In vivo embryo development in bitches inseminated laparoscopically after ovulation time estimated based on a single progesterone determination

Logistic and economical limitations are often the causes of dog owners not accurately monitoring the estrous cycle and the optimal insemination time. The aim of this study was to evaluate in vivo early embryonic development in bitches, after the analysis of sequential vaginal cytologies associated to single progesterone measurement and single laparoscopic insemination with high quality semen (fresh and with high spermatozoa concentration) or low-quality semen (frozen/thawed and with low spermatozoa concentration) at 48 h post- ovulation time predicted on a single progesterone measurement. Ten bitches were inseminated with 250 x 106 fresh spermatozoa (80% motility), and ten with 80 x 106 frozen/thawed spermatozoa (60% motility) in the cranial part of each uterine horn. Seven days later, ovariohysterectomy was performed and the oviducts and uterine horns and body were flushed to recover embryos and unfertilized oocytes. In 80% of the bitches inseminated with fresh and 50% of bitches inseminated with frozen/thawed semen, embryos at 2 to 8 cells stage were recovered mostly from the, oviducts. This study indicates that pregnancies can be obtained with a single laparoscopic intrauterine insemination after single serum progesterone measurement, although with a low number of embryos. This result should be taken into account in case economic or logistic restrictions that affect the possibility of owners to plan an accurate monitoring of the optimal breeding time using fresh and frozen semen.(AU)

Programas de inseminação artificial com sêmen congelado de caprinos e ovinos por laparoscopia no Nordeste do Brasil / Programs of artificial insemination with frozen semen of goats and sheep by laparoscopy in Northeast of Brazil

Dentre as biotécnicas aplicadas a reprodução animal, a inseminação artificial (IA) consiste na aplicação do sêmen no aparelho reprodutor da fêmea por meio instrumental. A IA oferece vários benefícios aos criadores, como aceleração do melhoramento genético de animais de interesse econômico, maior controle de doenças sexualmente transmissíveis, facilita a realização do teste de progênie, viabiliza a utilização de sêmen congelado de reprodutores alojados em outras localidades e possibilita que machos com subfertilidade adquirida produzam descendentes. Suas limitações estão relacionadas com carência de mão de obra qualificada, principalmente quando se utiliza a inseminação artificial por laparoscopia, infraestrutura mínima na propriedade para a realização dos procedimentos e aumento dos custos com a aquisição de hormônios. Nesse contexto, a presente revisão de literatura relata os principais pontos que devem ser considerados a fim de superar algumas limitações, bem como, as vantagens da utilização e escolha da melhor técnica.(AU)

Artificial insemination (AI) through laparoscopic techniques has been an important alternative to minimize the difficulties observed in cervical AI in small ruminants. Artificial insemination by laparoscopy facilitates the deposition of the semen directly into the uterine horns of the female, and does not present the cervix as a barrier, especially in sheep that have high sinuosity of the cervical rings. Thus, the use of frozen semen with laparoscopic intrauterine deposition has been important to obtain better fertility indexes in goats and sheep. AI offers several benefits to breeders, such as accelerating the genetic improvement of animals of economic interest, greater control of sexually transmitted diseases, facilitating progeny testing, enabling the use of frozen semen from breeding animals housed in other locations and enabling males with acquired subfertility produce descendants.(AU)

Programas de inseminação artificial com sêmen congelado de caprinos e ovinos por laparoscopia no Nordeste do Brasil / Programs of artificial insemination with frozen semen of goats and sheep by laparoscopy in Northeast of Brazil

Dentre as biotécnicas aplicadas a reprodução animal, a inseminação artificial (IA) consiste na aplicação do sêmen no aparelho reprodutor da fêmea por meio instrumental. A IA oferece vários benefícios aos criadores, como aceleração do melhoramento genético de animais de interesse econômico, maior controle de doenças sexualmente transmissíveis, facilita a realização do teste de progênie, viabiliza a utilização de sêmen congelado de reprodutores alojados em outras localidades e possibilita que machos com subfertilidade adquirida produzam descendentes. Suas limitações estão relacionadas com carência de mão de obra qualificada, principalmente quando se utiliza a inseminação artificial por laparoscopia, infraestrutura mínima na propriedade para a realização dos procedimentos e aumento dos custos com a aquisição de hormônios. Nesse contexto, a presente revisão de literatura relata os principais pontos que devem ser considerados a fim de superar algumas limitações, bem como, as vantagens da utilização e escolha da melhor técnica.

