Resumo
The present study was designed to evaluate the protective effects of echinochrome (Ech) on intrahepatic cholestasis in rats induced by a single (i.p.) injection of alpha-naphthylisothiocyanate (ANIT) (75 mg/kg body weight). The rats were pre-treated orally for 48hr (one dose / 24hr) with Ech (1, 5 and 10 mg/kg body weight) or ursodeoxycholic acid (UDCA) 80 mg/kg body weight drug then, injected with ANIT. ANIT markedly increased serum activities of alanine amino transaminase (ALT), aspartate amino transaminase (AST) and alkaline phosphatase (ALP), which was accompanied by a massive inflammation of epithelial cells on bile duct at 24h after ANIT injection. ANIT also increased the levels of total protein (TP), total bilirubin (TB), direct bilirubin (DB), indirect bilirubin (IB), however decrease albumin content (ALB). In addition ANIT increased hepatic MDA and NO level and decreased GSH level and GST activity. The Ech exerted hepatoprotective and anticholestatic effects as assessed by a significant decrease in the activities of serum AST, ALT and ALP, and the levels of TP, TB, DB and IB as well as liver MDA level and NO level. In conclusion, Ech was found to possess hepatoprotective effect against intrahepatic cholestasis induced by hepatotoxin such as ANIT.(AU)
O presente estudo destinou-se a avaliar os efeitos protetores do Ech na colestase intra-hepática em ratos induzidos por uma única injeção (i.p.) de alfa-naftilisotiocianato (ANIT) (75 mg / kg de peso corporal). Os ratos foram pré-tratados oralmente durante 48 horas (uma dose / 24 horas) com cada (1, 5 e 10 mg / kg de peso corporal) e ácido ursodeoxicólico (UDCA) 80 mg / kg de peso corporal, em seguida, injetado com ANIT. ANIT atividades de soro marcadamente aumentadas de alanina amino transaminasa (ALT), aspartato de amino transaminases (AST) e fosfatase alcalina (ALP), que foi acompanhada por uma inflamação maciça de células epiteliais no ducto biliar às 24h após a injeção de ANIT. A ANIT também aumentou os níveis de proteína total (TP), bilirrubina total (TB), bilirrubina direta (DB), bilirrubina indireta (IB), no entanto, diminuem o teor de albumina (ALB). Além disso, a ANIT aumentou o nível de MDA hepático e NO e diminuiu o nível de GSH e a atividade de GST. O Ech exerceu efeitos hepatoprotectores e anticolestáticos como avaliado por uma diminuição significativa nas atividades de AST sérica, ALT e ALP e os níveis de TP, TB, DB e IB, bem como o nível de MDA no fígado e o nível de NO. Ech foi encontrado para possuir efeito protetor no fígado contra a colestase intra-hepática induzida por hepatotoxina, como a ANIT.(AU)
Assuntos
Animais , Ratos , Colestase , Colestase Intra-Hepática , Bilirrubina , 1-NaftilisotiocianatoResumo
Abstract The present study was designed to evaluate the protective effects of echinochrome (Ech) on intrahepatic cholestasis in rats induced by a single (i.p.) injection of alpha-naphthylisothiocyanate (ANIT) (75 mg/kg body weight). The rats were pre-treated orally for 48hr (one dose / 24hr) with Ech (1, 5 and 10 mg/kg body weight) or ursodeoxycholic acid (UDCA) 80 mg/kg body weight drug then, injected with ANIT. ANIT markedly increased serum activities of alanine amino transaminase (ALT), aspartate amino transaminase (AST) and alkaline phosphatase (ALP), which was accompanied by a massive inflammation of epithelial cells on bile duct at 24h after ANIT injection. ANIT also increased the levels of total protein (TP), total bilirubin (TB), direct bilirubin (DB), indirect bilirubin (IB), however decrease albumin content (ALB). In addition ANIT increased hepatic MDA and NO level and decreased GSH level and GST activity. The Ech exerted hepatoprotective and anticholestatic effects as assessed by a significant decrease in the activities of serum AST, ALT and ALP, and the levels of TP, TB, DB and IB as well as liver MDA level and NO level. In conclusion, Ech was found to possess hepatoprotective effect against intrahepatic cholestasis induced by hepatotoxin such as ANIT.
