 blood samples and 120 faecal samples of rural dogs were collected from the cities of Cascavel, Toledo, Marechal Cândido Rondon and Palotina, and also an epidemiological questionnaire was applied. For the detection of anti-Neospora caninum antibodies in dogs and cattle, an Indirect Immunofluorescence Reaction (IFAT) was performed. For the diagnosis of T. vivax in cattle, an IFAT and blood smear of the leukocyte layer was performed. The methods of Willis-Mollay, Hoffman, Pons and Janer and Sheather were used to detect eggs and/or oo(cysts) of parasites in samples of feces from dogs. Brain, heart and placenta samples from bovine fetuses were submitted to the Polymerase Chain Reaction (PCR) technique for the diagnosis of Neospora caninum. The results and data collected from the epidemiological questionnaire were analyzed through the EpiInfo program. Of the bovine samples, 23.67% were positive for N. caninum and all showed negative results for T. vivax. In nine (52.94%) fetuses it was possible to amplify genetic material of N. caninum. The main variables associated with the infection were abortion history, low milk yield, extensive breeding and Jersey breed. Of the 163 dog blood samples, 11.66% were positive for N. caninum, with no significant correlation between the serology results of dogs and cattle. Of the fecal samples, 71.67% were positive for at least one parasite. The most sought after were Ancylostoma spp. (80.23%), Trichuris vulpis (20.93%), Cystoisospora spp. (17.44%) and Giardia spp. (8.14%). Sarcocystis spp., Toxocara spp., Hymenolepis diminuta and Capillaria spp. were also found In a lower percentage. Pseudoparasites such as oocysts of the family Adeleidae and Eimeria spp., and eggs of the Ascaridiidae family were found too. According to the genus/species of parasite, the association was verified between pasty faeces and parasitism by Cystoisospora spp. and Sarcocystis spp., history of verminosis and Trichuris vulpis, and living conditions, that is, if they live loose or trapped, for Ancylostoma spp., Cystoisospora spp., Giardia spp. and Trichuris vulpis.

Diagnóstico de Cryptosporidium spp: inserção na rotina de exames parasitológicos? / Diagnosis of Cryptosporidium spp: should it be part of routine parasitological tests?

Protozoários do gênero Cryptosporidium são coccídeos zoonóticos que infectam cerca de 170 espécies animais. O objetivo deste trabalho foi avaliar amostras de fezes para a detecção de oocistos de Cryptosporidium spp. em animais domésticos, sem a indicação de seu diagnóstico. Foram analisadas amostras fecais de 90 animais domésticos entre outubro de 2007 a janeiro de 2008: 21 caninos, 7 felinos, 22 suínos, 2 equinos, 16 bovinos e 22 ovinos. Foram examinados esfregaços de fezes e corados pela técnica de Ziehl Neelsen modificada. A frequência total foi de 11% (10/90) de positividade em esfregaços fecais, com 22,7% (5/22) de ovinos, 18,7% (3/16) de bovinos e 9,5% (2/21) de caninos apresentando oocistos de Cryptosporidium spp. nas fezes. A presença de Cryptosporidium spp. nas amostras fecais faculta o fator de risco para transmissão entre animais e/ou humanos. Sugere-se a inclusão da investigação de Cryptosporidium spp. na rotina de exames parasitológicos

Protozoa of the genus Cryptosporidium are zoonotic coccidia that infect approximately 170 animal species. The aim of this study was to assess fecal samples in order to detect Cryptosporid¬ium spp oocysts in pets and farm animals without suspected diagnosis of this infection. A total of 90 samples were analyzed between October 2007 and January 2008: 21 from dogs, 7 from cats, 22 from pigs, 2 from horses, 16 from cows and 22 from sheep. Fecal smears were examined and stained by the modified Ziehl-Neelsen’s method. The overall frequency of Cryptosporidium oocysts in the feces was 11% (10/90), of which 22.7% (5/22) belonged to sheep, 18.7% (3/16) to cows and 9.5% (2/21) to dogs. The presence of Cryptosporidium spp. in fecal samples predisposes to the risk of transmission between animals and/or humans. We suggest including the screening for Cryptosporidium spp. in routine parasitological tests

Diagnóstico de Cryptosporidium spp: inserção na rotina de exames parasitológicos? / Diagnosis of Cryptosporidium spp: should it be part of routine parasitological tests?