Artificial insemination (AI) through laparoscopic techniques has been an important alternative to minimize the difficulties observed in cervical AI in small ruminants. Artificial insemination by laparoscopy facilitates the deposition of the semen directly into the uterine horns of the female, and does not present the cervix as a barrier, especially in sheep that have high sinuosity of the cervical rings. Thus, the use of frozen semen with laparoscopic intrauterine deposition has been important to obtain better fertility indexes in goats and sheep. AI offers several benefits to breeders, such as accelerating the genetic improvement of animals of economic interest, greater control of sexually transmitted diseases, facilitating progeny testing, enabling the use of frozen semen from breeding animals housed in other locations and enabling males with acquired subfertility produce descendants.

Inseminação em ovelhas por videolaparoscopia por meio de acesso único: relato de caso / Videolaparoscopic insemination in sheeps: case report

A inseminação artificial (IA) proporciona melhoramento genético, intensifica o manejo animal e possibilita a utilização de sêmen de reprodutores que se encontram em diferentes regiões do país, bem como de animais de alto valor zootécnico que já morreram ou de machos que possuem subfertilidade. Por peculiaridades anatômicas das ovelhas, a inseminação artificial intrauterina transcervical é dificultosa. Dessa forma, bons resultados na IA são alcançados quando há deposição do sêmen diretamente dentro do útero, realizada por meio de laparoscopia. Atualmente, diversas técnicas laparoscópicas são utilizadas para inseminação; os métodos rotineiramente empregados são realizados através de dois ou três portais de acesso. O presente trabalho tem o objetivo de verificar a viabilidade de uma nova técnica de inseminação videolaparoscópica intrauterina em ovelhas, com o uso de um acesso único, visando a um procedimento mais eficaz, mais rápido, com menor trauma tecidual e com menor contaminação bacteriana, a fim de minimizar o desconforto pós-operatório. A média do tempo cirúrgico foi de 5,92 minutos. Não foram encontradas dificuldades para realização dos procedimentos, e os animais recuperaram-se sem nenhuma complicação. A utilização de um único acesso mostrou-se eficaz, pois reduziu o tempo cirúrgico e não apresentou complicações.(AU)

Artificial Insemination (AI) provides genetic gain, enhances animal management and enables the use of semen from rams that are in different regions of the country, high-value livestock animals that have died or males who have subfertility. Because of anatomical peculiarities of sheep, transcervical intrauterine insemination is troublesome, thus good results in IA are achieved when there is deposition of semen directly into the uterus, performed by laparoscopy. Currently, various techniques are used for laparoscopic insemination, those routinely employed are conducted using two or three access portals. This study aims to verify the feasibility of a new laparoscopic intrauterine insemination in sheep using a single access, aiming at a more effective and faster procedure with less tissue trauma, minimizing post-operative discomfort and lower bacterial contamination. The mean operative time was 5,92 minutes, there were no difficulties in the procedures and the animals recovered without complications. The use of a single access was effective, reducing the time of the surgery and complications weren't observed.(AU)

Inseminação em ovelhas por videolaparoscopia por meio de acesso único: relato de caso / Videolaparoscopic insemination in sheeps: case report

A inseminação artificial (IA) proporciona melhoramento genético, intensifica o manejo animal e possibilita a utilização de sêmen de reprodutores que se encontram em diferentes regiões do país, bem como de animais de alto valor zootécnico que já morreram ou de machos que possuem subfertilidade. Por peculiaridades anatômicas das ovelhas, a inseminação artificial intrauterina transcervical é dificultosa. Dessa forma, bons resultados na IA são alcançados quando há deposição do sêmen diretamente dentro do útero, realizada por meio de laparoscopia. Atualmente, diversas técnicas laparoscópicas são utilizadas para inseminação; os métodos rotineiramente empregados são realizados através de dois ou três portais de acesso. O presente trabalho tem o objetivo de verificar a viabilidade de uma nova técnica de inseminação videolaparoscópica intrauterina em ovelhas, com o uso de um acesso único, visando a um procedimento mais eficaz, mais rápido, com menor trauma tecidual e com menor contaminação bacteriana, a fim de minimizar o desconforto pós-operatório. A média do tempo cirúrgico foi de 5,92 minutos. Não foram encontradas dificuldades para realização dos procedimentos, e os animais recuperaram-se sem nenhuma complicação. A utilização de um único acesso mostrou-se eficaz, pois reduziu o tempo cirúrgico e não apresentou complicações.(AU)