Resumo O presente estudo destinou-se a avaliar os efeitos protetores do Ech na colestase intra-hepática em ratos induzidos por uma única injeção (i.p.) de alfa-naftilisotiocianato (ANIT) (75 mg / kg de peso corporal). Os ratos foram pré-tratados oralmente durante 48 horas (uma dose / 24 horas) com cada (1, 5 e 10 mg / kg de peso corporal) e ácido ursodeoxicólico (UDCA) 80 mg / kg de peso corporal, em seguida, injetado com ANIT. ANIT atividades de soro marcadamente aumentadas de alanina amino transaminasa (ALT), aspartato de amino transaminases (AST) e fosfatase alcalina (ALP), que foi acompanhada por uma inflamação maciça de células epiteliais no ducto biliar às 24h após a injeção de ANIT. A ANIT também aumentou os níveis de proteína total (TP), bilirrubina total (TB), bilirrubina direta (DB), bilirrubina indireta (IB), no entanto, diminuem o teor de albumina (ALB). Além disso, a ANIT aumentou o nível de MDA hepático e NO e diminuiu o nível de GSH e a atividade de GST. O Ech exerceu efeitos hepatoprotectores e anticolestáticos como avaliado por uma diminuição significativa nas atividades de AST sérica, ALT e ALP e os níveis de TP, TB, DB e IB, bem como o nível de MDA no fígado e o nível de NO. Ech foi encontrado para possuir efeito protetor no fígado contra a colestase intra-hepática induzida por hepatotoxina, como a ANIT.
Resumo
Abstract The present study was designed to evaluate the protective effects of echinochrome (Ech) on intrahepatic cholestasis in rats induced by a single (i.p.) injection of alpha-naphthylisothiocyanate (ANIT) (75 mg/kg body weight). The rats were pre-treated orally for 48hr (one dose / 24hr) with Ech (1, 5 and 10 mg/kg body weight) or ursodeoxycholic acid (UDCA) 80 mg/kg body weight drug then, injected with ANIT. ANIT markedly increased serum activities of alanine amino transaminase (ALT), aspartate amino transaminase (AST) and alkaline phosphatase (ALP), which was accompanied by a massive inflammation of epithelial cells on bile duct at 24h after ANIT injection. ANIT also increased the levels of total protein (TP), total bilirubin (TB), direct bilirubin (DB), indirect bilirubin (IB), however decrease albumin content (ALB). In addition ANIT increased hepatic MDA and NO level and decreased GSH level and GST activity. The Ech exerted hepatoprotective and anticholestatic effects as assessed by a significant decrease in the activities of serum AST, ALT and ALP, and the levels of TP, TB, DB and IB as well as liver MDA level and NO level. In conclusion, Ech was found to possess hepatoprotective effect against intrahepatic cholestasis induced by hepatotoxin such as ANIT.
Resumo O presente estudo destinou-se a avaliar os efeitos protetores do Ech na colestase intra-hepática em ratos induzidos por uma única injeção (i.p.) de alfa-naftilisotiocianato (ANIT) (75 mg / kg de peso corporal). Os ratos foram pré-tratados oralmente durante 48 horas (uma dose / 24 horas) com cada (1, 5 e 10 mg / kg de peso corporal) e ácido ursodeoxicólico (UDCA) 80 mg / kg de peso corporal, em seguida, injetado com ANIT. ANIT atividades de soro marcadamente aumentadas de alanina amino transaminasa (ALT), aspartato de amino transaminases (AST) e fosfatase alcalina (ALP), que foi acompanhada por uma inflamação maciça de células epiteliais no ducto biliar às 24h após a injeção de ANIT. A ANIT também aumentou os níveis de proteína total (TP), bilirrubina total (TB), bilirrubina direta (DB), bilirrubina indireta (IB), no entanto, diminuem o teor de albumina (ALB). Além disso, a ANIT aumentou o nível de MDA hepático e NO e diminuiu o nível de GSH e a atividade de GST. O Ech exerceu efeitos hepatoprotectores e anticolestáticos como avaliado por uma diminuição significativa nas atividades de AST sérica, ALT e ALP e os níveis de TP, TB, DB e IB, bem como o nível de MDA no fígado e o nível de NO. Ech foi encontrado para possuir efeito protetor no fígado contra a colestase intra-hepática induzida por hepatotoxina, como a ANIT.