Protozoários do gênero Cryptosporidium são coccídeos zoonóticos que infectam cerca de 170 espécies animais. O objetivo deste trabalho foi avaliar amostras de fezes para a detecção de oocistos de Cryptosporidium spp. em animais domésticos, sem a indicação de seu diagnóstico. Foram analisadas amostras fecais de 90 animais domésticos entre outubro de 2007 a janeiro de 2008: 21 caninos, 7 felinos, 22 suínos, 2 equinos, 16 bovinos e 22 ovinos. Foram examinados esfregaços de fezes e corados pela técnica de Ziehl Neelsen modificada. A frequência total foi de 11% (10/90) de positividade em esfregaços fecais, com 22,7% (5/22) de ovinos, 18,7% (3/16) de bovinos e 9,5% (2/21) de caninos apresentando oocistos de Cryptosporidium spp. nas fezes. A presença de Cryptosporidium spp. nas amostras fecais faculta o fator de risco para transmissão entre animais e/ou humanos. Sugere-se a inclusão da investigação de Cryptosporidium spp. na rotina de exames parasitológicos(AU)

Protozoa of the genus Cryptosporidium are zoonotic coccidia that infect approximately 170 animal species. The aim of this study was to assess fecal samples in order to detect Cryptosporid¬ium spp oocysts in pets and farm animals without suspected diagnosis of this infection. A total of 90 samples were analyzed between October 2007 and January 2008: 21 from dogs, 7 from cats, 22 from pigs, 2 from horses, 16 from cows and 22 from sheep. Fecal smears were examined and stained by the modified Ziehl-Neelsens method. The overall frequency of Cryptosporidium oocysts in the feces was 11% (10/90), of which 22.7% (5/22) belonged to sheep, 18.7% (3/16) to cows and 9.5% (2/21) to dogs. The presence of Cryptosporidium spp. in fecal samples predisposes to the risk of transmission between animals and/or humans. We suggest including the screening for Cryptosporidium spp. in routine parasitological tests(AU)

Avaliação de protocolos para indução de inatividade ovariana em gatas domésticas / Evaluation of protocols for induction of inactivity ovarian in domestic cats

Os índices de prenhez após inseminação artificial em felídeos selvagens não são satisfatórios devido ao variável ambiente endócrino após a estimulação com gonadotropinas. O objetivo deste estudo consistiuem aumentar a taxa de sucesso em programas de inseminação artificial em gatas domésticas (animal modelo). As fêmeas (n=9) foram divididas em três grupos, cada um com três animais, sendo: 1) controle(C), somente 200 UI eCG/ 100 UI hCG ; 2) levonorgestrel oral (L)(0,075 mg) durante 37 dias + eCG/hCG; 3) etonogestrel (E), implante subdérmico durante 37 dias + eCG/hCG. Foram submetidas ao exame laparoscópico 29-39 horas após a administração de hCG para verificação da resposta ovariana e realização de esfregaço vaginal para monitoração da fase do ciclo estral. Foram coletadas amostras de fezes 60 dias antes e 60 dias após o tratamento com gonadotropinas para dosagem hormonal de estrógenos. Os resultados foram avaliados através do Teste ANOVA. Os níveis de significância mostraram que o Grupo E, em contraste com o Grupo C e o Grupo L, apresentou inibição satisfatória das concentrações de estrógenos durante a sua utilização. O grupo L não apresentou inibição ovariana durante o tratamento e diferença significativa em relação ao Grupo C. No exame laparoscópico todas as fêmeas dos grupos C, L e E apresentaram folículos e 77% das fêmeas apresentaram corpo lúteo. Também apresentaram células epiteliais superficiais anucleadas e nucleadas características de estro. Concluiu-se que a utilização de implantes de etonogestrel em gatas domésticas mostrou-se eficaz, possibilitando asua utilização prévia aos programas de inseminação artificial, aspiração folicular e também para a contracepção.(AU)

Reproductive success in endangered captive small felids species is veryl ow. Due to great variability in endocrine environment post gonadotropin treatment, after artificial insemination pregnancy rates are very low. Nowadays, ovarian activity controll improves the AI success in many species. In this study, new protocols were compared to improve the fertilization rates in artificial insemination programs in domestic cat. Female domestic cats were divided in three treatments: 1) control (eCG/hCG); 2) levonorgestrel (0.075 mg) orally during 37days + eCG/hCG; 3) etonogestrel subdermal implant during 37days + eCG/hCG: Laparoscopies were done 29-39 hours post hCG treatment to verify ovarian activity. Vaginal swabs were collected at laparoscopic procedures. Fecal samples were colected 60 days before, during and 60 days after the gonadotropin treatment for estradiol assay. Means comparisons were done by ANOVA test. Results demonstrated that etonogestrel (implant) and not oral levonorgestrel successfully suppressed ovarian activity. The levonorgestrel group didnot show ovarian inactivity during the administration, presenting oestradiol peaks and without significative diference comparing to control group. All females presented anuclear and nuclear superficial vaginal epithelial cells at laparoscopies. In conclusion, the etonogestrel implant used in the domestic cat was efficient and can be used previous to gonadotropin protocol in artificial insemination programs, follicular aspiration and contraception.(AU)