Artificial Insemination (AI) provides genetic gain, enhances animal management and enables the use of semen from rams that are in different regions of the country, high-value livestock animals that have died or males who have subfertility. Because of anatomical peculiarities of sheep, transcervical intrauterine insemination is troublesome, thus good results in IA are achieved when there is deposition of semen directly into the uterus, performed by laparoscopy. Currently, various techniques are used for laparoscopic insemination, those routinely employed are conducted using two or three access portals. This study aims to verify the feasibility of a new laparoscopic intrauterine insemination in sheep using a single access, aiming at a more effective and faster procedure with less tissue trauma, minimizing post-operative discomfort and lower bacterial contamination. The mean operative time was 5,92 minutes, there were no difficulties in the procedures and the animals recovered without complications. The use of a single access was effective, reducing the time of the surgery and complications weren't observed.(AU)

Influence of catalase and pre-freezing equilibration on post-thaw semen quality and conception rate in ewes laparoscopically inseminated

The aim of this study was to investigate the effects of catalase and pre-freezing equilibration during ram sperm cryopreservation on motility and membrane and acrosomal integrity of frozen-thawed semen, as well as conception rate following laparoscopic timedinsemination. Semen was collected from four mature Dorper rams, pooled and diluted in Tris egg-yolk extender basic solution (CON), or this solution supplemented with catalase (CAT; 20 U/100 × 106 sperm). Extended semen was packaged in 0.25 ml mini straws (25 × 106 sperm/straw), chilled (to 5°C), and then either frozen immediately (CON and CAT) or maintained at 5°C for 12 h of pre-freezing equilibration (CON12 and CAT12). Immediately after thawing and at 1 h after incubation at 37°C, kinematic parameters (CASA), plasma membrane integrity (PI-FITC), and acrosomal status (FITC-PNA) of sperm were assessed. There were no significant differences among the four groups on sperm traits evaluated immediately postthaw. However, after 1 h of incubation, total motility (46.7 and 25.0%) and plasma membrane integrity (38.7 and 25.7%) were higher (P < 0.05) in CAT12 than CON. When these two treatments were used for laparoscopic timed artificial insemination of ewes (with synchronized ovulation), conception rate was similar for CAT12 and CON (32.8%, n = 61 vs. 27.3%, n = 55). In conclusion, the combination of catalase and pre-freezing equilibration resulted in significantly improved quality of post-thawed ram semen without affecting conception rate in fixed-time laparoscopically intrauterine inseminated ewes.

Influence of catalase and pre-freezing equilibration on post-thaw semen quality and conception rate in ewes laparoscopically inseminated

The aim of this study was to investigate the effects of catalase and pre-freezing equilibration during ram sperm cryopreservation on motility and membrane and acrosomal integrity of frozen-thawed semen, as well as conception rate following laparoscopic timedinsemination. Semen was collected from four mature Dorper rams, pooled and diluted in Tris egg-yolk extender basic solution (CON), or this solution supplemented with catalase (CAT; 20 U/100 × 106 sperm). Extended semen was packaged in 0.25 ml mini straws (25 × 106 sperm/straw), chilled (to 5°C), and then either frozen immediately (CON and CAT) or maintained at 5°C for 12 h of pre-freezing equilibration (CON12 and CAT12). Immediately after thawing and at 1 h after incubation at 37°C, kinematic parameters (CASA), plasma membrane integrity (PI-FITC), and acrosomal status (FITC-PNA) of sperm were assessed. There were no significant differences among the four groups on sperm traits evaluated immediately postthaw. However, after 1 h of incubation, total motility (46.7 and 25.0%) and plasma membrane integrity (38.7 and 25.7%) were higher (P < 0.05) in CAT12 than CON. When these two treatments were used for laparoscopic timed artificial insemination of ewes (with synchronized ovulation), conception rate was similar for CAT12 and CON (32.8%, n = 61 vs. 27.3%, n = 55). In conclusion, the combination of catalase and pre-freezing equilibration resulted in significantly improved quality of post-thawed ram semen without affecting conception rate in fixed-time laparoscopically intrauterine inseminated ewes.(AU)