Resumo
Dentre as espécies cultivadas mundialmente, o camarão branco Litopenaeus vannamei tem sido o crustáceo mais cultivado. Fatores externos prejudicam sua produção, como as toxinas gerada por cianobactérias, que podem induzir estresse oxidativo, dentre outros efeitos toxicológicos. O fruto Euterpe oleracea, conhecido popularmente como açaí, contém grandes quantidades de moléculas antioxidantes, incluindo antocianinas. Estudos prévios mostraram que a suplementação de antioxidantes pode ser uma estratégia eficaz para amenizar os efeitos tóxicos de cianotoxinas. Deste modo, o objetivo do trabalho foi avaliar o efeito da adição do açaí na dieta do camarão como uma estratégia quimioprotetora no camarão L. vannamei exposto a cianotoxina nodularina (Nod). Foram utilizadas unidades experimentais de 14 litros, com 3 repetições, contendo 7 juvenis de camarões (1,50 ± 0.39 g) por unidade. O experimento baseou-se na inclusão de 10% de açaí na dieta, além da dieta controle, sem adição de açaí. A ração foi fornecida duas vezes ao dia, durante 30 dias e após, os camarões foram subdivididos em outros 3 tratamentos (Controle, 0,25 e 1 g de Nod/L), tanto no grupo que recebeu inclusão com açaí quanto os alimentados com a dieta controle. No final do experimento foi avaliado a bioacumulação da toxina no músculo do camarão através de cromatografia líquida de alta eficiência. Também foi avaliada a concentração do antioxidante glutationa reduzida (GSH), utilizando ácido 5,5-ditio-bis- (2-nitrobenzóico), DTNB, e avaliando a absorbância em 405nm. Com o mesmo método foi avaliação a concentração de grupos sulfidrilas associados à proteínas. Também foi dosada a peroxidação lipídica avaliado pelo método TBARS e, quantificada por fluorimetria. Finalmente, foi medida a atividade da enzima glutationa-S-transferase (GST) espectrofotometricamente. Os dados foram analisados estatisticamente utilizando um modelo linear com componentes de variância (fatores: pré tratamento com açaí e concentrações de nodularina) seguidos pelo teste de Newmann-Keuls. A inclusão com açaí na dieta foi capaz de aumentar os níveis de glutationa reduzida (GSH), diminuir os níveis de peroxidação lipídica e os níveis de grupos sulfidrila (P<0,05). Na análise da peroxidação lipídica nas amostras de hepatopâncreas, observou-se redução significativa do conteúdo de TBARS nos organismos tratados com açaí (0,13 ± 5,1x10-4 nmol/mg de tecido) comparados com os que não receberam açaí (0,16 ± 5,2x10-4 nmol/mg de tecido) (P <0,05). 8 Na análise de determinação da atividade da enzima GST, não foi encontrada diferenças estatísticas em nenhum dos tratamentos (P>0,05). Os dados da análise de GSH nas amostras de hepatopâncreas dos animais que receberam açaí em sua dieta apresentaram um aumento significativo (0,46 ± 0,03 nM GSH / mg de proteína) em relação ao grupo que não recebeu açaí na dieta (0,27 ± 0,03 nM GSH / mg de proteína) (P <0,05). Entretanto, a exposição a toxina não causou efeito na concentração de GSH no organismo (P>0.05). Nas amostras de músculo, a presença de açaí na dieta reduziu a concentração de grupos sulfidrilas associados às proteínas (5,99 ± 0,24 mol equiv GSH/mg de proteína), quando foram comparadas ao grupo que não recebeu açaí em sua dieta. (6,99 ± 0.32 mol equiv GSH/mg de proteína) (P<0.05). Mas a exposição à toxina não causou diferenças na concentração dos grupos sulfidrila associados às proteínas (P>0,05). É notório o fato de que organismos aquáticos quando expostos a florações de cianobactérias estão sujeitos a apresentar efeitos negativos em seus parâmetros bioquímicos e fisiológicos, podendo levar inclusive a morte. Estas florações podem acontecer naturalmente em ambientes oligotróficos, ou seja, em ambientes característicos por serem pobres em nutrientes, ou também podem acontecer em ambientes ricos em nutrientes e temperaturas elevadas. No caso em estudo, a toxina nodularina apesar desta toxina ser hepatotóxica (Zimba et al; 2006) também têm sido reportados efeitos em outros tecidos e órgãos (egura, Zajc, Lah & Filipi, 2008). Neste estudo, foi verificado a presença da toxina no músculo do organismo, porém as concentrações ensaiadas estão abaixo ou no limite para consumo humano estabelecido no Brasil, estabelecido para uma hepatotoxina como a microcistinas. O valor limite de 1 g.L-1, adotado pela Portaria 518 de 2004, do Ministério da Saúde, foi estipulado pela Organização Mundial da Saúde com base na variante LR de microcistina. Em camundongos e porcos foi estabelecido o valor de 0,04 g.Kg-1 como a dose oral máxima diária aceitável (Chorus & Bartram, 1999) aqui caberia comparar com os valores que vc achou no musculo. Tanto a inclusão de açaí quanto a exposição à toxina não foram capazes de induzir diferenças significativas (P>0,05) na concentração de toxina encontrada no músculo do organismo. Neste presente trabalho, pôde ser observado que a inclusão de biomoléculas antioxidantes fornecida através do fruto açaí na dieta dos organismos, permitiu ao camarão enfrentar o estresse causado pela toxina, minimizando seus efeitos negativos quais foram? Não está claramente enunciado no resumo, e trazendo qualidade na saúde 9 do animal, isto pode ser afirmado com base nos dados de conteúdo de GSH no hepatopâncreas, levando em conta a característica de hepatotoxina da nodularina. A detoxificação do organismo ocorre pela atividade de algumas enzimas, como por exemplo as enzimas do grupo das GSTs, que conjugam cianotoxinas como as microcistinas com o grupo SH (tiol) da molécula de GSH, facilitando a excreção (Jayaraj, Anand & Rao, 2006). Entretanto, no presente estudo, não foi verificado alterações na atividade da GST, o que pode ser consequência do tempo de exposição e/ou as concentrações de toxina utilizadas no trabalho, Também é importante salientar que até o momento não existem trabalhos que indiquem que a nodularina é substrato das GSTs. Uma alternativa rápida para ver se a nodularina é fe fato substrato das GSTs seria avaliar através de ensaios de docagem molecular Estudo anterior demonstrou aumento significativo no dano lipídico em molusco Perna viridis expostos a Nodularia spumigena durante 3 dias (Davies et al., 2005). Entretanto, no presente estudo foi verificado a diminuição dos níveis de peroxidação lipídica no hepatopâncreas, evidenciando a atuação do açaí como fonte quimioprotetora frente a toxicidade da toxina. Ao todo, o tratamento com açaí foi capaz de melhorar a capacidade antioxidante do camarão, restando, para trabalhos futuros desafiar ao organismo a concentrações mais elevadas de cianotoxinas e analisar mais apropriadamente a diminuição da concentração dos grupos sulfidrila associados à proteínas observado no músculo dos camarões que receveram açaí.
The experiment considered the inclusion of 10% of açaí Euterpe olaracea in the diet of shrimp Litopenaeus vannamei, besides the control diet, without açaí. The feed was given twice a day for 30 days and, afterward, the shrimps were subdivided into another 3 treatments (Control, 0.25 and 1 g/L of hepatotoxin nodularin), both in the group that received inclusion with açaí and those fed with the control diet. At the end of the experiment, it was evaluated the concentration of reduced glutathione (GSH); sulfhydryl groups associated with proteins (P-SH), lipid peroxidation (TBARS method), the activity of glutathione-S-transferase (GST), and nodularin accumulation in muscle. The inclusion of açaí in the diet was able to increase the levels of GSH in the hepatopancreas and gills and to decrease the levels of lipid peroxidation in the muscle of nodularinexposed shrimps in respect to the control group. Nodularin exposure did not affect P-SH levels in the analyzed organs, although açaí treatment reduced P-SH levels in muscle. TBARS muscle concentration was reduced in shrimps fed with açaí and exposed to nodularin. Finally, nodularin exposure was not followed by toxin accumulation in muscle but, notably, it was detected measurable levels in control groups (fed or not with açai). Overall, the results showed to induce the antioxidant levels of the shrimp and to reduce TBARS in muscle when exposed to nodularin, suggesting the use of açaí as a chemoprotectant.