Artificial insemination in small ruminants / Inseminação artificial em pequenos ruminantes

Although artificial insemination (AI) has been described in many domes­tic species, it still remains with a great potential of use in small ruminants, com­pared to others species such as cattle. This brief review aimed to describe few central aspects of small ruminants AI, highlighting differences between sheep and goat species, as well as some advantages and limitations of each technique (vaginal, simple transcervical, and intrauterine laparoscopic or transcervical). Due to pronounced contribution that AI could exert on breed genetics improve­ment and considering the current demand for high-quality products, it is of note that the knowledge about the productive system and reproductive peculiarities from each farm have to be properly aligned, allowing the correct chose of AI technique and also other appropriate reproductive biotechnologies that enhance profitability.

Apesar de ser uma técnica há muito descrita em diversas espécies do­mésticas, a inseminação artificial (IA) ainda permanece com grande potencial de utilização em pequenos ruminantes, quando comparada a sua utilização em outras espécies, como a bovina. Essa breve revisão objetiva descrever alguns aspectos centrais da IA em pequenos ruminantes, enfatizando diferenças entre as espécies caprina e ovina, bem como algumas vantagens e limitações de cada uma da das técnicas (vaginal, transcervical simples e intrauterina laparoscó­pica ou transcervical). Devido a grande contribuição que a IA pode exercer no melhoramento genético e a atual demanda por subprodutos de alta qualidade, é importante que os conhecimentos sobre o sistema produtivo e peculiaridades reprodutivas de cada propriedade estejam alinhados, de forma a selecionar a técnica de IA ou outras biotecnologias reprodutivas adequadas, permitindo o aumento da rentabilidade.

Artificial insemination in small ruminants / Inseminação artificial em pequenos ruminantes

Although artificial insemination (AI) has been described in many domes­tic species, it still remains with a great potential of use in small ruminants, com­pared to others species such as cattle. This brief review aimed to describe few central aspects of small ruminants AI, highlighting differences between sheep and goat species, as well as some advantages and limitations of each technique (vaginal, simple transcervical, and intrauterine laparoscopic or transcervical). Due to pronounced contribution that AI could exert on breed genetics improve­ment and considering the current demand for high-quality products, it is of note that the knowledge about the productive system and reproductive peculiarities from each farm have to be properly aligned, allowing the correct chose of AI technique and also other appropriate reproductive biotechnologies that enhance profitability.(AU)

Apesar de ser uma técnica há muito descrita em diversas espécies do­mésticas, a inseminação artificial (IA) ainda permanece com grande potencial de utilização em pequenos ruminantes, quando comparada a sua utilização em outras espécies, como a bovina. Essa breve revisão objetiva descrever alguns aspectos centrais da IA em pequenos ruminantes, enfatizando diferenças entre as espécies caprina e ovina, bem como algumas vantagens e limitações de cada uma da das técnicas (vaginal, transcervical simples e intrauterina laparoscó­pica ou transcervical). Devido a grande contribuição que a IA pode exercer no melhoramento genético e a atual demanda por subprodutos de alta qualidade, é importante que os conhecimentos sobre o sistema produtivo e peculiaridades reprodutivas de cada propriedade estejam alinhados, de forma a selecionar a técnica de IA ou outras biotecnologias reprodutivas adequadas, permitindo o aumento da rentabilidade.(AU)

Viabilidade de duas novas técnicas para inseminação intrauterina laparoscópica em ovinos / Two new techniques for laparoscopic intrauterine insemination in sheep - feasibility study