Resumo
Urban and industrial discharges, intense agricultural exploitation and fisheries have been causing the eutrophication in both drinking and recreational waters. A frequent consequence of eutrophication in waters is the massive development of cyanobacteria. The occurrence of these blooms induces a severe problem, as Microcystis aeruginosa, the most widespread distributed cyanobacteria, can produce microcystins (MC). Toxic effects of MC have been described in liver, lungs, stomach, and intestine. Deaths in wildlife, livestock and human beings were also associated with MC exposition. MC exposition can occurs directly by ingestion, inhalation, contact, intravenous inoculation of contaminated water (hemodialysis) or indirectly, by the consumption of animals, as fish and mollusks, the majors ingestors of cyanobacteria and its toxins. The most toxic MC, an also the most common is microcystin-LR (MC-LR), that has the liver as the main target organ. Microcystin is taken up specifically into the liver by bile acid transporters and, after entering the cytoplasm, inhibit protein phosphatases 1 and 2A, which leads to the increase in protein phosphorylation. This effect has two main consequences: the destruction of cytoskeleton directly causing cytotoxic effects, and deregulation of cell division, leading to tumor-promoting activity. Acute exposition to MC induces severe intrahepatic hemorrha
Efluentes industriais e urbanos e a intensa exploração agrícola e de pescado têm levado à eutrofização de muitos mananciais de água, destinados ao consumo e às atividades recreacionais. A eutrofização das águas, freqüentemente, tem como conseqüência o desenvolvimento expressivo de cianobactérias. Estas florações induzem a sérios problemas, visto que a ocorrência de Microcystis aeruginosa, uma das cianobactérias mais difundidas, pode produzir microcistinas (MCs). O efeito citotóxico da MC tem sido descrito no fígado, pulmões, estômago e intestino. Mortes de seres humanos, de animais silvestres e domésticos têm sido associadas à exposição a MC. Esta pode ocorrer diretamente por ingestão, inalação, contato, inoculação intravenosa (hemodiálise) ou indiretamente, pelo consumo de animais, dentre os quais os peixes e moluscos, que podem ingerir as cianobactérias e suas toxinas. A mais tóxica e também mais comum das MCs é a microcistina-LR (MC-LR), cujo órgão alvo é o fígado. A MC chega ao fígado especificamente por transporte dos ácidos biliares e, uma vez no citoplasma, inibe as proteínas fosfatases 1 e 2A, induzindo ao aumento da fosforilação protéica. Esta reação tem duas conseqüências: destruição do citoesqueleto, causando efeitos citotóxicos e descontrole da divisão celular, levando à promoção tumoral. A exposição aguda à MC induz severa hemorragia intra-hepática, necrose e apopt
Resumo
Urban and industrial discharges, intense agricultural exploitation and fisheries have been causing the eutrophication in both drinking and recreational waters. A frequent consequence of eutrophication in waters is the massive development of cyanobacteria. The occurrence of these blooms induces a severe problem, as Microcystis aeruginosa, the most widespread distributed cyanobacteria, can produce microcystins (MC). Toxic effects of MC have been described in liver, lungs, stomach, and intestine. Deaths in wildlife, livestock and human beings were also associated with MC exposition. MC exposition can occurs directly by ingestion, inhalation, contact, intravenous inoculation of contaminated water (hemodialysis) or indirectly, by the consumption of animals, as fish and mollusks, the majors ingestors of cyanobacteria and its toxins. The most toxic MC, an also the most common is microcystin-LR (MC-LR), that has the liver as the main target organ. Microcystin is taken up specifically into the liver by bile acid transporters and, after entering the cytoplasm, inhibit protein phosphatases 1 and 2A, which leads to the increase in protein phosphorylation. This effect has two main consequences: the destruction of cytoskeleton directly causing cytotoxic effects, and deregulation of cell division, leading to tumor-promoting activity. Acute exposition to MC induces severe intrahepatic hemorrha