Avaliaram-se duas novas técnicas de inseminação laparoscópica intrauterina com o uso de agulha espinhal em ovinos. Foram realizadas quatro etapas experimentais, sendo os animais separados em dois grupos em cada etapa. Para tanto, foram utilizados os posicionamentos quadrupedal e dorsal. Realizou-se a inseminação de 80 ovinos após a sincronização de cio. Verificou-se que os acessos laparoscópicos propostos foram viáveis para a inseminação em ovinos. Considerou-se que a inseminação em posicionamento quadrupedal foi tecnicamente mais difícil se comparada ao acesso laparoscópico em decúbito dorsal, porém, com o aprimoramento da técnica e na dependência dos resultados quanto aos índices de prenhez, poderá se tornar procedimento adequado para a inseminação de ovelhas.(AU)

This study evaluated two new laparoscopic intrauterine insemination techniques with spinal needles in sheep. Four experimental stages were done, in which the animals were separated into two groups aiming to evaluate the techniques used. We used a total of 80 estrus-synchronized sheep, which were placed in quadrupedal or dorsal recumbence. The results showed that both insemination techniques using a spinal needle are feasible, but the quadrupedal insemination is technically more difficult compared to the laparoscopic approach in the dorsal position. With technical improvement and depending on the results in relation to pregnancy rates, this access could be considered an alternative procedure for sheep insemination.(AU)

Effect of transcervical techniques and laparoscopy on pregnancy rate of sheep inseminated in fixed-time / Efeito das técnicas transcervical e laparoscópica sobre a taxa de prenhez de ovelhas inseminadas em tempo-fixo

The objective of this experiment was to evaluate the effect of the transcervical and laparoscopic techniques on the pregnancy rate of inseminated sheep in fixed-time. The pregnancy rate for the transcervical and for laparoscopic techniques was 40% (p>0.05). About the place of deposition of the semen in transcervical artificial insemination (AI), there was not difference in the pregnancy rate (p>0.05), with rates of 25.0% in the superficial cervical, 43.7% in medium cervical, 41.7% in deep cervical and 50.0% intrauterine. These results demonstrate that transcervical AI showed similar results to the obtained with laparoscopy, when these techniques are accomplished in fixed-time. KEY WORDS: Cervix, intrauterine, frozen semen, traction

O objetivo deste experimento foi avaliar o efeito das técnicas transcervical e laparoscópica sobre a taxa de prenhez de ovelhas inseminadas em tempo-fixo. A taxa de prenhez para as técnicas transcervical e laparoscópica foi de 40% (p>0.05). Quanto ao local de deposição do sêmen na inseminação artificial (IA) transcervical, não houve diferença na taxa de prenhez (p>0.05), com taxas de 25.0% na cervical superficial, 43.7% cervical médio, 41.7% cervical profundo e 50.0% intra-uterino. Estes resultados demonstram que a IA transcervical apresenta resultados semelhantes aos obtidos com o uso de laparoscopia, quando estas técnicas são realizadas em tempo-fixo. PALAVRAS-CHAVE: Cérvix, intrauterino, sêmen congelado, tracionamento

Fertilidade após a inseminação artificial intra-cervical ou laparoscópica intra-uterina de ovelhas utilizando diluidores à base de água de coco / Fertility following intracervical or intrauterine laparoscopic insemination of ewes using extenders based on coconut water

O objetivo deste estudo foi avaliar a taxa de prenhez em ovelhas utilizando diluidores à base de água de coco (in natura: ACN ou em pó: ACP-102®) após inseminação artificial intra-cervical (Experimento 1) ou laparoscópica intra-uterina (Experimento 2). Experimento 1. Sêmen de 4 carneiros Santa Inês foi coletado, diluído a 37°C (T1: ACN; T2: ACP-102®) e resfriado á 4°C. 56 ovelhas Santa Inês foram inseminadas cervicalmente após a sincronização, 31 utilizando o diluidor ACN e 25 o diluidor ACP-102®. Experimento 2. Sêmen de 5 carneiros adultos (Santa Inês: n=04; Dorper n=01) foi coletado e processado de acordo com o descrito. 64 ovelhas SRD foram inseminadas intra-uterina por laparoscopia após a sincronização do estro, 37 utilizando o diluidor ACN e 27 o diluidor ACP-102®. O diagnóstico de gestação foi realizado por ultra-sonografia. A taxa de prenhez entre os tratamentos, dentro de cada método de inseminação, entre cada diluidor para ambos métodos de inseminação foi analisada pelo teste do Qui-quadrado (p<0,05). A taxa de prenhez após IA intra-cervical (ACN: 25,8% vs. ACP-102®: 48%) e laparoscópica (ACN: 72,9% vs ACP-102®: 70,3%) não foi influenciada pelos diluidores. A taxa de prenhez foi influenciada pelo método de inseminação (intra-cervical: 35,7% vs.laparoscopia: 71,8%; p<0,05). Os diluidores a base de água de coco podem ser utilizados nas inseminações artificiais cervical ou laparoscopica em ovelhas do Nordeste do Brasil em condições de campo.(AU)

The objetive of this study was to evaluate pregnancy rates in ewes using extenders based on coconut water (in natura: NCW or in powder: PCW-102®) following intra - cervical (Trial 1) or intrauterine laparoscopic insemination (Trial2). Trial 1. Semen from 4 Santa Inês rams were collected, diluted at 32°C (T1: NCW; T2: PCW-102®) and cooled to 4°C. 56 adult Santa Inês ewes were inseminated intra-cervically following syncronization, 31 using the extender NCW and 25 the extender PCW-102®. Trial 2. Semen from 5 rams (Santa Inês: n=04; Dorper n=01) were collected and processed as described. 64 adult crossbred multiparous ewes were inseminated intrauterine by laparoscopy following oestrus syncronization. 37 ewes using the extender NCW and 27 the extender PCW-102®. The pregnancy diagnosis was performed by ultrasonography. The fertility rates between treatments for each method of insemination and within each extender for both methods were analysed by Chi-square test (p<0,05). The pregnancy rates following intra-cervical (NCW: 25.8% vs PCW-102®: 48%) and intrauterine (NCW: 72.9% vs 70.3%) inseminations were not influenced by the extenders. The pregnancy rate was influenced by insemination method (intra-cervical: 35.7% vs laparoscopy: 71.8%; p<0,05). The extenders based coconut water as basis can be used following cervical or intra-uterine laparoscopic inseminations in ewes from Northeast of Brazil under field conditions.(AU)

EFFECT OF TRANSCERVICAL TECHNIQUES AND LAPAROSCOPY ON PREGNANCY RATE OF SHEEP INSEMINATED IN FIXED-TIME / EFEITO DAS TÉCNICAS TRANSCERVICAL E LAPAROSCÓPICA SOBRE A TAXA DE PRENHEZ DE OVELHAS INSEMINADAS EM TEMPO-FIXO

The objective of this experiment was to evaluate the effect of the transcervical and laparoscopic techniques on the pregnancy rate of inseminated sheep in fixed-time. The pregnancy rate for the transcervical and for laparoscopic techniques was 40% (p>0.05). About the place of deposition of the semen in transcervical artificial insemination (AI), there was not difference in the pregnancy rate (p>0.05), with rates of 25.0% in the superficial cervical, 43.7% in medium cervical, 41.7% in deep cervical and 50.0% intrauterine. These results demonstrate that transcervical AI showed similar results to the obtained with laparoscopy, when these techniques are accomplished in fixed-time. KEY WORDS: Cervix, intrauterine, frozen semen, traction

O objetivo deste experimento foi avaliar o efeito das técnicas transcervical e laparoscópica sobre a taxa de prenhez de ovelhas inseminadas em tempo-fixo. A taxa de prenhez para as técnicas transcervical e laparoscópica foi de 40% (p>0.05). Quanto ao local de deposição do sêmen na inseminação artificial (IA) transcervical, não houve diferença na taxa de prenhez (p>0.05), com taxas de 25.0% na cervical superficial, 43.7% cervical médio, 41.7% cervical profundo e 50.0% intra-uterino. Estes resultados demonstram que a IA transcervical apresenta resultados semelhantes aos obtidos com o uso de laparoscopia, quando estas técnicas são realizadas em tempo-fixo. PALAVRAS-CHAVE: Cérvix, intrauterino, sêmen congelado, tracionamento