Efluentes industriais e urbanos e a intensa exploração agrÃcola e de pescado têm levado à eutrofização de muitos mananciais de água, destinados ao consumo e à s atividades recreacionais. A eutrofização das águas, freqûentemente, tem como conseqûência o desenvolvimento expressivo de cianobactérias. Estas florações induzem a sérios problemas, visto que a ocorrência de Microcystis aeruginosa, uma das cianobactérias mais difundidas, pode produzir microcistinas (MCs). O efeito citotóxico da MC tem sido descrito no fÃgado, pulmões, estômago e intestino. Mortes de seres humanos, de animais silvestres e domésticos têm sido associadas à exposição a MC. Esta pode ocorrer diretamente por ingestão, inalação, contato, inoculação intravenosa (hemodiálise) ou indiretamente, pelo consumo de animais, dentre os quais os peixes e moluscos, que podem ingerir as cianobactérias e suas toxinas. A mais tóxica e também mais comum das MCs é a microcistina-LR (MC-LR), cujo órgão alvo é o fÃgado. A MC chega ao fÃgado especificamente por transporte dos ácidos biliares e, uma vez no citoplasma, inibe as proteÃnas fosfatases 1 e 2A, induzindo ao aumento da fosforilação protéica. Esta reação tem duas conseqûências: destruição do citoesqueleto, causando efeitos citotóxicos e descontrole da divisão celular, levando à promoção tumoral. A exposição agu
Resumo
Urban and industrial discharges, intense agricultural exploitation and fisheries have been causing the eutrophication in both drinking and recreational waters. A frequent consequence of eutrophication in waters is the massive development of cyanobacteria. The occurrence of these blooms induces a severe problem, as Microcystis aeruginosa, the most widespread distributed cyanobacteria, can produce microcystins (MC). Toxic effects of MC have been described in liver, lungs, stomach, and intestine. Deaths in wildlife, livestock and human beings were also associated with MC exposition. MC exposition can occurs directly by ingestion, inhalation, contact, intravenous inoculation of contaminated water (hemodialysis) or indirectly, by the consumption of animals, as fish and mollusks, the majors ingestors of cyanobacteria and its toxins. The most toxic MC, an also the most common is microcystin-LR (MC-LR), that has the liver as the main target organ. Microcystin is taken up specifically into the liver by bile acid transporters and, after entering the cytoplasm, inhibit protein phosphatases 1 and 2A, which leads to the increase in protein phosphorylation. This effect has two main consequences: the destruction of cytoskeleton directly causing cytotoxic effects, and deregulation of cell division, leading to tumor-promoting activity. Acute exposition to MC induces severe intrahepatic hemorrha
Efluentes industriais e urbanos e a intensa exploração agrícola e de pescado têm levado à eutrofização de muitos mananciais de água, destinados ao consumo e às atividades recreacionais. A eutrofização das águas, freqüentemente, tem como conseqüência o desenvolvimento expressivo de cianobactérias. Estas florações induzem a sérios problemas, visto que a ocorrência de Microcystis aeruginosa, uma das cianobactérias mais difundidas, pode produzir microcistinas (MCs). O efeito citotóxico da MC tem sido descrito no fígado, pulmões, estômago e intestino. Mortes de seres humanos, de animais silvestres e domésticos têm sido associadas à exposição a MC. Esta pode ocorrer diretamente por ingestão, inalação, contato, inoculação intravenosa (hemodiálise) ou indiretamente, pelo consumo de animais, dentre os quais os peixes e moluscos, que podem ingerir as cianobactérias e suas toxinas. A mais tóxica e também mais comum das MCs é a microcistina-LR (MC-LR), cujo órgão alvo é o fígado. A MC chega ao fígado especificamente por transporte dos ácidos biliares e, uma vez no citoplasma, inibe as proteínas fosfatases 1 e 2A, induzindo ao aumento da fosforilação protéica. Esta reação tem duas conseqüências: destruição do citoesqueleto, causando efeitos citotóxicos e descontrole da divisão celular, levando à promoção tumoral. A exposição aguda à MC induz severa hemorragia intra-hepática, necrose e apopt