Parameters to evaluate ovine frozen semen for laparoscopic insemination / Parâmetros utilizados na avaliação do sêmen congelado ovino para inseminação laparoscópica

The aim of the present study was to verify some parameters for evaluating frozen semen, throughout pregnancy rate, in sheep. Two hundred and ninety-seven ewes from the Corriedale breed were inseminated by laparoscopic method. The estrus were synchronized with intravaginal sponge, containing 50 mg of MAP (medroxyprogesterone acetate), for 12 days and eCG (Equine Chorionic Gonadotrophin; 400 IU) was given in a single intramuscular injection at the moment of withdrawing the sponges. The semen from 32 rams was frozen in pellets. Semen of different qualities was used. The quality of the semen was determined by evaluating sperm motility at thawing, sperm motility after 5 hours incubation, the mean of sperm motility during incubation period (0, 1, 2, 3, 4 and 5 hours) and the percentage of normal sperm cells. Each of these parameters was correlated with pregnancy after laparoscopic insemination. The diagnosis of pregnancy was performed by ultrasonography at 40 days after insemination. The percentages of pregnancy were from 60% to 80% only when the sperm samples exhibited sperm motility higher than 40% (68.1), mean of sperm motility and after thawing at least of 20% (64.4 and 72.3) and sperm motility after 5 hours of incubation superior to 10% (61.1 and 78.6). With regard to the percentage of viable cells, the samples with at least 40% of sperm motility resulted in 61.8% and 66.4% of p

Com a finalidade de verificar o valor de alguns atributos para avaliação da qualidade do sêmen congelado, através da prenhez, duzentas e noventa e sete ovelhas da raça Corriedale foram inseminadas, intra-uterinamente, por laparoscopia. Utilizou-se cio sincronizado, com pessários vaginais contendo 50 mg de MAP (acetato de medroxiprogesterona), por 12 dias, e 400 UI de eCG (Equine chorionic gonadotrophin) no 12º dia. O sêmen, proveniente de 32 carneiros, foi congelado em pellets. Para a inseminação, utilizaram-se amostras de sêmen com diferentes padrões de qualidade preestabelecida, de motilidade progressiva (MP) ao descongelamento, média da MP durante todo o período de incubação (0, 1, 2, 3, 4 e 5 horas), a 37ºC, MP após cinco horas de incubação e percentagem de células, morfologicamente, íntegras. O diagnóstico de gestação foi realizado por ecografia 40 dias após a inseminação. Obtiveram-se percentuais de prenhez entre 60 e 80% somente quando as amostras apresentaram um movimento progressivo superior a 40% (68,0%), uma MP média e após 5 horas de incubação mínima de 20% (64,4 e 72,3%) e uma MP às 5 horas de incubação quando superior a 10% (61,1 e 78,5%). Com relação ao percentual de células íntegras, as amostras com um mínimo de 40% proporcionaram prenhez de 61,7 e 66,4%, enquanto nas com menos de 40% o percentual foi de apenas 15,2%. Os parâmetros estudados demonstraram eficiên

INSEMINAÇÃO LAPAROSCÓPICA EM OVELHAS COM CIO NATURAL INDUZIDO E SINCRONIZADO ANTES E DURANTE A ESTAÇÃO REPRODUTIVA

SUMMARY Three hundred and twenty-nine Corriedale ewes, between two and six years old, were inseminated by laparoscopic method with frozen sêmen in pellet to verify the fertility with natural, induced and synchronized estrous. Sponge with 50mg of MAP was used intravaginal during 12 days, out and within the reproductive season either with or without eCG (Equine Chorionic Gonadotrophin) at the moment of removing the sponges to induce or to synchronize estrous in the ewes. The insemination was between 58 and 66 hours after withdrawal of the sponges, with at least 40% of progressive motility after thawing and each ewe received at least 50 millions total sperm per dose. The pregnancy diagnosis was performed at 40 days by ultrasound. It was observed that satisfatory percentage of pregnancy was obtained only when eCG was injectd in both out (64.91%) and within (62.11%) of the reproductive season. During the reproductive season, the results were just fair when MAP was used without eCG. With natural estrous, the percentage of pregnancy was 63.51%. In conclusion, the results showed that the intrauterine insemination with frozen sêmen in ewes with natural, induced and synchronized estrous using laparoscopy are satisfatory, in both within and out of the reproductive season when eCG is used.

RESUMO Trezentas e vinte e nove ovelhas Corriedale com idade entre 2 e 6 anos foram submetidas a inseminação laparoscópica com sêmen congelado em pellet para verificação dos efeitos do cio natural, induzido e sincronizado com esponjas (MAP- 50mg, por 12 dias), fora e dentro da estação reprodutiva utilizando ou não eCG (Equine Chorionic Gonadotrophin), no porcentual de prenhez. A aplicação do sêmen foi entre 58 e 66 horas após retirada das esponjas, com pelo menos 40% de motilidade progressiva pós-descongelamento e cada ovelha recebeu um mínimo de 50 milhões de espermatozóides totais por dose. O diagnóstico de gestação foi realizado aos 40 dias por ecografia. Ficou evidenciado que os porcentuais de prenhez obtidos foram satisfatórios somente quando foi utilizado o eCG tanto fora (64,91%) quanto dentro (62,11%) da estação reprodutiva. A utilização única do MAP sem eCG apresentou resultados razoáveis (40,91%) na estação reprodutiva. A utilização de cio natural propiciou a obtenção de 63,51% de prenhez. Com base nos resultados obtidos conclui-se que a inseminação intrauterina por laparoscopia em ovelhas com cio induzido ou sincronizado dentro e fora da estação reprodutiva, desde que com a utilização de eCG, assim como em estro natural, apresenta resultados satisfatórios.

Inseminação laparoscópica em ovelhas com cio natural induzido e sincronizado antes e durante a estação reprodutiva

SUMMARY Three hundred and twenty-nine Corriedale ewes, between two and six years old, were inseminated by laparoscopic method with frozen sêmen in pellet to verify the fertility with natural, induced and synchronized estrous. Sponge with 50mg of MAP was used intravaginal during 12 days, out and within the reproductive season either with or without eCG (Equine Chorionic Gonadotrophin) at the moment of removing the sponges to induce or to synchronize estrous in the ewes. The insemination was between 58 and 66 hours after withdrawal of the sponges, with at least 40% of progressive motility after thawing and each ewe received at least 50 millions total sperm per dose. The pregnancy diagnosis was performed at 40 days by ultrasound. It was observed that satisfatory percentage of pregnancy was obtained only when eCG was injectd in both out (64.91%) and within (62.11%) of the reproductive season. During the reproductive season, the results were just fair when MAP was used without eCG. With natural estrous, the percentage of pregnancy was 63.51%. In conclusion, the results showed that the intrauterine insemination with frozen sêmen in ewes with natural, induced and synchronized estrous using laparoscopy are satisfatory, in both within and out of the reproductive season when eCG is used.

RESUMO Trezentas e vinte e nove ovelhas Corriedale com idade entre 2 e 6 anos foram submetidas a inseminação laparoscópica com sêmen congelado em pellet para verificação dos efeitos do cio natural, induzido e sincronizado com esponjas (MAP- 50mg, por 12 dias), fora e dentro da estação reprodutiva utilizando ou não eCG (Equine Chorionic Gonadotrophin), no porcentual de prenhez. A aplicação do sêmen foi entre 58 e 66 horas após retirada das esponjas, com pelo menos 40% de motilidade progressiva pós-descongelamento e cada ovelha recebeu um mínimo de 50 milhões de espermatozóides totais por dose. O diagnóstico de gestação foi realizado aos 40 dias por ecografia. Ficou evidenciado que os porcentuais de prenhez obtidos foram satisfatórios somente quando foi utilizado o eCG tanto fora (64,91%) quanto dentro (62,11%) da estação reprodutiva. A utilização única do MAP sem eCG apresentou resultados razoáveis (40,91%) na estação reprodutiva. A utilização de cio natural propiciou a obtenção de 63,51% de prenhez. Com base nos resultados obtidos conclui-se que a inseminação intrauterina por laparoscopia em ovelhas com cio induzido ou sincronizado dentro e fora da estação reprodutiva, desde que com a utilização de eCG, assim como em estro natural, apresenta resultados satisfatórios.